重组人促红素对老年慢性肾衰病人氧自由基及抗氧化酶活性的影响
作者：杜玉君 李秀江 徐学明
单位：白求恩医科大学第一临床学院肾内科，长春 130021
关键词：重组人促红素；氧自由基；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽过氧化物酶
中国老年学杂志990516 摘 要 目的 探讨重组人促红素(rH-EPO)对慢性肾衰患者体内氧自由基及抗氧化酶活性的影响。方法 测定19例老年慢性肾衰尿毒症期患者rH-EPO治疗前后血浆MDA、SOD及红细胞GSH-Px含量。结果 rH-EPO治疗后慢性肾衰病人MDA含量降低，SOD、GSH-Px活性升高。结论 rH-EPO纠正肾性贫血同时，可清除体内氧自由基，提高抗氧化酶活性。
The effects of recombinant human erythropoietin(rH-EPO) on oxygen free radical levels and the activities of antioxidases in chronic renal failure patients
, http://www.100md.com
Du Yujun, Li Xiujiang, Xu Xueming
The 1 st Affiliated Hospital of Norman Bethune University of Medical Science, Changchun 130021
Objective To study the effects of rH-EPO on the levels oxygen free radicals and the activities of antioxidases in chronic renal failure patients(CRF).Methods Contents of MDA and SOD in plasma, GSH-Px in erythrocytes in CRF patients were measured.Results The level of MDA was higher, the activitie of SOD and GSH-Px, was lower in CRF patients as compared with that in healthy controls. After twelve weeks of the treatment with rH-EPO, the levels of MDA decreased, the activities of SOD and GSH-Px incereased.Conclusions Decrease the MDA and increase the activities of SOD and GSH-Px can be acheived through improving the anemia of CRF patients treated with rH-EPO.
, 百拇医药
Key words rH-EPO MDA SOD GSH-Px
重组人促红素(rH-EPO)自1986年应用于临床，在纠正肾性贫血方面取得了成功，尤对老年慢性肾功能衰竭(CRF)患者更显其优越性。1992年以来，国外少数学者研究rH-EPO对氧自由基及其抗氧化酶活力的影响，结果不尽一致〔1，2〕，此方面研究国内未见报道。本文通过对rH-EPO治疗后CRF病人氧自由基代谢产物MDA、SOD及红细胞GSH-Px的变化分析，探讨rH-EPO对CRF病人氧自由基及抗氧化酶活性的影响。
1 对象和方法
1.1 研究对象 19例CRF尿毒症期患者，均为住院病人，男9例，女10例，年龄61～73岁，平均为64.7岁，rH-EPO每次2 000 U，每周2次皮下注射。健康组：20例市中心血站献血队员。
1.2 方法 19例CRF患者在治疗前及治疗12 w采血测定MDA、SOD、GSH-Px。在应用rH-EPO后4 w、8 w、12 w加做血常规。MDA：硫代巴比妥酸显色法，SOD：黄嘌呤氧化法，GSH-Px：比色定量法。测定用试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。rH-EPO由德国宝灵曼有限公司生产。各组数据均采用均数±标准差，显著性比较用t检验。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 rH-EPO治疗后RBC、HB、HCT变化 见表1。rH-EPO应用4 w、8 w、12 w后，RBC、HB、HCT逐渐升高，与用药前比较差异明显(P<0.01)。
表1 rH-EPO治疗前后RBC、HB、HCT变化(
±s)
RBC(×1012/L)
Hb(g/L)
HCT(%)
治疗前
1.79±0.98
, 百拇医药 54±9.2
17.5±3.8
治疗后4 w
2.01±0.58
64±9.0
20.3±1.9
8 w
2.79±0.63
73±13.1
22.9±1.9
12 w
3.00±0.231)
