二分类血液分析仪对新生儿白细胞分类结果的影响
作者：汪伟山 曾淑萍 宋兰珍 朱小瑜 秦振庭
单位：汪伟山，曾淑萍，宋兰珍，朱小瑜(珠海市妇幼保健院，广东珠海519000)；秦振庭(指导)(北京医科大学妇儿医院)
关键词：婴儿；新生儿；白细胞分类
临床检验杂志990428
为探讨新生儿期白细胞分类特点对Sysmex F-800二分类血细胞计数仪分类结果的影响，我们严格选择了40例正常足月新生儿，从生后第1天到4周末，用F-800仪检测其白细胞分类，同时做推片、染色、显微镜分类对比，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 对象 我院足月顺娩的正常新生儿40例，男女各半。条件如下：(1)排除妊娠、胎心、羊水及脐带异常等各种高危因素；(2)足月顺娩。平均胎龄(39.5±0.97)周，平均体重(3 272±353) g；(3)出生无窒息，Apgar评分8～10分，生后入母婴同室；(4)新生儿期患病者或一周内失访者剔除。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 采样 每例生后第1天、～3天、～5天、～7天、第2周、3周、4周共七次连续采样。采末梢血20 μl，用F-800仪器检测，同时推制血片，瑞氏染色。
1.2.2 电子法测定 日本Systemex F-800血细胞计数仪及所提供的溶血素和新样品杯。每日用广东省临检中心质控全血做质控，测定前清洁测量小孔，并做空白计数，保证仪器处于最佳状态，按手册操作。
1.2.3 手工法 油镜下分类计数血片体尾交界处100个白细胞。同时记录所见有核红细胞。
以上均专人专机操作，保证前后操作条件的一致性。
2 结果
2.1 电子法分类结果及与手工法的对比见表1。
, 百拇医药
表1 白细胞分类机测值与手工测定值对比
第1天
n＝40
2～3天
n＝40
4～5天
n＝40
6～7天
n＝40
第2周
n＝33
3周
n＝33
, 百拇医药
4周
n＝32
r
b
NG%
78.7±5.8
69.3±6.7
61.4±6.7
58.0±8.8
47.3±8.6
40.5±6.9
36.5±5.9
0.9884
, 百拇医药
1.159
N%
69.7±6.9
57.2±9.0
44.5±7.9
37.8±7.4
31.0±9.5
24.0±7.0
19.5±4.8
LYM%
21.4±5.8
30.7±6.7
, 百拇医药
38.6±6.7
42.1±8.8
52.7±8.6
59.6±6.9
63.5±5.9
0.9917
1.148
L%
20.1±6.5
31.3±7.3
42.7±8.0
50.0±7.6
, 百拇医药
59.3±11.2
65.2±7.1
67.8±6.3
NG：电子法中性粒细胞 LYM：电子法淋巴细胞： N：手工法中性粒细胞 L：手工法淋巴细胞 r：相关系数 b：回归系数
2.2 手工法分类结果见表2。表2 新生儿期白细胞手工分类动态值 日龄
例数
粒 细 胞 (%)
淋巴细胞
(%)
±s
, http://www.100md.com
单核细胞
(%)
有核红细胞(计数100个白细胞所见)
幼稚粒细胞
中性杆状
中性分叶±s
嗜酸性
嗜碱性
1天
40
3.4
(1～4)
, 百拇医药
3.9
(1～10)
69.7±6.9
1.7
(0～8)
0.2
(0～1)
20.1±6.5
1.0
(0～5)
1.2
～3
40
, http://www.100md.com
3.3
(1～3)
2.5
(1～7)
57.2±9.0
3.6
(1～8)
0.2
(0～1)
31.3±7.3
1.5
(0～5)
0.2
, http://www.100md.com
～5
40
2.6
(1～3)
3.2
(1～8)
44.5±7.9
4.3
(1～17)
0
(0～1)
42.7±8.0
1.9
, http://www.100md.com
(1～4)
0.1
～7
40
2.1
(0～3)
2.8
(0～7)
37.8±7.4
4.3
(1～12)
0.1
(0～1)
, 百拇医药
50.0±7.6
2.0
(1～5)
0
2周
33
1.2
(0～5)
2.3
(0～6)
31.0±9.5
3.3
(1～10)
, 百拇医药
0.2
(0～1)
59.3±11.2
2.0
(1～5)
0
3周
33
1.1
(0～4)
2.4
(1～6)
24.0±7.0
, 百拇医药
