血小板α-颗粒膜蛋白测定与糖尿病微血管病变关系研究
作者：胡爱平 蒋永威 钱少平 孙江容 李勤
单位：成都铁路局中心医院*
关键词：糖尿病；微血管病变；膜蛋白；放射免疫分析
临床血液学杂志990508 以毛细血管增殖、基底膜增厚、微血栓形成为特点的微血管病变是糖尿病慢性并发症的基础病变，发生机理涉及多种因素。研究认为，血小板活化与血管内皮细胞损伤是微血栓形成的始动环节，而血小板聚集功能亢进在微血管病变的整个病理过程中起重要作用。本组研究通过测定46例Ⅱ型糖尿病患者的血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)，探讨血小板活化在糖尿病微血管病变的早期诊断和病情分析中的临床意义。
1 对象与方法
1.1 研究对象 ①正常对照组：10例，男6例，女4例，年龄30～74岁，平均53.3岁。为无心、脑、肝、肾及血液系统疾病，无糖尿病、感染性疾病的健康人。Ⅱ型糖尿病组：46例。均为我院内分泌病房和专科门诊根据1980年WHO制定的糖尿病诊断标准而确诊的Ⅱ型糖尿病患者。根据有无微血管病变又分2组。微血管病变组：20例，男13例，女7例。年龄48～83岁，平均64±11.5岁。病程半年～25年，平均8±6年，均无心、脑、大血管并发症，眼底检查符合糖尿病眼底改变(根据Scott分期标准)。或具有糖尿病肾病改变(尿素氮、肌酐、β2-MG三项中一项以上异常及有持续或间断的蛋白尿，而除外泌尿系感染者)。无微血管病变组：26例，男10例，女16例，年龄48～80岁，平均64±8岁。病程2个月～16年，平均6.75年。
, 百拇医药
1.2 方法 ①观察指标：血浆GMP-140浓度，血小板计数，空腹血糖，血浆胆固醇。②测定方法：血浆GMP-140测定方法，为塑料空针抽取空腹静脉血5 ml，置于2% EDTA-Na2(含0.7% NaCl)塑料试管内。抗凝剂与全血之比为1∶9(VV)。经离心分离血浆后存放于-20℃冰箱内待测。血浆GMP-140测定所用药盒由苏州医学院止血与血栓研究室提供，严格按药盒说明书操作。测试仪为西安62厂生产的XH-6000 免疫计数器。空腹血糖和血浆胆固醇测定方法，为塑料空针抽取空腹静脉血3 ml后，使用日立7060生化仪采用酶法测定。血小板计数使用SYSMEX F-820血液分析仪测定。
2 结果
2.1 各组血小板及血浆GMP-140 浓度 见表1。对照组与糖尿病组两组血小板计数差异、Ⅱ型糖尿病患者有无微血管病变两组间血小板数差异均无显著性(P>0.05)。糖尿病组血浆GMP-140浓度较正常对照组明显增高(P<0.05)，微血管病变组血浆GMP-140浓度较无微血管病变组显著增高(P<0.01)。有无微血管病变，两组间发病年龄、病程、空腹血糖浓度均无差异(P>0.05)，见表2。
, 百拇医药
表1 各组血小板计数及血浆GMP-140浓度比较 组别
例数
血小板计数
(109/L)
血浆GMP-140
(μg/L)
对照组
10
148±31.50
8.79±2.23
Ⅱ型糖尿病组
, 百拇医药
46
124±60.00
13.05±5.89
微血管病变组
20
114±37.25
15.13±5.95△
无微血管病变组
26
134±71.85
11.17±2.55
注：*对照组与糖尿病组比较P>0.05 有无微血管病变两组比较 P>0.05
, 百拇医药
**对照组与糖尿病组比较P<0.05 △ 有无微血管病变两组比较P<0.01
2.2 部分观察指标相关分析 结果显示：血浆GMP-140浓度与空腹糖、血浆胆固醇、年龄无相关。血浆GMP-140浓度与病程正相关(r=0.407，P<0.01)。
表2 糖尿病两组比较*mmol/L 项目
微血管
病变组
无病变组
年龄(岁)
64.0±11.5
64.0±8.0
, 百拇医药
病程(年)
8.0±6.0
6.7±5.0
平均空腹血糖
9.3±4.2
9.6±2.3
