甲状腺癌P21、P53、PCNA表达及其意义
作者：杨燕初 卓建红 谢 群
单位：杨燕初 卓建红 广西柳州卫校病理教研室； 谢 群 广西柳州卫校附属医院病理科
关键词：甲状腺癌；免疫组化；肿瘤抑制基因
广西医学990509
摘要 目的：研究甲状腺癌P21、P53、PCNA表达及其意义。方法：应用SP免疫组化法检测40例甲状腺癌患者。结果：甲状腺癌中P21、P53、PCNA的阳性率分别为67.5%、52.5%和57.5%。P21、PCNA在癌中表达与在增生性病变中表达有显著差异(P<0.05)，P53仅在癌中表达，癌旁组织及增生性病变中无表达。P53和PCNA过度表达与浸润程度和淋巴结转移有关。结论：检测结果提示：P21、P53、PCNA表达对鉴别甲状腺的良、恶性病变有意义。P53、PCNA表达与癌的浸润、转移有关。
, 百拇医药
Expression of P21，P53,PCNA in thyroid carcinoma and its significance
Yang Yanchu,Xie Qun,Zhuo Jianhong.
Guangxi liuzhou Health School(Liuzhou 545005)
Abstract Objective:To study the expression of P21、P53、PCNA in thyroid carcinoma and its significance.Methods:40 cases of thyroid carcinoma were studied by SP immunohistochemical technique.Results:The positive rate of P21、P53、PCNA in thyroid carcinoma was 67.5%,52.5% and 57.5% respectively.Significant difference between the expression of P21、PCNA in cancer and that in multiplication lesions was found(P<0.05).P53 expression was only found in cancer,but not in peritumoral tissues and multiplication lesions.Meanwhile,a significant correlation was found between P53、PCNA overexpression and the depth of invasion and lymph node metastasis.Conclusion:It is suggested that the expression of P21、P53、PCNA may help differeninate benign and malignant lesions of thyroid.The expression of P53、PCNA is related to invasion and metastasis of cancer.
, 百拇医药
Key words Thyroid carcinoma;Immunohistochemistry;Tumor suppressor gene
本文采用SP免疫组化法观察40例甲状腺癌组织中P21、P53、PCNA蛋白的表达情况，探讨其与甲状腺癌的临床病理关系，寻找甲状腺癌诊断的免疫组化指标。
1 材料和方法
1.1 材料：收集本院1990年1月～1998年6月甲状腺癌手术切除标本40例，均经病理证实，部分病例做Tg、CT免疫组化染色。参照WHO(1988)甲状腺肿瘤组织学分型标准，其中乳头状腺癌21例、滤泡状腺癌14例、低分化癌3例、未分化癌2例。另选甲状腺瘤、结节性甲状腺肿、甲亢各7例作对照。全部病例术前未经放疗或化疗。所有标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，切片厚4μ。
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1.2 方法：SP免疫组化染色：抗P21抗体(F132)，工作浓度1∶50，抗P53抗体(DO-7)，工作浓度1∶50，抗PCNA抗体(PC10)，工作浓度1∶50，SP免疫组化试剂盒。试剂全部为美国Zymed公司产品，购于福州迈新公司。切片脱蜡，水化后，PBS冲洗(pH7.4)，按SP试剂盒说明书程序进行染色(室温20℃)。P53经微波处理后再行染色，DAB显色。用已知阳性切片作阳性对照。
1.3 结果判断：染色阳性信号呈棕黄色，每张切片双盲观测10个高倍视野，根据阳性细胞数量，阳性细胞>肿瘤细胞的15%，则判为阳性表达。
1.4 统计学处理：样本间比较，用卡方检验。
2 结果
2.1 P21、P53、PCNA在各组病例中同步检测结果见表1。
, 百拇医药
表1 P21、P53、PCNA在甲状腺癌中的阳性表达 生物学指标
