子宫内膜癌中CD15的表达及其意义
作者：谷化平 尚培中 胡海霞 苏红 王勤 李春光
单位：谷化平 胡海霞 苏红 李春光(中国人民解放军第251医院病理科，张家口 075000)；尚培中(中国人民解放军第251医院普外科，张家口 075000)；王勤(中国人民解放军第251医院妇产科，张家口 075000)
关键词：子宫肿瘤；细胞粘附分子；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志990440分类号 R737.33； R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)04-0368-02
子宫内膜癌是妇科中较常见的肿瘤，近年来有增多的趋势，严重威胁着妇女的健康。越来越多的证据表明，细胞粘附分子(CAMs)或其配基在恶性肿瘤的发生发展、侵袭和转移过程中起着重要作用〔1，2〕。我们应用免疫组化法，对子宫内膜癌组织进行细胞粘附分子CD15(以下简称CD15)检测，旨在探讨CD15表达与肿瘤发生、发展和转移的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 组织标本 40例子宫内膜癌为我院手术切除标本。患者年龄37～74岁，平均58.4岁。按照FIGO(1970年)病理分级：Ⅰ级13例，Ⅱ级16例，Ⅲ级11例。按照FIGO(1988年)新分期：Ⅰ期22例，Ⅱ期5例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例。子宫内膜不典型增生20例。正常增殖期子宫内膜10例作为对照观察。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm连续切片。
1.2 免疫组织化学染色 采用微波S-P法。鼠抗CD15单克隆抗体和S-P试剂盒为Dako公司产品。实验用已知CD15阳性大肠癌组织作为阳性对照，用5%正常羊血清替代一抗作为阴性对照。DAB显色。
1.3 结果判断 采用双盲法，根据阳性染色范围分为4级：-：无阳性染色细胞；+：阳性染色细胞<25%、染色较弱者；
：阳性染色细胞在25%～75%之间；
：阳性染色细胞>75%、染色较强者。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用χ2检验。
2 结果
2.1 CD15的表达 CD15染色阳性物质呈棕黄色。CD15阳性物质在正常增殖期子宫内膜中主要位于腺上皮游离面，在子宫内膜不典型增生中亦见细胞膜和细胞浆分布，在子宫内膜癌中主要位于细胞膜和细胞浆。CD15染色结果见表1。
表1 CD15在子宫内膜不同病变中的表达 组织学类型
n
CD15染色结果
阳性数(%)
-
, http://www.100md.com
+
子宫内膜癌
40
11
10
10
9
29(72.5)*
不典型增生子宫内膜
20
, 百拇医药 10
4
3
2
9(45.0)
正常增殖期子宫内膜
10
6
4
0
0
4(40.0)
与不典型增生子宫内膜相比较，*P<0.052.2 CD15表达与子宫内膜癌的病理指标关系 见表2。
, 百拇医药
表2 CD15表达与子宫内膜癌病理指标的关系 病理指标
n
CD15染色结果
阳性数(%)
-
+
组织类型
子宫内膜样腺癌
33
10
, http://www.100md.com
10
8
5
23(76.7)
浆液性乳头状腺癌
2
0
0
1
1
2/2
透明细胞腺癌
3
, http://www.100md.com 1
0
1
1
2/3
鳞状细胞癌
1
0
0
0
1
1/1
未分化癌
1
, http://www.100md.com
0
0
0
1
1/1
组织学分级
Ⅰ
13
8
3
2
0
5(38.5)*
, http://www.100md.com
Ⅱ
16
3
5
4
4
13(81.3)
Ⅲ
11
0
2
4
5
11(100.0)
, 百拇医药
转移情况
无转移
21
10
5
3
3
11(52.4)**
有转移
19
1
5
7
, http://www.100md.com
6
18(94.7)
临床分期
Ⅰ～Ⅱ
27
11
7
5
4
16(59.3)△
Ⅲ～Ⅳ
13
0
, 百拇医药
3
5
5
13(100)
与Ⅱ级和Ⅲ级相比，*P<0.05；与Ⅲ～Ⅳ期相比较，△P<0.05；与有转移相比较，**P<0.013 讨论