血浆胆固醇
4.8±1.1
5.2±0.9
*两组比较各项指标P均>0.053 讨论
本组研究表明，Ⅱ型糖尿病患者血浆GMP-140明显高于正常对照组(P<0.05)与文献报道一致，提示糖尿病患者体内确存在血小板活化，并且在微血管病变之前即已发生。微血管病变组血浆GMP-140明显高于无微血管病变组(P<0.01)。相关分析并显示血浆GMP-140浓度与病程呈正相关(r=0.407；P<0.01)。进一步说明随着糖尿病病程进展，微血管病变继续加重，血管内皮细胞损害、血小板功能紊乱、微血栓形成等多种异常互相影响、互相促进，使微血管损害进一步加重，导致一系列临床症状和实验室异常。我们认为，血浆GMP-140持续增高可在眼底改变，肾脏损害等临床症状出现之前即提示有微血管病变病理基础存在，对糖尿病患者进行GMP-140监测有助于微血管病变的早期诊断。并可作为糖尿病辅助治疗(抗血小板治疗)的参考指标。本组研究显示，糖尿病微血管病变组血浆GMP-140浓度平均15.13±5.95 μg/L，这仅为参考值，而有无微血管病变两组之间的血浆GMP-140浓度界限划分尚有待于更大样本数的统计分析确定。近年研究认为，糖尿病微血管病变的病理机制涉及多种因素，而其中蛋白的非酶糖化作用加强可能为关键因素。糖尿病患者的代谢紊乱、高血糖状态可导致或加重这一病理过程。血小板经糖化后可发生凝聚功能增强，促进血栓形成。但本组研究经相关性分析表明：血浆GMP-140浓度与空腹血糖无相关(r=-0.27，P>0.05)，与其他文献报道一致。分析原因可能是因为一次随机抽取的空腹血糖不能全面反映体内糖代谢紊乱的情况。另据文献报道，血浆GMP-140有随龄性增高，本组研究血浆GMP-140浓度与年龄无相关(r=0.15，P>0.05)。
*邮政编码：成都市，610081
1998-09-11 收稿, 百拇医药
单位：成都铁路局中心医院*
关键词：糖尿病；微血管病变；膜蛋白；放射免疫分析
临床血液学杂志990508 以毛细血管增殖、基底膜增厚、微血栓形成为特点的微血管病变是糖尿病慢性并发症的基础病变，发生机理涉及多种因素。研究认为，血小板活化与血管内皮细胞损伤是微血栓形成的始动环节，而血小板聚集功能亢进在微血管病变的整个病理过程中起重要作用。本组研究通过测定46例Ⅱ型糖尿病患者的血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)，探讨血小板活化在糖尿病微血管病变的早期诊断和病情分析中的临床意义。
1 对象与方法
1.1 研究对象 ①正常对照组：10例，男6例，女4例，年龄30～74岁，平均53.3岁。为无心、脑、肝、肾及血液系统疾病，无糖尿病、感染性疾病的健康人。Ⅱ型糖尿病组：46例。均为我院内分泌病房和专科门诊根据1980年WHO制定的糖尿病诊断标准而确诊的Ⅱ型糖尿病患者。根据有无微血管病变又分2组。微血管病变组：20例，男13例，女7例。年龄48～83岁，平均64±11.5岁。病程半年～25年，平均8±6年，均无心、脑、大血管并发症，眼底检查符合糖尿病眼底改变(根据Scott分期标准)。或具有糖尿病肾病改变(尿素氮、肌酐、β2-MG三项中一项以上异常及有持续或间断的蛋白尿，而除外泌尿系感染者)。无微血管病变组：26例，男10例，女16例，年龄48～80岁，平均64±8岁。病程2个月～16年，平均6.75年。
, 百拇医药
1.2 方法 ①观察指标：血浆GMP-140浓度，血小板计数，空腹血糖，血浆胆固醇。②测定方法：血浆GMP-140测定方法，为塑料空针抽取空腹静脉血5 ml，置于2% EDTA-Na2(含0.7% NaCl)塑料试管内。抗凝剂与全血之比为1∶9(VV)。经离心分离血浆后存放于-20℃冰箱内待测。血浆GMP-140测定所用药盒由苏州医学院止血与血栓研究室提供，严格按药盒说明书操作。测试仪为西安62厂生产的XH-6000 免疫计数器。空腹血糖和血浆胆固醇测定方法，为塑料空针抽取空腹静脉血3 ml后，使用日立7060生化仪采用酶法测定。血小板计数使用SYSMEX F-820血液分析仪测定。
