足月儿和早产儿母乳中游离和构成蛋白质的氨基酸含量动态比较
作者：翁梅倩 田小琳 吴圣楣 戴定威 夏其昌 张伟利
单位：200092 上海市第二医科大学附属新华医院(翁梅倩、张伟利)；上海市儿科研究 所(吴圣楣、戴定威)；中国科学院上海生化研究所(田小琳、夏其昌)
关键词：人乳；氨基酸；母乳喂养；婴儿
上海学报Shanghai Medical Journal1999年4月 第22卷 第4期 1999 【摘要】 目的 了解足月儿和早产儿母乳中游离和构成 蛋白质的氨基酸含量的动态变化。 方法 采用氨基酸自动分析仪对不同泌乳期的足月儿和早产儿母乳中游 离和构成蛋白质的氨基酸含量进行测定。 结果 牛磺酸、谷氨酸/谷氨酰胺是母初乳中最丰富的游离氨基酸，而谷 氨酸/谷氨酰胺、亮氨酸和天门冬氨酸是蛋白质中含量最丰富的氨基酸，提示了其对新生儿 的最佳供应。早产儿母乳中氨基酸谱变化与足月儿母乳有所不同，但更符合于早产儿的需求 。 结论 从氨基酸变化看，母乳为婴儿最佳匹配的食品，对于早产儿更应 强调和鼓励母乳喂养。
, 百拇医药
Comparison of dynamic changes of free amino acid and amino acid const itutional structural protein in full-term and preterm maternal milk WONG Meiqian, TIAN Xiaolin, WU Shenmei, et al. Xinhua hospital, Shanghai Institute for Pediatric Rese arch Shanghai Second Medical University, 2000092
【Abstract】 Objective To learn the dynamic cha nges in the concentrations of free amino acid and amino acid in the structural protein of full-term and preterm maternal milk so as to improve breast feedin g further. Methods Amino acids of free and structural protein of full-te rm and preterm human milk were quantified at different periods of lactat ion by automatic amino-acid analyser.Results In human milk's colostrum and milk, taurine and glutami ne glutamylamide were the most abundant free amino acids and glutamine/ghtamylam ides. Leucine and aspartic acid were the most abundant protein of structural ami no acids. It showed that human milk was the best food for infants, although the a m ino acid in preterm and full-term maternal milk was in different spectrum, ye t preterm maternal milk is more fit for preterm infants. Conclusion Basing on the above changes, breast feeding shoul d be emphasized and encouraged for poreterm infants.(Shanghai Med J, 1999, 22∶217-222)
, 百拇医药
【Key words】 Human milk Amino acids Breast feedin g Infants
母乳是足月或早产新生儿的最佳食物，母乳中的氨基酸成分十分适合婴 儿的需要，是婴儿合成蛋白质及其体内生物物质的重要来源[1]，国外报道的母 乳中游离 和构成蛋白质的氨基酸含量变异较大[2～4]，国内曾有足月儿母乳游离氨基 酸含量测定的报道[5]，但未测定构成蛋白质的氨基酸含量。至于早产儿母乳游离 或构成蛋白质的氨基酸含量 的报道则尚未见到。本研究为早产儿和足月儿母乳中游离和构成蛋白质的氨基酸含量的动 态变化观察，为进一步提倡母乳喂养，指导科学喂养婴儿和配方奶的合理化研制提供理论依 据。
对象和方法
一、乳母情况
在1997年5月至1997年12月间，选择上海市新华医院和杨浦区妇婴保健院分娩、身体健 康、足月或早产、经阴道正常分娩、奶量充足、经济生活较为稳定的产后3周内的乳母，产 后饮食变动不大，无特殊偏食习惯，授母乳的产妇共45例，均为第一胎，其中足月分娩的产 妇25例，年龄为(26.4±3.4)岁，孕龄(39.8±1.1)周，新生儿出生体重为(3 344.8±326.7) 克；未足月分娩的产妇20例，年龄为(27.7±4.6)岁，孕龄(34.2±2.0)周，新生儿出生 体重为(2 263.4±454.8)克。
, http://www.100md.com
二、乳样采集
收集每位产妇产后第3天的初乳和第10天的过渡乳及第21天成熟乳。初乳在院内时取，过渡 乳和成熟乳到乳母家中取。所有标本均在上午9时至10时在哺乳前采集。用手挤法采集乳汁 ，采集后立即入清洁的聚苯乙烯塑料试管中，置于-4°C冰箱保存，24小时内进行乳样 处理。共收集了足月分娩产妇的初乳25份、过渡乳22份、成熟乳20份，末足月分娩产妇的初 乳20份，过渡乳和成熟乳各16份。
三、测定方法
(一) 试剂 磺基水杨酸(分析纯)为北京化学试剂二厂产品。无水碳酸钠(分析纯) 为上海 宏光化工厂产品。System6300氨基酸自动分析仪所需试剂为Beckman公司配套产品。超纯水 由Millipore公司Milli-Q仪制备，经Q-PAK Kit过滤后使用。
(二)标本处理 采用 Wu报道的方法[6]将收集的乳样低温(-4°C)高速离心、 去脂、去蛋白后上清液用于测定游离氨基酸，蛋白质水解产物用于测定构成蛋白质的氨基酸 含量。乳汁中氨基酸的定量分析均在System 6300氨基酸自动分析仪上进行。
, 百拇医药
(三) 统计方法
使用Statistica for Windows软件5.0版本进行统计，两样本均数比较采用t检验，多 样本均数比较采用方差分析(ANOVA)。
结 果
一、足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成的动态变化
