一种新型DNA病毒(TTV)对恒河猴的实验感染
作者：梁蔚芳 杨守昌 何海棠 王燕军 肖红 刘定燮 吴爱华 章廉 骆抗先
单位：第一军医大学南方医院感染内科，广州，510515
关键词：新型DNA病毒；TTV；恒河猴；实验感染
一种新型DNA病毒 中图分类号：R373.2
1 材料和方法
收集潜伏期病人粪便，以0.01 mol/L PBS液制成20%粪提取液，静脉(10 ml/只)和灌胃(20ml/只)接种恒河猴，再以阳性猴粪便经口传代。以一只猴灌阴性粪便液并行检测对照。每日收集粪便和隔日血液标本1周，继每周粪便，每月血液一次6个月。2只灌胃的猴在第4日手术，第7日杀死，另2只猴接种后6个月时手术，收集胆汁、肝脏和上中下3处空肠组织。以PCR检测猴血液和粪便，原位杂交检测活检或杀死猴的空肠和肝内的病毒。
2 结果与讨论
静脉接种猴4～7d后血液检出病毒，几乎同时粪便也检出病毒。口服接种猴当日粪便检出病毒，可能是排出的接种物。于接种后第3～4日病毒再现，病毒血症始于5～10 d。猴的粪便PCR产物(nt1940～2187)测序，与发现的TTV序列的247核苷酸区段比较，同源性94.3%。传代实验中，也可以相同的时间从猴血液和粪便中检出病毒，粪便PCR产物(247 bp片段)与发表TTV序列的同源性98.6%，与第一代猴粪病毒(接种物)的同源性97.8%。
挤压胆囊由十二指肠的胆管出口收集的胆汁标本，在灌胃接种第4日病毒血症尚未出现时以PCR检测病毒阴性，在接种第7日和6个月有病毒血症时采集的均可检出病毒。
组织内病毒原位杂交，肝细胞的胞核和胞浆都可有病毒的阳性染色，单一或同时胞核和胞浆阳性，阳性肝细胞散在分布于肝小叶。3处空肠绒毛的柱状上皮和固有层中有些细胞胞核及/或胞浆阳性。但有些组织均未见明显病变。
接种前猴的粪便和血液均阴性，平行检测的对照猴所有粪便和血液标本检测结果均阴性。所有猴每2周检测血清ALT，在整个观察期间均未见增高。
接种实验表明恒河猴对新型DNA病毒易感，且无明显致病性。无论灌胃或静脉接种都能引起感染，都可建立病毒血症，感染后都可由肠道排出病毒。潜伏期(接种至血液或粪便中出现病毒)短暂，而病毒血症和肠道病毒携带的时间漫长，观察6个月尚未消失。
(收稿日期：1998-11-25), http://www.100md.com
单位：第一军医大学南方医院感染内科，广州，510515
关键词：新型DNA病毒；TTV；恒河猴；实验感染
一种新型DNA病毒 中图分类号：R373.2
1 材料和方法
收集潜伏期病人粪便，以0.01 mol/L PBS液制成20%粪提取液，静脉(10 ml/只)和灌胃(20ml/只)接种恒河猴，再以阳性猴粪便经口传代。以一只猴灌阴性粪便液并行检测对照。每日收集粪便和隔日血液标本1周，继每周粪便，每月血液一次6个月。2只灌胃的猴在第4日手术，第7日杀死，另2只猴接种后6个月时手术，收集胆汁、肝脏和上中下3处空肠组织。以PCR检测猴血液和粪便，原位杂交检测活检或杀死猴的空肠和肝内的病毒。
2 结果与讨论
静脉接种猴4～7d后血液检出病毒，几乎同时粪便也检出病毒。口服接种猴当日粪便检出病毒，可能是排出的接种物。于接种后第3～4日病毒再现，病毒血症始于5～10 d。猴的粪便PCR产物(nt1940～2187)测序，与发现的TTV序列的247核苷酸区段比较，同源性94.3%。传代实验中，也可以相同的时间从猴血液和粪便中检出病毒，粪便PCR产物(247 bp片段)与发表TTV序列的同源性98.6%，与第一代猴粪病毒(接种物)的同源性97.8%。
挤压胆囊由十二指肠的胆管出口收集的胆汁标本，在灌胃接种第4日病毒血症尚未出现时以PCR检测病毒阴性，在接种第7日和6个月有病毒血症时采集的均可检出病毒。
组织内病毒原位杂交，肝细胞的胞核和胞浆都可有病毒的阳性染色，单一或同时胞核和胞浆阳性，阳性肝细胞散在分布于肝小叶。3处空肠绒毛的柱状上皮和固有层中有些细胞胞核及/或胞浆阳性。但有些组织均未见明显病变。
接种前猴的粪便和血液均阴性，平行检测的对照猴所有粪便和血液标本检测结果均阴性。所有猴每2周检测血清ALT，在整个观察期间均未见增高。
接种实验表明恒河猴对新型DNA病毒易感，且无明显致病性。无论灌胃或静脉接种都能引起感染，都可建立病毒血症，感染后都可由肠道排出病毒。潜伏期(接种至血液或粪便中出现病毒)短暂，而病毒血症和肠道病毒携带的时间漫长，观察6个月尚未消失。
(收稿日期：1998-11-25), http://www.100md.com