创伤小鼠反抑制T细胞的变化
作者：梁华平 王正国 朱佩芳 罗 艳 耿 波 徐 祥
单位：400042 重庆，第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所
关键词：创伤和损伤；T淋巴细胞
中华创伤杂志990407 【摘要】 目的 研究创伤对反抑制细胞(Tcs)的影响。方法 采用小鼠截肢伤模型，利用长柔毛野豌豆凝集素(VVL)分离获取Tcs细胞，以直接免疫荧光法检测Tcs细胞数目；于正常T淋转、白介素2(IL-2)、IL-2受体(IL-2R)检测系统中测定Tcs细胞的反抑制活性变化；并作光镜、透射电镜观察。结果 创伤小鼠脾脏、胸腺细胞中Tcs细胞数目下降，但肠系膜淋巴细胞中Tcs细胞数目无明显变化；创伤后Tcs细胞的反抑制活性于伤后1天即有降低，伤后4～10天降低更甚，伤后14天尚未完全恢复正常；创伤后Tcs细胞在光镜未见明显异常，透射电镜下可见胞浆空泡形成，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核内假包涵体形成。结论 创伤可引起Tcs细胞数目、功能及形态结构发生不同程度的改变。
, 百拇医药
Changes of Contrasuppressor T Cells in Traumatized Mice
LIANG Huaping, WANG Zhengguo, ZHU Peifang, et al.
Research Institute of Surgery, 3rd Military Medical University, Chongqing 400042
【Abstract】 Objective Effect of trauma on contrasuppressor T cells (Tcs) was studied. Methods A murine amputation injury model was used. Tcs were separated using the vicia villosa lective (VVL). Tcs number was measured with direct immunofluorescence method. Contrasuppressive activity of Tcs was determined in the measuring system of normal T lymphocyte transformation. Interleukin-2 (IL-2), IL-2 receptor (IL-2R), and morphological structure of Tcs were observed under light microscope and penetrating electron microscope. Results The number of Tcs from the spleen and thymocyte was decreased after trauma while no significant change was noticed in mesenteric lymph nodes. Contrasuppressive activity of Tcs was decreased on 1st day after trauma and became more obvious on day 4 to 10. This change did not yet return to normal on day 14. The morphological structure of Tcs was not seen abnormal under light microscope, but under penetrating electron microscope, bleb formation was seen in Tcs cytoplasm, pseudounclusion in nucleus, and rarely cytolysis with naked nucleus were observed on day 14 posttrauma. Conclusions Trauma may result in changes of Tcs in number, functions and morphological structure at various degrees.
, 百拇医药
【Key words】 Wounds and injuries T lymphocytes
严重创伤可致机体免疫功能紊乱，其中T细胞介导的细胞免疫功能受抑现象表现得尤为突出，且这一变化同伤后感染的发生密切相关[1]。因此，有关创伤与T细胞的研究正成为创伤免疫领域中的研究热点。目前有关创伤后辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)的变化已有大量报道[1-3]，但创伤后反抑制T细胞(contrasuppressor T cells, Tcs)的变化情况如何尚不清楚。笔者利用小鼠截肢伤模型对此进行了探讨。
材料与方法
一、 动物模型及分组
Balb/c小鼠(本校动物所提供)，雌雄各半，18～22g，6～8周龄。随机分为正常对照、伤后1，4，7，10，14天共6组，各组8只。按文献[3]的方法采用双后肢膝关节离断术制备小鼠截肢伤模型。各组动物于相应时间处死，制备脾脏、胸腺及肠系膜淋巴结细胞悬液待测。