4.6
(1～16)
0.3
(0～1)
65.2±7.1
2.0
(1～6)
0
4周
32
1.2
(0～4)
2.7
, 百拇医药
(1～6)
19.5±4.8
5.7
(1～16)
0.3
(0～1)
67.8±6.3
2.3
(1～6)
0
注：括号内数值为最低值与最高值
3 讨论
3.1 传统均认为中性粒细胞与淋巴细胞生后第一次交叉是在第5天左右，我们手工分类的结果与之吻合。N和L的比例虽有显著的日龄升降变化，但经计算L的绝对数变化并不大，基本稳定在(4.5～5.5)×109/L，起决定作用的是N的不断降低，从18.7×109/L降至4周末的3.2×109/L，但并非是骨髓受抑。通过血片观察，发现在新生儿早期，76.7%的血片中可见到幼稚粒细胞，部分还可见到幼稚淋巴细胞。随着日龄的递增，幼稚粒细胞计数减低，例数减少，但直至4周末个别仍未完全消失，这说明新生儿出生后造血功能是相当活跃的。新生儿期嗜酸性粒细胞增多并随日龄上升，最高值可达17%。这一现象国外亦早有记载，其绝对值可达(0.6～1.2)×109/L，并认为这是新生儿初次接触外界抗原的一种生理反应，与儿童的嗜酸性粒细胞增多意义不一样[1]。电子法LYM和NG两类细胞的交叉推迟至第2周，从表1看，LYM与L的相关性较NG与N的好，因此我们认为是F-800仪分类较粗，而新生儿期幼稚粒细胞、嗜酸性粒细胞等大细胞占了相当比例，掩盖了中性粒细胞下降真相之故。因此，F-800二分类仪不能真实地反应新生儿期不同日龄中性粒细胞与淋巴细胞的比例变化。
, 百拇医药
3.2 (杆状核细胞/中性细胞)≥0.2时有助于诊断新生儿败血症[2]。而这一比值是F-800仪所不能测知的，必须依靠显微镜分类报告。
综上所述，F-800二分类血细胞计数仪的分类结果不能充分反映新生儿的真实情况，尤其患感染性疾病或血液性疾病的新生儿，必须有手工分类结果，以明确各细胞比例和形态上的改变，以免误诊、漏诊。
参考文献
1 Oski F A,et al.Hematologic problems in the newborn. 3rdedition.Philadelphia:W B Saunders Company,1982.230
2 秦振庭主编.围产新生儿医学.北京：能源出版社，1989.821
(1998-07-10收稿，1999-02-16修回), 百拇医药
单位：汪伟山，曾淑萍，宋兰珍，朱小瑜(珠海市妇幼保健院，广东珠海519000)；秦振庭(指导)(北京医科大学妇儿医院)
关键词：婴儿；新生儿；白细胞分类
临床检验杂志990428
为探讨新生儿期白细胞分类特点对Sysmex F-800二分类血细胞计数仪分类结果的影响，我们严格选择了40例正常足月新生儿，从生后第1天到4周末，用F-800仪检测其白细胞分类，同时做推片、染色、显微镜分类对比，现报告如下。
1 对象和方法
1.1 对象 我院足月顺娩的正常新生儿40例，男女各半。条件如下：(1)排除妊娠、胎心、羊水及脐带异常等各种高危因素；(2)足月顺娩。平均胎龄(39.5±0.97)周，平均体重(3 272±353) g；(3)出生无窒息，Apgar评分8～10分，生后入母婴同室；(4)新生儿期患病者或一周内失访者剔除。
, 百拇医药
1.2 方法
1.2.1 采样 每例生后第1天、～3天、～5天、～7天、第2周、3周、4周共七次连续采样。采末梢血20 μl，用F-800仪器检测，同时推制血片，瑞氏染色。
1.2.2 电子法测定 日本Systemex F-800血细胞计数仪及所提供的溶血素和新样品杯。每日用广东省临检中心质控全血做质控，测定前清洁测量小孔，并做空白计数，保证仪器处于最佳状态，按手册操作。
1.2.3 手工法 油镜下分类计数血片体尾交界处100个白细胞。同时记录所见有核红细胞。
以上均专人专机操作，保证前后操作条件的一致性。
2 结果
2.1 电子法分类结果及与手工法的对比见表1。
, 百拇医药
表1 白细胞分类机测值与手工测定值对比
第1天
n＝40
2～3天
n＝40
4～5天
n＝40
6～7天
n＝40
第2周
n＝33
3周
n＝33
, 百拇医药
4周
n＝32
r
b
NG%
78.7±5.8
69.3±6.7
61.4±6.7
58.0±8.8
47.3±8.6
40.5±6.9
36.5±5.9
0.9884
, 百拇医药
1.159
N%
69.7±6.9
57.2±9.0
44.5±7.9
37.8±7.4
31.0±9.5