从表l可见足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成在不同泌乳期的变化。初乳中牛磺酸和谷 氨酰/谷氨酰胺是最丰富的游离氨基酸，其次为丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和苏氨 酸等。早产儿母初乳中除了牛磺酸的含量明显低于足月儿母乳外，其余各游离氨基酸含量与 足月儿母初乳之间没有明显差异。
谷氨酸/谷氨酰胺随泌乳期延长迅速升高，成为过渡乳和成熟乳中含量最丰富的游离氨基酸 。母成熟乳中谷氨酸/谷氨酰胺含量已达到初乳时的2倍。牛磺酸随着泌乳期延长其含量虽 逐渐下降，但仍为过渡乳和成熟乳中仅次于谷氨酸/谷氨酰胺的含量丰富的游离氨基酸，其 下降速度以哺乳第10天后更为明显，足月儿母成熟乳中牛磺酸的含量已下降至初乳时的一半 ，而早产儿母乳中牛磺酸含量下降速度较为缓慢，成熟乳中牛磺酸含量仍达到初乳时的83% ，因此早产儿母过渡乳和成熟乳中牛磺酸含量与足月儿母乳之间己无明显差异。
, 百拇医药
无论在足月儿或早产儿母乳中其丝氨酸、半胱氨酸和甘氨酸含量亦随着泌乳期延长而上升， 尤以丝氨酸含量升高较为明显，而丙氨酸、组氨酸和苏氨酸的含量在过渡乳中略有上升，在 成熟乳中则下降。其余各游离氨基酸含量随泌乳期延长逐渐下降，尤以精氨酸、脯氨酸、蛋 氨酸和赖氨酸的含量下降更为明显，与初乳相比，足月儿母成熟乳中这些氨基酸含量下降了 近71%～87%，早产儿母成熟乳中亦下降了近17%～74%，由于下降速度不及足月儿母乳， 故在过渡乳和成熟乳中早产儿母乳中的精氨酸、脯氨酸、蛋氨酸和赖氨酸含量明显高于足 月儿母乳。
早产儿母初乳中游离氨基酸总量略低于足月儿母初乳，而在过渡乳和成熟乳中则略高 于足月儿母乳，但两者不存在统计学差异。
二、足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量动态变化
从表2可见足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量在不同泌乳期的变化。不论母初 乳、过渡乳或成熟乳，其中谷氨酸/谷氨酰胺均是构成蛋白质的氨基酸中含量最丰富的氨基 酸， 其次为亮氨酸、天冬氨酸和脯氨酸，而含硫氨基 酸半胱氨酸和蛋氨酸则是构成蛋白质的氨 基酸中含量最少的氨基酸。早产儿母初乳蛋白质中除了组氨酸和蛋氨酸含量略低于足月儿母 初乳，其余各构成蛋白质的氨基酸含量均略高于足月儿母初乳，但除脯氨酸外，两者之间经 统计学处理无统计学差异。
, http://www.100md.com
随着泌乳期延长，母乳中蛋白质总量不断下降，构成蛋白质的氨基酸含量亦逐渐下降，足月 儿母初乳氨基酸含量较成熟乳中平均高1.57倍，早产儿则为1.51倍。以初乳至过渡乳时氨 基酸含量下降更为明显，而过渡乳和成熟乳中构成蛋白质的氨基酸含量变化不大。谷氨酸/ 谷氨酰胺亦随泌乳
表1 足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成 在不同泌乳期的变化(μmol/dl) 氨基酸
初乳
过渡乳
成熟乳
F值
P值
Tau
35.60±12.26*
, http://www.100md.com
30.81±10.49
17.65±9.64
13.518
0.000
27.59±8.61*
30.60±11.81
23.00±8.40
2.061
0.160
Orn
1.03±0.46
0.91±0.35
, http://www.100md.com
0.72±0.18
3.146
0.058
1.03±0.57
0.72±0.29
0.63±0.40
0.630
0.553
Ala
8.30±3.48
15.18±5.23
13.27±5.57
, 百拇医药
23.419
0.000
6.75±3.49
14.17±5.37
12.66±6.54
3.916
0.049
Asp
5.69±2.26
4.87±2.40
4.28±2.90
2.730
, http://www.100md.com
0.079
4.78±2.77
5.70±2.51
4.46±2.52
0.886
0.432
Cys
0.92±0.49
0.98±0.59
1.00±0.66*
1.150
0.330
, 百拇医药
0.80±0.49
1.09±0.40
1.54±0.63*
5.597
0.016
Glx
29.85±16.62
61.11±21.42
62.54±24.59
38.845
0.000
26.16±17.65
, 百拇医药
53.41±25.32
51.80±23.53
5.882
0.017
Gly
3.62±1.68
4.66±1.83
4.73±2.84
1.857
0.173
3.99±2.70
5.23±2.42
, http://www.100md.com
4.96±2.82
3.186
0.007
Ser
7.20±4.92
14.53±6.41*
14.69±7.83
10.761
0.000
7.02±4.86
9.92±4.94*
, 百拇医药 11.89±6.54
1.713
0.208
Tyr
1.70±0.92
1.09±0.36
0.77±0.35*
10.354
0.000
2.08±1.35
1.35±0.79
1.23±0.80*
, 百拇医药
4.804
0.021
Arg
3.81±2.02
1.19±0.69*
0.50±0.31
12.854
0.003
4.54±3.13
2.79±1.92*
1.05±0.77
4.032
, 百拇医药
0.052
Pro
3.43±2.07
1.27±0.62*
0.95±0.44*
24.322
0.000
3.46±1.88
2.73±1.09*
2.61±1.36*
4.271
, 百拇医药
0.040
His
1.70±0.99
2.23±0.59
1.96±0.59
9.615
0.000
1.56±0.77
2.43±0.96
2.32±0.91
3.984
0.037
, http://www.100md.com
Leu
2.74±1.51
2.21±0.74
1.90±0.45
3.193
0.055
3.07±1.11
2.28±0.96
2.15±1.08
0.935
0.416
Met
, 百拇医药
3.41±1.94
1.48±0.61*
0.98±0.76*
20.91
0.000
3.53±1.76
2.36±1.14*
2.23±1.59*
1.651
0.223
Phe
, 百拇医药
1.36±0.60
1.36±0.50
1.16±0.27
1.339
0.276
1.36±0.86
1.31±0.51
1.32±0.73
0.342
0.715
Thr
4.24±2.79
, 百拇医药
