小儿止泻液的药理研究
作者：李秋华 谭大琦 李卫星 严春海 姜 楠
单位：湖北中医学院附属医院(430061)
关键词：小儿止泻液；药理研究；止泻；免疫；抑菌
湖北中医杂志990540 摘 要：研究结果表明，小儿止泻液20～60g/kg对大黄所致小鼠腹泻有明显止泻作用；能明显抑制小鼠小肠推进功能，高剂量(60g/kg)有抑制胃排空作用；能促进腹腔巨噬细胞吞噬功能和抗SRBC抗体形成；有一定的广谱抗菌作用。
小儿止泻液系我院倪珠英教授的经验方。该方能迅速有效控制小儿的腹泻症状，缩短病程。本文对该方做了药理实验方面的研究，现将结果报告如下。
1 实验材料
1.1 药物 小儿止泻液(以下简称止泻液)由藿香、厚朴等诸味中药组成。由湖北五三制药厂提供。
, http://www.100md.com
1.2 动物 昆明小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由湖北省医科院动物中心提供。合格证号：鄂医动管证字012号。
2 实验方法和结果
2.1 对大黄所致腹泻的影响[1] 小鼠50只，随机均分5组，分别灌服生理盐水(N.S)20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，阿片酊2mg/kg。1次/d，共2次，于末次给药后1小时用大黄液25g/kg灌胃，观察给大黄液后5小时大便的情况(结果见表1)。提示止泻液有明显止泻作用，其止泻作用与阿片酊相当。
表1 止泻液对大黄所致腹泻的影响(n=10) 组 别
剂量
湿粪数
(
±SD)
, 百拇医药
腹泻抑制
率(%)
P 值
生理盐水
20ml/kg
12.5±4.2
-
-
止泻液
20g/kg
5.9±3.0
52.8
<0.01
, http://www.100md.com
止泻液
40g/kg
5.2±3.4
58.4
<0.01
止泻液
60g/kg
5.0±2.1
60.0
<0.01
阿片酊
2ml/kg
5.1±2.9
, 百拇医药
59.0
<0.01
2.2 对胃肠功能的影响
(1)对小肠推进运动试验[2]：取小鼠50只，给药途径同上。实验前禁食24小时，灌胃给药1小时后，分别用炭末阿拉伯胶混悬液灌胃，于炭末液灌胃后20分钟，处死动物，剖腹取出胃肠，测量自贲门至直肠末端的推进距离，计算炭末推进距离占胃肠全长的百分率，作为小肠推进率(结果见表2)。提示止泻液和阿片酊对大肠推进功能有明显抑制作用，止泻液(60g/kg)对小肠推进功能的抑制作用明显高于阿片酊(P<0.05)。表2 止泻液对小肠推进运动的影响(n=10) 组 别
剂量
炭末推进率(%)
(±SD)
, 百拇医药
抑制率
生理盐水
20ml/kg
70.7±12.6
-
止泻液
20g/kg
52.7±6.8*△
25.3
止泻液
40g/kg
49.1±13.7*
, http://www.100md.com
31.1
止泻液
60g/kg
13.0±18.7**△
81.7
阿片酊
2ml/kg
34.5±21.1*
50.7
注：与生理盐水的比较，*P<0.01；与阿片酊组比较 △P<0.05
(2)胃排空试验[3]：小鼠55只，随机均分5组。实验前禁食16小时，分别皮下给药NS 25ml/kg，止泻液10g/kg、20g/kg、40g/kg，阿托品10mg/kg。注药后50分钟用甲基橙水溶液灌胃，于灌胃后20分钟处死小鼠，将胃内容物洗入10ml蒸馏水中，用NaHCO3调节pH至6～6.5离心，取上清液，比色测定光密度，计算胃残留率(结果见表3)，提示高剂量止泻液和阿托品有抑制胃排空作用。表3 止泻液对甲基残留率的影响(n=11) 组 别
, 百拇医药
剂量
胃残留率(%)
(±SD)
胃排空抑
制率(%)
P 值
生理盐水
25ml/kg
32.9±13.6
-
-
止泻液
, http://www.100md.com
10g/kg
45.3±18.2
37.6
P>0.05
止泻液
20g/kg
46.9±22.6
42.5
P>0.05
止泻液
40g/kg
58.8±19.8
, 百拇医药 78.8
P<0.01
阿托品
10mg/kg
47.5±16.7
44.3
P<0.05
3 免疫作用
