痛风宁消炎镇痛的实验研究
作者：陈文照 姜 宏 刘延龄 林 坚 金 策 顾瑞生
单位：陈文照 林 坚 金 策 浙江中医学院 浙江 杭州 310009；姜 宏 苏州市中医院 江苏 苏州 215007；刘延龄 上海长海医院 上海 20001；顾瑞生 上海中医药大学 上海 200032
关键词：痛风；痛风宁；抗炎镇痛；药理学；动物；大鼠
中国中医骨伤科990401 摘要 目的：评估痛风宁对急性痛风的抗炎镇痛药效。方法：24只雄性Wistar大鼠随机分成模型组、中药组、西药组，分别灌胃蒸馏水、痛风宁溶液、秋水仙碱溶液，于第3天将0.2ml尿酸钠溶液注入右侧踝关节腔造成急性痛风模型，24h后观察步态，72h后测量关节周径，观察受试关节周围软组织炎症病理及滑膜细胞超微结构变化。结果：中药组和西药组受试关节周径增大值明显比模型组小(P<0.01)；中药组和西药组受试关节周围软组织炎性细胞浸润、水肿、毛细血管充血及滑膜细胞线粒体、内质网肿胀均比模型组轻，痛行为步态均得到明显改善(P<0.01)。结论：痛风宁与秋水仙碱一样是治疗急性痛风有效的抗炎镇痛药。
中图分类号：R589.7 文献标识码：A 文章编号：1005-0205(1999)04-0001-03
The Experimental Study of Anti-inflammation and
Analgesia Effect of TFN on Acute Gout
Chen Wenzhao,Jiang Hong,Liu Yanling,et al
Zhe jiang College of Traditional Chinese Medicine,Hangzhou (310009)
ABSTRACT Object:To evaluate the anti-inflammation and analgesia effect of TFN on acute gout.Methods:Twenty-four male wistar rats were divided at random into three groups:Model Group(MG) was treated with distilled water,Chinese Medicine Group(CMG) was treated with TFN solution,West Medicine Group(WMG) was treated with colchicine solution.On the 3th day,the acute gout model was established by injecting 0.2ml Monosodium Urate(MSU) solution into the right ankle of rats.24h later,gait was observed.72h later,ankle perimeter was measured and inflammation pathology of periarticular connective tissues and ultarstruction of synovial cells were observed.Result:The increase of ankle perimeter of CMG and WMG were significantly less than that of MG (P<0.01).The inflammatory cell infiltration,capillary congestion and edema of periarticuar connective tissues,and swelling of mitochondrion and endoplasmic reticulum of CMG and WMG were significantly slighter than those of MG.Gait ws improved obviously in rats of CMG and WMG(P<0.01/0.05).Conclusions:TFN is an effective anti-inflammation and analgesia medicine such as colchicine in treatment of acute gout.