5.22±1.73
3.21±1.83
5.407
0.009
3.19±2.02
5.93±2.72
4.37±2.86
1.772
0.202
Val
3.22±1.92
3.30±1.21
, 百拇医药
3.02±1.09
0.245
0.784
4.01±1.96
3.74±2.08
3.27±1.79
0.142
0.869
Lys
8.27±5.38
2.46±1.23*
1.50±0.83
, 百拇医药
30.288
0.000
7.46±4.31
3.64±1.68*
1.91±0.80
6.428
0.013
总计
114.85±48.74
137.56±44.93
117.44±49.67
7.326
, http://www.100md.com
0.002
107.81±53.80
147.40±56.80
131.50±59.88
1.712
0.212
注：(1) 表中上列数据代表足月儿母乳中游离氨基酸含量，下列数据代表早产 儿母乳中游离氨基酸含量；(2) 表中足月儿母初乳为23份；(3) Glx代表谷氨酸/谷氨酰胺； (4) *表示P<0.05表2 足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨 基酸含量在不同泌乳期的变化(μmol/dl) 氨基酸
初乳
过渡乳
, 百拇医药
成熟乳
F值
P值
Ala
80.87±23.09
53.35±10.65*
50.63±8.36
31.233
0.000
90.47±19.28
62.98±13.89*
57.90±16.39
, 百拇医药
15.68
0.000
Asp
122.38±29.14
83.80±17.75*
80.71±14.96
31.389
0.000
127.71±23.87
96.28±19.74*
89.29±17.98
, 百拇医药
12.599
0.000
Cys
16.22±5.75*
10.31±2.84*
11.44±2.43
17.99
0.000
20.77±3.95*
14.18±3.64*
12.79±3.89
, 百拇医药
22.564
0.000
Glx
166.32±27.54
135.86±33.85
156.86±99.13
1.802
0.180
177.36±30.96
152.01±33.69
141.92±20.61
6.652
, 百拇医药
0.006
Gly
69.33±22.70
38.39±8.76*
36.20±8.07*
53.63
0.000
78.82±21.44
48.65±12.38*
44.29±14.74*
16.637
, http://www.100md.com
0.000
Ser
85.85±27.93
52.73±13.53*
53.08±9.72
34.887
0.000
99.44±27.78
65.39±14.19*
60.77±15.84
15.641
, 百拇医药
0.000
Tyr
46.25±11.16
33.58±8.20*
33.74±5.67
21.229
0.000
52.42±10.88
40.00±7.12*
37.10±7.46
13.243
, 百拇医药
0.000
Arg
43.82±15.33
24.94±9.18*
26.81±4.46*
26.264
0.000
51.63±10.32
35.10±7.05*
34.42±9.62*
18.231
, 百拇医药
0.000
Pro
99.03±24.96*
95.52±18.27
99.89±17.26
0.526
0.596
117.13±21.87*
105.64±26.73
99.97±14.17
3.996
, 百拇医药
0.035
His
25.72±5.51
18.90±4.75
18.34±3.15
17.129
0.000
24.97±4.72
21.06±4.65
21.64±9.40
1.312
0.291
, 百拇医药
Leu
122.22±27.17
92.15±20.45
93.80±16.56
15.140
0.000
126.90±24.19
103.73±22.08
97.93±16.60
8.483
0.002
Met
, 百拇医药
16.44±3.42*
9.93±4.45
7.31±3.00
36.566
0.000
11.89±5.36*
9.50±3.55
8.05±1.82
3.827
0.041
Phe
, http://www.100md.com 45.20±11.73
29.87±6.45*
28.11±5.39
33.628
0.000
47.48±10.08
34.71±7.10*
32.19±8.59
12.130
0.000
Thr
, http://www.100md.com 75.10±22.48
45.82±10.96*
45.38±8.57
50.390
0.000
81.70±23.64
54.19±12.23*
50.60±12.80
14.784
0.000
Ile
, 百拇医药
53.24±10.54
45.40±12.23
47.40±13.39
4.205
0.020
53.11±10.01
51.03±11.54
48.73±6.87
0.983
0.392
Val
80.16±21.99*
, http://www.100md.com
59.30±14.09*
58.93±16.23
1.000
0.379
97.02±17.96*
72.85±16.86*
67.21±12.15
15.690
0.000
Lys
69.64±15.38
, http://www.100md.com
54.84±11.69
52.00±9.16
4.241
0.020
69.69±13.34
60.04±12.17
52.15±14.81
4.899
0.018
总计
1291.38±382.42
853.88±190.72*
, 百拇医药
879.46±153.21
14.355
0.000
1329.21±257.50
1026.48±213.21*
958.39±179.97
11.847
0.000
注：(1) 表中上列数据代表足月儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量，下列数据 代表早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量；
(2) Glx代表谷氨酸/谷氨酰胺；(3) *表示P<0.05
, http://www.100md.com