3.1 腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 小鼠50只，随机均分5组。分别灌胃NS 20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，四君子汤5g/kg，1次/d，共5天。末次给药后1小时，腹腔注射5%绵羊红细胞1ml，于3小时后注射生理盐水2ml，处死小鼠取出腹腔液，离心、涂片、镜检。计算出吞噬率和吞噬指数(结果见表4)，提示止泻液能促进腹腔巨噬细胞吞噬功能。表4 止泻液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬的影响 组 别
, 百拇医药
剂 量
吞噬率
(±SD)
吞噬指数
(±SD)
生理盐水
20ml/kg
12.7±1.40
0.39±0.06
止 泻 液
, 百拇医药
20g/kg
20.30±3.00
0.57±0.09
止 泻 液
40g/kg
17.5±1.88
0.68±0.08
止 泻 液
60g/kg
18.28±1.42
0.630.07
四君子汤
, http://www.100md.com
5g/kg
22.8±2.30±
0.93±0.10
* P<0.01
3.2 止泻液对小鼠抗体形成的影响 健康昆明种小鼠50只，随机分为5组。NS 20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，四君子汤5g/kg。连续灌胃给药12天，在给药第6天的同时，用10%绵羊红细胞0.5ml腹腔免疫，免疫后第7天取血，分离血清，灭活测抗体效价(结果见表5)，提示止泻液能促进SRBC抗体形成。
4 止泻液体外抗菌实验
采用试管液体稀释法，将止泻液和氨苄青霉素钠用无菌生理盐水作倍比稀释，分别取不同稀释度的药液，1ml加入双倍营养液肉汤1ml中，使药液的稀释度依次为1/2、1/4、1/8……1/1024(10个管)，止泻液的相应浓度为780、390、145、……1.532mg/kg，氨苄青霉素纳的相应浓度为20、10、5……0.039μg/kg。另设药液、培养基、和菌液三种对照管，在每一稀释管内接种18小时孵育的细菌肉汤培养物(10～3稀释菌液)5ml，混匀，置37℃温箱培养。于接种后24、48小时分别从各管取一接种环液体，转种于相应琼脂平板上，培养24小时后观察结果，以无菌生长的药物提高稀释度作为该药的最低抑菌浓度(MIC)结果见表6。止泻液对福氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌均有一定抗菌作用。
, 百拇医药
5 讨论
小儿腹泻病因复杂，大多数由于饮食不调、消化不良或诱发致病菌感染所引起。中医辨证认为，婴幼儿秋季腹泻的病机为外感湿邪、阻滞肠胃，致使胃肠道运动紊乱或引发肠壁炎症，肠内容物通过肠道的速度加快，肠道对水和营养物质的吸收功能出现障碍，从而导致腹泄。表5 止泻液对小鼠抗体形成的影响 组别
只数
剂量
抗体效价
(±SD)
P 值
生理盐水
11
, 百拇医药
20ml/kg
314±132
-
止 泻 液
10
20g/kg
320±173
>0.05
止 泻 液
11
40g/kg
488±77.0
<0.01
, 百拇医药
止 泻 液
11
60g/kg
512±0
<0.01
四君子汤
10
5g/kg
460±180
<0.05
表6 止泻液体外抑菌试验结果 菌 珠
最低抑菌浓度(mic)
, 百拇医药
止泻液
(mg/ml)
氨苄青霉素钠
(μg/ml)
福氏痢疾杆菌
195
0.625
伤 寒 杆 菌
195
<0.0195
大 肠 杆 菌
195
2.5
, 百拇医药
绿 脓 杆 菌
195
20.5
金黄色葡萄球菌
97.5
<0.0195
实验资料表明，小儿止泻液对大黄所致腹泻有明显抑制作用，可明显抑制小肠推进功能和抑制胃排空，促进腹腔巨噬细胞吞噬功能和特异性抗体形成，对致病性肠道杆菌有一定抗菌作用。
实验结果提示：止泻液具有明显的止泻作用，能抑制胃肠道推进功能，调整紊乱的肠道活动，这是止泻液控制腹泻的重要机制之一。另通过促进血液抗体形成的作用，还可提高肠道抗体产生，从而控制肠道上皮细胞的感染和损伤。止泻液还具有广谱抗菌作用，故对于感染性腹泻，还有标本兼治的功效。 参考文献
[1] 唐映红，等.吴茱萸止泻作用的实验研究.中药药理与临床，1990，(6)：9
[2] 徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992，11
3 张明发，等.温里药对小白鼠胃排空及离体兔小肠活动的影响.中医杂志，1984，(12)：63