, 百拇医药
二、 Tcs细胞数目测定
按文献[4]的方法以直接免疫荧光法进行，即在脾脏、胸腺及肠系膜淋巴细胞悬液(5×106/ml)中，加入终浓度为0.1 mg/ml的VVL-FITC(Sigma公司)，冰浴 30分钟，洗涤细胞后调至原浓度，滴片，于荧光显微镜下计数200个细胞，计算阳性细胞百分率(%)。
三、 Tcs细胞、Ts细胞的分离及Tcs细胞反抑制活性测定
分别参照文献[5，6]的方法以黏附盘化法分离获取Tcs细胞、Ts细胞，以直接免疫荧光法鉴定Tcs细胞纯度>92%，以间接免疫荧光法鉴定Ts细胞纯度>95%，台盼蓝染色证明两类细胞存活率均>95%。于正常脾细胞的T淋转、IL-2诱生IL-2R表达的细胞培养系统中，同时加入Tcs和Ts细胞(均占细胞总数的10%)，并设只添加Ts细胞和不添加Tcs、Ts细胞组作对照，根据Ts细胞对各指标的抑制活性及Tcs细胞对Ts细胞抑制活性的拮抗作用分别计算Ts细胞抑制率(%)和Tcs细胞反抑制率(%)。
, 百拇医药
四、 Tcs细胞形态结构观察
分离的Tcs细胞按常规处理，作光镜、透射电镜观察。
五、 数据处理
结果以平均值±标准差(
±s)表示，用t检验进行统计学分析。
结 果
一、 各组Tcs细胞数目的变化
和正常对照组相比，创伤小鼠脾细胞中Tcs细胞数目于伤后4～7天明显降低；胸腺细胞中Tcs细胞数目以伤后4～10天降低最为明显；肠系膜淋巴结细胞中Tcs细胞数目的变化无统计学差异(表1)。
表1 各组Tcs细胞数目的变化(±s) 组别
, http://www.100md.com
鼠数
Tcs细胞数目的变化(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
8.1±1.2
9.4±1.6
8.9±1.4
伤后1天
8
9.0±1.8
, 百拇医药
9.0±2.0
9.2±2.0
伤后4天
8
6.1±1.0**
6.2±0.9**
7.8±0.9
伤后7天
8
6.9±1.3*
6.1±0.9**
, 百拇医药
8.7±1.3
伤后10天
8
7.7±1.3
6.9±1.1*
8.5±1.3
伤后14天
8
8.6±0.9
8.8±1.4
8.8±1.7
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01 二、 各组Tcs细胞反抑制活性的变化
, 百拇医药
和正常对照组相比 ，创伤小鼠Tcs细胞反抑制活性于伤后1天即有降低，伤后4～10天降低更甚，伤后14天尚未完全恢复正常(表2～4)。
表2 各组不同来源Tcs细胞在T淋转检测系统中反抑制活性的变化(±s) 组别
鼠数
不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
, http://www.100md.com
96.1±10.2
84.7±11.3
88.4±6.3
伤后1天
8
50.1±8.6*
50.1±7.7*
38.5±6.6*
伤后4天
8
19.3±5.5**
, http://www.100md.com
11.6±3.2**
0.0±2.4**
伤后7天
8
27.1±7.8**
11.6±2.6**
7.7±1.6**
伤后10天
8
27.1±6.4**
19.3±3.1*
, 百拇医药
11.6±2.2**
伤后14天
8
69.2±10.4*
65.4±5.4
61.5±5.2*
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01表3 各组不同来源Tcs细胞在IL-2检测系统中反抑制活性的变化(±s) 组别
鼠数
, 百拇医药 不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
92.1±9.7
100.0±11.6
84.0±7.4
伤后1天
8
68.0±8.4
72.0±9.5*
, 百拇医药
63.9±6.1
伤后4天
8
23.9±4.7**
15.8±4.0**
15.8±3.7**
伤后7天
8
19.9±3.9**
28.0±6.1**
19.9±3.0**
, 百拇医药
伤后10天
8
7.9±1.8**
3.9±1.0**
7.9±1.4**
伤后14天
8
88.0±9.2
72.0±6.8*
63.9±6.7
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01表4 各组不同来源Tcs细胞在IL-2R检测系统中反抑制活性的变化(±s) 组别
, http://www.100md.com
鼠数
不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
92.5±10.6
85.6±7.5
85.0±7.2
伤后1天
8
48.2±6.7*
, http://www.100md.com
40.9±5.5*
44.7±3.5*
伤后4天
8
24.4±4.0**
22.2±3.8**
31.9±3.8*
伤后7天
8
20.9±5.3**
16.3±3.1**
, 百拇医药
4.3±1.0**
伤后10天
8
26.0±4.7**
12.2±2.7**
20.7±4.3**
伤后14天
8
26.6±5.9**
29.9±3.0**
30.7±4.2*
, 百拇医药
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01
三、 Tcs细胞形态结构观察
