改良制片法在肾穿刺标本快速诊断中的应用
作者：周展眉 王国保 王 力 耿 舰
单位：周展眉 王国保 王 力 第一军医大学 南方医院肾内科，广州，510515；耿 舰 第一军医大学 病理教研室，广州，510515
关键词：肾穿刺；病理；制片法
第一军医大学学报990544 摘要：目的 肾穿刺标本常规制片时间长、步骤繁琐，故本研究探讨一种肾穿刺组织快速制片的新方法。材料与方法 25例肾组织标本用微波固定，酒精-环己酮混合液快速脱水、包埋切片。结果 制片时间仅为1.2 h，约是经典方法的1/5，且染色效果好，结构清晰。结论 这种改良的制片法缩短了制片时间，有助于疾病的快速诊断，是一种值得推广的新技术。
中图分类号：R692
肾穿刺组织光镜检查是目前确诊肾脏疾病最常用和可靠的方法。由于肾活检组织标本小、切片薄，在固定、浸蜡、包埋、切片及染色等方面要求较高。为此，我们改进了常规制片的方法，效果甚好，现介绍如下：
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 取材 肾穿刺所获得的组织25例，其中男15例，女10例。
1.2 微波辐射 采用Whirlpool VIP20型家用型微波炉，输出功率900 W，设有6个微波选择，辐射标本及小瓶放在微波炉中央，四周放置装有200 ml水的烧杯以控制炉温。
1.3 操作步骤 (1)将肾组织放入2 ml升汞-福尔马林液，固定5 min后放入2 ml Duboscq-Brasil液内进行微波固定，微波选取90 W辐射强度，辐射时间为1.5 min。固定液温度为45℃。(2)入75%酒精溶液，振动清洗3 min×2。(3)入纯酒精-环己酮混合液(4:1)中10 min×2。(4)入氯仿溶液中10 min。(5)最后放入已熔好的石蜡(熔点为58～60℃)中30 min。取出组织，包埋于同熔点的石蜡，进行切片及常规染色。
, 百拇医药 2 结果和讨论
经过25例肾穿刺组织的试用，以此制片法制作的蜡块均能连续切片，不引起组织的收缩硬化，从而避免了切片困难。HE、PAS、Masson及PASM等染色观察，组织结构清晰，效果满意。经计算，改良法仅用1.2 h，约为传统方法的1/5。改良法具备诸多的优点，如步骤少、时间短、成本低、操作简便、试剂易得、效果理想等。
组织固定、脱水、透明是石蜡切片法的特有步骤，较易产生瑕疵，故一直处在改进之中。改进的目的是为了提高工作效率，适应临床发展的需要。
本研究发现，肾组织经微波辐射后，更易切出1μm的薄片，可满足病理诊断的要求。这与微波辐射既保持了组织的柔韧性，又增加了组织的硬度有关。微波辐射后组织内的各种细胞仍保持完好形态，且着色力增强。
纯酒精、环己酮、氯仿是病理制片中较普遍的三种试剂。纯酒精为最常用的脱水剂，脱水能力强，并能使组织硬化，但缺点是易使组织收缩变脆。环己酮沸点140℃、冰点-40℃，比重与水相似，无毒，可与苯、二甲苯、氯仿等有机溶剂混合，也为石蜡溶剂，可代替纯酒精脱水而直接入石蜡，组织不会变硬，不需再经二甲苯透明，其缺点是脱水透明速度较慢。氯仿的透明能力比二甲苯、苯差，不易使组织变脆，能溶于醇、醚、苯等，缺点是透明速度较慢。根据纯酒精、环己酮、氯仿的各自特点，按比例混合，可取长补短。纯酒精环己酮混合液主要作用是脱水，同时兼有固定、透明作用，可防止单纯的纯酒精引起组织的过度收缩。氯仿主要起透明作用，不易使组织变脆。在上述两种液体中，放置时间长短对组织影响较小。一般来讲，肾穿刺活检组织放入纯酒精环己酮液中20 min就可以达到脱水和半透明的目的，接着转入氯仿中10 min即可透明。
作者简介：周展眉，女，1971年出生；第三军医大学医学检验(函授)大专；技师；电话85141594