期延长而下降，但其在足月儿母乳总蛋白中的构成比从初乳时的12.9 %上升至过渡乳和成熟乳时的15.9%和17.8%。早产儿母乳中谷氨酸/谷氨酰胺含量比足 月儿母乳中高，其在初乳总蛋白中的构成比亦高于足月儿母初乳，达到13.4%。早产儿母过 渡乳中丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、精氨酸、脯氨酸、苏氨 酸和缬氨酸含量明显高于足月儿母过渡乳，经统计学处理两者之间有差异显著性。早产儿母 成 熟乳中除了甘氨酸和精氨酸，其余各构成蛋白质的氨基酸含量虽仍高于足月儿母成熟乳，但 亦不存在统计学差异。
讨 论
讨 论
作者所测母乳中氨基酸含量与文献报道相接近[3，5]，尽管我们选择了文化背景 较接近、经济生活较为稳定、饮食差异不大的产妇，但个体的乳中氨基酸含量变异仍较大。可能由于个体间乳腺动脉血中摄取氨基酸速率、蛋白质转变的速率、乳腺中氨基酸合成和降 解的速率及乳汁分泌的速率等存在差异，从而解释了个体间的较大差异。
, 百拇医药
母初乳中第一丰富的游离氨基酸是牛磺酸，足月儿母初乳中达36μmol/dl，而牛奶中牛磺 酸只有lμmol/dl，虽然早产儿母初乳中牛磺酸明显低于足月儿母初乳，但亦达到28μmol /dl，为牛奶的28倍。随着泌乳期延长牛磺酸含量逐渐下降，足月儿母乳中牛磺酸含量下 降速度明显快于早产儿母乳中牛磺酸含量变化，因此早产儿母过渡乳和成熟乳中牛磺酸含量 已接近并略高于足月儿母乳。这是作者观察到的一个重要特点之一。已经知道个体合成牛磺 酸的半胱氨酸磺酸基脱羧酶(CSAD)活性较低，主要依靠摄取食物中的牛磺酸来满足机体的需 要。新生儿期，尤其是早产儿其体内 CSAD活性较成人更低，容易造成牛磺酸缺乏，而牛磺 酸是公认的条件必需氨基酸，具有广泛的生理功能，对婴儿生长发育、脑发育、正常视觉产 生和体内的脂质代谢都具有重要作用[6]。因此，母乳喂养对于新生儿，尤其是早 产 儿尤为重要，不但初乳要尽量哺喂新生儿，鉴于早产儿母乳中牛磺酸含量变化特点，早产儿 更应坚持母乳喂养。
谷氨酸/谷氨酰胺是母初乳中第二丰富的游离氨基酸，但随着泌乳期延长其含量迅速升 高，而成为过渡乳和成熟乳中含量最丰富的游离氨基酸，同时谷氨酸/谷氨酰胺也是母乳中 构成蛋白质的氨基酸中含量最丰富的氨基酸，虽然随着泌乳期延长其绝对含量有所下降，但 在总蛋白中的构成比则逐渐升高。这种特色提示了其对新生儿的最佳供应，因在新生儿期， 胃肠道发育尚不成熟，将肠道中的物质转化为能量供人体需要的能力差，而谷氨酸/谷氨酰 胺则成了肠道中的主要能源物质，参与三羧酸循环供能：当机体谷氨酰胺缺乏，可导致肠 粘膜萎缩。在严重创伤、感染和全胃肠外营养(TNP)等病理状态下，补充外源性谷氨酚胺可 维持和恢复肠粘膜的代谢、结构和功能；此外，谷氨酸还能提高锌的吸收，并被认为是与大 脑 兴奋性有关的一种重要的神经传递物质，在保持机体的氮平衡中亦起作用[7～9] 。虽然早产儿母乳中游离谷氨酸/谷氨酰胺含量略低于足月儿母乳，但在蛋白质中的含量却 高 于足月儿母乳。可以认为：早产儿母乳中的谷氨酸/谷氨酰胺含量符合于早产儿的需求。
, 百拇医药
通过观察，我们发现母乳中各个时期的游离氨基酸含量都比牛奶中高[10]，牛奶 中游离氨 基酸含量低，新生儿肠道中的消化酶发育不成熟，对蛋白质的消化能力有限，而母乳中含有 的丰富游离氨基酸能迅速进入血循环，被机体组织利用，对新生儿生长发育有重要意义。
母乳中构成蛋白质的氨基酸中亮氨酸和天冬氨酸的含量在不同哺乳期虽呈下降趋势，但 始终保持较高水平，且早产儿母乳中这两种氨基酸的含量始终高于足月儿，这是作者观察到 的另一重要特点。Denne等[11]对离体肌肉组织的研究中证实：亮氨酸可以促进 蛋白质的合成，延迟蛋白质的降解；新生儿的出生体重与其体内亮氨酸的量呈正相关，新 生儿每公斤体重的亮氨酸量明显高于成人，反映了新生儿生长发育期有较快的蛋白质重塑 性。由此我们可以认为早产儿母乳中较丰富的亮氨酸满足了早产儿比足月儿更为迫切的生长 需求。且早产儿母乳中构成蛋白质的其它氨基酸含量均比足月儿母乳高，其过渡乳和成熟乳中游离氨基酸总量亦比足月儿母乳高，用早产儿母乳喂养早产儿更合适，较足月儿母乳喂养 的早产儿恢复出生时体重较快，所有生长指标亦较好，故应尽量鼓励用早产儿的母乳喂养， 但早产儿成熟母乳中蛋白质含量对生长中的早产儿太低，钙、磷、钠、镁也嫌不足，故在早 产儿满月后必须适当补充一些强化人乳产品，以满足早产儿的需要。
, http://www.100md.com
注释：本课题获香港中文大学医药卫生科学应用研究奖金
参考文献
1 Lawrence PB. Brlast milk: Best sourse of nutrition for term and prete rm infants. Pediatr Clin North
Am, 1994, 41:925.
2 Janas LM, Picciano MF. Quantities of amino acids ingested by human milk-fed infants. J Pediatr,1986, 109:802.
3 Carlson SE. Human milk nonprotein nitrogen:occurrence and possible functions . In: Barness LA, eds.
, 百拇医药
Advances in Pediatrics. 1st ed. Chicago: Year book medica l publishers, INC, 1985,32:43.
4 Davis TA, Nguyen HV, Bravo RG, et al. Amino acid composition of human milk is not unique. J Nutr,1994, 124:1126.
5 刘家浩，李玉珍，叶永军.人乳游离氨基酸的含量及动态变化.营养学报，1992，14：
171 .
6 叶琳，石蕾，苏祖佑.牛磺酸与小儿营养.国外医学妇幼保健分册，1996，7：56.
7 Shenoy V, Roig JC, Kubilis P, et al. Characterization of glutaminase in the d eveloping rat small
, 百拇医药
intestine. J Nutr, 1996, 126:1121s.
8 Roig JC, Meetze WH, Auestad N, et al. Enteral glutamine supplementation for the very low birthweight
infant: plasma amino acid concentrations. J Nutr, 1996 , 126:1115s.
9 Wu G, Thompson JR. The effect of glutamine on protein turnover in chick skele tal muscle in vitro.
Biochem J, 1990, 265:593.
