喉组织癌前病变的DNA流式定量研究
作者：袁雅生 王秀英 黄 健
单位：袁雅生 徐州医学院附属医院 耳鼻咽喉科；王秀英 黄 健 中心实验室,221002
关键词：喉癌前病变；DNA含量；流式细胞术
山东医大基础医学院学报990402 内容提要 应用流式细胞术对80例喉癌前病变细胞中的DNA含量进行定量检测。结果显示,29例I级不典型增生中出现DNA异倍体1例,30例Ⅱ级不典型增生中出现DNA异倍体2例,21例Ⅲ级不典型增生中出现DNA异倍体11例。提示喉癌前病变的DNA异倍体率随不典型增生病变的分级增高而增加,不典型增生程度越高,癌变率越高,提示DNA异倍体可能是喉癌变早期的分子标志物。
中图分类号 R 739.65
FLOW QUANTITATIVE ANALYSIS OF DNA
, http://www.100md.com
IN PRECANCERSIS WITH LARYNX
Yuan Yasheng Wang Xiuying Huang Jian
(The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College,221002)
Abstract The amount of DNA in precancerous cells with larynx were determined in 80 cases. One DNA heteroploid was found in 29 cases of the grade I of precancerous with larynx,2 DNA heteroploids in 30 cases of grade Ⅱ,11 DNA heteroploids in 21 cases of grade Ⅲ.This study shows that the quantity DNA heteroploid in precancersis with larynx increases as high as the grade does,and DNA heteroploid may be one of the important markers of precancersis with larynx.
, http://www.100md.com
Key words Precancersis of larynx;DNA,quantity;Flow cytometry
肿瘤的发生发展与细胞本身的基因改变密切相关,研究证明,癌基因激活和抑制基因失活、突变直接参与了细胞的恶性转化,我们应用流式细胞术对喉癌前病变的DNA含量进行了定量检测,以探讨它在癌变过程中的作用以及与病理形态学的关系。
1 材料和方法
1.1 标本来源 留取支撑喉镜活检的喉粘膜可疑组织和手术切除的癌旁粘膜组织,经病理诊断证实为癌前病变(不典型增生)80例,其中不典型增生I级29例,Ⅱ级30例,Ⅲ级21例,另取正常喉粘膜组织15例,慢性喉炎组织10例,晚期喉癌组织20例作为对照组。
1.2 检测方法 按本实验室常规制备FCM-DNA标本,测定分析喉癌前病变及对照组细胞的DNA含量。流式细胞仪系美国BD公司产。
, http://www.100md.com
1.3 测量资料的分析方法
1.3.1 以DNA指数(DI值)表示DNA含量
DI=0.9～1.1为二倍体,DI>1.1或<0.9为异倍体
1.3.2 为证实喉癌前病变DNA异倍体与早期癌变的关系,对所有不典型增生患者随访3年。
2 结 果
2.1 喉不典型增生病变的细胞DNA倍体分析 根据DNA倍体测定标准,15例正常喉粘膜组织(DI=1.00±0.02)和10例慢性喉炎(DI=1.00±0.03)DNA含量均为二倍体。在喉组织癌前病变中,29例I级不典型增生(DI=1.01±0.03)出现1例DNA异倍体,30例Ⅱ级不典型增生(DI=1.02±0.05)出现2例异倍体,在21例Ⅲ级不典型增生(DI=1.12±0.09) 出现11例异倍体, 在20例喉癌中(DI = 1.19±0.14) 出现了15例异倍体。
, http://www.100md.com
2.2 DNA异倍体和癌变的关系 对80例随访3年,24例(I级16例,Ⅱ级7例,Ⅲ级1例)后失访,有随访结果的56例中,17例(Ⅲ级14例、Ⅱ级3例)在随访期间由病理诊断证实为早期癌变,其中12例癌变病例为DNA异倍体,5例癌变病例为DNA二倍体。
3 讨 论
对癌前病变的研究是肿瘤防治的重要课题之一。预防癌前病变向恶性转化,并对有可能癌变的病例进行早期诊断,寻找早期癌变特异性的标志物具有重要的临床价值。应用流式细胞术检测喉组织癌前病变中的DNA异倍体,在病理形态学还不能确诊癌变之前,从DNA定量的分子水平进行研究可对癌变做出诊断。本研究表明,DNA异倍体出现率随不典型增生程度加重而增加。随访结果显示,DNA异倍体的癌变率显著高于二倍体,且Ⅲ级不典型增生患者出现的癌变比例明显增高,进一步证实不典型增生程度越高,癌变率越高,从而提示DNA异倍体可能是喉癌变早期的重要标志之一。
参考文献
, 百拇医药
1 Hinds P,Finlay C,Levine AJ,et al.Mutation is required to activate the p53 gene for cooperation with the Ras oncogene and transmation.J Virol,1989;63(4):739
2 左连富,等.流式细胞术检测石蜡包埋肿瘤细胞DNA含量样品制备方法.中华病理学杂志,1998;17(3):232
3 左连富,等.21ras在胃癌前病变和胃癌细胞表达的定量研究.中华病理学杂志,1994;23(3):138
4 Morkve O,Learun OD.Flow cytometry measurement of p53 protein expression and DNA content in praraffin embedded tissue from bronchial carcinoma.Cytometry,1991;12(4):438
5 Macarthey JC,Camplejohn R.DNA flow cytometry of histomucosa.J Pathology,1996;150(2):113
(收稿日期 1999-07-10), 百拇医药
单位：袁雅生 徐州医学院附属医院 耳鼻咽喉科；王秀英 黄 健 中心实验室,221002
关键词：喉癌前病变；DNA含量；流式细胞术
山东医大基础医学院学报990402 内容提要 应用流式细胞术对80例喉癌前病变细胞中的DNA含量进行定量检测。结果显示,29例I级不典型增生中出现DNA异倍体1例,30例Ⅱ级不典型增生中出现DNA异倍体2例,21例Ⅲ级不典型增生中出现DNA异倍体11例。提示喉癌前病变的DNA异倍体率随不典型增生病变的分级增高而增加,不典型增生程度越高,癌变率越高,提示DNA异倍体可能是喉癌变早期的分子标志物。
中图分类号 R 739.65
FLOW QUANTITATIVE ANALYSIS OF DNA
, http://www.100md.com
IN PRECANCERSIS WITH LARYNX
Yuan Yasheng Wang Xiuying Huang Jian
(The Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College,221002)
Abstract The amount of DNA in precancerous cells with larynx were determined in 80 cases. One DNA heteroploid was found in 29 cases of the grade I of precancerous with larynx,2 DNA heteroploids in 30 cases of grade Ⅱ,11 DNA heteroploids in 21 cases of grade Ⅲ.This study shows that the quantity DNA heteroploid in precancersis with larynx increases as high as the grade does,and DNA heteroploid may be one of the important markers of precancersis with larynx.