(收稿日期：1998-12-02), 百拇医药
单位：周展眉 王国保 王 力 第一军医大学 南方医院肾内科，广州，510515；耿 舰 第一军医大学 病理教研室，广州，510515
关键词：肾穿刺；病理；制片法
第一军医大学学报990544 摘要：目的 肾穿刺标本常规制片时间长、步骤繁琐，故本研究探讨一种肾穿刺组织快速制片的新方法。材料与方法 25例肾组织标本用微波固定，酒精-环己酮混合液快速脱水、包埋切片。结果 制片时间仅为1.2 h，约是经典方法的1/5，且染色效果好，结构清晰。结论 这种改良的制片法缩短了制片时间，有助于疾病的快速诊断，是一种值得推广的新技术。
中图分类号：R692
肾穿刺组织光镜检查是目前确诊肾脏疾病最常用和可靠的方法。由于肾活检组织标本小、切片薄，在固定、浸蜡、包埋、切片及染色等方面要求较高。为此，我们改进了常规制片的方法，效果甚好，现介绍如下：
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 取材 肾穿刺所获得的组织25例，其中男15例，女10例。
1.2 微波辐射 采用Whirlpool VIP20型家用型微波炉，输出功率900 W，设有6个微波选择，辐射标本及小瓶放在微波炉中央，四周放置装有200 ml水的烧杯以控制炉温。
1.3 操作步骤 (1)将肾组织放入2 ml升汞-福尔马林液，固定5 min后放入2 ml Duboscq-Brasil液内进行微波固定，微波选取90 W辐射强度，辐射时间为1.5 min。固定液温度为45℃。(2)入75%酒精溶液，振动清洗3 min×2。(3)入纯酒精-环己酮混合液(4:1)中10 min×2。(4)入氯仿溶液中10 min。(5)最后放入已熔好的石蜡(熔点为58～60℃)中30 min。取出组织，包埋于同熔点的石蜡，进行切片及常规染色。
, 百拇医药 2 结果和讨论
经过25例肾穿刺组织的试用，以此制片法制作的蜡块均能连续切片，不引起组织的收缩硬化，从而避免了切片困难。HE、PAS、Masson及PASM等染色观察，组织结构清晰，效果满意。经计算，改良法仅用1.2 h，约为传统方法的1/5。改良法具备诸多的优点，如步骤少、时间短、成本低、操作简便、试剂易得、效果理想等。
组织固定、脱水、透明是石蜡切片法的特有步骤，较易产生瑕疵，故一直处在改进之中。改进的目的是为了提高工作效率，适应临床发展的需要。
本研究发现，肾组织经微波辐射后，更易切出1μm的薄片，可满足病理诊断的要求。这与微波辐射既保持了组织的柔韧性，又增加了组织的硬度有关。微波辐射后组织内的各种细胞仍保持完好形态，且着色力增强。
纯酒精、环己酮、氯仿是病理制片中较普遍的三种试剂。纯酒精为最常用的脱水剂，脱水能力强，并能使组织硬化，但缺点是易使组织收缩变脆。环己酮沸点140℃、冰点-40℃，比重与水相似，无毒，可与苯、二甲苯、氯仿等有机溶剂混合，也为石蜡溶剂，可代替纯酒精脱水而直接入石蜡，组织不会变硬，不需再经二甲苯透明，其缺点是脱水透明速度较慢。氯仿的透明能力比二甲苯、苯差，不易使组织变脆，能溶于醇、醚、苯等，缺点是透明速度较慢。根据纯酒精、环己酮、氯仿的各自特点，按比例混合，可取长补短。纯酒精环己酮混合液主要作用是脱水，同时兼有固定、透明作用，可防止单纯的纯酒精引起组织的过度收缩。氯仿主要起透明作用，不易使组织变脆。在上述两种液体中，放置时间长短对组织影响较小。一般来讲，肾穿刺活检组织放入纯酒精环己酮液中20 min就可以达到脱水和半透明的目的，接着转入氯仿中10 min即可透明。
作者简介：周展眉，女，1971年出生；第三军医大学医学检验(函授)大专；技师；电话85141594
(收稿日期：1998-12-02), 百拇医药