N
P21
P53
PCNA
n
%
n
%
n
%
组织类型
, 百拇医药
乳头状腺癌
21
15
71.43
9
42.86
11
47.62
滤泡状腺癌
14
9
64.29
8
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57.14
8
57.14
低分化腺癌
3
2
66.66
2
66.66
2
66.66
未分化腺癌
2
, 百拇医药
1
50.00
2
100.00
2
100.00
甲状腺腺瘤
7
1
14.28
0
1
14.28
, 百拇医药
结甲
7
2
28.56
0
1
14.28
甲亢
7
0
0
0
淋巴结转移
阳性组
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17
10
58.82
13
76.47
14
82.35
阴性组
23
17
73.91
8
34.78
, 百拇医药
9
39.13
2.2 P21，其阳性表达位于细胞浆内。在本组甲状腺癌中的表达情况见表1，40例甲状腺癌P21阳性表达27例，阳性率为67.5%，癌旁上皮细胞可见弱阳性。良性增生有3例表达。腺癌各组织类别间无显著差异(χ2=0.37,P>0.05)。腺癌组与增生性病变组之间P21蛋白表达存在显著性差异(χ2=15.36，P<0.005)。
2.3 P53，其阳性表达位于细胞核内，胞浆偶见弱阳性。在本组甲状腺癌中表达情况见表1，40例甲状腺癌P53阳性表达21例，阳性率为52.5%，癌旁细胞未见着色，良性增生组不表达。低分化组与高分化组之间差异不显著(χ2=1.73，P>0.05)，淋巴结转移阳性显著高于淋巴结转移阴性者(χ2=6.81，P<0.01)。
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2.4 PCNA，其阳性表达位于细胞核内。在本组甲状腺癌中的表达情况见表1，40例甲状腺癌PCNA阳性表达23例，阳性率为57.5%，癌旁细胞未见着色，良性增生组有2例表达，差异性极显著(χ2=13.12，P<0.005)。各不同分化组之间差异不明显(χ2=1.18，P>0.05)，淋巴结转移阳性者显著高于淋巴结转移阴性者(χ2=7.47，P<0.05)。3 讨论
甲状腺癌的发病率及死亡率均较低，但在头颈部恶性肿瘤中占首位。其在病理诊断工作中有较多的难点。随着免疫组织化学的发展，寻找新的肿瘤标志物是帮助解决这些难点的一种方向。P21是ras族癌基因编码的一种蛋白质，P21蛋白在细胞增殖中起信号调控作用，ras癌基因激活致使P21过量表达，可导致细胞生长失控和肿瘤发生。在细胞恶性转化过程中起着引发作用(1)。P21过量表达是一些癌发生的早期事件。
, 百拇医药
P53基因是一个抑癌基因，正常的P53基因称为野生型P53基因，正常细胞的P53蛋白表达很低，且半衰期短。异常的P53基因称为突变型P53基因，主要为突变和杂合性丢失，突变型P53蛋白其代谢稳定性高，可用常规免疫组化等方法进行检测(2)。通常认为免疫组化能检测到P53蛋白即存在P53基因突变。Zou等研究发现，P53突变可引起甲状腺癌变，其突变不仅加速肿瘤发展，而且能促使甲状腺癌向未分化甲状腺癌恶性转化。突变的P53可使受转染的细胞获得侵袭转移的能力(3，4)。
PCNA是一种DNA合成所必需的核蛋白，PCNA的合成和表达与细胞增殖状态有关，是细胞增殖活性指标，已广用于各种肿瘤研究(5)。甲状腺癌中PCNA的表达与浸润程度和淋巴结转移有关。本组检测结果揭示：P21、P53、PCNA表达对鉴别甲状腺肿瘤的良恶性有一定意义。结果还表明：P53、PCNA表达与甲状腺癌的浸润与否及淋巴结转移有关。证实突变的P53使受转染的细胞获得侵袭转移的能力。
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参考文献
1 顾凯华，汪鸿志，祝庆孚等.P53和P21在大肠肿瘤中的表达及其临床意义.中华内科杂志 1996；35(7)：475
2 王艳颖，宁晓明，程 慧等.109例大肠癌P53、P21表达及预后的病理学分析.实用肿瘤学杂志 1996；(1)：33
3 倪桂宝.甲状腺癌P53基因表达及意义.中国肿瘤临床与康复 1997；4(4)：22
4 范松青.P53基因在甲腺癌中的研究进展.国外医学内分泌学分册 1997；17(4)：204
5 邓志鸿.PCNA在肿瘤病理学上的应用.临床与实验病理学杂志 1994；10(4)：331, 百拇医药
单位：杨燕初 卓建红 广西柳州卫校病理教研室； 谢 群 广西柳州卫校附属医院病理科
关键词：甲状腺癌；免疫组化；肿瘤抑制基因
广西医学990509
摘要 目的：研究甲状腺癌P21、P53、PCNA表达及其意义。方法：应用SP免疫组化法检测40例甲状腺癌患者。结果：甲状腺癌中P21、P53、PCNA的阳性率分别为67.5%、52.5%和57.5%。P21、PCNA在癌中表达与在增生性病变中表达有显著差异(P<0.05)，P53仅在癌中表达，癌旁组织及增生性病变中无表达。P53和PCNA过度表达与浸润程度和淋巴结转移有关。结论：检测结果提示：P21、P53、PCNA表达对鉴别甲状腺的良、恶性病变有意义。P53、PCNA表达与癌的浸润、转移有关。
