女性生殖道B群链球菌诊断技术的研究△
作者：金慧心 张丹莹孙宏杨署伏张敬东王艳王世平于宪利
单位：黑龙江省皮肤病防治研究所
关键词：无乳链球菌；生化鉴定系列培养基；鉴定技术
黑龙江医学990507 摘要 无乳链球菌是新生儿呼吸道、妇女生殖器官感染的重要病原菌，但目前国内外尚无无乳链球菌系统鉴定方法的研究报道。我们通过多种生理生化试验从中选出九项，并在培养基成份上作了调整，组成无乳链球菌生化鉴定系列培养基，经100株菌的试验结果表明，可使无乳链球菌鉴定到种，同时可将A群、C群、D群及肠球菌作出初步鉴定，为无乳链球菌的诊断提供了有实用价值的新方法。
The Research of Diagnostic Technique and Its Application for
B strain Streptococci in Female Genital Tract
, http://www.100md.com
Jin Huixin Zhang Danying Sun Hong et al
(The Provincial Dermatosis Prevention and Treatment Institute of HeiLongjiang)
Abstract The agalactosis streptococci was an important pathogenic bacteria in newborn respiratory tract and female genital tract.The 100 strains of this bacteria were tested on the biochemical appraisal cultivate base,which was made after selection of 9 items biochemical test and change of ingredients.The result showed that it was a new method as it could identify the species and also the subgroups of A,C and D.
, http://www.100md.com
Key words Agalactosis streptococci Biochemical appraisal cultivate base
70年代以来，无乳链球所致的感染逐年增多，目前认为该菌是新生儿呼吸道和妇女生殖器官感染的重要病原菌。据国外统计，新生儿无乳链球菌感染首位，其病死率可高达20%～50%〔1〕。我国近几年的报道较多〔2〕〔3〕，严重危害广大婴幼儿及妇女的健康。长期以来，对无乳链球菌鉴定方法的研究甚少，为提高无乳链球菌感染的诊断水平和实验技术，我们对无乳链球菌的鉴定技术进行了研究并研制出一套生化鉴定系列培养基，在国内首先建立了无乳链球菌的鉴定方法，对准确诊断、指导临床合理使用抗生素有实用价值。
1 材料与方法
1.1 材料。
菌株：100株，其中来自临床标本的88株，无乳链球菌标准菌株(编号略)12株。对照菌株：A群链球菌5株，C群链球菌2株，D群链球菌1株，粪肠球菌3株，屎肠球菌1株；链球菌分群诊断血清：购自日本东芝化学工业株式会社。Api 20 Strep数值鉴定系列培养基：由法国生产。
, http://www.100md.com
分离、鉴定用培养基〔4〕：血液琼脂、T-H增菌培养基、糖醇发酵培养基(葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、水杨素、蕈糖、菊糖、核糖，阿拉伯糖)、分解试验培养基(精氨酸、马尿酸盐、七叶灵、ONPG)、V-P、PH7.4心浸液、PH9.6心浸液、6.5%NaCl心浸液、触酶试剂等，由本课题组制备。杆菌肽(0.04μg/片)、奥普托欣(5μg)纸片购自浙江省军区卫生防疫检验所。