光镜下观察，创伤后不同来源的Tcs细胞未见明显异常；透射电镜下发现，创伤后Tcs细胞可见胞浆空泡形成，以伤后4～10天的变化较为明显，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核内假包涵体形成。
讨 论
Tcs细胞是近十几年来认识并逐渐肯定的新T细胞亚群，由于其功能与Ts细胞相反，故命名为反抑制T细胞[8]。它可分泌反抑制因子作用于Th细胞，使之不能接受Ts细胞的抑制信号。故Tcs和Th-Ts细胞共同平衡着机体的免疫网络，即“辅助-抑制-反抑制”调节网络。如果T细胞亚群的任一成分发生改变，就可破坏T细胞的“辅助-抑制-反抑制”调节网络，最终导致T细胞功能紊乱。
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严重创伤可致T细胞的免疫功能受抑。其主要表现[1，3]：T细胞对有丝分裂原如植物血凝素(PHA)和刀豆素A(ConA)刺激的增殖能力下降，IL-2生成减少，细胞膜IL-2R表达受抑，此外还伴有干扰素γ(IFN-γ)合成不足、白介素12(IL-12)生成减少、转铁蛋白受体(IFR)表达低下等。有学者认为，创伤后T细胞数目下降、Th数目减少、Ts数目增多伴活性增强、Th/Ts比例倒置是导致创伤后T细胞功能受抑重要原因[2，3]。近来，Decker等[7]发现，手术应激可致Th1/Th2细胞平衡向Th2方向移动，并认为这一变化是导致手术患者T细胞介导的细胞免疫功能受抑的原因之一。但上述研究均只是从T细胞的“辅助-抑制“调节网络变化的角度揭示创伤后T细胞功能受抑的发生机制，并未从反抑制调节的角度去探索。Kupper等[9]观察到，烧伤晚期小鼠免疫功能恢复的同时，伴随Tcs增多，推测Tcs细胞在烧伤后小鼠免疫功能重建中可能起一定作用，但缺乏直接的证据。Kobayashi等[5]发现，甘草甜素可通过作用于Tcs细胞进而阻止烧伤小鼠Ts细胞的活性增高，这一结果间接说明了Tcs细胞可能参与了烧伤后的免疫抑制反应。但仍未直接回答创伤(或烧伤)后Tcs细胞是否发生改变这一问题。
, 百拇医药
笔者发现，截肢伤小鼠脾脏、胸腺细胞中Tcs细胞数目下降，但肠系膜淋巴结细胞中Tcs细胞数目无明显变化。此变化差异可能与来源于不同淋巴器官中的淋巴细胞对创伤反应的敏感性不同有关[3]。和Tcs细胞数目相比，Tcs细胞活性的变化更为明显，3种脏器淋巴细胞中Tcs细胞在正常T淋转、IL-2、IL-2R检测系统中的反抑制活性于伤后均不同程度降低，伤后14天尚未完全恢复正常。此外，笔者对Tcs细胞形态结构进行了观察，发现创伤后Tcs细胞在光镜下未见明显异常，但在透射电镜下，可见胞浆空泡形成，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核假包涵体形成。提示创伤可引起Tcs细胞数目、功能及形态结构发生不同程度的改变。结合以往文献分析，笔者推测创伤体内可能存在着T细胞的辅助-抑制-反抑制免疫调节网络失衡。笔者在另一实验中，曾观察到创伤后Tcs细胞的变化同多项T细胞功能的降低密切相关，提示创伤后Tcs细胞的改变可能参与了T细胞功能受抑的调节过程。有关创伤后Tcs细胞变化的详细机制需深入研究。
*本课题为国家自然科学基金资助项目(No.39400136)
, http://www.100md.com
参考文献
1 Harris BH, Gelfand JA. The immune response to trauma. Semin Pediatr Surg, 1995, 4∶77-81.
2 O'Sullivan ST, Lederer JA, Horgan AF, et al. Major injury leads to predominance of the T helper-2 lymphocyte phenotype and diminished interleukin-12 production associated with decreased resistance to infection. Ann Surg, 1995, 222∶482-487.
3 Zapata-Sirvent R, Hansbrough JF, Bartle EJ. Prevention of posttraumatic alterations in lymphocyte subpopulations in mice by immunomodulating drugs. Arch Surg, 1986, 121∶116-123.
, 百拇医药
4 Ptak W, bereta M, Marcinkiewicz J, et al. Production of antigen-special contrasuppressor cells and factor, and their use in augmentation of cell-mediated immunity. J Immunol, 1984, 133∶623-629.
5 Kobayashi M, Schmitt DA, Utsunomiya T, et al. Inhibition of burn-associated suppressor cell generation by glycyrrhizin through the induction of contrasuppressor T cells. Immunol Cell Biol, 1993, 71∶181-188.
