良恶性胸腔积液γ-干扰素及白介素—8水平研究
作者：钟小宁 柳广南 陆光润 李超乾 苏 红
单位：广西医科大学第一附属医院呼吸内科 南宁 530021
关键词：γ-干扰素；白介素-8；胸腔积液
广西医科大学学报990519
摘要 目的：探讨γ-干扰素(INF-γ)和白介素-8(IL-8)在结核性和癌性胸腔积液中的作用及临床意义。方法：采用ELISA法检测19例结核性和癌性胸腔积液血清和胸水中IFN-γ及IL—8水平。结果：结核性胸液IFN-γ水平明显高于癌性(P<0.01)，全部观察病例结核性胸液IFN-γ水平与癌性无重叠，而两组胸液及血清IL-8水平均无显著性差异，但二者其胸液IL-8水平均显著高于其血清IL-8水平。结论：结果表明IL-8参与了结核性及癌性胸腔积液的炎症反应过程，而胸液IFN-γ的水平则反映了二者不同的局部免疫状态，并有助于二者的鉴别诊断。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R446.1
A STUDY ON THE LEVEL OF γ-INTERFERON AND INTERLEUKIN-8 IN TUBERCULOUS AND CARCINOMATIOUS PLEURAL EFFUSION
Zhong Xiaoning,Liu Guangnan,Lu Guangrun,et al
(the First Affiliated Hospital,Guangxi Medical University, Nanning,530021)
Abstract Objective:To explore the role and clinical significance of gamma-interferon(IFN-γ) and interleukin-8(IL-8) in tuberculous and carcinomatious pleural effusion.Methods:IFN-γ and IL-8 levels were detected by ELISA in 19 cases of tuberculous and carcinomatious pleural effusion.Rsults:The level of IFN-γ in the tuberculous pleural effusion is significantly higher than that in the carcinomatious pleural effusion(P<0.01). There was no overlapping case of IFN-γ between tuberculous pleural effusion and carcinomatious pleural effusion.There was no significant difference of IL-8 between the above two cases,but IL-8 level was much higher in the pleural effusion than in serum.Conclusions:The finding suggests that IL-8 and IFN-γ may play an important role in local inflammation and immune reaction and that measurement of IFN-γ is useful to distinguish tuberculous pleuritis from carcinomatious pleural effusion.
, 百拇医药
Key words IFN-γ; IL-8; pleural effusion
γ-干扰素(IFN-γ)是T淋巴细胞在特异性抗原或非特异性的丝裂原刺激下产生的细胞因子，具有调节机体免疫系统的功能，IFN-γ的产生可反映机体的细胞免疫功能状态。结核性与癌性胸腔积液由于机体细胞免疫状态不同，其胸液中IFN-γ水平的差别有助于对二者的鉴别诊断，但目前国内有关这方面报道很少[1,2]。白介素-8(IL-8)是一种由单核细胞、巨噬细胞及T淋巴细胞等多种细胞所分泌的细胞因子，其生物活性主要对中性粒细胞及T淋巴细胞具有较强的趋化作用，与炎症反应密切相关。目前有关IL-8与胸腔积液的关系已引起人们的关注[3]，本文测定结核性与癌性胸液及血清IFN-γ和IL-8水平，旨在探讨IFN-γ及IL-8在结核性与癌性胸腔积液中的作用及临床意义。