1.2 方法
1.2.1 菌种纯化：将分离菌和标准菌接种PH7.4牛心浸液，置5%CO2中37℃培养18～24h，划线分离于血琼脂，37℃培养24～36h，挑取形态典型的菌落转种血琼脂斜面，37℃培养24h，待鉴定。
1.2.2 初步鉴定：将菌分离于血琼脂平板，5%CO2中37℃培养36～48h，凡出现灰色、湿润、稍凸起、边缘整齐的小菌落，β或γ(少数)溶血，触酶阴性；革兰氏染色为阳性球形或卵圆形、呈对状或链状排列，无芽胞、荚膜及无动力者，进行系统鉴定。
, 百拇医药
1.2.3 系统鉴定〔5，6，7，8，9，10〕，将菌分别接种系统生理生化试验培养基，37℃培养24～48h，观察结果。
糖、醇观察发酵试验，七叶灵培养基由黄色变黑色为阳性，精氨酸由黄色变粉红色为阳性，马尿酸盐水解测定其安息香酸，加10%FeCl3后产生浓厚的沉淀物，在10min内不消失为阳性。杆菌肽(>10mm)、奥普托欣(>14mm)观察抑菌环。
1.2.4 血清学鉴定：采用玻片凝集法〔11〕，测定菌株的B抗原。
1.2.5 Api 20 Strep数值鉴定：按该系列培养基使用说明书操作和判定结果。
2 结果
2.1 系统生理生化鉴定结果。
, http://www.100md.com
临床标本分离的无乳链球菌88株，标准菌12株，接种系统生理化鉴定培养基，结果见表1。
表1 88株无乳链球菌的生理生化特征
无乳链
球 菌
(临床)
无乳链
球 菌
(标准株)
A群链
球 菌
(对照)
粪肠
, http://www.100md.com
球菌
(对照)
屎肠
球菌
(对照)
C群链
球菌
(对照)
D群链
球菌
(对照)
株数
88
, http://www.100md.com 12
5
3
1
2
1
葡萄糖
88
12
5
3
1
2
1
, 百拇医药
乳糖
81
8
5
3
1
1
1
山梨醇
0
0
0
3
1
, http://www.100md.com
1
0
甘露醇
0
0
0
3
1
0
0
水杨素
76
4
4
, 百拇医药
1
0
2
1
蕈糖
83
10
5
2
1
0
1
菊糖
0
, 百拇医药
0
0
0
0
0
1
核糖
81
10
0
2
1
1
0
, 百拇医药
阿拉伯糖
0
0
0
0
1
0
0
精氨酸
80
11
4
3
1
, 百拇医药
2
0
七叶灵
2
0
2
3
1
0
1
马尿酸盐
88
12
0
, 百拇医药
1
0
0
0
ONPG
81
9
0
1
0
1
0
V-P
87
, 百拇医药
12
0
3
1
0
1
奥普托欣敏感性
0
0
0
0
0
0
0
, http://www.100md.com
杆菌肽敏感性
0
0
5
0
0
0
0
45%生长
0
0
0
3
1
, 百拇医药
0
1
PH9.6生长
1
0
0
3
1
0
0
65%NaCl生长
13
2
0
, 百拇医药
3
1
0
0
触酶
0
0
0
0
0
0
0
CAMP
86
, http://www.100md.com
11
0
0
0
0
0
溶血性
β-78γ10
β-11
γ1
β
α
α
β
, 百拇医药
α
由表1可见，无乳链球菌均发酵葡萄糖产酸不产气，马尿酸盐水解阳性，绝大多数菌分解乳糖、蕈糖、水解精氨酸，V-P试验阳性。不分解山梨醇、甘露醇、阿拉伯糖等。45℃、PH9.6肉汤中不生长，对杆菌肽、奥普托欣耐药。
2.2 九种生化系列培养基鉴定结果。
从系统鉴定的多种生化鉴定试验中，优选出九种生化鉴定培养基，通过100株无乳链球菌的鉴定，结果见表2。表2 九项生化试验对100株无乳链球菌的鉴定结果
无乳链
球 菌
A群链
球 菌
C群链
, http://www.100md.com
球 菌
D群链
球 菌
肠球
菌属
株数
100
5
2
1
4
葡萄糖
100
5
, http://www.100md.com
2
1
4
山梨醇
0
0
