血液透析对细胞内游离钙和细胞膜β肾上腺素能受体密度的影响*
作者：张晓良 刘必成 王辉 徐标
单位：张晓良 刘必成 王 辉 (南京铁道医学院附属医院肾内科 南京，210009)；徐 标 (南京铁道医学院附属医院心内科 南京，210009)
关键词：血液透析；细胞内游离钙；β肾上腺素能受体
肾脏病与透析肾移植杂志990315
本研究旨在观察血液透析对透析患者血小板细胞内游离钙及淋巴细胞膜表面β肾上腺素能受体密度的影响。
1 对象和方法
1.1 研究对象 25例尿毒症接受维持性血液透析的患者(男14例，女11例)，年龄35～65(平均52±3)岁。按有无慢性充血性心力衰竭分为心衰组(n＝8)与无心衰组(n＝17)。
, 百拇医药
1.2 试剂 Fura-2/AM(Sigma公司)，3H-双氢心得舒(3H-Dihydroalprenolo，3H-DHA)(北京原子能研究所)，双氢心得安(Sigma公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 所有患者接受常规维持性血液透析治疗(碳酸氢盐透析)，在透析前后分别取静脉血测定血小板胞内游离钙(PCC)浓度和淋巴细胞膜β肾上腺素能受体密度(BAR)。
1.3.2 观察指标 参照房祥[1]的方法，以Fura-2/AM作为荧光指示剂，用双波长荧光比值法测定PCC浓度；以3H-DHA作为标记配基，参照单京瑞[2]的方法，用标记配基受体结合法测定淋巴细胞BAR。
1.4 统计方法 用Graphpad软件包进行均数、标准差统计及t检验和相关分析。
, http://www.100md.com
2 结果
结果表明，心衰组PCC高于非心衰组，两组透析后PCC均升高(表1)；心衰组BAR低于非心衰组，两组透析后BAR均明显降低(表2)。直线相关分析表明，无论透析前还是透析后BAR与PCC均呈显著负相关(透析前r＝-0.5636，P<0.01；透析后r＝-0.7933，P<0.001)。
表1 透析前后血小板胞内游离钙浓度(PCC，nmol/L)
透 前
透 后
P值
心衰组(n＝8)
186.8±6.6
207.5±7.9
, 百拇医药
<0.001
无心衰组(n＝17)
150.1±19.0
176.0±3.8
<0.001
P值
<0.001
<0.05
表2 透析前后β肾上腺素能受体密度(BAR，fmol/107cells)
透 前
透 后
, 百拇医药 P值
心衰组(n＝8)
476.0±85.7
420.4±13.8
<0.001
无心衰组(n＝17)
636.0±25.3
547.4±21.8
<0.001
P值
<0.001
<0.001
, 百拇医药
3 讨论
心功能不全是维持性血液透析患者常见的并发症，也是导致血透患者死亡最常见的原因之一[3]，因此探讨血透患者心功能不全的机制具有重要的临床意义。有关透析过程对细胞内钙离子和β肾上腺素能受体的影响及两者的关系，国内外未见报道。本研究结果表明，维持性血透合并心功能不全患者透析前、后反映心肌细胞内钙离子水平的PCC均较无心衰组明显增高，而反映心肌细胞膜β肾上腺素能受体的淋巴细胞膜表面BAR在心衰组较无心衰组明显降低。Yonemochi等[5]发现钙拮抗剂可以使下调的BAR增高40%～50%。我们先前在对乳鼠心肌细胞的研究中也证实[6]，钙拮抗剂Verapamil能部分逆转去甲肾上腺素诱导的心肌β肾上腺素能受体下调，其机制可能是增加了β肾上腺素能受体mRNA的合成。因此，细胞内高钙负荷可能通过某种机制影响到β肾上腺素能受体蛋白的表达及功能。
本研究还发现，透析后无论在心衰组还是无心衰组细胞内游离钙水平均较透析前明显增高，并伴有β受体的下调。Yoon[7]的研究也表明，血液透析可使血小板游离钙水平显著增高，然其确切机制及意义均不甚清楚。由于细胞内高钙负荷在心功能不全的发生中起重要的作用，本研究提示，血液透析过程本身可能通过影响细胞内钙离子浓度而对心肌收缩产生不良影响。
, 百拇医药
总之，本研究结果表明，尽管血液透析通过有效地清除潴留的水分和毒素而缓解尿毒症症状，并降低容量依赖性高血压和纠正心力衰竭，但由于该过程本身可能增加细胞内钙负荷和下调心肌细胞β受体，从而对心肌收缩力产生影响，此可能是维持性血透患者容易发生心力衰竭的重要原因之一。因此进一步加强对透析过程中心肌细胞钙调节的研究，可能为血液透析合并心力衰竭的防治提供新的途径。*本课题获国家自然科学基金赞助(39400054)