(收稿日期：1998-12-08)
, 百拇医药
单位：湖北中医学院附属医院(430061)
关键词：小儿止泻液；药理研究；止泻；免疫；抑菌
湖北中医杂志990540 摘 要：研究结果表明，小儿止泻液20～60g/kg对大黄所致小鼠腹泻有明显止泻作用；能明显抑制小鼠小肠推进功能，高剂量(60g/kg)有抑制胃排空作用；能促进腹腔巨噬细胞吞噬功能和抗SRBC抗体形成；有一定的广谱抗菌作用。
小儿止泻液系我院倪珠英教授的经验方。该方能迅速有效控制小儿的腹泻症状，缩短病程。本文对该方做了药理实验方面的研究，现将结果报告如下。
1 实验材料
1.1 药物 小儿止泻液(以下简称止泻液)由藿香、厚朴等诸味中药组成。由湖北五三制药厂提供。
, http://www.100md.com
1.2 动物 昆明小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由湖北省医科院动物中心提供。合格证号：鄂医动管证字012号。
2 实验方法和结果
2.1 对大黄所致腹泻的影响[1] 小鼠50只，随机均分5组，分别灌服生理盐水(N.S)20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，阿片酊2mg/kg。1次/d，共2次，于末次给药后1小时用大黄液25g/kg灌胃，观察给大黄液后5小时大便的情况(结果见表1)。提示止泻液有明显止泻作用，其止泻作用与阿片酊相当。
表1 止泻液对大黄所致腹泻的影响(n=10) 组 别
剂量
湿粪数
(
±SD), 百拇医药
腹泻抑制
率(%)
P 值
生理盐水
20ml/kg
12.5±4.2
-
-
止泻液
20g/kg
5.9±3.0
52.8
<0.01
, http://www.100md.com
止泻液
40g/kg
5.2±3.4
58.4
<0.01
止泻液
60g/kg
5.0±2.1
60.0
<0.01
阿片酊
2ml/kg
5.1±2.9
, 百拇医药
59.0
<0.01
2.2 对胃肠功能的影响
(1)对小肠推进运动试验[2]：取小鼠50只，给药途径同上。实验前禁食24小时，灌胃给药1小时后，分别用炭末阿拉伯胶混悬液灌胃，于炭末液灌胃后20分钟，处死动物，剖腹取出胃肠，测量自贲门至直肠末端的推进距离，计算炭末推进距离占胃肠全长的百分率，作为小肠推进率(结果见表2)。提示止泻液和阿片酊对大肠推进功能有明显抑制作用，止泻液(60g/kg)对小肠推进功能的抑制作用明显高于阿片酊(P<0.05)。表2 止泻液对小肠推进运动的影响(n=10) 组 别
剂量
炭末推进率(%)
(
±SD), 百拇医药
抑制率
生理盐水
20ml/kg
70.7±12.6
-
止泻液
20g/kg
52.7±6.8*△
25.3
止泻液
40g/kg
49.1±13.7*
, http://www.100md.com
31.1
止泻液
60g/kg
13.0±18.7**△
81.7
阿片酊
2ml/kg
34.5±21.1*
50.7
注：与生理盐水的比较，*P<0.01；与阿片酊组比较 △P<0.05
(2)胃排空试验[3]：小鼠55只，随机均分5组。实验前禁食16小时，分别皮下给药NS 25ml/kg，止泻液10g/kg、20g/kg、40g/kg，阿托品10mg/kg。注药后50分钟用甲基橙水溶液灌胃，于灌胃后20分钟处死小鼠，将胃内容物洗入10ml蒸馏水中，用NaHCO3调节pH至6～6.5离心，取上清液，比色测定光密度，计算胃残留率(结果见表3)，提示高剂量止泻液和阿托品有抑制胃排空作用。表3 止泻液对甲基残留率的影响(n=11) 组 别
, 百拇医药
剂量
胃残留率(%)
(
±SD)胃排空抑
制率(%)
P 值
生理盐水
25ml/kg
32.9±13.6
-
-
止泻液
, http://www.100md.com
10g/kg
45.3±18.2
37.6
P>0.05
止泻液
20g/kg
46.9±22.6
42.5
P>0.05
止泻液
40g/kg
58.8±19.8
, 百拇医药 78.8
P<0.01
阿托品
10mg/kg
47.5±16.7
44.3
P<0.05
3 免疫作用