1 材料与方法
, 百拇医药 1.1 研究对象及标本采集
结核性胸膜炎组：9例，年龄16～56岁，均经临床证实，经抗痨治疗有效，胸水消失快，定期复查无复发。癌性胸腔积液组：10例，年龄28～72岁，均为肺癌患者，均经病理组织学或细胞学证实。标本收集胸液经常规胸腔穿刺，肝素抗凝，离心上清冻存，同时取同量血清冻存待测。
1.2 检测方法
1.2.1 试剂：IFN-γ及IL-8 ELISA试剂盒购自美国Endogen公司；
1.2.2 检测方法：IFN-γ ELISA的检测方法严格按试剂盒说明书进行,具体步骤为：① 加入已按要求倍数稀释好的IFN-γ标准液及标本100μl至反应板上(复孔)，置37℃反应120min; ②洗板3次，加100μl已稀释好的酶联复合物到反应孔，置37℃作用60 min;③ 洗板3次，每孔加OPD底物50μl，避光37℃作用30min;④每孔加终止液50μl；⑤用美国960酶标仪测定样本吸光度，画出标准曲线，由标本曲线算出样本的IFN-γ的水平。
, 百拇医药
1.2.3 IL-8 ELISA的检测方法及步骤与上相同。
1.3 统计学处理
所得数据输入PC兼容机，用华西医科大学的统计软件作统计处理，先进行方差齐性分析，然后作多样本的两两比较，并做直线相关分析。
2 结 果
2.1 结核组与肿瘤组血清和胸液IFN-γ水平见表1。从表1可见结核性胸膜炎患者胸水IFN-γ水平较癌性病人显著增高(P<0.01)，亦较其血清IFN-γ水平显著增高(P<0.01)。
表1 结核组与肿瘤组血清和胸液IFN-γ值(
±S) 组别
n
, 百拇医药
血清(ρB/ng.L-1)
胸液(ρB/ng.L-1)
P
结核组
9
479.97±675.97
3074.17±1457.64
<0.01
肿瘤组
10
118.89±83.99
, 百拇医药
107.10±50.49
>0.05
P
>0.05
<0.01
2.2 胸液IFN-γ水平在结核性和癌性胸腔积液中的诊断敏感性和特异性：若按胸液IFN-γ>230 ng/L为诊断结核性胸膜炎的参考值，其诊断结核性胸膜炎的敏感性为100%，特异性为100%。两组间无一重叠，结核组除1例为249.9 ng/L外，其余均大于1000ng/L，而肿瘤组均小于220 ng/L,两者相差十分明显。
2.3 结核组与肿瘤组胸液IFN-γ实测值见图1。
, 百拇医药
图1 结核性与癌性胸液IFN-γ实测值
肿瘤组-◆- 结核组-■-
2.4 将结核组血清与胸液IFN-γ值作直线相关分析，r=0.3661，P>0.05，结果显示两者无明显相关。
2.5 结核组与肿瘤组血清和胸液IL-8水平见表2。
2 结核组与肿瘤组血清和胸液IL-8值(±S) 组别
n
血清(ρB/ng.L-1)
胸液(ρB/ng.L-1)
, 百拇医药
P
结核组
9
42.60±19.71
544.97±511.76
<0.05
肿瘤组
10
38.29±21.57
752.37±673.99
<0.01
P
, 百拇医药 >0.05
>0.05
2.6 将结核组及肿瘤组血清与胸液IL-8值作直线相关分析，r=0.2665，P>0.05，结果显示二者无明显相关。
3 讨 论
结核性胸腔积液和癌性胸腔积液均为临床常见疾病，有时临床难以鉴别。近年来有关细胞因子与胸腔积液的关系已引起国内外学者的重视，本组结果显示结核性与癌性胸腔积液血清IFN-γ水平虽然有一定差别，但二者重叠较多，经统计学处理无显著性差异，对二者鉴别诊断意义不大。而结核性胸液中IFN-γ水平较癌性胸液明显增高，P<0.01，与Ribera[4]、张占英[2]、李为民[1]等报道相似。且我们发现结核组与肿瘤组之间胸水IFN-γ值无一重叠，二者差别非常显著，结核组胸水IFN-γ水平一般大于1000 ng/L，而肿瘤组均小于220 ng/L，诊断敏感性及特异性均很高，均为100%，显示胸液IFN-γ水平测定对二者的鉴别具有较高的诊断价值。Ribera报道胸水量多的结核性胸膜炎或伴有明显肺部结核病变的患者其胸水中IFN-γ水平增高更明显，显示胸水IFN-γ水平与结核病变程度有一定相关性。