, 百拇医药
90±8.91)
28.9±2.41)
与治疗前比较1)P<0.01
2.2 rH-EPO对MDA、SOD、GSH-Px的影响 见表2。CRF患者rH-EPO治疗前MDA升高，SOD、GSH-Px活性降低，较健康组比较差异显著(P<0.05)，rH-EPO治疗后12 w，MDA降低，SOD、GSH-Px活性升高，较治疗前比较均有显著差异(P<0.05)。
表2 rH-EPO对MDA、SOD、GSH-Px的影响(±s)
MDA(μmol/L)
, http://www.100md.com SOD(μU/L)
GSH-Px(kU/L)
健康组
4.04±0.86
111.60±11.40
123.80±12.83
治疗前
5.73±0.831)
93.20±7.311)
109.72±3.141)
治疗后
, 百拇医药
4.90±0.082)
118.00±3.112)
128.12±2.082)
与健康组比较1)P<0.05，与治疗前比较2)P<0.05
3 讨论
氧自由基产生是有条件的。目前最受重视的为黄嘌呤氧化酶系统〔3〕，黄嘌呤氧化酶在催化次黄嘌呤和黄嘌呤的代谢中可产生氧自由基。现已证实，肾脏内存在黄嘌呤氧化酶，CRF时促红素生成减少，出现肾性贫血，组织缺血缺氧。肾脏为缺血敏感器官，此时能量生成障碍，细胞膜钠泵功能下降，使细胞内Ca2+浓度升高，Ca2+依赖的蛋白酶激活，既黄嘌呤氧化酶增多。另外，缺血状态下ATP分解成次黄嘌呤，为正常的100～300倍，可见缺血的肾组织内既有生成氧自由基的酶活性升高，又有该酶所需的底物之一次黄嘌呤的聚集。肾缺血时线粒体的结构和功能明显受损，且Fe2+含量增加，均加速氧自由基的生成。因此，缺血缺氧是CRF氧自由基生成的主要原因。而rH-EPO应用后，随着RBC、Hb升高，改善肾性贫血，同时改善机体组织细胞缺血缺氧，故氧自由基生成减少。
, http://www.100md.com
CRF时病人机体免疫功能低下，感染增多。Ward和Paul报道〔4，5〕，此时多核白细胞和巨噬细胞吞噬异物或被免疫复合物和补体激活时，产生一系列氧自由基，用以杀伤吞噬病原体。多核白细胞释放的髓过氧化物酶能促使H2O2与Cl-反应，生成具有强氧化活性的次氯酸和氯胺，进一步引起细胞受损。而rH-EPO可直接在体内刺激和调节B、T淋巴细胞功能，使CRF病人原本低下的免疫状态得以改善，抗病能力提高，感染减少，使通过白细胞产生氧自由基的机会减少。
CRF时由于缺血缺氧状态存在，组织内防御性酶类SOD、红细胞GSH-Px合成减少，且SOD是锌、铜依赖酶，GSH-Px是硒依赖酶。CRF病人体内微量元素缺乏，降低酶活性及酶蛋白含量，抗氧化能力下降。本试验rH-EPO用药前MDA升高，SOD、GSH-Px降低，充分证实此观点。CRF病人经rH-EPO治疗后，生活质量提高，食欲增强，微量元素缺乏在一定程度上得以纠正，此亦可能为rH-EPO降低氧自由基，提高抗氧化酶活性的机制之一。
, 百拇医药
rH-EPO可以改善及纠正肾性贫血，清除CRF病人氧自由基，提高抗氧化酶活力，故rH-EPO是CRF病人延缓肾功能进行性损害的药物之一。
作者简介：杜玉君，女，36岁，主治医师，硕士研究生
4 参考文献
1 Bozfakioglu S, Alptekin N, Seckin S et al.Red cell lipid peroxidation and antioxidant system in chronic renal patients treated with recombinant human erythropoietin.Nephron，1992；61：228
2 Zachee P, Ferrant A, Daelemans R et al.Oxidative injury to erythrocytes, cell rigidity and splenic hemolysis in hemodialyzed patients before and during erythropoietin treatment.Nephron，1993；65：288
, 百拇医药
3 Parks DA.Xanthine oxidase:biochemistry distributin and physiology.Acta Physiol Scand，1986；126(supp/548)：87
4 Ward PA.Host-defence mechanisms responsible for hung injury.J Allergy Clin Immunol，1986；78：373
5 Paul JL, Roch-Arveiller M, Man NK et al.Influence of uremia on polymorphonuclear leukocytes oxidative metabolism in end-stage renal disease and dialyzed patients.Nephron，1991；57：428
1998-09-07收稿
1999-03-01修回, 百拇医药