CAMs是位于细胞表面的一大类糖蛋白分子，介导细胞与细胞或细胞与基质间的相互识别和结合，从而在调节细胞增殖、分化、迁移等方面起着重要作用。同样，肿瘤的发生、发展、浸润、转移、机体免疫反应以及临床表现等也与CAMs密切相关〔2〕。经过多年的研究，目前已鉴定出主要负责细胞粘附的CAMs有钙粘附素、整合素、免疫球蛋白超基因家族、选择素和CD44五大类。其中选择素是近年来被确定的一类CAMs家族，它包括P-选择素(GMP-140、P-selectin)、E-选择素(ELAM-1、E-selectin)和L-选择素(LAM-1、L-selectin)3种主要成分。已有研究表明，选择素、包括它所识别并能结合的配基在肿瘤的转移过程中起着重要作用〔3〕。CD15抗原(又叫粒细胞相关抗原，或Lewis x)是Lewis血型抗原之一，属CAMs成员，为P-选择素和E-选择素的配基，由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖胺组成的碳水化合物抗原〔4～6〕。越来越多的研究证实，CD15的表达与许多肿瘤的侵袭、转移及预后密切相关，被视为一些肿瘤预后不良的标志物。Konety等〔7〕研究证实，CD15阳性的膀胱移行细胞癌容易复发。Nakagoe等〔8〕研究证实，CD15阳性的大肠癌患者5年生存率(60.5%)显著低于CD15阴性患者的5年生存率(81.2%)，且CD15表达程度越强者，5年生存率就越低。我们曾对95例胃癌组织进行CD15研究，结果证实CD15表达与肿瘤分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关〔4〕。本实验结果显示，在正常增殖期子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中，CD15均呈不同程度阳性反应，其阳性率在子宫内膜癌中显著高于不典型增生子宫内膜(P<0.05)，10例正常增殖期子宫内膜中4例呈CD15弱阳性反应。我们观察，CD15阳性物质分布在子宫内膜良恶性病变中存在着明显差异性。即CD15阳性物质在正常子宫内膜组织中主要分布于腺上皮游离面，在子宫内膜不典型增生组织中则出现细胞膜或细胞浆分布，而在子宫内膜癌组织中主要分布于细胞膜和细胞浆，表现出明显的异质性。表明CD15表达与子宫内膜癌的发生有关，对于子宫内膜良恶性病变判断可能是一种有用标志。肿瘤的组织学类型、病理分级、临床分期和淋巴结转移是重要的预后相关因素〔9〕。本实验结果显示，CD15表达与子宫内膜癌的组织类型、病理分级、临床分期和转移状况相关。浆液性乳头状腺癌、透明细胞腺癌、鳞状细胞癌及未分化癌通常被视为恶性程度较高、预后较差的肿瘤，在病理分级中多以Ⅲ级为主，而CD15表达多较强。在病理分级Ⅱ级和Ⅲ级病例、临床Ⅲ～Ⅳ期病例或淋巴结转移阳性病例中，CD15阳性率均明显高于相应的病理Ⅰ级、临床1～Ⅱ期和无淋巴结转移的病例，差异有显著意义。提示CD15表达在子宫内膜癌细胞增殖、分化、侵袭、转移和临床进展过程中可能起着重要调节作用。这对于判断肿瘤恶性程度、预测生物学行为、评估预后或指导临床对患者采取抗粘附治疗等可能是一种很有意义的参考指标。
, 百拇医药
关于CD15表达在肿瘤转移过程中的确切作用，文献报道甚少。但肿瘤的转移是一个复杂的多环节过程，肿瘤细胞在原发灶恶性生长并脱离，是肿瘤转移的关键条件；而肿瘤细胞与内皮细胞、细胞外基质粘附，又为癌血行转移不可缺少的环节。有报道指出，P-选择素和E-选择素主要表达于活化的血管内皮细胞，其受体通过识别癌细胞上相应配基而起粘附介导作用，从而在肿瘤转移中起着重要作用〔10〕。CD15是P-选择素和E-选择素所识别的一个比较确定的配基，提示高表达CD15抗原的肿瘤细胞可能通过与其受体的相互识别，从而促使肿瘤细胞易于进入血管腔，导致转移发生。
参考文献
1，Nigam AK, Savage FJ, Boulos PB et al. Loss of cell-cell and cell-atrix adhesion molecules in colorectal cancer. Br J Cancer,1993;68:507～510
, 百拇医药
2，裴雪涛. 细胞粘附分子与肿瘤的发生及转移. 中国病理生理杂志，1997；13：103～106
3，陈金联，同 同 选择素与肿瘤研究进展. 生命科学，1996;8(1)：31～33