, http://www.100md.com
我们发现结核组胸液IFN-γ水平较血清明显增高，约为血清的6.4倍，但二者无明显相关，提示结核性胸膜炎主要是局部细胞免疫功能增强。结核性胸液中IFN-γ水平明显增高的主要原因是由于T淋巴细胞特别是CD+4细胞在分枝杆菌刺激下产生所致，Barnes[5]报道结核性胸膜炎胸水中含大量的CD+4CDW+29T淋巴细胞，该细胞被认为是记忆T细胞，在体外用PPD刺激后，CD+4CDW+29迅速增殖并产生大量IFN-γ。Ribera[4]亦发现结核性胸腔积液中CD+3、CD+4细胞较其他类型胸腔积液增高，但IFN-γ水平与胸液中淋巴细胞总数、CD+3、CD+4细胞数之间无明显相关。由于IFN-γ具有活化人类巨噬细胞，抑制分枝杆菌的生长，从而在局部抗分枝杆菌感染的防御机制中起重要作用。而肿瘤组胸液IFN-γ水平处于较低水平，其主要原因与恶性肿瘤患者机体免疫特别是细胞免疫功能低下有关。
, 百拇医药
IL-8作为一种对炎症细胞具有趋化作用的细胞因子，在炎症反应及变态反应中具有重要的调节作用。研究表明[6]，单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞、上皮细胞等多种细胞受白介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子(TNF)等刺激诱导IL-8的产生，而IL-8趋化上述细胞达到炎症部位引起炎症或变态反应。本文结果显示，结核性及癌性胸膜炎胸液IL-8水平均明显高于其血清IL-8水平(P<0.05),见表2，且其胸液与血清IL-8水平无明显相关(r=0.26)，提示胸液IL-8与血清IL-8的来源不同，胸液中IL-8水平明显增高与其胸腔的局部炎症有关，IL-8参与了其炎症反应。一些研究表明[7]癌性及结核性胸液中IL-1和TNF水平均明显增高，由于IL-1及TNF均为刺激IL-8合成分泌的强有力的诱导物，因此可解释结核性及癌性胸液中IL-8升高的原因，胸液中IL-8升高又趋化中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及巨噬细胞等到达胸膜参与其炎症反应。本文结果显示结核性与癌性胸液IL-8水平无显著性差异(P>0.05)，两组IL-8水平重叠较多，这与一些文献报道结果不同[3]，其原因与二者胸腔均存在慢性炎症有关，故临床上胸液及血清IL-8水平的测定对良恶性胸腔积液的鉴别诊断意义不大。
, 百拇医药
综上可见IL-8均参与了结核性及癌性胸腔积液的局部炎症反应，具有较强的促炎作用，IFN-γ则反映了二者不同的局部免疫状态，IFN-γ在结核性胸腔积液局部抗分枝杆菌感染的防御机制中起重要作用，测定胸液IFN-γ有助于结核性与癌性胸腔积液的鉴别诊断。
参考文献
1 李为民,林震勋.胸液中γ-干扰素的测定及诱生能力的观察.中华结核和呼吸杂志,1995,18(2):94
2 张占英,张澜生,殷秋华.胸膜渗液中IFN-γ,IL-2及NKCF活性研究.上海免疫学杂志,1995,15(3):153
3 马晓星，杨道理，张波，等.癌性和结核性胸液白细胞介素-8及一氧化氮的检测与意义.中华结核与呼吸杂志,1996，19(4)：235
4 Ribera E,Ocana I,Vazqnez JM,et al.High level of IFN-γ in tuberculous pleural effusion.Chest.1988,93:308
, 百拇医药
5 Barnes PF,Mistry SD,Cooper CL,et al.Compartmentaliation of a CD+4 T lymphocyte subpopulation in tuberculous pleuritis.J Immunol.1989;142(4):1114
6 Strieter RM,Kasahara K,Allen RM,et al.Cytokine-induced Neutrophil-derived Interleukin-8.Am J Pathol,1992;141:397
7 Shimokata K,Saka H,Murate T,et al.Cytokine Content in Pleural Effusion.Chest,1991,99:1103