10 Ghadimi H, Pecora P. Free amino acids of different kind of milk. Am J Clin Nutr, 1963, 13:75.
11 Denne SC, Kalhan SC. Leucine metabolism in human newborns. Am J Physiol, 198 7,253:E608.
收稿：1999-01-10, 百拇医药
单位：200092 上海市第二医科大学附属新华医院(翁梅倩、张伟利)；上海市儿科研究 所(吴圣楣、戴定威)；中国科学院上海生化研究所(田小琳、夏其昌)
关键词：人乳；氨基酸；母乳喂养；婴儿
上海学报Shanghai Medical Journal1999年4月 第22卷 第4期 1999 【摘要】 目的 了解足月儿和早产儿母乳中游离和构成 蛋白质的氨基酸含量的动态变化。 方法 采用氨基酸自动分析仪对不同泌乳期的足月儿和早产儿母乳中游 离和构成蛋白质的氨基酸含量进行测定。 结果 牛磺酸、谷氨酸/谷氨酰胺是母初乳中最丰富的游离氨基酸，而谷 氨酸/谷氨酰胺、亮氨酸和天门冬氨酸是蛋白质中含量最丰富的氨基酸，提示了其对新生儿 的最佳供应。早产儿母乳中氨基酸谱变化与足月儿母乳有所不同，但更符合于早产儿的需求 。 结论 从氨基酸变化看，母乳为婴儿最佳匹配的食品，对于早产儿更应 强调和鼓励母乳喂养。
, 百拇医药
Comparison of dynamic changes of free amino acid and amino acid const itutional structural protein in full-term and preterm maternal milk WONG Meiqian, TIAN Xiaolin, WU Shenmei, et al. Xinhua hospital, Shanghai Institute for Pediatric Rese arch Shanghai Second Medical University, 2000092
【Abstract】 Objective To learn the dynamic cha nges in the concentrations of free amino acid and amino acid in the structural protein of full-term and preterm maternal milk so as to improve breast feedin g further. Methods Amino acids of free and structural protein of full-te rm and preterm human milk were quantified at different periods of lactat ion by automatic amino-acid analyser.Results In human milk's colostrum and milk, taurine and glutami ne glutamylamide were the most abundant free amino acids and glutamine/ghtamylam ides. Leucine and aspartic acid were the most abundant protein of structural ami no acids. It showed that human milk was the best food for infants, although the a m ino acid in preterm and full-term maternal milk was in different spectrum, ye t preterm maternal milk is more fit for preterm infants. Conclusion Basing on the above changes, breast feeding shoul d be emphasized and encouraged for poreterm infants.(Shanghai Med J, 1999, 22∶217-222)
, 百拇医药
【Key words】 Human milk Amino acids Breast feedin g Infants
母乳是足月或早产新生儿的最佳食物，母乳中的氨基酸成分十分适合婴 儿的需要，是婴儿合成蛋白质及其体内生物物质的重要来源[1]，国外报道的母 乳中游离 和构成蛋白质的氨基酸含量变异较大[2～4]，国内曾有足月儿母乳游离氨基 酸含量测定的报道[5]，但未测定构成蛋白质的氨基酸含量。至于早产儿母乳游离 或构成蛋白质的氨基酸含量 的报道则尚未见到。本研究为早产儿和足月儿母乳中游离和构成蛋白质的氨基酸含量的动 态变化观察，为进一步提倡母乳喂养，指导科学喂养婴儿和配方奶的合理化研制提供理论依 据。
对象和方法
一、乳母情况
在1997年5月至1997年12月间，选择上海市新华医院和杨浦区妇婴保健院分娩、身体健 康、足月或早产、经阴道正常分娩、奶量充足、经济生活较为稳定的产后3周内的乳母，产 后饮食变动不大，无特殊偏食习惯，授母乳的产妇共45例，均为第一胎，其中足月分娩的产 妇25例，年龄为(26.4±3.4)岁，孕龄(39.8±1.1)周，新生儿出生体重为(3 344.8±326.7) 克；未足月分娩的产妇20例，年龄为(27.7±4.6)岁，孕龄(34.2±2.0)周，新生儿出生 体重为(2 263.4±454.8)克。
, http://www.100md.com
二、乳样采集
收集每位产妇产后第3天的初乳和第10天的过渡乳及第21天成熟乳。初乳在院内时取，过渡 乳和成熟乳到乳母家中取。所有标本均在上午9时至10时在哺乳前采集。用手挤法采集乳汁 ，采集后立即入清洁的聚苯乙烯塑料试管中，置于-4°C冰箱保存，24小时内进行乳样 处理。共收集了足月分娩产妇的初乳25份、过渡乳22份、成熟乳20份，末足月分娩产妇的初 乳20份，过渡乳和成熟乳各16份。
三、测定方法
(一) 试剂 磺基水杨酸(分析纯)为北京化学试剂二厂产品。无水碳酸钠(分析纯) 为上海 宏光化工厂产品。System6300氨基酸自动分析仪所需试剂为Beckman公司配套产品。超纯水 由Millipore公司Milli-Q仪制备，经Q-PAK Kit过滤后使用。
(二)标本处理 采用 Wu报道的方法[6]将收集的乳样低温(-4°C)高速离心、 去脂、去蛋白后上清液用于测定游离氨基酸，蛋白质水解产物用于测定构成蛋白质的氨基酸 含量。乳汁中氨基酸的定量分析均在System 6300氨基酸自动分析仪上进行。
, 百拇医药
(三) 统计方法
使用Statistica for Windows软件5.0版本进行统计，两样本均数比较采用t检验，多 样本均数比较采用方差分析(ANOVA)。