3.1 腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 小鼠50只，随机均分5组。分别灌胃NS 20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，四君子汤5g/kg，1次/d，共5天。末次给药后1小时，腹腔注射5%绵羊红细胞1ml，于3小时后注射生理盐水2ml，处死小鼠取出腹腔液，离心、涂片、镜检。计算出吞噬率和吞噬指数(结果见表4)，提示止泻液能促进腹腔巨噬细胞吞噬功能。表4 止泻液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬的影响 组 别
, 百拇医药
剂 量
吞噬率
(
±SD)吞噬指数
(
±SD)生理盐水
20ml/kg
12.7±1.40
0.39±0.06
止 泻 液
, 百拇医药
20g/kg
20.30±3.00
0.57±0.09
止 泻 液
40g/kg
17.5±1.88
0.68±0.08
止 泻 液
60g/kg
18.28±1.42
0.630.07
四君子汤
, http://www.100md.com
5g/kg
22.8±2.30±
0.93±0.10
* P<0.01
3.2 止泻液对小鼠抗体形成的影响 健康昆明种小鼠50只，随机分为5组。NS 20ml/kg，止泻液20g/kg、40g/kg、60g/kg，四君子汤5g/kg。连续灌胃给药12天，在给药第6天的同时，用10%绵羊红细胞0.5ml腹腔免疫，免疫后第7天取血，分离血清，灭活测抗体效价(结果见表5)，提示止泻液能促进SRBC抗体形成。
4 止泻液体外抗菌实验
采用试管液体稀释法，将止泻液和氨苄青霉素钠用无菌生理盐水作倍比稀释，分别取不同稀释度的药液，1ml加入双倍营养液肉汤1ml中，使药液的稀释度依次为1/2、1/4、1/8……1/1024(10个管)，止泻液的相应浓度为780、390、145、……1.532mg/kg，氨苄青霉素纳的相应浓度为20、10、5……0.039μg/kg。另设药液、培养基、和菌液三种对照管，在每一稀释管内接种18小时孵育的细菌肉汤培养物(10～3稀释菌液)5ml，混匀，置37℃温箱培养。于接种后24、48小时分别从各管取一接种环液体，转种于相应琼脂平板上，培养24小时后观察结果，以无菌生长的药物提高稀释度作为该药的最低抑菌浓度(MIC)结果见表6。止泻液对福氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌均有一定抗菌作用。
, 百拇医药
5 讨论
小儿腹泻病因复杂，大多数由于饮食不调、消化不良或诱发致病菌感染所引起。中医辨证认为，婴幼儿秋季腹泻的病机为外感湿邪、阻滞肠胃，致使胃肠道运动紊乱或引发肠壁炎症，肠内容物通过肠道的速度加快，肠道对水和营养物质的吸收功能出现障碍，从而导致腹泄。表5 止泻液对小鼠抗体形成的影响 组别
只数
剂量
抗体效价
(
±SD)P 值
生理盐水
11
, 百拇医药
20ml/kg
314±132
-
止 泻 液
10
20g/kg
320±173
>0.05
止 泻 液
11
40g/kg
488±77.0
<0.01
, 百拇医药
止 泻 液
11
60g/kg
512±0
<0.01
四君子汤
10
5g/kg
460±180
<0.05
表6 止泻液体外抑菌试验结果 菌 珠
最低抑菌浓度(mic)
, 百拇医药
止泻液
(mg/ml)
氨苄青霉素钠
(μg/ml)
福氏痢疾杆菌
195
0.625
伤 寒 杆 菌
195
<0.0195
大 肠 杆 菌
195
2.5
, 百拇医药
绿 脓 杆 菌
195
20.5
金黄色葡萄球菌
97.5
<0.0195
实验资料表明，小儿止泻液对大黄所致腹泻有明显抑制作用，可明显抑制小肠推进功能和抑制胃排空，促进腹腔巨噬细胞吞噬功能和特异性抗体形成，对致病性肠道杆菌有一定抗菌作用。
实验结果提示：止泻液具有明显的止泻作用，能抑制胃肠道推进功能，调整紊乱的肠道活动，这是止泻液控制腹泻的重要机制之一。另通过促进血液抗体形成的作用，还可提高肠道抗体产生，从而控制肠道上皮细胞的感染和损伤。止泻液还具有广谱抗菌作用，故对于感染性腹泻，还有标本兼治的功效。 参考文献
[1] 唐映红，等.吴茱萸止泻作用的实验研究.中药药理与临床，1990，(6)：9
[2] 徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992，11
3 张明发，等.温里药对小白鼠胃排空及离体兔小肠活动的影响.中医杂志，1984，(12)：63
(收稿日期：1998-12-08)
, 百拇医药