收稿日期：1998-10-19, http://www.100md.com
单位：广西医科大学第一附属医院呼吸内科 南宁 530021
关键词：γ-干扰素；白介素-8；胸腔积液
广西医科大学学报990519
摘要 目的：探讨γ-干扰素(INF-γ)和白介素-8(IL-8)在结核性和癌性胸腔积液中的作用及临床意义。方法：采用ELISA法检测19例结核性和癌性胸腔积液血清和胸水中IFN-γ及IL—8水平。结果：结核性胸液IFN-γ水平明显高于癌性(P<0.01)，全部观察病例结核性胸液IFN-γ水平与癌性无重叠，而两组胸液及血清IL-8水平均无显著性差异，但二者其胸液IL-8水平均显著高于其血清IL-8水平。结论：结果表明IL-8参与了结核性及癌性胸腔积液的炎症反应过程，而胸液IFN-γ的水平则反映了二者不同的局部免疫状态，并有助于二者的鉴别诊断。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号 R446.1
A STUDY ON THE LEVEL OF γ-INTERFERON AND INTERLEUKIN-8 IN TUBERCULOUS AND CARCINOMATIOUS PLEURAL EFFUSION
Zhong Xiaoning,Liu Guangnan,Lu Guangrun,et al
(the First Affiliated Hospital,Guangxi Medical University, Nanning,530021)
Abstract Objective:To explore the role and clinical significance of gamma-interferon(IFN-γ) and interleukin-8(IL-8) in tuberculous and carcinomatious pleural effusion.Methods:IFN-γ and IL-8 levels were detected by ELISA in 19 cases of tuberculous and carcinomatious pleural effusion.Rsults:The level of IFN-γ in the tuberculous pleural effusion is significantly higher than that in the carcinomatious pleural effusion(P<0.01). There was no overlapping case of IFN-γ between tuberculous pleural effusion and carcinomatious pleural effusion.There was no significant difference of IL-8 between the above two cases,but IL-8 level was much higher in the pleural effusion than in serum.Conclusions:The finding suggests that IL-8 and IFN-γ may play an important role in local inflammation and immune reaction and that measurement of IFN-γ is useful to distinguish tuberculous pleuritis from carcinomatious pleural effusion.
, 百拇医药
Key words IFN-γ; IL-8; pleural effusion
γ-干扰素(IFN-γ)是T淋巴细胞在特异性抗原或非特异性的丝裂原刺激下产生的细胞因子，具有调节机体免疫系统的功能，IFN-γ的产生可反映机体的细胞免疫功能状态。结核性与癌性胸腔积液由于机体细胞免疫状态不同，其胸液中IFN-γ水平的差别有助于对二者的鉴别诊断，但目前国内有关这方面报道很少[1,2]。白介素-8(IL-8)是一种由单核细胞、巨噬细胞及T淋巴细胞等多种细胞所分泌的细胞因子，其生物活性主要对中性粒细胞及T淋巴细胞具有较强的趋化作用，与炎症反应密切相关。目前有关IL-8与胸腔积液的关系已引起人们的关注[3]，本文测定结核性与癌性胸液及血清IFN-γ和IL-8水平，旨在探讨IFN-γ及IL-8在结核性与癌性胸腔积液中的作用及临床意义。