6 Mage MG, Mathieson B, Sharrow S, et al. Preparative non-lytic separation of Lyt2+ and Lyt- T lymphocytes. Eur J Immunol, 1981, 11∶17-21.
, 百拇医药
7 Decker D, Schondorf M, Bidlingmaier F, et al. Surgical stress induces a shift in the type-1/type-2 T-helper cell balance, suggesting down-regulation of cell-mediated and up-regulation of antibody-mediated immunity commensurate to the trauma. Surgery, 1996, 119∶316-403.
8 Ptak W, Bryniarski K, Szczepanik M, et al. Regulation of contact sensitivity reaction: contrasuppressor T cells and contrasuppressor factor downregulate efferent T suppressor cells. Cell Immunol, 1992, 144∶95-101.
9 Kupper TS, Green DR. Immunoregulation after thermal injury. J Immunol, 1984, 135∶3047-3055.
收稿日期：1997-10-10
修稿日期：1998-04-30, http://www.100md.com
单位：400042 重庆，第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所
关键词：创伤和损伤；T淋巴细胞
中华创伤杂志990407 【摘要】 目的 研究创伤对反抑制细胞(Tcs)的影响。方法 采用小鼠截肢伤模型，利用长柔毛野豌豆凝集素(VVL)分离获取Tcs细胞，以直接免疫荧光法检测Tcs细胞数目；于正常T淋转、白介素2(IL-2)、IL-2受体(IL-2R)检测系统中测定Tcs细胞的反抑制活性变化；并作光镜、透射电镜观察。结果 创伤小鼠脾脏、胸腺细胞中Tcs细胞数目下降，但肠系膜淋巴细胞中Tcs细胞数目无明显变化；创伤后Tcs细胞的反抑制活性于伤后1天即有降低，伤后4～10天降低更甚，伤后14天尚未完全恢复正常；创伤后Tcs细胞在光镜未见明显异常，透射电镜下可见胞浆空泡形成，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核内假包涵体形成。结论 创伤可引起Tcs细胞数目、功能及形态结构发生不同程度的改变。
, 百拇医药
Changes of Contrasuppressor T Cells in Traumatized Mice
LIANG Huaping, WANG Zhengguo, ZHU Peifang, et al.
Research Institute of Surgery, 3rd Military Medical University, Chongqing 400042
【Abstract】 Objective Effect of trauma on contrasuppressor T cells (Tcs) was studied. Methods A murine amputation injury model was used. Tcs were separated using the vicia villosa lective (VVL). Tcs number was measured with direct immunofluorescence method. Contrasuppressive activity of Tcs was determined in the measuring system of normal T lymphocyte transformation. Interleukin-2 (IL-2), IL-2 receptor (IL-2R), and morphological structure of Tcs were observed under light microscope and penetrating electron microscope. Results The number of Tcs from the spleen and thymocyte was decreased after trauma while no significant change was noticed in mesenteric lymph nodes. Contrasuppressive activity of Tcs was decreased on 1st day after trauma and became more obvious on day 4 to 10. This change did not yet return to normal on day 14. The morphological structure of Tcs was not seen abnormal under light microscope, but under penetrating electron microscope, bleb formation was seen in Tcs cytoplasm, pseudounclusion in nucleus, and rarely cytolysis with naked nucleus were observed on day 14 posttrauma. Conclusions Trauma may result in changes of Tcs in number, functions and morphological structure at various degrees.