1
0
4
甘露醇
0
0
0
0
, 百拇医药
4
V-P
98
0
0
1
4
马尿酸盐
100
0
0
0
1
七叶灵
, http://www.100md.com
2
3
0
1
4
PH9.6生长
1
0
0
0
4
6.5%NaCl生长
20
0
, 百拇医药
0
0
4
杆菌肽敏感
0
9
0
0
0
由表2可见无乳链球菌马尿酸盐阳性、V-P阳性，可与杆菌肽敏感、马尿酸盐、V-P均为阴性的A群链球菌相鉴别；也可与七叶灵阳性，马尿酸盐阴性的D群链球菌相鉴别；根据山梨醇阴性、甘露醇阴性和在ph9.6和6.5%NaCl的生长情况可与肠球菌相鉴别，也可根据V-P、马尿酸盐阳性而与C群链球菌相区别。
, 百拇医药
2.3 Api 20 Strep数值鉴定结果。
选取经九种生化试验鉴定的无乳链球菌20株，接种Api 20 Strep数值鉴定培养基，结果有19株与九种生化鉴定的结果一致，仅1株(5.0%)因V-P阴性而无相应的编码。
2.4 血清学测定结果。
将生化试验鉴定为无乳链球菌的88株菌，用玻片凝集法进行抗原结构测定〔11〕，结果87株菌含B抗原，1株菌(1.1%)与A、B、D、E、G群血清均不凝集。
3 讨论
无乳链球菌为链球菌属中的一个种，根据Lancefield氏的血清学分类，划归B群。
对于无乳链球菌的鉴定，长期以来沿用的是毛细管沉淀法，80年代以后，日本和我国相继研制出玻片凝集法用的分群诊断血清〔11〕，为链球菌血清学分群提供了可靠的方法。但因价格较贵和操作有一定难度而未能普遍应用。80年代，法国研制出Api 20 Strep数值鉴定系列培养基，可使多数链球菌鉴定到种，是国际上公认的先进鉴定技术。但该系列价格昂贵，试验项目多为酶类测定，我国尚不具备引进该技术的条件。为此，我们参考有关文献〔5，6，8，9〕，选出九种生理生化试验组成“生化鉴定系列培养基”。经考核应用，可将无乳链球菌鉴定到种，并可将A群、C群、D群及肠球菌属细菌鉴别开或作出种、属的初步鉴定。为了在实际工作应用方便，将九项生化试验的反应特点列于表3，作为无乳链球菌判定的依据。在无乳链球菌鉴定前，首先经过革兰氏染色，观察其形态、排列，结合触酶试验，排除链球菌科其它菌属后，可直接应用该生化鉴定系列。如九项试验中的葡萄糖，链球菌均能发酵，产酸不产气，可与产酸产气的明串珠菌属相鉴别〔8〕，还可排除非发酵菌。马尿酸盐试验，无乳链球菌的阳性率为99%，肠球菌20%～40%，对A、C群链球菌有鉴别意义。如6.5%NaCl生长试验，肠球菌属100%为阳性，无乳链球菌的阳性率为20%～80%，其它菌均为阴性〔5，8〕。对于肺炎链球菌，因其形态特点、对奥普托欣敏感和胆汁溶解试验阳性，分解葡糖而易于鉴定，本方法未将其列入。
, 百拇医药
表3 无乳链球菌生化鉴定系列的结果判定
无乳链
球 菌
A群链
球 菌
C群链
球 菌
D群链
球 菌
肠球
菌属
葡萄糖
+
, http://www.100md.com
+
+
+
+
山梨醇
-
-
d
-
+
甘露醇
-
-
-
, 百拇医药
d
+
V-P
+
-
-
+
+
马尿酸盐
+
-
-
-
d
, 百拇医药
七叶灵
-
d
-
+
+
PH9.6生长
-
-
-
-
+
6.5%NaCl生长
d
, http://www.100md.com
-
-
-
+
杆菌肽敏感性
-
+
-
-
-
注：+100%阳性 -：100%阴性 d：不定
本方法与法国产的Api 20 Strep系列培养基的鉴定结果基本一致，说明该法在使用效果上已达到国外同类产品水平。对本法鉴定的88株无乳链球菌，1株血清学试验未测出B抗原，此菌株有待进一步研究。
, http://www.100md.com
总之，我们研究的无乳链球菌鉴定技术及其相应的鉴定培养基对提高我国无乳链球菌感染的早期、正确诊断和指导合理用药，开展女性生殖器官检查及新生儿带菌调查提供了科学的方法。
△哈尔滨市科技进步二等奖