结 果
一、足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成的动态变化
从表l可见足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成在不同泌乳期的变化。初乳中牛磺酸和谷 氨酰/谷氨酰胺是最丰富的游离氨基酸，其次为丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和苏氨 酸等。早产儿母初乳中除了牛磺酸的含量明显低于足月儿母乳外，其余各游离氨基酸含量与 足月儿母初乳之间没有明显差异。
谷氨酸/谷氨酰胺随泌乳期延长迅速升高，成为过渡乳和成熟乳中含量最丰富的游离氨基酸 。母成熟乳中谷氨酸/谷氨酰胺含量已达到初乳时的2倍。牛磺酸随着泌乳期延长其含量虽 逐渐下降，但仍为过渡乳和成熟乳中仅次于谷氨酸/谷氨酰胺的含量丰富的游离氨基酸，其 下降速度以哺乳第10天后更为明显，足月儿母成熟乳中牛磺酸的含量已下降至初乳时的一半 ，而早产儿母乳中牛磺酸含量下降速度较为缓慢，成熟乳中牛磺酸含量仍达到初乳时的83% ，因此早产儿母过渡乳和成熟乳中牛磺酸含量与足月儿母乳之间己无明显差异。
, 百拇医药
无论在足月儿或早产儿母乳中其丝氨酸、半胱氨酸和甘氨酸含量亦随着泌乳期延长而上升， 尤以丝氨酸含量升高较为明显，而丙氨酸、组氨酸和苏氨酸的含量在过渡乳中略有上升，在 成熟乳中则下降。其余各游离氨基酸含量随泌乳期延长逐渐下降，尤以精氨酸、脯氨酸、蛋 氨酸和赖氨酸的含量下降更为明显，与初乳相比，足月儿母成熟乳中这些氨基酸含量下降了 近71%～87%，早产儿母成熟乳中亦下降了近17%～74%，由于下降速度不及足月儿母乳， 故在过渡乳和成熟乳中早产儿母乳中的精氨酸、脯氨酸、蛋氨酸和赖氨酸含量明显高于足 月儿母乳。
早产儿母初乳中游离氨基酸总量略低于足月儿母初乳，而在过渡乳和成熟乳中则略高 于足月儿母乳，但两者不存在统计学差异。
二、足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量动态变化
从表2可见足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量在不同泌乳期的变化。不论母初 乳、过渡乳或成熟乳，其中谷氨酸/谷氨酰胺均是构成蛋白质的氨基酸中含量最丰富的氨基 酸， 其次为亮氨酸、天冬氨酸和脯氨酸，而含硫氨基 酸半胱氨酸和蛋氨酸则是构成蛋白质的氨 基酸中含量最少的氨基酸。早产儿母初乳蛋白质中除了组氨酸和蛋氨酸含量略低于足月儿母 初乳，其余各构成蛋白质的氨基酸含量均略高于足月儿母初乳，但除脯氨酸外，两者之间经 统计学处理无统计学差异。
, http://www.100md.com
随着泌乳期延长，母乳中蛋白质总量不断下降，构成蛋白质的氨基酸含量亦逐渐下降，足月 儿母初乳氨基酸含量较成熟乳中平均高1.57倍，早产儿则为1.51倍。以初乳至过渡乳时氨 基酸含量下降更为明显，而过渡乳和成熟乳中构成蛋白质的氨基酸含量变化不大。谷氨酸/ 谷氨酰胺亦随泌乳
表1 足月儿和早产儿母乳中游离氨基酸组成 在不同泌乳期的变化(μmol/dl) 氨基酸
初乳
过渡乳
成熟乳
F值
P值
Tau
35.60±12.26*
, http://www.100md.com
30.81±10.49
17.65±9.64
13.518
0.000
27.59±8.61*
30.60±11.81
23.00±8.40
2.061
0.160
Orn
1.03±0.46
0.91±0.35
, http://www.100md.com
0.72±0.18
3.146
0.058
1.03±0.57
0.72±0.29
0.63±0.40
0.630
0.553
Ala
8.30±3.48
15.18±5.23
13.27±5.57
, 百拇医药
23.419
0.000
6.75±3.49
14.17±5.37
12.66±6.54
3.916
0.049
Asp
5.69±2.26
4.87±2.40
4.28±2.90
2.730
, http://www.100md.com
0.079
4.78±2.77
5.70±2.51
4.46±2.52
0.886
0.432
Cys
0.92±0.49
0.98±0.59
1.00±0.66*
1.150
0.330
, 百拇医药
0.80±0.49
1.09±0.40
1.54±0.63*
5.597
0.016
Glx
29.85±16.62
61.11±21.42
62.54±24.59
38.845
0.000
26.16±17.65
, 百拇医药
53.41±25.32
51.80±23.53
5.882
0.017
Gly
3.62±1.68
4.66±1.83
4.73±2.84
1.857
0.173
3.99±2.70
5.23±2.42
, http://www.100md.com
4.96±2.82
3.186
0.007
Ser
7.20±4.92
14.53±6.41*
14.69±7.83
10.761
0.000
7.02±4.86
9.92±4.94*
, 百拇医药 11.89±6.54
1.713
0.208
Tyr
1.70±0.92
1.09±0.36
0.77±0.35*
10.354
0.000
2.08±1.35
1.35±0.79
1.23±0.80*
, 百拇医药
4.804
0.021
Arg
3.81±2.02
1.19±0.69*
0.50±0.31
12.854
0.003
4.54±3.13
2.79±1.92*
1.05±0.77
4.032
, 百拇医药
0.052
Pro
3.43±2.07
1.27±0.62*
0.95±0.44*
24.322
0.000
3.46±1.88
2.73±1.09*
2.61±1.36*
4.271
, 百拇医药
0.040
His
1.70±0.99
2.23±0.59
1.96±0.59
9.615
0.000
1.56±0.77
2.43±0.96
2.32±0.91
3.984
0.037
, http://www.100md.com
Leu
2.74±1.51
2.21±0.74
1.90±0.45
3.193
0.055
3.07±1.11
2.28±0.96
2.15±1.08
0.935
0.416
Met
, 百拇医药
3.41±1.94
1.48±0.61*
0.98±0.76*
20.91
0.000
3.53±1.76
2.36±1.14*
2.23±1.59*
1.651
0.223
Phe
, 百拇医药
1.36±0.60
1.36±0.50
1.16±0.27
1.339
0.276
1.36±0.86
1.31±0.51
1.32±0.73
0.342
0.715
Thr
4.24±2.79
, 百拇医药
5.22±1.73