参考文献
1 房 祥.Fura-2荧光比值法测定血小板胞浆内游离钙浓度.湖南医科大学学报，1993，18：209
2 单京瑞.外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体的放射性配基结合分析法.军事医学科学院院刊，1988，53：73
3 John DH，Robert NF，Gloria MK.Congestive heart failure in dialysis patients：Prevalence，incidence，prognosis and risk factors.Kidney Int，1995，47：884
, 百拇医药
4 Bond M，Jaraki AR，Disch CH et al.Subcellular calcium content in cardiaomyopthic hamster hearts in vivo： An electron prob study.Circulation Res，1989，64：1001
5 Yonemochi H，Saikawa T，Takakura T et al.Effects of calcium antagonists on β adrenoceptors of cultured cardiac myocytes isolated from neonatal rat ventricle.Circulation，1990，81：1401
6 Xu Biao.Effects of verapamil on down-regulation of norepinephrine induced β adrenoceptors in cultured rat cardiomyocytes.Acta Pharmacologica Sinica，1998 Mar，19：148
7 Yoon YS.Intraplatelet free calcium concentration in patients with chronic uraemia.Kidney Int，1991，39：210
(1999-03-15收稿，1999-04-05修回), 百拇医药
单位：张晓良 刘必成 王 辉 (南京铁道医学院附属医院肾内科 南京，210009)；徐 标 (南京铁道医学院附属医院心内科 南京，210009)
关键词：血液透析；细胞内游离钙；β肾上腺素能受体
肾脏病与透析肾移植杂志990315
本研究旨在观察血液透析对透析患者血小板细胞内游离钙及淋巴细胞膜表面β肾上腺素能受体密度的影响。
1 对象和方法
1.1 研究对象 25例尿毒症接受维持性血液透析的患者(男14例，女11例)，年龄35～65(平均52±3)岁。按有无慢性充血性心力衰竭分为心衰组(n＝8)与无心衰组(n＝17)。
, 百拇医药
1.2 试剂 Fura-2/AM(Sigma公司)，3H-双氢心得舒(3H-Dihydroalprenolo，3H-DHA)(北京原子能研究所)，双氢心得安(Sigma公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 所有患者接受常规维持性血液透析治疗(碳酸氢盐透析)，在透析前后分别取静脉血测定血小板胞内游离钙(PCC)浓度和淋巴细胞膜β肾上腺素能受体密度(BAR)。
1.3.2 观察指标 参照房祥[1]的方法，以Fura-2/AM作为荧光指示剂，用双波长荧光比值法测定PCC浓度；以3H-DHA作为标记配基，参照单京瑞[2]的方法，用标记配基受体结合法测定淋巴细胞BAR。
1.4 统计方法 用Graphpad软件包进行均数、标准差统计及t检验和相关分析。
, http://www.100md.com
2 结果
结果表明，心衰组PCC高于非心衰组，两组透析后PCC均升高(表1)；心衰组BAR低于非心衰组，两组透析后BAR均明显降低(表2)。直线相关分析表明，无论透析前还是透析后BAR与PCC均呈显著负相关(透析前r＝-0.5636，P<0.01；透析后r＝-0.7933，P<0.001)。
表1 透析前后血小板胞内游离钙浓度(PCC，nmol/L)
透 前
透 后
P值
心衰组(n＝8)
186.8±6.6
207.5±7.9
, 百拇医药
<0.001
无心衰组(n＝17)
150.1±19.0
176.0±3.8