作者简介：张丹莹孙宏杨署伏张敬东王艳王世平于宪利(哈尔滨市卫生防疫站)
参考文献
1 申阿东，杨永弘，等.新生儿B族链球菌感染27例临床分析.中华儿科杂志，1993，31(2)：69～71
2 朱荫芝，杨永弘，等.北京地区非妊娠妇女阴道B族链球菌带菌情况的调查.中华流行病学杂志，1996，17(1)：17
, 百拇医药
3 张景华，袁林，等.600名妊娠妇女及其所娩新生儿GBS带菌情况的研究.中华流行病学杂志，1995，16(1)：36
4 秋山利一.他.细菌真菌原虫用培地.第4版.日本日水制药株式会社，1987.111～114
5 中国科学院微生物研究所译.伯杰氏细菌鉴定手册.第八版.北京：科学出版社，1984.677～701
6 Sneath,P.H.A，et al.Bergey′s Manual systematic Bacteriology Vol.2,Williams & Wilkins,Baltimore,1043～1063，1986
7 荆永志，李在连，等.实验细菌学.第1版.济南：山东省医学科学院，1982.294～307
8 Lennete,E.H.Manual of Clinical Microbiology (5th.ed) American Society for Microbiology,Washington,338～354，1992
9 李影林.中华医学检验技术全书.第1版.北京：人民卫生出版社，1996.1329～1375
10 金慧心，杨暑伏，等.90株链球菌血清学及生化特征分群鉴定的研究.生物技术，1991，5(1)：38
11 杨暑伏，郑秀英，金慧心.链球菌分群诊断血清的制备及应用.中华流行病学杂志，1988，9(3)：186
(收稿日期：1999-03-25), 百拇医药
单位：黑龙江省皮肤病防治研究所
关键词：无乳链球菌；生化鉴定系列培养基；鉴定技术
黑龙江医学990507 摘要 无乳链球菌是新生儿呼吸道、妇女生殖器官感染的重要病原菌，但目前国内外尚无无乳链球菌系统鉴定方法的研究报道。我们通过多种生理生化试验从中选出九项，并在培养基成份上作了调整，组成无乳链球菌生化鉴定系列培养基，经100株菌的试验结果表明，可使无乳链球菌鉴定到种，同时可将A群、C群、D群及肠球菌作出初步鉴定，为无乳链球菌的诊断提供了有实用价值的新方法。
The Research of Diagnostic Technique and Its Application for
B strain Streptococci in Female Genital Tract
, http://www.100md.com
Jin Huixin Zhang Danying Sun Hong et al
(The Provincial Dermatosis Prevention and Treatment Institute of HeiLongjiang)
Abstract The agalactosis streptococci was an important pathogenic bacteria in newborn respiratory tract and female genital tract.The 100 strains of this bacteria were tested on the biochemical appraisal cultivate base,which was made after selection of 9 items biochemical test and change of ingredients.The result showed that it was a new method as it could identify the species and also the subgroups of A,C and D.