4，谷化平，周翠玲，苏 红. 细胞粘附分子CD15在胃癌组织中的表达. 中国肿瘤临床与康复，1997；4：8～9
5，Brooks SA, Leatemn AJ. Expression of the CD15 antigen (Lewis X) in breast cancer. Histochem J, 1995;27:689～693
6，Torii A, Nakayama A, Harada A et al. Expression of the CD15 antigen in hepatocellular carcinoma. Cancer,1993;71:3864～3867
, http://www.100md.com
7，Konety BR, Bullou B, Jaffe R et al. Expression of SSEA-1(Lewis x)on transitional cell carcinoma of the bladder. Urol Int，1997；58(2)：69～74
8，Nakagoe T, Fukushima K, Hirota M et al. Immunohistochemical expression of Sialyl Lex antigen in relation to survival of patients with colorectal carcinoma. Cancer,1993;72(8):2323～2329
9，郭燕燕，党 群. 子宫内膜癌组织雌激素及孕激素受体的测定及其临床意义. 中华妇产科杂志，1997；32(7)：418～421
10，Vaki A. Selectins ligands. Proc Natl Acad Sci USA,1994;91:7390～7394
收稿日期：1998-09-30
修回日期：1999-03-01, 百拇医药
单位：谷化平 胡海霞 苏红 李春光(中国人民解放军第251医院病理科，张家口 075000)；尚培中(中国人民解放军第251医院普外科，张家口 075000)；王勤(中国人民解放军第251医院妇产科，张家口 075000)
关键词：子宫肿瘤；细胞粘附分子；免疫组织化学
临床与实验病理学杂志990440分类号 R737.33； R392.31 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(1999)04-0368-02
子宫内膜癌是妇科中较常见的肿瘤，近年来有增多的趋势，严重威胁着妇女的健康。越来越多的证据表明，细胞粘附分子(CAMs)或其配基在恶性肿瘤的发生发展、侵袭和转移过程中起着重要作用〔1，2〕。我们应用免疫组化法，对子宫内膜癌组织进行细胞粘附分子CD15(以下简称CD15)检测，旨在探讨CD15表达与肿瘤发生、发展和转移的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 组织标本 40例子宫内膜癌为我院手术切除标本。患者年龄37～74岁，平均58.4岁。按照FIGO(1970年)病理分级：Ⅰ级13例，Ⅱ级16例，Ⅲ级11例。按照FIGO(1988年)新分期：Ⅰ期22例，Ⅱ期5例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例。子宫内膜不典型增生20例。正常增殖期子宫内膜10例作为对照观察。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，4 μm连续切片。
1.2 免疫组织化学染色 采用微波S-P法。鼠抗CD15单克隆抗体和S-P试剂盒为Dako公司产品。实验用已知CD15阳性大肠癌组织作为阳性对照，用5%正常羊血清替代一抗作为阴性对照。DAB显色。
1.3 结果判断 采用双盲法，根据阳性染色范围分为4级：-：无阳性染色细胞；+：阳性染色细胞<25%、染色较弱者；
：阳性染色细胞在25%～75%之间；：阳性染色细胞>75%、染色较强者。, 百拇医药
1.4 统计学处理 采用χ2检验。
2 结果
2.1 CD15的表达 CD15染色阳性物质呈棕黄色。CD15阳性物质在正常增殖期子宫内膜中主要位于腺上皮游离面，在子宫内膜不典型增生中亦见细胞膜和细胞浆分布，在子宫内膜癌中主要位于细胞膜和细胞浆。CD15染色结果见表1。
表1 CD15在子宫内膜不同病变中的表达 组织学类型
n
CD15染色结果
阳性数(%)
-