单位：白求恩医科大学第一临床学院肾内科，长春 130021
关键词：重组人促红素；氧自由基；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽过氧化物酶
中国老年学杂志990516 摘 要 目的 探讨重组人促红素(rH-EPO)对慢性肾衰患者体内氧自由基及抗氧化酶活性的影响。方法 测定19例老年慢性肾衰尿毒症期患者rH-EPO治疗前后血浆MDA、SOD及红细胞GSH-Px含量。结果 rH-EPO治疗后慢性肾衰病人MDA含量降低，SOD、GSH-Px活性升高。结论 rH-EPO纠正肾性贫血同时，可清除体内氧自由基，提高抗氧化酶活性。
The effects of recombinant human erythropoietin(rH-EPO) on oxygen free radical levels and the activities of antioxidases in chronic renal failure patients
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Du Yujun, Li Xiujiang, Xu Xueming
The 1 st Affiliated Hospital of Norman Bethune University of Medical Science, Changchun 130021
Objective To study the effects of rH-EPO on the levels oxygen free radicals and the activities of antioxidases in chronic renal failure patients(CRF).Methods Contents of MDA and SOD in plasma, GSH-Px in erythrocytes in CRF patients were measured.Results The level of MDA was higher, the activitie of SOD and GSH-Px, was lower in CRF patients as compared with that in healthy controls. After twelve weeks of the treatment with rH-EPO, the levels of MDA decreased, the activities of SOD and GSH-Px incereased.Conclusions Decrease the MDA and increase the activities of SOD and GSH-Px can be acheived through improving the anemia of CRF patients treated with rH-EPO.
, 百拇医药
Key words rH-EPO MDA SOD GSH-Px
重组人促红素(rH-EPO)自1986年应用于临床，在纠正肾性贫血方面取得了成功，尤对老年慢性肾功能衰竭(CRF)患者更显其优越性。1992年以来，国外少数学者研究rH-EPO对氧自由基及其抗氧化酶活力的影响，结果不尽一致〔1，2〕，此方面研究国内未见报道。本文通过对rH-EPO治疗后CRF病人氧自由基代谢产物MDA、SOD及红细胞GSH-Px的变化分析，探讨rH-EPO对CRF病人氧自由基及抗氧化酶活性的影响。
1 对象和方法
1.1 研究对象 19例CRF尿毒症期患者，均为住院病人，男9例，女10例，年龄61～73岁，平均为64.7岁，rH-EPO每次2 000 U，每周2次皮下注射。健康组：20例市中心血站献血队员。
1.2 方法 19例CRF患者在治疗前及治疗12 w采血测定MDA、SOD、GSH-Px。在应用rH-EPO后4 w、8 w、12 w加做血常规。MDA：硫代巴比妥酸显色法，SOD：黄嘌呤氧化法，GSH-Px：比色定量法。测定用试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。rH-EPO由德国宝灵曼有限公司生产。各组数据均采用均数±标准差，显著性比较用t检验。
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2 结果
2.1 rH-EPO治疗后RBC、HB、HCT变化 见表1。rH-EPO应用4 w、8 w、12 w后，RBC、HB、HCT逐渐升高，与用药前比较差异明显(P<0.01)。
表1 rH-EPO治疗前后RBC、HB、HCT变化(
±s)RBC(×1012/L)
Hb(g/L)
HCT(%)
治疗前
1.79±0.98
, 百拇医药 54±9.2
17.5±3.8
治疗后4 w
2.01±0.58
64±9.0
20.3±1.9
8 w
2.79±0.63
73±13.1
22.9±1.9
12 w
3.00±0.231)
, 百拇医药
90±8.91)