, http://www.100md.com
Key words Agalactosis streptococci Biochemical appraisal cultivate base
70年代以来，无乳链球所致的感染逐年增多，目前认为该菌是新生儿呼吸道和妇女生殖器官感染的重要病原菌。据国外统计，新生儿无乳链球菌感染首位，其病死率可高达20%～50%〔1〕。我国近几年的报道较多〔2〕〔3〕，严重危害广大婴幼儿及妇女的健康。长期以来，对无乳链球菌鉴定方法的研究甚少，为提高无乳链球菌感染的诊断水平和实验技术，我们对无乳链球菌的鉴定技术进行了研究并研制出一套生化鉴定系列培养基，在国内首先建立了无乳链球菌的鉴定方法，对准确诊断、指导临床合理使用抗生素有实用价值。
1 材料与方法
1.1 材料。
菌株：100株，其中来自临床标本的88株，无乳链球菌标准菌株(编号略)12株。对照菌株：A群链球菌5株，C群链球菌2株，D群链球菌1株，粪肠球菌3株，屎肠球菌1株；链球菌分群诊断血清：购自日本东芝化学工业株式会社。Api 20 Strep数值鉴定系列培养基：由法国生产。
, http://www.100md.com
分离、鉴定用培养基〔4〕：血液琼脂、T-H增菌培养基、糖醇发酵培养基(葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、水杨素、蕈糖、菊糖、核糖，阿拉伯糖)、分解试验培养基(精氨酸、马尿酸盐、七叶灵、ONPG)、V-P、PH7.4心浸液、PH9.6心浸液、6.5%NaCl心浸液、触酶试剂等，由本课题组制备。杆菌肽(0.04μg/片)、奥普托欣(5μg)纸片购自浙江省军区卫生防疫检验所。
1.2 方法
1.2.1 菌种纯化：将分离菌和标准菌接种PH7.4牛心浸液，置5%CO2中37℃培养18～24h，划线分离于血琼脂，37℃培养24～36h，挑取形态典型的菌落转种血琼脂斜面，37℃培养24h，待鉴定。
1.2.2 初步鉴定：将菌分离于血琼脂平板，5%CO2中37℃培养36～48h，凡出现灰色、湿润、稍凸起、边缘整齐的小菌落，β或γ(少数)溶血，触酶阴性；革兰氏染色为阳性球形或卵圆形、呈对状或链状排列，无芽胞、荚膜及无动力者，进行系统鉴定。
, 百拇医药
1.2.3 系统鉴定〔5，6，7，8，9，10〕，将菌分别接种系统生理生化试验培养基，37℃培养24～48h，观察结果。
糖、醇观察发酵试验，七叶灵培养基由黄色变黑色为阳性，精氨酸由黄色变粉红色为阳性，马尿酸盐水解测定其安息香酸，加10%FeCl3后产生浓厚的沉淀物，在10min内不消失为阳性。杆菌肽(>10mm)、奥普托欣(>14mm)观察抑菌环。
1.2.4 血清学鉴定：采用玻片凝集法〔11〕，测定菌株的B抗原。
1.2.5 Api 20 Strep数值鉴定：按该系列培养基使用说明书操作和判定结果。
2 结果
2.1 系统生理生化鉴定结果。
, http://www.100md.com
临床标本分离的无乳链球菌88株，标准菌12株，接种系统生理化鉴定培养基，结果见表1。
表1 88株无乳链球菌的生理生化特征
无乳链
球 菌
(临床)
无乳链
球 菌
(标准株)
A群链
球 菌
(对照)
粪肠
, http://www.100md.com
球菌
(对照)
屎肠
球菌
(对照)
C群链
球菌
(对照)
D群链
球菌
(对照)
株数
88
, http://www.100md.com 12
5
3
1
2
1
葡萄糖
88
12
5
3
1
2
1
, 百拇医药
乳糖
81
8
5
3
1
1
1
山梨醇
0
0
0
3
1
, http://www.100md.com
1
0
甘露醇
0
0
0
3
1
0
0
水杨素
76
4
4
, 百拇医药
1