KEY WORDS Gout Tongfeng Ning Anti-inflammation action Analgesia action Pharmacology Animal Rat
痛风是由尿酸钠结晶(MSUC)沉积在关节周围而引起的一种炎症，临床以关节剧痛伴肿胀发热暗红为主要表现。我们用痛风宁治疗收到了较好的消炎镇痛效果，在此基础上，我们对其进行了动物实验研究，旨在客观地评估其疗效。
材料与方法
1 动物 雄性Wistar大鼠24只，体重200±20g，随机分成模型组、中药组、西药组各8只。
2 药物 痛风宁由制川乌、汉防己、生黄芪、当归尾、生麻黄等组成，每m1药液含生药2g；西药用秋水仙碱溶液，浓度为2%。
3 方法 参照Coderre[1]介绍的方法制备尿酸钠溶液及动物造模。模型组、中药组、西药组动物分别灌胃蒸馏水、痛风宁药液和秋水仙碱溶液，均为每次4m1，每天2次，连用5天，并于第3天第1次用药前lh用软皮尺测量各鼠右后肢踝关节周径，然后将尿酸钠溶液0.2m1注入到踝关节腔内造模，24h后观察各鼠步态变化。造模后72h再用软皮尺在前次相同部位测量关节周径，接着处死动物，每组各2只，取下其受试关节周围软组织，放入甲醛中固定，等待观察炎症病理变化；另每组各2只，取下其受试关节滑膜组织，放入戊二醛中固定，等待观察滑膜细胞内超微结构变化。普通病理用100倍光镜观察，超微结构用透射电镜观察。步态分级按Coderre介绍的方法，0级：正常行走；I级：轻微跛行，受试下肢略有弯曲；Ⅱ级：中度跛行，受试下肢刚触及地面；Ⅲ级：重度跛行，受试下肢离开地面，三足着地行走。
结果与分析
1 药物对关节周径的影响 由表1可见，各组动物造模前后关节周径均有不同程度的增大。其中，模型组增大最明显，平均增大39.97%；中药组增大次之，平均增大16.56%：西药组增大最少，平均增大11.7%。从表2可见，各组间造模前后关节周径增大值均有明显差异，西药抑制关节周径增大比中药明显。
表1 造模前后各组关节周径变化 (x±s，cm) 组别
n
造模前
造模后
模型组(a)
8
2.43±0.05
3.40±0.18
中药组(b)
8
2.46±0.06
2.86±0.07
西药组(c)
8
2.46±0.07
2.75±0.07
表2 组间关节周径增大值的秩和检验(t检验) 组比
na nb
Ra-Rb
P
a∶b
8 8
8.25
<0.01
a∶c
8 8
15.75
<0.01
b∶c
8 8
7.60
<0.01
2 药物对关节周围软组织病理变化的影响 图1显示模型动物受试关节周围软组织充血水肿明显，炎症细胞大量浸润；图2、3分别显示使用中、西药后，受试关节周围软组织炎症细胞浸润减少，水肿、充血不明显。
3 药物对滑膜细胞超微结构变化的影响 图4显示模型动物受试关节滑膜细胞内线粒体、内质网等细胞器明显肿胀，图5、6分别显示使用中、西药后，受试关节滑膜细胞内的各种细胞器水肿情况减轻。
4 药物对步态变化的影响 由表3可见，中药组与模型组比较有非常显著性差异，西药组与模型组比较有显著性差异，但中西药组之间相比较没有统计学意义。表3 药物对步态变化的影响(秩和检验) 组别
n
0级
Ⅰ级
Ⅱ级
Ⅲ级
模型组(a)
8
0
0
2
6
中药组(b)
8
0
4
3
1
西药组(c)
8
0
2
4
2
a∶b P<0.01 a∶c P<0.05 b∶c P>0.05
讨论
炎症是由于机体受到物理、化学、生物学因素等作用所引起的组织或器官反应。目前已经证实，急性痛风的致炎因子是MSUC。当这种MSUC沉积到关节腔周围时，可以诱使炎症细胞聚集到其周围发生吞噬反应，且吞噬细胞破裂释出多种致炎致痛因子。国外许多研究表明，MSUC可促使人体白细胞和血小板产生LTB4和与之相关的脂氧合酶代谢产物水平升高。[2～4]LTB4是一种强烈的炎症趋化因子，在急性痛风的发展过程中，它诱使更多的白细胞趋于炎症部位，加重炎症反应。本实验病理结果显示了模型动物受试关节周围软组织有大量白细胞浸润，与当今研究相符。[1]模型动物使用中西药后其病理结果均显示受试关节周围软组织的炎症白细胞浸润减少，说明中西药对白细胞浸润到炎症部位有一定的抑制作用。从相关实验研究进展来看，有人发现本方主要药物汉防己的有效成分粉防己碱能抑制嗜中性白细胞的游走。[5]杜泽英[6]等进一步发现粉防己碱能明显抑制LTB4的产生，师海波[7]等观察到本方另一主要药物制川乌的有效成分川乌总碱也能非常显著地抑制白细胞的趋化。由此推测，痛风宁抑制炎症细胞浸润的部分机理可能与本方有些药物能抑制LTB4等趋化因子的趋化性，进而抑制炎症细胞的趋化、游走有关。