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Expression of P21，P53,PCNA in thyroid carcinoma and its significance
Yang Yanchu,Xie Qun,Zhuo Jianhong.
Guangxi liuzhou Health School(Liuzhou 545005)
Abstract Objective:To study the expression of P21、P53、PCNA in thyroid carcinoma and its significance.Methods:40 cases of thyroid carcinoma were studied by SP immunohistochemical technique.Results:The positive rate of P21、P53、PCNA in thyroid carcinoma was 67.5%,52.5% and 57.5% respectively.Significant difference between the expression of P21、PCNA in cancer and that in multiplication lesions was found(P<0.05).P53 expression was only found in cancer,but not in peritumoral tissues and multiplication lesions.Meanwhile,a significant correlation was found between P53、PCNA overexpression and the depth of invasion and lymph node metastasis.Conclusion:It is suggested that the expression of P21、P53、PCNA may help differeninate benign and malignant lesions of thyroid.The expression of P53、PCNA is related to invasion and metastasis of cancer.
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Key words Thyroid carcinoma;Immunohistochemistry;Tumor suppressor gene
本文采用SP免疫组化法观察40例甲状腺癌组织中P21、P53、PCNA蛋白的表达情况，探讨其与甲状腺癌的临床病理关系，寻找甲状腺癌诊断的免疫组化指标。
1 材料和方法
1.1 材料：收集本院1990年1月～1998年6月甲状腺癌手术切除标本40例，均经病理证实，部分病例做Tg、CT免疫组化染色。参照WHO(1988)甲状腺肿瘤组织学分型标准，其中乳头状腺癌21例、滤泡状腺癌14例、低分化癌3例、未分化癌2例。另选甲状腺瘤、结节性甲状腺肿、甲亢各7例作对照。全部病例术前未经放疗或化疗。所有标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，切片厚4μ。
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1.2 方法：SP免疫组化染色：抗P21抗体(F132)，工作浓度1∶50，抗P53抗体(DO-7)，工作浓度1∶50，抗PCNA抗体(PC10)，工作浓度1∶50，SP免疫组化试剂盒。试剂全部为美国Zymed公司产品，购于福州迈新公司。切片脱蜡，水化后，PBS冲洗(pH7.4)，按SP试剂盒说明书程序进行染色(室温20℃)。P53经微波处理后再行染色，DAB显色。用已知阳性切片作阳性对照。
1.3 结果判断：染色阳性信号呈棕黄色，每张切片双盲观测10个高倍视野，根据阳性细胞数量，阳性细胞>肿瘤细胞的15%，则判为阳性表达。
1.4 统计学处理：样本间比较，用卡方检验。
2 结果
2.1 P21、P53、PCNA在各组病例中同步检测结果见表1。
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表1 P21、P53、PCNA在甲状腺癌中的阳性表达 生物学指标
N
P21
P53
PCNA
n
%
n
%
n
%
组织类型
, 百拇医药
乳头状腺癌
21
15
71.43
9
42.86
11
47.62
滤泡状腺癌
14
9
64.29