, 百拇医药
【Key words】 Wounds and injuries T lymphocytes
严重创伤可致机体免疫功能紊乱，其中T细胞介导的细胞免疫功能受抑现象表现得尤为突出，且这一变化同伤后感染的发生密切相关[1]。因此，有关创伤与T细胞的研究正成为创伤免疫领域中的研究热点。目前有关创伤后辅助性T细胞(Th)、抑制性T细胞(Ts)的变化已有大量报道[1-3]，但创伤后反抑制T细胞(contrasuppressor T cells, Tcs)的变化情况如何尚不清楚。笔者利用小鼠截肢伤模型对此进行了探讨。
材料与方法
一、 动物模型及分组
Balb/c小鼠(本校动物所提供)，雌雄各半，18～22g，6～8周龄。随机分为正常对照、伤后1，4，7，10，14天共6组，各组8只。按文献[3]的方法采用双后肢膝关节离断术制备小鼠截肢伤模型。各组动物于相应时间处死，制备脾脏、胸腺及肠系膜淋巴结细胞悬液待测。
, 百拇医药
二、 Tcs细胞数目测定
按文献[4]的方法以直接免疫荧光法进行，即在脾脏、胸腺及肠系膜淋巴细胞悬液(5×106/ml)中，加入终浓度为0.1 mg/ml的VVL-FITC(Sigma公司)，冰浴 30分钟，洗涤细胞后调至原浓度，滴片，于荧光显微镜下计数200个细胞，计算阳性细胞百分率(%)。
三、 Tcs细胞、Ts细胞的分离及Tcs细胞反抑制活性测定
分别参照文献[5，6]的方法以黏附盘化法分离获取Tcs细胞、Ts细胞，以直接免疫荧光法鉴定Tcs细胞纯度>92%，以间接免疫荧光法鉴定Ts细胞纯度>95%，台盼蓝染色证明两类细胞存活率均>95%。于正常脾细胞的T淋转、IL-2诱生IL-2R表达的细胞培养系统中，同时加入Tcs和Ts细胞(均占细胞总数的10%)，并设只添加Ts细胞和不添加Tcs、Ts细胞组作对照，根据Ts细胞对各指标的抑制活性及Tcs细胞对Ts细胞抑制活性的拮抗作用分别计算Ts细胞抑制率(%)和Tcs细胞反抑制率(%)。
, 百拇医药
四、 Tcs细胞形态结构观察
分离的Tcs细胞按常规处理，作光镜、透射电镜观察。
五、 数据处理
结果以平均值±标准差(
±s)表示，用t检验进行统计学分析。结 果
一、 各组Tcs细胞数目的变化
和正常对照组相比，创伤小鼠脾细胞中Tcs细胞数目于伤后4～7天明显降低；胸腺细胞中Tcs细胞数目以伤后4～10天降低最为明显；肠系膜淋巴结细胞中Tcs细胞数目的变化无统计学差异(表1)。
表1 各组Tcs细胞数目的变化(
±s) 组别, http://www.100md.com
鼠数
Tcs细胞数目的变化(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
8.1±1.2
9.4±1.6
8.9±1.4
伤后1天
8
9.0±1.8
, 百拇医药
9.0±2.0
9.2±2.0
伤后4天
8
6.1±1.0**
6.2±0.9**
7.8±0.9
伤后7天
8
6.9±1.3*
6.1±0.9**
, 百拇医药
8.7±1.3
伤后10天
8
7.7±1.3
6.9±1.1*
8.5±1.3
伤后14天
8
8.6±0.9
8.8±1.4
8.8±1.7
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01 二、 各组Tcs细胞反抑制活性的变化
, 百拇医药
和正常对照组相比 ，创伤小鼠Tcs细胞反抑制活性于伤后1天即有降低，伤后4～10天降低更甚，伤后14天尚未完全恢复正常(表2～4)。
表2 各组不同来源Tcs细胞在T淋转检测系统中反抑制活性的变化(
±s) 组别鼠数
不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
, http://www.100md.com
96.1±10.2
84.7±11.3
88.4±6.3
伤后1天
8
50.1±8.6*
50.1±7.7*
38.5±6.6*
伤后4天
8
19.3±5.5**
, http://www.100md.com
11.6±3.2**
0.0±2.4**
伤后7天
8
27.1±7.8**
11.6±2.6**
7.7±1.6**
伤后10天
8
27.1±6.4**
19.3±3.1*
, 百拇医药
11.6±2.2**
伤后14天
8
69.2±10.4*
65.4±5.4
61.5±5.2*
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01表3 各组不同来源Tcs细胞在IL-2检测系统中反抑制活性的变化(
±s) 组别鼠数
, 百拇医药 不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
92.1±9.7
100.0±11.6
84.0±7.4
伤后1天
8
68.0±8.4
72.0±9.5*
, 百拇医药
63.9±6.1
伤后4天
8
23.9±4.7**
15.8±4.0**
