细胞因子和一氧化氮与肝硬化病情变化的关系
作者：周伏喜 卢放根 吴小平 凌奇荷 林礼茂
单位：第二附属医院消化内科 长沙 410011
关键词：一氧化氮；Ⅲ型前胶原；白细胞介素8；白细胞介素12；肿瘤坏死因子；肝硬化
湖南医科大学学报990526 中国图书分类号 R575.2
由于促使肝硬化从代偿期向失代偿期发展的因素尚不十分清楚，给肝硬化治疗带来了一定的困难。肝硬化失代偿期的主要病理机制是肝细胞功能障碍、广泛的侧枝循环形成以及肝纤维化。研究表明，一氧化氮(NO)对肝细胞有损害作用，可加重门脉血流动力学紊乱[1]，同时发现某些炎性细胞因子如IL-1β，TNFα及IL-8等与NO产生有关[2]，其中TNFα及IL-1β等对肝纤维化的影响已比较明确，但IL-8及IL-12对肝纤维化的影响研究甚少。为此，笔者检测了肝硬化血清NO，IL-8，IL-12及TNFα水平，旨在探讨它们与反映肝细胞功能的血清白蛋白和反映肝纤维化的PCⅢ之间的关系。
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1 对象与方法
1.1 对象
肝硬化患者35例，符合临床诊断标准，男26例，女9例，年龄31～65岁。急性肝炎25例，男17例，女8例，年龄20～50岁，诊断标准参照1995年病毒性肝炎防治方案修改讨论稿(北京)。健康志愿者30例，男19例，女11例，年龄28～60岁。
1.2 方法
空腹静脉采血4ml，尽快分离血清并分装，置-20℃保存待测。
1.2.1 IL-8，IL-12及TNFα的测定 用ELISA方法检测，操作按说明书方法。
1.2.2 PCⅢ的测定 用放免法，操作按说明书方法。
1.2.3 血清NO的测定 参照Griess体液NO检测法稍加修改，血清去蛋白后，用镀铜镉还原后加入Griess试剂显色[3]。
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1.3 统计学处理
数据用均数±标准差(
±s)表示，两组之间比较用t检验，多组均数间比较用单因素F检验。
2 结 果
2.1 各检验指标浓度的比较
表1示肝炎组仅TNFα和IL-8显著高于正常值(P<0.01)。而肝硬化组 NO，IL-8，TNFα，IL-12和PCⅢ均显著高于对照组(P<0.05)。
表1 各检测指标浓度的比较(±s) 组别
例数
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NO(μmol.L-1)
IL-12(pg.ml-1)
IL-8(pg.ml-1)
TNFα(pg.ml-1)
PCⅢ(μg.L-1)
正常对照
30
37.02±12.85
34.57±11.46
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3.64±0.46
131.19±19.14
114.50±51.08
急性肝炎
25
47.86±22.38
42.94±11.49
15.02±8.04①
328.02±162.88①
148.29±46.48
肝硬化
, 百拇医药
35
73.43±22.60②
116.26±31.12②
36.49±8.73②
611.90±274.26②
176.14±41.58②
①与对照组比较P<0.01；②与对照组比较P<0.05
2.2 肝硬化患者血清白蛋白与PCⅢ，NO，IL-12，IL-8及TNFα的关系
表2示白蛋白低于30g.L-1者，其NO，IL-8，TNFα及PCⅢ水平明显高于白蛋白水平高于30g.L-1者(P<0.05)，而IL-12则相反。
, 百拇医药
表2 肝硬化患者血清白蛋白与NO，IL-12，IL-8，TNFα及PCⅢ的关系(±s) 组别
例数
NO(μmol.L-1)
IL-12(pg.ml-1)
IL-8(pg.ml-1)
TNFα(pg.ml-1)
PCⅢ(μg.L-1)
, 百拇医药
<30g.L-1
20
86.06±38.73①
94.71±25.96
52.87±18.14①
775.67±253.28①
189.71±68.74①
≥30g.L-1
15
68.44±35.02
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196.36±40.82②
32.36±15.87
427.65±226.24
159.24±43.23
①与白蛋白≥30g.L-1组比较P<0.05；②与白蛋白30g.L-1值比较P<0.01
3 讨 论
肝硬化的主要病理改变是肝纤维化、肝细胞数目减少及侧枝循环形成，凡是损伤肝细胞并加重肝纤维化的因子均可使肝硬化的病情加剧。近年来研究最多的是加速肝细胞损伤和肝纤维化的某些因子和NO[4]。研究发现，某些细胞因子可介导肝细胞的损伤及纤维化，NO加重肝细胞的损伤[1]，而某些细胞因子可促使NO的产生[2]。本组肝硬化患者IL-12，IL-8及TNFα均增高，均可使NO的生成增多，而肝内eNOS相对少，导致肝内外NO比例失衡，造成肝外血管扩张，肝内血管相对不扩张，加剧门脉高压和肝细胞损伤，从而使肝硬化病情恶化。由于IL-8和TNFα水平既在急性肝炎时增高，亦在肝硬化血清白蛋白水平低的患者中增高，故肝硬化时IL-8和TNFα可能直接损害肝细胞，使肝硬化病情恶化。