3.21±1.83
5.407
0.009
3.19±2.02
5.93±2.72
4.37±2.86
1.772
0.202
Val
3.22±1.92
3.30±1.21
, 百拇医药
3.02±1.09
0.245
0.784
4.01±1.96
3.74±2.08
3.27±1.79
0.142
0.869
Lys
8.27±5.38
2.46±1.23*
1.50±0.83
, 百拇医药
30.288
0.000
7.46±4.31
3.64±1.68*
1.91±0.80
6.428
0.013
总计
114.85±48.74
137.56±44.93
117.44±49.67
7.326
, http://www.100md.com
0.002
107.81±53.80
147.40±56.80
131.50±59.88
1.712
0.212
注：(1) 表中上列数据代表足月儿母乳中游离氨基酸含量，下列数据代表早产 儿母乳中游离氨基酸含量；(2) 表中足月儿母初乳为23份；(3) Glx代表谷氨酸/谷氨酰胺； (4) *表示P<0.05表2 足月儿和早产儿母乳中构成蛋白质的氨 基酸含量在不同泌乳期的变化(μmol/dl) 氨基酸
初乳
过渡乳
, 百拇医药
成熟乳
F值
P值
Ala
80.87±23.09
53.35±10.65*
50.63±8.36
31.233
0.000
90.47±19.28
62.98±13.89*
57.90±16.39
, 百拇医药
15.68
0.000
Asp
122.38±29.14
83.80±17.75*
80.71±14.96
31.389
0.000
127.71±23.87
96.28±19.74*
89.29±17.98
, 百拇医药
12.599
0.000
Cys
16.22±5.75*
10.31±2.84*
11.44±2.43
17.99
0.000
20.77±3.95*
14.18±3.64*
12.79±3.89
, 百拇医药
22.564
0.000
Glx
166.32±27.54
135.86±33.85
156.86±99.13
1.802
0.180
177.36±30.96
152.01±33.69
141.92±20.61
6.652
, 百拇医药
0.006
Gly
69.33±22.70
38.39±8.76*
36.20±8.07*
53.63
0.000
78.82±21.44
48.65±12.38*
44.29±14.74*
16.637
, http://www.100md.com
0.000
Ser
85.85±27.93
52.73±13.53*
53.08±9.72
34.887
0.000
99.44±27.78
65.39±14.19*
60.77±15.84
15.641
, 百拇医药
0.000
Tyr
46.25±11.16
33.58±8.20*
33.74±5.67
21.229
0.000
52.42±10.88
40.00±7.12*
37.10±7.46
13.243
, 百拇医药
0.000
Arg
43.82±15.33
24.94±9.18*
26.81±4.46*
26.264
0.000
51.63±10.32
35.10±7.05*
34.42±9.62*
18.231
, 百拇医药
0.000
Pro
99.03±24.96*
95.52±18.27
99.89±17.26
0.526
0.596
117.13±21.87*
105.64±26.73
99.97±14.17
3.996
, 百拇医药
0.035
His
25.72±5.51
18.90±4.75
18.34±3.15
17.129
0.000
24.97±4.72
21.06±4.65
21.64±9.40
1.312
0.291
, 百拇医药
Leu
122.22±27.17
92.15±20.45
93.80±16.56
15.140
0.000
126.90±24.19
103.73±22.08
97.93±16.60
8.483
0.002
Met
, 百拇医药
16.44±3.42*
9.93±4.45
7.31±3.00
36.566
0.000
11.89±5.36*
9.50±3.55
8.05±1.82
3.827
0.041
Phe
, http://www.100md.com 45.20±11.73
29.87±6.45*
28.11±5.39
33.628
0.000
47.48±10.08
34.71±7.10*
32.19±8.59
12.130
0.000
Thr
, http://www.100md.com 75.10±22.48
45.82±10.96*
45.38±8.57
50.390
0.000
81.70±23.64
54.19±12.23*
50.60±12.80
14.784
0.000
Ile
, 百拇医药
53.24±10.54
45.40±12.23
47.40±13.39
4.205
0.020
53.11±10.01
51.03±11.54
48.73±6.87
0.983
0.392
Val
80.16±21.99*
, http://www.100md.com
59.30±14.09*
58.93±16.23
1.000
0.379
97.02±17.96*
72.85±16.86*
67.21±12.15
15.690
0.000
Lys
69.64±15.38
, http://www.100md.com
54.84±11.69
52.00±9.16
4.241
0.020
69.69±13.34
60.04±12.17
52.15±14.81
4.899
0.018
总计
1291.38±382.42
853.88±190.72*
, 百拇医药
879.46±153.21
14.355
0.000
1329.21±257.50
1026.48±213.21*
958.39±179.97
11.847
0.000
注：(1) 表中上列数据代表足月儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量，下列数据 代表早产儿母乳中构成蛋白质的氨基酸含量；
(2) Glx代表谷氨酸/谷氨酰胺；(3) *表示P<0.05
, http://www.100md.com
期延长而下降，但其在足月儿母乳总蛋白中的构成比从初乳时的12.9 %上升至过渡乳和成熟乳时的15.9%和17.8%。早产儿母乳中谷氨酸/谷氨酰胺含量比足 月儿母乳中高，其在初乳总蛋白中的构成比亦高于足月儿母初乳，达到13.4%。早产儿母过 渡乳中丙氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、丝氨酸、酪氨酸、精氨酸、脯氨酸、苏氨 酸和缬氨酸含量明显高于足月儿母过渡乳，经统计学处理两者之间有差异显著性。早产儿母 成 熟乳中除了甘氨酸和精氨酸，其余各构成蛋白质的氨基酸含量虽仍高于足月儿母成熟乳，但 亦不存在统计学差异。