0
2
1
蕈糖
83
10
5
2
1
0
1
菊糖
0
, 百拇医药
0
0
0
0
0
1
核糖
81
10
0
2
1
1
0
, 百拇医药
阿拉伯糖
0
0
0
0
1
0
0
精氨酸
80
11
4
3
1
, 百拇医药
2
0
七叶灵
2
0
2
3
1
0
1
马尿酸盐
88
12
0
, 百拇医药
1
0
0
0
ONPG
81
9
0
1
0
1
0
V-P
87
, 百拇医药
12
0
3
1
0
1
奥普托欣敏感性
0
0
0
0
0
0
0
, http://www.100md.com
杆菌肽敏感性
0
0
5
0
0
0
0
45%生长
0
0
0
3
1
, 百拇医药
0
1
PH9.6生长
1
0
0
3
1
0
0
65%NaCl生长
13
2
0
, 百拇医药
3
1
0
0
触酶
0
0
0
0
0
0
0
CAMP
86
, http://www.100md.com
11
0
0
0
0
0
溶血性
β-78γ10
β-11
γ1
β
α
α
β
, 百拇医药
α
由表1可见，无乳链球菌均发酵葡萄糖产酸不产气，马尿酸盐水解阳性，绝大多数菌分解乳糖、蕈糖、水解精氨酸，V-P试验阳性。不分解山梨醇、甘露醇、阿拉伯糖等。45℃、PH9.6肉汤中不生长，对杆菌肽、奥普托欣耐药。
2.2 九种生化系列培养基鉴定结果。
从系统鉴定的多种生化鉴定试验中，优选出九种生化鉴定培养基，通过100株无乳链球菌的鉴定，结果见表2。表2 九项生化试验对100株无乳链球菌的鉴定结果
无乳链
球 菌
A群链
球 菌
C群链
, http://www.100md.com
球 菌
D群链
球 菌
肠球
菌属
株数
100
5
2
1
4
葡萄糖
100
5
, http://www.100md.com
2
1
4
山梨醇
0
0
1
0
4
甘露醇
0
0
0
0
, 百拇医药
4
V-P
98
0
0
1
4
马尿酸盐
100
0
0
0
1
七叶灵
, http://www.100md.com
2
3
0
1
4
PH9.6生长
1
0
0
0
4
6.5%NaCl生长
20
0
, 百拇医药
0
0
4
杆菌肽敏感
0
9
0
0
0
由表2可见无乳链球菌马尿酸盐阳性、V-P阳性，可与杆菌肽敏感、马尿酸盐、V-P均为阴性的A群链球菌相鉴别；也可与七叶灵阳性，马尿酸盐阴性的D群链球菌相鉴别；根据山梨醇阴性、甘露醇阴性和在ph9.6和6.5%NaCl的生长情况可与肠球菌相鉴别，也可根据V-P、马尿酸盐阳性而与C群链球菌相区别。
, 百拇医药
2.3 Api 20 Strep数值鉴定结果。
选取经九种生化试验鉴定的无乳链球菌20株，接种Api 20 Strep数值鉴定培养基，结果有19株与九种生化鉴定的结果一致，仅1株(5.0%)因V-P阴性而无相应的编码。
2.4 血清学测定结果。
将生化试验鉴定为无乳链球菌的88株菌，用玻片凝集法进行抗原结构测定〔11〕，结果87株菌含B抗原，1株菌(1.1%)与A、B、D、E、G群血清均不凝集。
3 讨论
无乳链球菌为链球菌属中的一个种，根据Lancefield氏的血清学分类，划归B群。
对于无乳链球菌的鉴定，长期以来沿用的是毛细管沉淀法，80年代以后，日本和我国相继研制出玻片凝集法用的分群诊断血清〔11〕，为链球菌血清学分群提供了可靠的方法。但因价格较贵和操作有一定难度而未能普遍应用。80年代，法国研制出Api 20 Strep数值鉴定系列培养基，可使多数链球菌鉴定到种，是国际上公认的先进鉴定技术。但该系列价格昂贵，试验项目多为酶类测定，我国尚不具备引进该技术的条件。为此，我们参考有关文献〔5，6，8，9〕，选出九种生理生化试验组成“生化鉴定系列培养基”。经考核应用，可将无乳链球菌鉴定到种，并可将A群、C群、D群及肠球菌属细菌鉴别开或作出种、属的初步鉴定。