8
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57.14
8
57.14
低分化腺癌
3
2
66.66
2
66.66
2
66.66
未分化腺癌
2
, 百拇医药
1
50.00
2
100.00
2
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甲状腺腺瘤
7
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14.28
0
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14.28
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结甲
7
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14.28
甲亢
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淋巴结转移
阳性组
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17
10
58.82
13
76.47
14
82.35
阴性组
23
17
73.91
8
34.78
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9
39.13
2.2 P21，其阳性表达位于细胞浆内。在本组甲状腺癌中的表达情况见表1，40例甲状腺癌P21阳性表达27例，阳性率为67.5%，癌旁上皮细胞可见弱阳性。良性增生有3例表达。腺癌各组织类别间无显著差异(χ2=0.37,P>0.05)。腺癌组与增生性病变组之间P21蛋白表达存在显著性差异(χ2=15.36，P<0.005)。
2.3 P53，其阳性表达位于细胞核内，胞浆偶见弱阳性。在本组甲状腺癌中表达情况见表1，40例甲状腺癌P53阳性表达21例，阳性率为52.5%，癌旁细胞未见着色，良性增生组不表达。低分化组与高分化组之间差异不显著(χ2=1.73，P>0.05)，淋巴结转移阳性显著高于淋巴结转移阴性者(χ2=6.81，P<0.01)。
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2.4 PCNA，其阳性表达位于细胞核内。在本组甲状腺癌中的表达情况见表1，40例甲状腺癌PCNA阳性表达23例，阳性率为57.5%，癌旁细胞未见着色，良性增生组有2例表达，差异性极显著(χ2=13.12，P<0.005)。各不同分化组之间差异不明显(χ2=1.18，P>0.05)，淋巴结转移阳性者显著高于淋巴结转移阴性者(χ2=7.47，P<0.05)。3 讨论
甲状腺癌的发病率及死亡率均较低，但在头颈部恶性肿瘤中占首位。其在病理诊断工作中有较多的难点。随着免疫组织化学的发展，寻找新的肿瘤标志物是帮助解决这些难点的一种方向。P21是ras族癌基因编码的一种蛋白质，P21蛋白在细胞增殖中起信号调控作用，ras癌基因激活致使P21过量表达，可导致细胞生长失控和肿瘤发生。在细胞恶性转化过程中起着引发作用(1)。P21过量表达是一些癌发生的早期事件。
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P53基因是一个抑癌基因，正常的P53基因称为野生型P53基因，正常细胞的P53蛋白表达很低，且半衰期短。异常的P53基因称为突变型P53基因，主要为突变和杂合性丢失，突变型P53蛋白其代谢稳定性高，可用常规免疫组化等方法进行检测(2)。通常认为免疫组化能检测到P53蛋白即存在P53基因突变。Zou等研究发现，P53突变可引起甲状腺癌变，其突变不仅加速肿瘤发展，而且能促使甲状腺癌向未分化甲状腺癌恶性转化。突变的P53可使受转染的细胞获得侵袭转移的能力(3，4)。
PCNA是一种DNA合成所必需的核蛋白，PCNA的合成和表达与细胞增殖状态有关，是细胞增殖活性指标，已广用于各种肿瘤研究(5)。甲状腺癌中PCNA的表达与浸润程度和淋巴结转移有关。本组检测结果揭示：P21、P53、PCNA表达对鉴别甲状腺肿瘤的良恶性有一定意义。结果还表明：P53、PCNA表达与甲状腺癌的浸润与否及淋巴结转移有关。证实突变的P53使受转染的细胞获得侵袭转移的能力。
, http://www.100md.com
参考文献
1 顾凯华，汪鸿志，祝庆孚等.P53和P21在大肠肿瘤中的表达及其临床意义.中华内科杂志 1996；35(7)：475
2 王艳颖，宁晓明，程 慧等.109例大肠癌P53、P21表达及预后的病理学分析.实用肿瘤学杂志 1996；(1)：33
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5 邓志鸿.PCNA在肿瘤病理学上的应用.临床与实验病理学杂志 1994；10(4)：331, 百拇医药