, http://www.100md.com
+
子宫内膜癌
40
11
10
10
9
29(72.5)*
不典型增生子宫内膜
20
, 百拇医药 10
4
3
2
9(45.0)
正常增殖期子宫内膜
10
6
4
0
0
4(40.0)
与不典型增生子宫内膜相比较，*P<0.052.2 CD15表达与子宫内膜癌的病理指标关系 见表2。
, 百拇医药
表2 CD15表达与子宫内膜癌病理指标的关系 病理指标
n
CD15染色结果
阳性数(%)
-
+
组织类型
子宫内膜样腺癌
33
10
, http://www.100md.com
10
8
5
23(76.7)
浆液性乳头状腺癌
2
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2/2
透明细胞腺癌
3
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鳞状细胞癌
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1/1
未分化癌
1
, http://www.100md.com
0
0
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1
1/1
组织学分级
Ⅰ
13
8
3
2
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5(38.5)*
, http://www.100md.com
Ⅱ
16
3
5
4
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13(81.3)
Ⅲ
11
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11(100.0)
, 百拇医药
转移情况
无转移
21
10
5
3
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11(52.4)**
有转移
19
1
5
7
, http://www.100md.com
6
18(94.7)
临床分期
Ⅰ～Ⅱ
27
11
7
5
4
16(59.3)△
Ⅲ～Ⅳ
13
0
, 百拇医药
3
5
5
13(100)
与Ⅱ级和Ⅲ级相比，*P<0.05；与Ⅲ～Ⅳ期相比较，△P<0.05；与有转移相比较，**P<0.013 讨论
CAMs是位于细胞表面的一大类糖蛋白分子，介导细胞与细胞或细胞与基质间的相互识别和结合，从而在调节细胞增殖、分化、迁移等方面起着重要作用。同样，肿瘤的发生、发展、浸润、转移、机体免疫反应以及临床表现等也与CAMs密切相关〔2〕。经过多年的研究，目前已鉴定出主要负责细胞粘附的CAMs有钙粘附素、整合素、免疫球蛋白超基因家族、选择素和CD44五大类。其中选择素是近年来被确定的一类CAMs家族，它包括P-选择素(GMP-140、P-selectin)、E-选择素(ELAM-1、E-selectin)和L-选择素(LAM-1、L-selectin)3种主要成分。已有研究表明，选择素、包括它所识别并能结合的配基在肿瘤的转移过程中起着重要作用〔3〕。CD15抗原(又叫粒细胞相关抗原，或Lewis x)是Lewis血型抗原之一，属CAMs成员，为P-选择素和E-选择素的配基，由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖胺组成的碳水化合物抗原〔4～6〕。越来越多的研究证实，CD15的表达与许多肿瘤的侵袭、转移及预后密切相关，被视为一些肿瘤预后不良的标志物。Konety等〔7〕研究证实，CD15阳性的膀胱移行细胞癌容易复发。Nakagoe等〔8〕研究证实，CD15阳性的大肠癌患者5年生存率(60.5%)显著低于CD15阴性患者的5年生存率(81.2%)，且CD15表达程度越强者，5年生存率就越低。我们曾对95例胃癌组织进行CD15研究，结果证实CD15表达与肿瘤分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关〔4〕。本实验结果显示，在正常增殖期子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中，CD15均呈不同程度阳性反应，其阳性率在子宫内膜癌中显著高于不典型增生子宫内膜(P<0.05)，10例正常增殖期子宫内膜中4例呈CD15弱阳性反应。