骨形成蛋白在颌骨骨肉瘤中的表达及临床意义
作者：岳文 杨连甲 马明 金岩 朱萧玲 李鑫
单位：710032 西安，第四军医大学口腔医学院
关键词：
中华口腔医学杂志/990327 为研究骨形成蛋白(BMP)在颌骨肉瘤中的表达及其与肿瘤预后的关系。作者对24例颌骨肉瘤患者的组织标本，进行了免疫组化和原位杂交检测等研究，以了解BMP与骨肉瘤的关系。
1.材料和方法：
(1)材料来源于我院外科手术切除并经病理诊断为骨肉瘤的24例标本，其中上颌14例，下颌10例，平均年龄26.5岁。应用骨形成蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)单抗对组织切片进行免疫组化染色，胞浆和胞核呈棕色为阳性细胞。
(2)原位杂交：重组质粒PSP64-BMP2和bluescript sk-BMP4分别转化感受态细胞，经扩增、质粒提取及酶切鉴定后，按地高辛标记试剂盒说明对探针标记。组织切片按原位杂交处理后，探针(2 μg/ml) 97℃变性后杂交(40 ℃，20小时)，切片经清洗和正常血清封闭后，以标记碱性磷酸酶的地高辛检测系统进行检测。
(3)BMP单抗对骨肉瘤的体外作用：选用不同浓度BMP单抗作用人成骨肉瘤细胞株，测抗体的细胞毒及对细胞的杀伤率。
2.结果和讨论：
(1)骨形成蛋白(BMPs)家族是一组形态和功能相近的多肽，并发现BMPs在胚胎组织生长发育、机体创伤愈合和肿瘤形成中起重要作用。BMP2和BMP4在骨肉瘤、骨纤维异常增殖症和造釉细胞瘤中均有表达，并影响其生物学特性。用免疫组化染色，在24小时标本中有18例检测到BMP表达。原位杂交的结果表明，有15例可检测到BMP2和BMP4 mRNA的表达，提示它们可能参与肿瘤的发生和发展过程。
(2)淋巴结的转移是肿瘤预后不良的重要指标。研究表明，有BMP表达的骨肉瘤患者其5年生存率明显低于无BMP表达者。在作BMP2和BMP4 mRNA的表达与骨肉瘤淋巴结转移的相关性分析时，发现有上述2个基因mRNA表达的患者更易发生淋巴结转移。提示BMP2和BMP4与骨肉瘤预后密切相关。PCNA是反映细胞增殖状态的标记物，利用该单抗检测骨肉瘤细胞增殖活性并与BMP2和BMP4 mRNA表达的相关性作分析，结果表明有这2个基因表达的病例也有较高的PCNA表达。提示BMP2和BMP4可能通过某种机制促进肿瘤细胞增殖，使肿瘤恶性度增高。
BMP单抗在体外对骨肉瘤细胞株的作用结果表明，BMP单抗对肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用，这进一步证实BMP与骨肉瘤发生密切相关。
(收稿：1998-04-27 修回：1999-03-05), 百拇医药
单位：710032 西安，第四军医大学口腔医学院
关键词：
中华口腔医学杂志/990327 为研究骨形成蛋白(BMP)在颌骨肉瘤中的表达及其与肿瘤预后的关系。作者对24例颌骨肉瘤患者的组织标本，进行了免疫组化和原位杂交检测等研究，以了解BMP与骨肉瘤的关系。
1.材料和方法：
(1)材料来源于我院外科手术切除并经病理诊断为骨肉瘤的24例标本，其中上颌14例，下颌10例，平均年龄26.5岁。应用骨形成蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)单抗对组织切片进行免疫组化染色，胞浆和胞核呈棕色为阳性细胞。
(2)原位杂交：重组质粒PSP64-BMP2和bluescript sk-BMP4分别转化感受态细胞，经扩增、质粒提取及酶切鉴定后，按地高辛标记试剂盒说明对探针标记。组织切片按原位杂交处理后，探针(2 μg/ml) 97℃变性后杂交(40 ℃，20小时)，切片经清洗和正常血清封闭后，以标记碱性磷酸酶的地高辛检测系统进行检测。
(3)BMP单抗对骨肉瘤的体外作用：选用不同浓度BMP单抗作用人成骨肉瘤细胞株，测抗体的细胞毒及对细胞的杀伤率。
2.结果和讨论：
(1)骨形成蛋白(BMPs)家族是一组形态和功能相近的多肽，并发现BMPs在胚胎组织生长发育、机体创伤愈合和肿瘤形成中起重要作用。BMP2和BMP4在骨肉瘤、骨纤维异常增殖症和造釉细胞瘤中均有表达，并影响其生物学特性。用免疫组化染色，在24小时标本中有18例检测到BMP表达。原位杂交的结果表明，有15例可检测到BMP2和BMP4 mRNA的表达，提示它们可能参与肿瘤的发生和发展过程。
(2)淋巴结的转移是肿瘤预后不良的重要指标。研究表明，有BMP表达的骨肉瘤患者其5年生存率明显低于无BMP表达者。在作BMP2和BMP4 mRNA的表达与骨肉瘤淋巴结转移的相关性分析时，发现有上述2个基因mRNA表达的患者更易发生淋巴结转移。提示BMP2和BMP4与骨肉瘤预后密切相关。PCNA是反映细胞增殖状态的标记物，利用该单抗检测骨肉瘤细胞增殖活性并与BMP2和BMP4 mRNA表达的相关性作分析，结果表明有这2个基因表达的病例也有较高的PCNA表达。提示BMP2和BMP4可能通过某种机制促进肿瘤细胞增殖，使肿瘤恶性度增高。
BMP单抗在体外对骨肉瘤细胞株的作用结果表明，BMP单抗对肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用，这进一步证实BMP与骨肉瘤发生密切相关。
(收稿：1998-04-27 修回：1999-03-05), 百拇医药