炎症反应的另一病理现象为毛细血管扩张充血及组织水肿，毛细血管扩张充血，可以降低痛阈；组织水肿，渗出物压迫神经末梢，可以加剧疼痛。本实验发现，动物造模后，受试关节周径明显增大，肿胀严重，痛行为步态明显改变；病理结果显示炎症组织区水肿，毛细血管扩张，超微结构显示滑膜细胞内线粒体、内质网等明显水肿。而使用中西药后，痛行为步态明显好转，关节周径缩小，肿胀减轻；毛细血管充血得到改善，组织水肿明显好转，滑膜细胞内线粒体、内质网等细胞器水肿情况大有改善。痛风宁可能通过防己、黄芪等药利水配合归尾活血共奏利水活血作用。其镇痛效应环节可能在于：改善微循环，减轻神经末梢的激惹态，提高痛阈，从而减轻疼痛。而其消炎镇痛作用可能主要通过减少局部PGE2、PGI2等致炎因子及K+、5-HT、NE、DA等致痛因子，增加中枢5-HT、DA等镇痛因子而发挥。[8]
至于本实验中还发现的秋水仙碱退肿优于痛风宁，其可能与中药起效较慢有关。但我们在实验中发现模型动物滑膜组织粘连明显，当使用秋水仙碱后有好转，而使用痛风宁后有明显好转，本方虽起效较慢，但作用持久，此与临床上用药的疗效观察相符合。
基金项目：浙江省教委基金项目(97123)；1999年获浙江省中医药科技进步三等奖。
作者简介：陈文照(1962-)，男(汉族)，浙江临安人，浙江中医学院博士、副教授。
参考文献
[1] Coderre TJ and Wall PD.Ankle joint urate arthritis in rat:an alternative animal model of arthritis to that produced by freund's adjuvant.Pain,1987,28:379
[2] Hasselbacher P.Binding of IgG and complement protein monosodium urate monohydrate and other crystals.J.Lab Clin Med,1979,94:532
[3] Sergan CH,lundberg U,Weissman G,et al.Formation of neutrophils and platelets exposed to monosodium urate.Prostaglandings,1984,27:563
[4] Poubelle PE,DeModicis R and Nacache P.Monosodium urate and calicum pyrophosphate crystal differentially active the excitation,response coupling sequence in human neutrophils.Biochem Biophys Res Commun,1987,149:649
[5] 何凤慈，唐汝愚，姚丹帆.粉防己碱对急性炎症血管通透性和嗜中性白细胞功能的影响.中国药理学报,1989,10(3)：249
[6] 杜泽英，黄铖华.粉防己碱对兔血LTB4和TXB2产生的影响.中国药理学报，1993，14(4)：325
[7] 师海波，周重楚，李延忠，等.川乌总碱的抗炎作用.中国中药杂志，1990，15(3)：46
[8] 陈文照，吴士良，姜宏，等.防己黄芪乌苡汤对急性痛风外周神经递质的影响.中国医药学报，1997，(4)：25
图1 模型动物受试关节周围软组织炎症充血水肿明显炎症细胞大量浸润。
图2 模型动物使用中药后，炎症细胞浸润减少，水肿、充血不明显。
图3 模型动物使用西药后，炎症细胞浸润减少，水肿、充血不明显。
图4 模型动物滑膜细胞内线粒体肿胀，线粒体嵴变短、断裂消失，部分内质网扩张成囊状。
图5 使用中药后，滑膜细胞线粒体轻度肿胀，内质网略有扩张。
图6 使用西药后，滑膜细胞相对正常，但胞浆密度略有增高，线粒体较多，嵴轻度肿胀。
收稿日期：1999-02-08