, 百拇医药
研究表明，TNFα可促使PCⅢ的产生。本文肝硬化患者中细胞因子IL-8，IL-12，TNFα及NO与PCⅢ水平平行增高，说明IL-8，IL-12，NO与PCⅢ的产生有关，降低IL-8，IL-12，NO及TNFα血清水平可能延缓肝纤维化进程的作用。在临床上，实施减少这些细胞因子和NO的治疗手段将有助于缓解肝硬化的病情。
参考文献
1 Gardner CR, Heck DE, Yang CS, et al. Role of nitric oxide in acetaminophen-induced hepatotoxicity in the rat. Hepatology, 1998,27:748～754
2 Stevenson MM, Tam MF, Wolf SF, et al. IL-12 induced protection against bloodstage plasmodium chabaudi AS requires IFN and TNFα and occurs via a nitric oxide-dependent mechanism. J Immunol, 1995,155:2524～2526
, http://www.100md.com
3 卢放根，方建珍，霍继荣，等.不同腹水中一氧化氮，一氧化氮合成酶和肿瘤坏死因子的研究.中华内科杂志，1996，35：744～747
4 Zide KZ, Lotxova E, Frankova D, et al. Indirect stimulatory effects of murine IL-12 on invitro production of nitric oxide by mouse peritoneal cells. J Interferon cytokine Res, 1996,16:389～395
5 Rockey DC, Chunt JJ. Reduced nitric oxide production by endothelial cells in cirrhotic rat liver: Endothelial function in portal hypertension. Gastroenterology, 1986,114:344～351, 百拇医药
单位：第二附属医院消化内科 长沙 410011
关键词：一氧化氮；Ⅲ型前胶原；白细胞介素8；白细胞介素12；肿瘤坏死因子；肝硬化
湖南医科大学学报990526 中国图书分类号 R575.2
由于促使肝硬化从代偿期向失代偿期发展的因素尚不十分清楚，给肝硬化治疗带来了一定的困难。肝硬化失代偿期的主要病理机制是肝细胞功能障碍、广泛的侧枝循环形成以及肝纤维化。研究表明，一氧化氮(NO)对肝细胞有损害作用，可加重门脉血流动力学紊乱[1]，同时发现某些炎性细胞因子如IL-1β，TNFα及IL-8等与NO产生有关[2]，其中TNFα及IL-1β等对肝纤维化的影响已比较明确，但IL-8及IL-12对肝纤维化的影响研究甚少。为此，笔者检测了肝硬化血清NO，IL-8，IL-12及TNFα水平，旨在探讨它们与反映肝细胞功能的血清白蛋白和反映肝纤维化的PCⅢ之间的关系。
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1 对象与方法
1.1 对象
肝硬化患者35例，符合临床诊断标准，男26例，女9例，年龄31～65岁。急性肝炎25例，男17例，女8例，年龄20～50岁，诊断标准参照1995年病毒性肝炎防治方案修改讨论稿(北京)。健康志愿者30例，男19例，女11例，年龄28～60岁。
1.2 方法
空腹静脉采血4ml，尽快分离血清并分装，置-20℃保存待测。
1.2.1 IL-8，IL-12及TNFα的测定 用ELISA方法检测，操作按说明书方法。
1.2.2 PCⅢ的测定 用放免法，操作按说明书方法。
1.2.3 血清NO的测定 参照Griess体液NO检测法稍加修改，血清去蛋白后，用镀铜镉还原后加入Griess试剂显色[3]。
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1.3 统计学处理
数据用均数±标准差(
±s)表示，两组之间比较用t检验，多组均数间比较用单因素F检验。2 结 果
2.1 各检验指标浓度的比较
表1示肝炎组仅TNFα和IL-8显著高于正常值(P<0.01)。而肝硬化组 NO，IL-8，TNFα，IL-12和PCⅢ均显著高于对照组(P<0.05)。
表1 各检测指标浓度的比较(
±s) 组别例数
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NO(μmol.L-1)
IL-12(pg.ml-1)
IL-8(pg.ml-1)
TNFα(pg.ml-1)
PCⅢ(μg.L-1)
正常对照
30
37.02±12.85
34.57±11.46
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3.64±0.46