<0.001
P值
<0.001
<0.05
表2 透析前后β肾上腺素能受体密度(BAR，fmol/107cells)
透 前
透 后
, 百拇医药 P值
心衰组(n＝8)
476.0±85.7
420.4±13.8
<0.001
无心衰组(n＝17)
636.0±25.3
547.4±21.8
<0.001
P值
<0.001
<0.001
, 百拇医药
3 讨论
心功能不全是维持性血液透析患者常见的并发症，也是导致血透患者死亡最常见的原因之一[3]，因此探讨血透患者心功能不全的机制具有重要的临床意义。有关透析过程对细胞内钙离子和β肾上腺素能受体的影响及两者的关系，国内外未见报道。本研究结果表明，维持性血透合并心功能不全患者透析前、后反映心肌细胞内钙离子水平的PCC均较无心衰组明显增高，而反映心肌细胞膜β肾上腺素能受体的淋巴细胞膜表面BAR在心衰组较无心衰组明显降低。Yonemochi等[5]发现钙拮抗剂可以使下调的BAR增高40%～50%。我们先前在对乳鼠心肌细胞的研究中也证实[6]，钙拮抗剂Verapamil能部分逆转去甲肾上腺素诱导的心肌β肾上腺素能受体下调，其机制可能是增加了β肾上腺素能受体mRNA的合成。因此，细胞内高钙负荷可能通过某种机制影响到β肾上腺素能受体蛋白的表达及功能。
本研究还发现，透析后无论在心衰组还是无心衰组细胞内游离钙水平均较透析前明显增高，并伴有β受体的下调。Yoon[7]的研究也表明，血液透析可使血小板游离钙水平显著增高，然其确切机制及意义均不甚清楚。由于细胞内高钙负荷在心功能不全的发生中起重要的作用，本研究提示，血液透析过程本身可能通过影响细胞内钙离子浓度而对心肌收缩产生不良影响。
, 百拇医药
总之，本研究结果表明，尽管血液透析通过有效地清除潴留的水分和毒素而缓解尿毒症症状，并降低容量依赖性高血压和纠正心力衰竭，但由于该过程本身可能增加细胞内钙负荷和下调心肌细胞β受体，从而对心肌收缩力产生影响，此可能是维持性血透患者容易发生心力衰竭的重要原因之一。因此进一步加强对透析过程中心肌细胞钙调节的研究，可能为血液透析合并心力衰竭的防治提供新的途径。*本课题获国家自然科学基金赞助(39400054)
参考文献
1 房 祥.Fura-2荧光比值法测定血小板胞浆内游离钙浓度.湖南医科大学学报，1993，18：209
2 单京瑞.外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体的放射性配基结合分析法.军事医学科学院院刊，1988，53：73
3 John DH，Robert NF，Gloria MK.Congestive heart failure in dialysis patients：Prevalence，incidence，prognosis and risk factors.Kidney Int，1995，47：884
, 百拇医药
4 Bond M，Jaraki AR，Disch CH et al.Subcellular calcium content in cardiaomyopthic hamster hearts in vivo： An electron prob study.Circulation Res，1989，64：1001
5 Yonemochi H，Saikawa T，Takakura T et al.Effects of calcium antagonists on β adrenoceptors of cultured cardiac myocytes isolated from neonatal rat ventricle.Circulation，1990，81：1401
6 Xu Biao.Effects of verapamil on down-regulation of norepinephrine induced β adrenoceptors in cultured rat cardiomyocytes.Acta Pharmacologica Sinica，1998 Mar，19：148
7 Yoon YS.Intraplatelet free calcium concentration in patients with chronic uraemia.Kidney Int，1991，39：210
(1999-03-15收稿，1999-04-05修回), 百拇医药