我们观察，CD15阳性物质分布在子宫内膜良恶性病变中存在着明显差异性。即CD15阳性物质在正常子宫内膜组织中主要分布于腺上皮游离面，在子宫内膜不典型增生组织中则出现细胞膜或细胞浆分布，而在子宫内膜癌组织中主要分布于细胞膜和细胞浆，表现出明显的异质性。表明CD15表达与子宫内膜癌的发生有关，对于子宫内膜良恶性病变判断可能是一种有用标志。肿瘤的组织学类型、病理分级、临床分期和淋巴结转移是重要的预后相关因素〔9〕。本实验结果显示，CD15表达与子宫内膜癌的组织类型、病理分级、临床分期和转移状况相关。浆液性乳头状腺癌、透明细胞腺癌、鳞状细胞癌及未分化癌通常被视为恶性程度较高、预后较差的肿瘤，在病理分级中多以Ⅲ级为主，而CD15表达多较强。在病理分级Ⅱ级和Ⅲ级病例、临床Ⅲ～Ⅳ期病例或淋巴结转移阳性病例中，CD15阳性率均明显高于相应的病理Ⅰ级、临床1～Ⅱ期和无淋巴结转移的病例，差异有显著意义。提示CD15表达在子宫内膜癌细胞增殖、分化、侵袭、转移和临床进展过程中可能起着重要调节作用。这对于判断肿瘤恶性程度、预测生物学行为、评估预后或指导临床对患者采取抗粘附治疗等可能是一种很有意义的参考指标。
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关于CD15表达在肿瘤转移过程中的确切作用，文献报道甚少。但肿瘤的转移是一个复杂的多环节过程，肿瘤细胞在原发灶恶性生长并脱离，是肿瘤转移的关键条件；而肿瘤细胞与内皮细胞、细胞外基质粘附，又为癌血行转移不可缺少的环节。有报道指出，P-选择素和E-选择素主要表达于活化的血管内皮细胞，其受体通过识别癌细胞上相应配基而起粘附介导作用，从而在肿瘤转移中起着重要作用〔10〕。CD15是P-选择素和E-选择素所识别的一个比较确定的配基，提示高表达CD15抗原的肿瘤细胞可能通过与其受体的相互识别，从而促使肿瘤细胞易于进入血管腔，导致转移发生。
参考文献
1，Nigam AK, Savage FJ, Boulos PB et al. Loss of cell-cell and cell-atrix adhesion molecules in colorectal cancer. Br J Cancer,1993;68:507～510
, 百拇医药
2，裴雪涛. 细胞粘附分子与肿瘤的发生及转移. 中国病理生理杂志，1997；13：103～106
3，陈金联，同 同 选择素与肿瘤研究进展. 生命科学，1996;8(1)：31～33
4，谷化平，周翠玲，苏 红. 细胞粘附分子CD15在胃癌组织中的表达. 中国肿瘤临床与康复，1997；4：8～9
5，Brooks SA, Leatemn AJ. Expression of the CD15 antigen (Lewis X) in breast cancer. Histochem J, 1995;27:689～693
6，Torii A, Nakayama A, Harada A et al. Expression of the CD15 antigen in hepatocellular carcinoma. Cancer,1993;71:3864～3867
, http://www.100md.com
7，Konety BR, Bullou B, Jaffe R et al. Expression of SSEA-1(Lewis x)on transitional cell carcinoma of the bladder. Urol Int，1997；58(2)：69～74
8，Nakagoe T, Fukushima K, Hirota M et al. Immunohistochemical expression of Sialyl Lex antigen in relation to survival of patients with colorectal carcinoma. Cancer,1993;72(8):2323～2329
9，郭燕燕，党 群. 子宫内膜癌组织雌激素及孕激素受体的测定及其临床意义. 中华妇产科杂志，1997；32(7)：418～421
10，Vaki A. Selectins ligands. Proc Natl Acad Sci USA,1994;91:7390～7394
收稿日期：1998-09-30
修回日期：1999-03-01, 百拇医药