131.19±19.14
114.50±51.08
急性肝炎
25
47.86±22.38
42.94±11.49
15.02±8.04①
328.02±162.88①
148.29±46.48
肝硬化
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35
73.43±22.60②
116.26±31.12②
36.49±8.73②
611.90±274.26②
176.14±41.58②
①与对照组比较P<0.01；②与对照组比较P<0.05
2.2 肝硬化患者血清白蛋白与PCⅢ，NO，IL-12，IL-8及TNFα的关系
表2示白蛋白低于30g.L-1者，其NO，IL-8，TNFα及PCⅢ水平明显高于白蛋白水平高于30g.L-1者(P<0.05)，而IL-12则相反。
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表2 肝硬化患者血清白蛋白与NO，IL-12，IL-8，TNFα及PCⅢ的关系(
±s) 组别例数
NO(μmol.L-1)
IL-12(pg.ml-1)
IL-8(pg.ml-1)
TNFα(pg.ml-1)
PCⅢ(μg.L-1)
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<30g.L-1
20
86.06±38.73①
94.71±25.96
52.87±18.14①
775.67±253.28①
189.71±68.74①
≥30g.L-1
15
68.44±35.02
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196.36±40.82②
32.36±15.87
427.65±226.24
159.24±43.23
①与白蛋白≥30g.L-1组比较P<0.05；②与白蛋白30g.L-1值比较P<0.01
3 讨 论
肝硬化的主要病理改变是肝纤维化、肝细胞数目减少及侧枝循环形成，凡是损伤肝细胞并加重肝纤维化的因子均可使肝硬化的病情加剧。近年来研究最多的是加速肝细胞损伤和肝纤维化的某些因子和NO[4]。研究发现，某些细胞因子可介导肝细胞的损伤及纤维化，NO加重肝细胞的损伤[1]，而某些细胞因子可促使NO的产生[2]。本组肝硬化患者IL-12，IL-8及TNFα均增高，均可使NO的生成增多，而肝内eNOS相对少，导致肝内外NO比例失衡，造成肝外血管扩张，肝内血管相对不扩张，加剧门脉高压和肝细胞损伤，从而使肝硬化病情恶化。由于IL-8和TNFα水平既在急性肝炎时增高，亦在肝硬化血清白蛋白水平低的患者中增高，故肝硬化时IL-8和TNFα可能直接损害肝细胞，使肝硬化病情恶化。
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研究表明，TNFα可促使PCⅢ的产生。本文肝硬化患者中细胞因子IL-8，IL-12，TNFα及NO与PCⅢ水平平行增高，说明IL-8，IL-12，NO与PCⅢ的产生有关，降低IL-8，IL-12，NO及TNFα血清水平可能延缓肝纤维化进程的作用。在临床上，实施减少这些细胞因子和NO的治疗手段将有助于缓解肝硬化的病情。
参考文献
1 Gardner CR, Heck DE, Yang CS, et al. Role of nitric oxide in acetaminophen-induced hepatotoxicity in the rat. Hepatology, 1998,27:748～754
2 Stevenson MM, Tam MF, Wolf SF, et al. IL-12 induced protection against bloodstage plasmodium chabaudi AS requires IFN and TNFα and occurs via a nitric oxide-dependent mechanism. J Immunol, 1995,155:2524～2526
, http://www.100md.com
3 卢放根，方建珍，霍继荣，等.不同腹水中一氧化氮，一氧化氮合成酶和肿瘤坏死因子的研究.中华内科杂志，1996，35：744～747
4 Zide KZ, Lotxova E, Frankova D, et al. Indirect stimulatory effects of murine IL-12 on invitro production of nitric oxide by mouse peritoneal cells. J Interferon cytokine Res, 1996,16:389～395
5 Rockey DC, Chunt JJ. Reduced nitric oxide production by endothelial cells in cirrhotic rat liver: Endothelial function in portal hypertension. Gastroenterology, 1986,114:344～351, 百拇医药