1 材料与方法
, 百拇医药 1.1 研究对象及标本采集
结核性胸膜炎组：9例，年龄16～56岁，均经临床证实，经抗痨治疗有效，胸水消失快，定期复查无复发。癌性胸腔积液组：10例，年龄28～72岁，均为肺癌患者，均经病理组织学或细胞学证实。标本收集胸液经常规胸腔穿刺，肝素抗凝，离心上清冻存，同时取同量血清冻存待测。
1.2 检测方法
1.2.1 试剂：IFN-γ及IL-8 ELISA试剂盒购自美国Endogen公司；
1.2.2 检测方法：IFN-γ ELISA的检测方法严格按试剂盒说明书进行,具体步骤为：① 加入已按要求倍数稀释好的IFN-γ标准液及标本100μl至反应板上(复孔)，置37℃反应120min; ②洗板3次，加100μl已稀释好的酶联复合物到反应孔，置37℃作用60 min;③ 洗板3次，每孔加OPD底物50μl，避光37℃作用30min;④每孔加终止液50μl；⑤用美国960酶标仪测定样本吸光度，画出标准曲线，由标本曲线算出样本的IFN-γ的水平。
, 百拇医药
1.2.3 IL-8 ELISA的检测方法及步骤与上相同。
1.3 统计学处理
所得数据输入PC兼容机，用华西医科大学的统计软件作统计处理，先进行方差齐性分析，然后作多样本的两两比较，并做直线相关分析。
2 结 果
2.1 结核组与肿瘤组血清和胸液IFN-γ水平见表1。从表1可见结核性胸膜炎患者胸水IFN-γ水平较癌性病人显著增高(P<0.01)，亦较其血清IFN-γ水平显著增高(P<0.01)。
表1 结核组与肿瘤组血清和胸液IFN-γ值(
±S) 组别n
, 百拇医药
血清(ρB/ng.L-1)
胸液(ρB/ng.L-1)
P
结核组
9
479.97±675.97
3074.17±1457.64
<0.01
肿瘤组
10
118.89±83.99
, 百拇医药
107.10±50.49
>0.05
P
>0.05
<0.01
2.2 胸液IFN-γ水平在结核性和癌性胸腔积液中的诊断敏感性和特异性：若按胸液IFN-γ>230 ng/L为诊断结核性胸膜炎的参考值，其诊断结核性胸膜炎的敏感性为100%，特异性为100%。两组间无一重叠，结核组除1例为249.9 ng/L外，其余均大于1000ng/L，而肿瘤组均小于220 ng/L,两者相差十分明显。
2.3 结核组与肿瘤组胸液IFN-γ实测值见图1。
, 百拇医药
图1 结核性与癌性胸液IFN-γ实测值
肿瘤组-◆- 结核组-■-
2.4 将结核组血清与胸液IFN-γ值作直线相关分析，r=0.3661，P>0.05，结果显示两者无明显相关。
2.5 结核组与肿瘤组血清和胸液IL-8水平见表2。
2 结核组与肿瘤组血清和胸液IL-8值(
±S) 组别n
血清(ρB/ng.L-1)
胸液(ρB/ng.L-1)
, 百拇医药
P
结核组
9
42.60±19.71
544.97±511.76
<0.05
肿瘤组
10
38.29±21.57
752.37±673.99
<0.01
P
, 百拇医药 >0.05
>0.05
2.6 将结核组及肿瘤组血清与胸液IL-8值作直线相关分析，r=0.2665，P>0.05，结果显示二者无明显相关。
3 讨 论
结核性胸腔积液和癌性胸腔积液均为临床常见疾病，有时临床难以鉴别。近年来有关细胞因子与胸腔积液的关系已引起国内外学者的重视，本组结果显示结核性与癌性胸腔积液血清IFN-γ水平虽然有一定差别，但二者重叠较多，经统计学处理无显著性差异，对二者鉴别诊断意义不大。而结核性胸液中IFN-γ水平较癌性胸液明显增高，P<0.01，与Ribera[4]、张占英[2]、李为民[1]等报道相似。且我们发现结核组与肿瘤组之间胸水IFN-γ值无一重叠，二者差别非常显著，结核组胸水IFN-γ水平一般大于1000 ng/L，而肿瘤组均小于220 ng/L，诊断敏感性及特异性均很高，均为100%，显示胸液IFN-γ水平测定对二者的鉴别具有较高的诊断价值。Ribera报道胸水量多的结核性胸膜炎或伴有明显肺部结核病变的患者其胸水中IFN-γ水平增高更明显，显示胸水IFN-γ水平与结核病变程度有一定相关性。
