微波辐射快速制作常规制片及染色的经验
作者：王宗前 贺光友
单位：第三军医大学附属西南医院病理科 重庆，400038
关键词：微波；制片；染色
Experience in quick routine sections and staining by microwave treatmentExperience in quick routine sections and staining by microwave treatment
提 要 目的：探讨应用微波辐射处理进行常规制片与染色的方法。方法：选取不同活检标本，分别浸泡于蒸馏水、10%福尔马林及生理盐水中，在制片及染色的过程中进行微波处理。结果：应用微波处理标本使制片及染色所需时间显著减少，生理盐水浸泡标本微波处理效果好，不同组织所需温度不同。结论：应用微波处理可以减少制片及染色时间，且效果很好，并能使医生及时作出诊断及治疗，减轻病人痛苦。
, http://www.100md.com
中图法分类号 R361;R454.1
自Mayers1970年首次报告应用微波辐射对组织进行固定以来，揭开了微波在病理技术中应用的序幕[1]。近几年来，微波技术在病理各领域已广泛应用于组织的脱水透明、包埋、脱蜡[2]、染色及冰冻切片的干燥固定等[3]。微波技术不但提高了病理技术的质量，也缩短了样品制备或染色的过程。我科于1995年开始将微波辐射应用于病理手术标本，通过反复实验摸索，已获得较满意的结果，现总结如下。
1 材料和方法
1.1 材料
采用我院手术切除的活检标本，包括：胃肠、肝、脾、肺、肾、脑、胆囊、子宫等脏器组织，一般实体组织切成10mm×10mm×2mm大小，囊壁组织为20mm×2mm×囊壁厚度。
, 百拇医药
微波炉：Galanz微波炉，频率2.45GHz,功率800W。
1.2 操作方法
1.2.1固定 新鲜组织或事先被10%福尔马林固定的标本，取材后放入塑料盒中，加入生理盐水使组织块完全浸泡其中。微波辐射一般加热到60℃左右，时间约2～3min。
1.2.2 脱水 新鲜组织经微波固定后，放入无水乙醇中用微波加热，温度62℃～64℃，2min×2次；如组织是经福尔马林固定的，在入无水乙醇前先用70%、80%、95%酒精进行短暂的处理，然后进入无水乙醇用微波辐射脱水，温度和时间同前。
1.2.3 透明 组织块脱水后先进入正丁醇处理，微波辐射2min×2次，温度62℃～64℃；再经三氯甲烷透明，时间2min，温度同前。
1.2.4 浸蜡 组织块放入预热熔化的石蜡中，微波辐射4min，温度为64℃～66℃。常规石蜡包埋、切片。
, 百拇医药
1.2.5 染色 苏木素和伊红液微波照射加热至35℃～40℃，切片置于苏木素液染色2～3min，再入伊红染色1～2min，封片观察。
2 讨论
微波技术之所以应用到病理工作中，其主要原理是利用微波高频产生的热效应及增加了内部分子、外部化学物质的运动和弥散，使组织的反应能力加强，故可提高病理技术的质量，并大大缩短整个制片过程。我们采用微波辐射固定、脱水、透明、包埋、染色全过程可在20min左右完成。其制片效果与24 h完成的常规制片一样满意。
在应用微波辐射固定组织时，取材组织块大小十分重要。虽然微波能对组织均匀产热，加速其内部分子的运动，但因微波频率相当短，对组织的穿透力却很小，因此组织标本不能太大，一般在10mm×10mm×2mm为宜。
微波固定组织时，温度的高低将直接影响到组织固定的质量。各器官组织的自身成份特点不一，电子密度不一，固定的需要的温度也不完全一样。有人认为各组织的最佳固定温度为：肝70℃、肾77℃、肺77℃；而也有的则认为微波固定温度一般在58℃～62℃范围均能获得满意的结果。我们认为一般组织如肝、肺、肾、脾等组织最佳温度在60℃，脑组织微波固定温度较高，约75℃～80℃，胃肠较低，50℃左右为宜。但由于各自所用的微波炉型号，功率不同，各实验室条件也不尽相同，因此微波固定温度的选择差异也较大。
, 百拇医药
微波辐射的固定剂选择也非常重要，Leong等发现把组织块分别浸入到10%福尔马林、蒸馏水和生理盐水中，用微波辐射固定，结果用生理盐水固定者效果较前两者佳。我们的结果与Leong的报道相一致。
我们在透明时加入正丁醇，因其能起到脱水和透明的双重效果，也可克服组织收缩变脆变硬。此外，微波固定要求新鲜组织必须完全浸入生理盐水中。
作者简介：王宗前，男，46岁，主管技师
参考文献
1 Mayers C P.Histological fixation by microwave heating.J Clin Pathol,1970,23(3):273
2 潘美华，王晓秋.微波技术在快速石蜡切片中应用.临床与实验病理学杂志，1993，9(3)：216
3 惠延平，杨淑杰，刘受平.微波固定技术在冰冻切片中的应用.中华病理学杂志，1994，23(3)：188
(收稿：1998-02-19；修回：1998-10-27), 百拇医药
单位：第三军医大学附属西南医院病理科 重庆，400038
关键词：微波；制片；染色