为了在实际工作应用方便，将九项生化试验的反应特点列于表3，作为无乳链球菌判定的依据。在无乳链球菌鉴定前，首先经过革兰氏染色，观察其形态、排列，结合触酶试验，排除链球菌科其它菌属后，可直接应用该生化鉴定系列。如九项试验中的葡萄糖，链球菌均能发酵，产酸不产气，可与产酸产气的明串珠菌属相鉴别〔8〕，还可排除非发酵菌。马尿酸盐试验，无乳链球菌的阳性率为99%，肠球菌20%～40%，对A、C群链球菌有鉴别意义。如6.5%NaCl生长试验，肠球菌属100%为阳性，无乳链球菌的阳性率为20%～80%，其它菌均为阴性〔5，8〕。对于肺炎链球菌，因其形态特点、对奥普托欣敏感和胆汁溶解试验阳性，分解葡糖而易于鉴定，本方法未将其列入。
, 百拇医药
表3 无乳链球菌生化鉴定系列的结果判定
无乳链
球 菌
A群链
球 菌
C群链
球 菌
D群链
球 菌
肠球
菌属
葡萄糖
+
, http://www.100md.com
+
+
+
+
山梨醇
-
-
d
-
+
甘露醇
-
-
-
, 百拇医药
d
+
V-P
+
-
-
+
+
马尿酸盐
+
-
-
-
d
, 百拇医药
七叶灵
-
d
-
+
+
PH9.6生长
-
-
-
-
+
6.5%NaCl生长
d
, http://www.100md.com
-
-
-
+
杆菌肽敏感性
-
+
-
-
-
注：+100%阳性 -：100%阴性 d：不定
本方法与法国产的Api 20 Strep系列培养基的鉴定结果基本一致，说明该法在使用效果上已达到国外同类产品水平。对本法鉴定的88株无乳链球菌，1株血清学试验未测出B抗原，此菌株有待进一步研究。
, http://www.100md.com
总之，我们研究的无乳链球菌鉴定技术及其相应的鉴定培养基对提高我国无乳链球菌感染的早期、正确诊断和指导合理用药，开展女性生殖器官检查及新生儿带菌调查提供了科学的方法。
△哈尔滨市科技进步二等奖
作者简介：张丹莹孙宏杨署伏张敬东王艳王世平于宪利(哈尔滨市卫生防疫站)
参考文献
1 申阿东，杨永弘，等.新生儿B族链球菌感染27例临床分析.中华儿科杂志，1993，31(2)：69～71
2 朱荫芝，杨永弘，等.北京地区非妊娠妇女阴道B族链球菌带菌情况的调查.中华流行病学杂志，1996，17(1)：17
, 百拇医药
3 张景华，袁林，等.600名妊娠妇女及其所娩新生儿GBS带菌情况的研究.中华流行病学杂志，1995，16(1)：36
4 秋山利一.他.细菌真菌原虫用培地.第4版.日本日水制药株式会社，1987.111～114
5 中国科学院微生物研究所译.伯杰氏细菌鉴定手册.第八版.北京：科学出版社，1984.677～701
6 Sneath,P.H.A，et al.Bergey′s Manual systematic Bacteriology Vol.2,Williams & Wilkins,Baltimore,1043～1063，1986
7 荆永志，李在连，等.实验细菌学.第1版.济南：山东省医学科学院，1982.294～307
8 Lennete,E.H.Manual of Clinical Microbiology (5th.ed) American Society for Microbiology,Washington,338～354，1992
9 李影林.中华医学检验技术全书.第1版.北京：人民卫生出版社，1996.1329～1375
10 金慧心，杨暑伏，等.90株链球菌血清学及生化特征分群鉴定的研究.生物技术，1991，5(1)：38
11 杨暑伏，郑秀英，金慧心.链球菌分群诊断血清的制备及应用.中华流行病学杂志，1988，9(3)：186
(收稿日期：1999-03-25), 百拇医药