, http://www.100md.com
Key words Precancersis of larynx;DNA,quantity;Flow cytometry
肿瘤的发生发展与细胞本身的基因改变密切相关,研究证明,癌基因激活和抑制基因失活、突变直接参与了细胞的恶性转化,我们应用流式细胞术对喉癌前病变的DNA含量进行了定量检测,以探讨它在癌变过程中的作用以及与病理形态学的关系。
1 材料和方法
1.1 标本来源 留取支撑喉镜活检的喉粘膜可疑组织和手术切除的癌旁粘膜组织,经病理诊断证实为癌前病变(不典型增生)80例,其中不典型增生I级29例,Ⅱ级30例,Ⅲ级21例,另取正常喉粘膜组织15例,慢性喉炎组织10例,晚期喉癌组织20例作为对照组。
1.2 检测方法 按本实验室常规制备FCM-DNA标本,测定分析喉癌前病变及对照组细胞的DNA含量。流式细胞仪系美国BD公司产。
, http://www.100md.com
1.3 测量资料的分析方法
1.3.1 以DNA指数(DI值)表示DNA含量
DI=0.9～1.1为二倍体,DI>1.1或<0.9为异倍体
1.3.2 为证实喉癌前病变DNA异倍体与早期癌变的关系,对所有不典型增生患者随访3年。
2 结 果
2.1 喉不典型增生病变的细胞DNA倍体分析 根据DNA倍体测定标准,15例正常喉粘膜组织(DI=1.00±0.02)和10例慢性喉炎(DI=1.00±0.03)DNA含量均为二倍体。在喉组织癌前病变中,29例I级不典型增生(DI=1.01±0.03)出现1例DNA异倍体,30例Ⅱ级不典型增生(DI=1.02±0.05)出现2例异倍体,在21例Ⅲ级不典型增生(DI=1.12±0.09) 出现11例异倍体, 在20例喉癌中(DI = 1.19±0.14) 出现了15例异倍体。
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2.2 DNA异倍体和癌变的关系 对80例随访3年,24例(I级16例,Ⅱ级7例,Ⅲ级1例)后失访,有随访结果的56例中,17例(Ⅲ级14例、Ⅱ级3例)在随访期间由病理诊断证实为早期癌变,其中12例癌变病例为DNA异倍体,5例癌变病例为DNA二倍体。
3 讨 论
对癌前病变的研究是肿瘤防治的重要课题之一。预防癌前病变向恶性转化,并对有可能癌变的病例进行早期诊断,寻找早期癌变特异性的标志物具有重要的临床价值。应用流式细胞术检测喉组织癌前病变中的DNA异倍体,在病理形态学还不能确诊癌变之前,从DNA定量的分子水平进行研究可对癌变做出诊断。本研究表明,DNA异倍体出现率随不典型增生程度加重而增加。随访结果显示,DNA异倍体的癌变率显著高于二倍体,且Ⅲ级不典型增生患者出现的癌变比例明显增高,进一步证实不典型增生程度越高,癌变率越高,从而提示DNA异倍体可能是喉癌变早期的重要标志之一。
参考文献
, 百拇医药
1 Hinds P,Finlay C,Levine AJ,et al.Mutation is required to activate the p53 gene for cooperation with the Ras oncogene and transmation.J Virol,1989;63(4):739
2 左连富,等.流式细胞术检测石蜡包埋肿瘤细胞DNA含量样品制备方法.中华病理学杂志,1998;17(3):232
3 左连富,等.21ras在胃癌前病变和胃癌细胞表达的定量研究.中华病理学杂志,1994;23(3):138
4 Morkve O,Learun OD.Flow cytometry measurement of p53 protein expression and DNA content in praraffin embedded tissue from bronchial carcinoma.Cytometry,1991;12(4):438
5 Macarthey JC,Camplejohn R.DNA flow cytometry of histomucosa.J Pathology,1996;150(2):113
(收稿日期 1999-07-10), 百拇医药