Experience in quick routine sections and staining by microwave treatmentExperience in quick routine sections and staining by microwave treatment
提 要 目的：探讨应用微波辐射处理进行常规制片与染色的方法。方法：选取不同活检标本，分别浸泡于蒸馏水、10%福尔马林及生理盐水中，在制片及染色的过程中进行微波处理。结果：应用微波处理标本使制片及染色所需时间显著减少，生理盐水浸泡标本微波处理效果好，不同组织所需温度不同。结论：应用微波处理可以减少制片及染色时间，且效果很好，并能使医生及时作出诊断及治疗，减轻病人痛苦。
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中图法分类号 R361;R454.1
自Mayers1970年首次报告应用微波辐射对组织进行固定以来，揭开了微波在病理技术中应用的序幕[1]。近几年来，微波技术在病理各领域已广泛应用于组织的脱水透明、包埋、脱蜡[2]、染色及冰冻切片的干燥固定等[3]。微波技术不但提高了病理技术的质量，也缩短了样品制备或染色的过程。我科于1995年开始将微波辐射应用于病理手术标本，通过反复实验摸索，已获得较满意的结果，现总结如下。
1 材料和方法
1.1 材料
采用我院手术切除的活检标本，包括：胃肠、肝、脾、肺、肾、脑、胆囊、子宫等脏器组织，一般实体组织切成10mm×10mm×2mm大小，囊壁组织为20mm×2mm×囊壁厚度。
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微波炉：Galanz微波炉，频率2.45GHz,功率800W。
1.2 操作方法
1.2.1固定 新鲜组织或事先被10%福尔马林固定的标本，取材后放入塑料盒中，加入生理盐水使组织块完全浸泡其中。微波辐射一般加热到60℃左右，时间约2～3min。
1.2.2 脱水 新鲜组织经微波固定后，放入无水乙醇中用微波加热，温度62℃～64℃，2min×2次；如组织是经福尔马林固定的，在入无水乙醇前先用70%、80%、95%酒精进行短暂的处理，然后进入无水乙醇用微波辐射脱水，温度和时间同前。
1.2.3 透明 组织块脱水后先进入正丁醇处理，微波辐射2min×2次，温度62℃～64℃；再经三氯甲烷透明，时间2min，温度同前。
1.2.4 浸蜡 组织块放入预热熔化的石蜡中，微波辐射4min，温度为64℃～66℃。常规石蜡包埋、切片。
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1.2.5 染色 苏木素和伊红液微波照射加热至35℃～40℃，切片置于苏木素液染色2～3min，再入伊红染色1～2min，封片观察。
2 讨论
微波技术之所以应用到病理工作中，其主要原理是利用微波高频产生的热效应及增加了内部分子、外部化学物质的运动和弥散，使组织的反应能力加强，故可提高病理技术的质量，并大大缩短整个制片过程。我们采用微波辐射固定、脱水、透明、包埋、染色全过程可在20min左右完成。其制片效果与24 h完成的常规制片一样满意。
在应用微波辐射固定组织时，取材组织块大小十分重要。虽然微波能对组织均匀产热，加速其内部分子的运动，但因微波频率相当短，对组织的穿透力却很小，因此组织标本不能太大，一般在10mm×10mm×2mm为宜。
微波固定组织时，温度的高低将直接影响到组织固定的质量。各器官组织的自身成份特点不一，电子密度不一，固定的需要的温度也不完全一样。有人认为各组织的最佳固定温度为：肝70℃、肾77℃、肺77℃；而也有的则认为微波固定温度一般在58℃～62℃范围均能获得满意的结果。我们认为一般组织如肝、肺、肾、脾等组织最佳温度在60℃，脑组织微波固定温度较高，约75℃～80℃，胃肠较低，50℃左右为宜。但由于各自所用的微波炉型号，功率不同，各实验室条件也不尽相同，因此微波固定温度的选择差异也较大。
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微波辐射的固定剂选择也非常重要，Leong等发现把组织块分别浸入到10%福尔马林、蒸馏水和生理盐水中，用微波辐射固定，结果用生理盐水固定者效果较前两者佳。我们的结果与Leong的报道相一致。
我们在透明时加入正丁醇，因其能起到脱水和透明的双重效果，也可克服组织收缩变脆变硬。此外，微波固定要求新鲜组织必须完全浸入生理盐水中。
作者简介：王宗前，男，46岁，主管技师
参考文献
1 Mayers C P.Histological fixation by microwave heating.J Clin Pathol,1970,23(3):273
2 潘美华，王晓秋.微波技术在快速石蜡切片中应用.临床与实验病理学杂志，1993，9(3)：216
3 惠延平，杨淑杰，刘受平.微波固定技术在冰冻切片中的应用.中华病理学杂志，1994，23(3)：188
(收稿：1998-02-19；修回：1998-10-27), 百拇医药