讨 论
讨 论
作者所测母乳中氨基酸含量与文献报道相接近[3，5]，尽管我们选择了文化背景 较接近、经济生活较为稳定、饮食差异不大的产妇，但个体的乳中氨基酸含量变异仍较大。可能由于个体间乳腺动脉血中摄取氨基酸速率、蛋白质转变的速率、乳腺中氨基酸合成和降 解的速率及乳汁分泌的速率等存在差异，从而解释了个体间的较大差异。
, 百拇医药
母初乳中第一丰富的游离氨基酸是牛磺酸，足月儿母初乳中达36μmol/dl，而牛奶中牛磺 酸只有lμmol/dl，虽然早产儿母初乳中牛磺酸明显低于足月儿母初乳，但亦达到28μmol /dl，为牛奶的28倍。随着泌乳期延长牛磺酸含量逐渐下降，足月儿母乳中牛磺酸含量下 降速度明显快于早产儿母乳中牛磺酸含量变化，因此早产儿母过渡乳和成熟乳中牛磺酸含量 已接近并略高于足月儿母乳。这是作者观察到的一个重要特点之一。已经知道个体合成牛磺 酸的半胱氨酸磺酸基脱羧酶(CSAD)活性较低，主要依靠摄取食物中的牛磺酸来满足机体的需 要。新生儿期，尤其是早产儿其体内 CSAD活性较成人更低，容易造成牛磺酸缺乏，而牛磺 酸是公认的条件必需氨基酸，具有广泛的生理功能，对婴儿生长发育、脑发育、正常视觉产 生和体内的脂质代谢都具有重要作用[6]。因此，母乳喂养对于新生儿，尤其是早 产 儿尤为重要，不但初乳要尽量哺喂新生儿，鉴于早产儿母乳中牛磺酸含量变化特点，早产儿 更应坚持母乳喂养。
谷氨酸/谷氨酰胺是母初乳中第二丰富的游离氨基酸，但随着泌乳期延长其含量迅速升 高，而成为过渡乳和成熟乳中含量最丰富的游离氨基酸，同时谷氨酸/谷氨酰胺也是母乳中 构成蛋白质的氨基酸中含量最丰富的氨基酸，虽然随着泌乳期延长其绝对含量有所下降，但 在总蛋白中的构成比则逐渐升高。这种特色提示了其对新生儿的最佳供应，因在新生儿期， 胃肠道发育尚不成熟，将肠道中的物质转化为能量供人体需要的能力差，而谷氨酸/谷氨酰 胺则成了肠道中的主要能源物质，参与三羧酸循环供能：当机体谷氨酰胺缺乏，可导致肠 粘膜萎缩。在严重创伤、感染和全胃肠外营养(TNP)等病理状态下，补充外源性谷氨酚胺可 维持和恢复肠粘膜的代谢、结构和功能；此外，谷氨酸还能提高锌的吸收，并被认为是与大 脑 兴奋性有关的一种重要的神经传递物质，在保持机体的氮平衡中亦起作用[7～9] 。虽然早产儿母乳中游离谷氨酸/谷氨酰胺含量略低于足月儿母乳，但在蛋白质中的含量却 高 于足月儿母乳。可以认为：早产儿母乳中的谷氨酸/谷氨酰胺含量符合于早产儿的需求。
, 百拇医药
通过观察，我们发现母乳中各个时期的游离氨基酸含量都比牛奶中高[10]，牛奶 中游离氨 基酸含量低，新生儿肠道中的消化酶发育不成熟，对蛋白质的消化能力有限，而母乳中含有 的丰富游离氨基酸能迅速进入血循环，被机体组织利用，对新生儿生长发育有重要意义。
母乳中构成蛋白质的氨基酸中亮氨酸和天冬氨酸的含量在不同哺乳期虽呈下降趋势，但 始终保持较高水平，且早产儿母乳中这两种氨基酸的含量始终高于足月儿，这是作者观察到 的另一重要特点。Denne等[11]对离体肌肉组织的研究中证实：亮氨酸可以促进 蛋白质的合成，延迟蛋白质的降解；新生儿的出生体重与其体内亮氨酸的量呈正相关，新 生儿每公斤体重的亮氨酸量明显高于成人，反映了新生儿生长发育期有较快的蛋白质重塑 性。由此我们可以认为早产儿母乳中较丰富的亮氨酸满足了早产儿比足月儿更为迫切的生长 需求。且早产儿母乳中构成蛋白质的其它氨基酸含量均比足月儿母乳高，其过渡乳和成熟乳中游离氨基酸总量亦比足月儿母乳高，用早产儿母乳喂养早产儿更合适，较足月儿母乳喂养 的早产儿恢复出生时体重较快，所有生长指标亦较好，故应尽量鼓励用早产儿的母乳喂养， 但早产儿成熟母乳中蛋白质含量对生长中的早产儿太低，钙、磷、钠、镁也嫌不足，故在早 产儿满月后必须适当补充一些强化人乳产品，以满足早产儿的需要。
, http://www.100md.com
注释：本课题获香港中文大学医药卫生科学应用研究奖金
参考文献
1 Lawrence PB. Brlast milk: Best sourse of nutrition for term and prete rm infants. Pediatr Clin North
Am, 1994, 41:925.
2 Janas LM, Picciano MF. Quantities of amino acids ingested by human milk-fed infants. J Pediatr,1986, 109:802.
3 Carlson SE. Human milk nonprotein nitrogen:occurrence and possible functions . In: Barness LA, eds.
, 百拇医药
Advances in Pediatrics. 1st ed. Chicago: Year book medica l publishers, INC, 1985,32:43.
4 Davis TA, Nguyen HV, Bravo RG, et al. Amino acid composition of human milk is not unique. J Nutr,1994, 124:1126.
5 刘家浩，李玉珍，叶永军.人乳游离氨基酸的含量及动态变化.营养学报，1992，14：
171 .
6 叶琳，石蕾，苏祖佑.牛磺酸与小儿营养.国外医学妇幼保健分册，1996，7：56.
7 Shenoy V, Roig JC, Kubilis P, et al. Characterization of glutaminase in the d eveloping rat small
, 百拇医药
intestine. J Nutr, 1996, 126:1121s.
8 Roig JC, Meetze WH, Auestad N, et al. Enteral glutamine supplementation for the very low birthweight
infant: plasma amino acid concentrations. J Nutr, 1996 , 126:1115s.
9 Wu G, Thompson JR. The effect of glutamine on protein turnover in chick skele tal muscle in vitro.
Biochem J, 1990, 265:593.
10 Ghadimi H, Pecora P. Free amino acids of different kind of milk. Am J Clin Nutr, 1963, 13:75.
11 Denne SC, Kalhan SC. Leucine metabolism in human newborns. Am J Physiol, 198 7,253:E608.
收稿：1999-01-10, 百拇医药