, http://www.100md.com
我们发现结核组胸液IFN-γ水平较血清明显增高，约为血清的6.4倍，但二者无明显相关，提示结核性胸膜炎主要是局部细胞免疫功能增强。结核性胸液中IFN-γ水平明显增高的主要原因是由于T淋巴细胞特别是CD+4细胞在分枝杆菌刺激下产生所致，Barnes[5]报道结核性胸膜炎胸水中含大量的CD+4CDW+29T淋巴细胞，该细胞被认为是记忆T细胞，在体外用PPD刺激后，CD+4CDW+29迅速增殖并产生大量IFN-γ。Ribera[4]亦发现结核性胸腔积液中CD+3、CD+4细胞较其他类型胸腔积液增高，但IFN-γ水平与胸液中淋巴细胞总数、CD+3、CD+4细胞数之间无明显相关。由于IFN-γ具有活化人类巨噬细胞，抑制分枝杆菌的生长，从而在局部抗分枝杆菌感染的防御机制中起重要作用。而肿瘤组胸液IFN-γ水平处于较低水平，其主要原因与恶性肿瘤患者机体免疫特别是细胞免疫功能低下有关。
, 百拇医药
IL-8作为一种对炎症细胞具有趋化作用的细胞因子，在炎症反应及变态反应中具有重要的调节作用。研究表明[6]，单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞、上皮细胞等多种细胞受白介素-1(IL-1)及肿瘤坏死因子(TNF)等刺激诱导IL-8的产生，而IL-8趋化上述细胞达到炎症部位引起炎症或变态反应。本文结果显示，结核性及癌性胸膜炎胸液IL-8水平均明显高于其血清IL-8水平(P<0.05),见表2，且其胸液与血清IL-8水平无明显相关(r=0.26)，提示胸液IL-8与血清IL-8的来源不同，胸液中IL-8水平明显增高与其胸腔的局部炎症有关，IL-8参与了其炎症反应。一些研究表明[7]癌性及结核性胸液中IL-1和TNF水平均明显增高，由于IL-1及TNF均为刺激IL-8合成分泌的强有力的诱导物，因此可解释结核性及癌性胸液中IL-8升高的原因，胸液中IL-8升高又趋化中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及巨噬细胞等到达胸膜参与其炎症反应。本文结果显示结核性与癌性胸液IL-8水平无显著性差异(P>0.05)，两组IL-8水平重叠较多，这与一些文献报道结果不同[3]，其原因与二者胸腔均存在慢性炎症有关，故临床上胸液及血清IL-8水平的测定对良恶性胸腔积液的鉴别诊断意义不大。
, 百拇医药
综上可见IL-8均参与了结核性及癌性胸腔积液的局部炎症反应，具有较强的促炎作用，IFN-γ则反映了二者不同的局部免疫状态，IFN-γ在结核性胸腔积液局部抗分枝杆菌感染的防御机制中起重要作用，测定胸液IFN-γ有助于结核性与癌性胸腔积液的鉴别诊断。
参考文献
1 李为民,林震勋.胸液中γ-干扰素的测定及诱生能力的观察.中华结核和呼吸杂志,1995,18(2):94
2 张占英,张澜生,殷秋华.胸膜渗液中IFN-γ,IL-2及NKCF活性研究.上海免疫学杂志,1995,15(3):153
3 马晓星，杨道理，张波，等.癌性和结核性胸液白细胞介素-8及一氧化氮的检测与意义.中华结核与呼吸杂志,1996，19(4)：235
4 Ribera E,Ocana I,Vazqnez JM,et al.High level of IFN-γ in tuberculous pleural effusion.Chest.1988,93:308
, 百拇医药
5 Barnes PF,Mistry SD,Cooper CL,et al.Compartmentaliation of a CD+4 T lymphocyte subpopulation in tuberculous pleuritis.J Immunol.1989;142(4):1114
6 Strieter RM,Kasahara K,Allen RM,et al.Cytokine-induced Neutrophil-derived Interleukin-8.Am J Pathol,1992;141:397
7 Shimokata K,Saka H,Murate T,et al.Cytokine Content in Pleural Effusion.Chest,1991,99:1103
收稿日期：1998-10-19, http://www.100md.com