15.8±3.7**
伤后7天
8
19.9±3.9**
28.0±6.1**
19.9±3.0**
, 百拇医药
伤后10天
8
7.9±1.8**
3.9±1.0**
7.9±1.4**
伤后14天
8
88.0±9.2
72.0±6.8*
63.9±6.7
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01表4 各组不同来源Tcs细胞在IL-2R检测系统中反抑制活性的变化(
±s) 组别, http://www.100md.com
鼠数
不同来源Tcs细胞反抑制率(%)
脾脏
胸腺
淋巴结
正常对照
8
92.5±10.6
85.6±7.5
85.0±7.2
伤后1天
8
48.2±6.7*
, http://www.100md.com
40.9±5.5*
44.7±3.5*
伤后4天
8
24.4±4.0**
22.2±3.8**
31.9±3.8*
伤后7天
8
20.9±5.3**
16.3±3.1**
, 百拇医药
4.3±1.0**
伤后10天
8
26.0±4.7**
12.2±2.7**
20.7±4.3**
伤后14天
8
26.6±5.9**
29.9±3.0**
30.7±4.2*
, 百拇医药
与正常对照组比较：*P<0.05 **P<0.01
三、 Tcs细胞形态结构观察
光镜下观察，创伤后不同来源的Tcs细胞未见明显异常；透射电镜下发现，创伤后Tcs细胞可见胞浆空泡形成，以伤后4～10天的变化较为明显，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核内假包涵体形成。
讨 论
Tcs细胞是近十几年来认识并逐渐肯定的新T细胞亚群，由于其功能与Ts细胞相反，故命名为反抑制T细胞[8]。它可分泌反抑制因子作用于Th细胞，使之不能接受Ts细胞的抑制信号。故Tcs和Th-Ts细胞共同平衡着机体的免疫网络，即“辅助-抑制-反抑制”调节网络。如果T细胞亚群的任一成分发生改变，就可破坏T细胞的“辅助-抑制-反抑制”调节网络，最终导致T细胞功能紊乱。
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严重创伤可致T细胞的免疫功能受抑。其主要表现[1，3]：T细胞对有丝分裂原如植物血凝素(PHA)和刀豆素A(ConA)刺激的增殖能力下降，IL-2生成减少，细胞膜IL-2R表达受抑，此外还伴有干扰素γ(IFN-γ)合成不足、白介素12(IL-12)生成减少、转铁蛋白受体(IFR)表达低下等。有学者认为，创伤后T细胞数目下降、Th数目减少、Ts数目增多伴活性增强、Th/Ts比例倒置是导致创伤后T细胞功能受抑重要原因[2，3]。近来，Decker等[7]发现，手术应激可致Th1/Th2细胞平衡向Th2方向移动，并认为这一变化是导致手术患者T细胞介导的细胞免疫功能受抑的原因之一。但上述研究均只是从T细胞的“辅助-抑制“调节网络变化的角度揭示创伤后T细胞功能受抑的发生机制，并未从反抑制调节的角度去探索。Kupper等[9]观察到，烧伤晚期小鼠免疫功能恢复的同时，伴随Tcs增多，推测Tcs细胞在烧伤后小鼠免疫功能重建中可能起一定作用，但缺乏直接的证据。Kobayashi等[5]发现，甘草甜素可通过作用于Tcs细胞进而阻止烧伤小鼠Ts细胞的活性增高，这一结果间接说明了Tcs细胞可能参与了烧伤后的免疫抑制反应。但仍未直接回答创伤(或烧伤)后Tcs细胞是否发生改变这一问题。
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笔者发现，截肢伤小鼠脾脏、胸腺细胞中Tcs细胞数目下降，但肠系膜淋巴结细胞中Tcs细胞数目无明显变化。此变化差异可能与来源于不同淋巴器官中的淋巴细胞对创伤反应的敏感性不同有关[3]。和Tcs细胞数目相比，Tcs细胞活性的变化更为明显，3种脏器淋巴细胞中Tcs细胞在正常T淋转、IL-2、IL-2R检测系统中的反抑制活性于伤后均不同程度降低，伤后14天尚未完全恢复正常。此外，笔者对Tcs细胞形态结构进行了观察，发现创伤后Tcs细胞在光镜下未见明显异常，但在透射电镜下，可见胞浆空泡形成，偶见胞浆溶解并呈现裸核，伤后14天小鼠Tcs细胞可见核假包涵体形成。提示创伤可引起Tcs细胞数目、功能及形态结构发生不同程度的改变。结合以往文献分析，笔者推测创伤体内可能存在着T细胞的辅助-抑制-反抑制免疫调节网络失衡。笔者在另一实验中，曾观察到创伤后Tcs细胞的变化同多项T细胞功能的降低密切相关，提示创伤后Tcs细胞的改变可能参与了T细胞功能受抑的调节过程。有关创伤后Tcs细胞变化的详细机制需深入研究。
*本课题为国家自然科学基金资助项目(No.39400136)
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收稿日期：1997-10-10
修稿日期：1998-04-30, http://www.100md.com