2 结果
2.1 各组血小板及血浆GMP-140 浓度 见表1。对照组与糖尿病组两组血小板计数差异、Ⅱ型糖尿病患者有无微血管病变两组间血小板数差异均无显著性(P>0.05)。糖尿病组血浆GMP-140浓度较正常对照组明显增高(P<0.05)，微血管病变组血浆GMP-140浓度较无微血管病变组显著增高(P<0.01)。有无微血管病变，两组间发病年龄、病程、空腹血糖浓度均无差异(P>0.05)，见表2。
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表1 各组血小板计数及血浆GMP-140浓度比较 组别
例数
血小板计数
(109/L)
血浆GMP-140
(μg/L)
对照组
10
148±31.50
8.79±2.23
Ⅱ型糖尿病组
, 百拇医药
46
124±60.00
13.05±5.89
微血管病变组
20
114±37.25
15.13±5.95△
无微血管病变组
26
134±71.85
11.17±2.55
注：*对照组与糖尿病组比较P>0.05 有无微血管病变两组比较 P>0.05
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**对照组与糖尿病组比较P<0.05 △ 有无微血管病变两组比较P<0.01
2.2 部分观察指标相关分析 结果显示：血浆GMP-140浓度与空腹糖、血浆胆固醇、年龄无相关。血浆GMP-140浓度与病程正相关(r=0.407，P<0.01)。
表2 糖尿病两组比较*mmol/L 项目
微血管
病变组
无病变组
年龄(岁)
64.0±11.5
64.0±8.0
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病程(年)
8.0±6.0
6.7±5.0
平均空腹血糖
9.3±4.2
9.6±2.3
血浆胆固醇
4.8±1.1
5.2±0.9
*两组比较各项指标P均>0.053 讨论
本组研究表明，Ⅱ型糖尿病患者血浆GMP-140明显高于正常对照组(P<0.05)与文献报道一致，提示糖尿病患者体内确存在血小板活化，并且在微血管病变之前即已发生。微血管病变组血浆GMP-140明显高于无微血管病变组(P<0.01)。相关分析并显示血浆GMP-140浓度与病程呈正相关(r=0.407；P<0.01)。进一步说明随着糖尿病病程进展，微血管病变继续加重，血管内皮细胞损害、血小板功能紊乱、微血栓形成等多种异常互相影响、互相促进，使微血管损害进一步加重，导致一系列临床症状和实验室异常。我们认为，血浆GMP-140持续增高可在眼底改变，肾脏损害等临床症状出现之前即提示有微血管病变病理基础存在，对糖尿病患者进行GMP-140监测有助于微血管病变的早期诊断。并可作为糖尿病辅助治疗(抗血小板治疗)的参考指标。本组研究显示，糖尿病微血管病变组血浆GMP-140浓度平均15.13±5.95 μg/L，这仅为参考值，而有无微血管病变两组之间的血浆GMP-140浓度界限划分尚有待于更大样本数的统计分析确定。近年研究认为，糖尿病微血管病变的病理机制涉及多种因素，而其中蛋白的非酶糖化作用加强可能为关键因素。糖尿病患者的代谢紊乱、高血糖状态可导致或加重这一病理过程。血小板经糖化后可发生凝聚功能增强，促进血栓形成。但本组研究经相关性分析表明：血浆GMP-140浓度与空腹血糖无相关(r=-0.27，P>0.05)，与其他文献报道一致。分析原因可能是因为一次随机抽取的空腹血糖不能全面反映体内糖代谢紊乱的情况。另据文献报道，血浆GMP-140有随龄性增高，本组研究血浆GMP-140浓度与年龄无相关(r=0.15，P>0.05)。
*邮政编码：成都市，610081
1998-09-11 收稿, 百拇医药