24.0±7.0
19.5±4.8
LYM%
21.4±5.8
30.7±6.7
, 百拇医药
38.6±6.7
42.1±8.8
52.7±8.6
59.6±6.9
63.5±5.9
0.9917
1.148
L%
20.1±6.5
31.3±7.3
42.7±8.0
50.0±7.6
, 百拇医药
59.3±11.2
65.2±7.1
67.8±6.3
NG：电子法中性粒细胞 LYM：电子法淋巴细胞： N：手工法中性粒细胞 L：手工法淋巴细胞 r：相关系数 b：回归系数
2.2 手工法分类结果见表2。表2 新生儿期白细胞手工分类动态值 日龄
例数
粒 细 胞 (%)
淋巴细胞
(%)
±s, http://www.100md.com
单核细胞
(%)
有核红细胞(计数100个白细胞所见)
幼稚粒细胞
中性杆状
中性分叶
±s嗜酸性
嗜碱性
1天
40
3.4
(1～4)
, 百拇医药
3.9
(1～10)
69.7±6.9
1.7
(0～8)
0.2
(0～1)
20.1±6.5
1.0
(0～5)
1.2
～3
40
, http://www.100md.com
3.3
(1～3)
2.5
(1～7)
57.2±9.0
3.6
(1～8)
0.2
(0～1)
31.3±7.3
1.5
(0～5)
0.2
, http://www.100md.com
～5
40
2.6
(1～3)
3.2
(1～8)
44.5±7.9
4.3
(1～17)
0
(0～1)
42.7±8.0
1.9
, http://www.100md.com
(1～4)
0.1
～7
40
2.1
(0～3)
2.8
(0～7)
37.8±7.4
4.3
(1～12)
0.1
(0～1)
, 百拇医药
50.0±7.6
2.0
(1～5)
0
2周
33
1.2
(0～5)
2.3
(0～6)
31.0±9.5
3.3
(1～10)
, 百拇医药
0.2
(0～1)
59.3±11.2
2.0
(1～5)
0
3周
33
1.1
(0～4)
2.4
(1～6)
24.0±7.0
, 百拇医药
4.6
(1～16)
0.3
(0～1)
65.2±7.1
2.0
(1～6)
0
4周
32
1.2
(0～4)
2.7
, 百拇医药
(1～6)
19.5±4.8
5.7
(1～16)
0.3
(0～1)
67.8±6.3
2.3
(1～6)
0
注：括号内数值为最低值与最高值
3 讨论
3.1 传统均认为中性粒细胞与淋巴细胞生后第一次交叉是在第5天左右，我们手工分类的结果与之吻合。N和L的比例虽有显著的日龄升降变化，但经计算L的绝对数变化并不大，基本稳定在(4.5～5.5)×109/L，起决定作用的是N的不断降低，从18.7×109/L降至4周末的3.2×109/L，但并非是骨髓受抑。通过血片观察，发现在新生儿早期，76.7%的血片中可见到幼稚粒细胞，部分还可见到幼稚淋巴细胞。随着日龄的递增，幼稚粒细胞计数减低，例数减少，但直至4周末个别仍未完全消失，这说明新生儿出生后造血功能是相当活跃的。新生儿期嗜酸性粒细胞增多并随日龄上升，最高值可达17%。这一现象国外亦早有记载，其绝对值可达(0.6～1.2)×109/L，并认为这是新生儿初次接触外界抗原的一种生理反应，与儿童的嗜酸性粒细胞增多意义不一样[1]。电子法LYM和NG两类细胞的交叉推迟至第2周，从表1看，LYM与L的相关性较NG与N的好，因此我们认为是F-800仪分类较粗，而新生儿期幼稚粒细胞、嗜酸性粒细胞等大细胞占了相当比例，掩盖了中性粒细胞下降真相之故。因此，F-800二分类仪不能真实地反应新生儿期不同日龄中性粒细胞与淋巴细胞的比例变化。
, 百拇医药
3.2 (杆状核细胞/中性细胞)≥0.2时有助于诊断新生儿败血症[2]。而这一比值是F-800仪所不能测知的，必须依靠显微镜分类报告。
综上所述，F-800二分类血细胞计数仪的分类结果不能充分反映新生儿的真实情况，尤其患感染性疾病或血液性疾病的新生儿，必须有手工分类结果，以明确各细胞比例和形态上的改变，以免误诊、漏诊。
参考文献
1 Oski F A,et al.Hematologic problems in the newborn. 3rdedition.Philadelphia:W B Saunders Company,1982.230
2 秦振庭主编.围产新生儿医学.北京：能源出版社，1989.821
(1998-07-10收稿，1999-02-16修回), 百拇医药