28.9±2.41)
与治疗前比较1)P<0.01
2.2 rH-EPO对MDA、SOD、GSH-Px的影响 见表2。CRF患者rH-EPO治疗前MDA升高，SOD、GSH-Px活性降低，较健康组比较差异显著(P<0.05)，rH-EPO治疗后12 w，MDA降低，SOD、GSH-Px活性升高，较治疗前比较均有显著差异(P<0.05)。
表2 rH-EPO对MDA、SOD、GSH-Px的影响(
±s)MDA(μmol/L)
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GSH-Px(kU/L)
健康组
4.04±0.86
111.60±11.40
123.80±12.83
治疗前
5.73±0.831)
93.20±7.311)
109.72±3.141)
治疗后
, 百拇医药
4.90±0.082)
118.00±3.112)
128.12±2.082)
与健康组比较1)P<0.05，与治疗前比较2)P<0.05
3 讨论
氧自由基产生是有条件的。目前最受重视的为黄嘌呤氧化酶系统〔3〕，黄嘌呤氧化酶在催化次黄嘌呤和黄嘌呤的代谢中可产生氧自由基。现已证实，肾脏内存在黄嘌呤氧化酶，CRF时促红素生成减少，出现肾性贫血，组织缺血缺氧。肾脏为缺血敏感器官，此时能量生成障碍，细胞膜钠泵功能下降，使细胞内Ca2+浓度升高，Ca2+依赖的蛋白酶激活，既黄嘌呤氧化酶增多。另外，缺血状态下ATP分解成次黄嘌呤，为正常的100～300倍，可见缺血的肾组织内既有生成氧自由基的酶活性升高，又有该酶所需的底物之一次黄嘌呤的聚集。肾缺血时线粒体的结构和功能明显受损，且Fe2+含量增加，均加速氧自由基的生成。因此，缺血缺氧是CRF氧自由基生成的主要原因。而rH-EPO应用后，随着RBC、Hb升高，改善肾性贫血，同时改善机体组织细胞缺血缺氧，故氧自由基生成减少。
, http://www.100md.com
CRF时病人机体免疫功能低下，感染增多。Ward和Paul报道〔4，5〕，此时多核白细胞和巨噬细胞吞噬异物或被免疫复合物和补体激活时，产生一系列氧自由基，用以杀伤吞噬病原体。多核白细胞释放的髓过氧化物酶能促使H2O2与Cl-反应，生成具有强氧化活性的次氯酸和氯胺，进一步引起细胞受损。而rH-EPO可直接在体内刺激和调节B、T淋巴细胞功能，使CRF病人原本低下的免疫状态得以改善，抗病能力提高，感染减少，使通过白细胞产生氧自由基的机会减少。
CRF时由于缺血缺氧状态存在，组织内防御性酶类SOD、红细胞GSH-Px合成减少，且SOD是锌、铜依赖酶，GSH-Px是硒依赖酶。CRF病人体内微量元素缺乏，降低酶活性及酶蛋白含量，抗氧化能力下降。本试验rH-EPO用药前MDA升高，SOD、GSH-Px降低，充分证实此观点。CRF病人经rH-EPO治疗后，生活质量提高，食欲增强，微量元素缺乏在一定程度上得以纠正，此亦可能为rH-EPO降低氧自由基，提高抗氧化酶活性的机制之一。
, 百拇医药
rH-EPO可以改善及纠正肾性贫血，清除CRF病人氧自由基，提高抗氧化酶活力，故rH-EPO是CRF病人延缓肾功能进行性损害的药物之一。
作者简介：杜玉君，女，36岁，主治医师，硕士研究生
4 参考文献
1 Bozfakioglu S, Alptekin N, Seckin S et al.Red cell lipid peroxidation and antioxidant system in chronic renal patients treated with recombinant human erythropoietin.Nephron，1992；61：228
2 Zachee P, Ferrant A, Daelemans R et al.Oxidative injury to erythrocytes, cell rigidity and splenic hemolysis in hemodialyzed patients before and during erythropoietin treatment.Nephron，1993；65：288
, 百拇医药
3 Parks DA.Xanthine oxidase:biochemistry distributin and physiology.Acta Physiol Scand，1986；126(supp/548)：87
4 Ward PA.Host-defence mechanisms responsible for hung injury.J Allergy Clin Immunol，1986；78：373
5 Paul JL, Roch-Arveiller M, Man NK et al.Influence of uremia on polymorphonuclear leukocytes oxidative metabolism in end-stage renal disease and dialyzed patients.Nephron，1991；57：428
1998-09-07收稿
1999-03-01修回, 百拇医药