五种阿昔洛韦软膏释放与透皮性质比较
作者：马晓微 何飞燕* 梁文权
单位：浙江医科大学药剂教研室 杭州310006
关键词：阿昔洛韦；软膏剂；透皮促进剂；释放速率；透皮速率
中国医院药学杂志990501 摘要 目的:探讨不同的软膏基质对阿昔洛韦(ACV)透皮性能的影响。方法:设计四种不同基质的处方，测定ACV从处方中的释放与经皮渗透性质，并与商品ACV软膏进行比较。结果:四种软膏基质中ACV的释放速率与透皮速率均大于商品ACV软膏，乳膏基质、Ⅰ号凝胶基质、PEG基质、Ⅱ号凝胶基质中药物的透皮速率分别是商品软膏的2.47，4.98，12.79与17.85倍。结论:由卡巴浦、月桂氮
酮、丙二醇、薄荷油及辅助促透剂组成的ACV软膏为较好的处方。
, http://www.100md.com The comparison of five ointment formulations of acyclovir on release rate and percutaneous rate in vitro
Ma Xiaowei,He Feiyan,Liang Wenquan (The Department of pharmacy Zhejiang Medical University，Hangzhou 310006)
ABSTRACT OBJECTIVE:The four ointment formulations of acyclovir (ACV) were prepared to select optimal formulation for ACV.METHODS:The release rate and percutaneous rate through rat skin in vitro were measured using the modified Franz diffusion cell and an ACV ointment from a commercial source was used as reference preparation.RESULTS:The result showed that the release rates of ACV from four formulations were all larger than that of the reference preparation.The percutaneous rates of ACV from cream,gel (Ⅰ),PEG and gel (Ⅱ) ointment bases were 2.5,5.0,12.8 and 17.9-fold larger than that of the reference.CONCLUSIONS:The formulation which was made of carbomer and contains laurocapram,propylene glycol,methanol oil and an assist percutaneous enhancer is better than others.
, 百拇医药
KEY WORDS acyclovir,ointment,percutaneous enhancer,release rate,percutaneous rate
阿昔洛韦(Acyclovir,ACV)为核苷类抗病毒药，目前广泛用于皮肤科的各种疱疹病毒感染。除口服、注射给药外，皮肤局部用药仍为低毒、有效的给药途径，尤其作为非处方药物，其应用前景较为广泛。虽国内外已有含药为3%软膏剂上市，但如何提高其临床疗效还值得进一步研究。本实验比较了五种ACV软膏处方，通过测定药物从基质中的释放量、体外皮肤渗透速率等性质来评价与筛选处方。
1 仪器与试药
阿昔洛韦(浙江武义制药厂提供，批号931202)；月桂氮酮(Azone福建寿宁美菲思生物化学品厂，批号960606)；乙醇、丙二醇为分析纯，软膏基质、薄荷油为药用标准。751-G型分光光度计(上海分析仪器厂)；改进Franz扩散池(扩散面积4.52 cm2，接受室体积13 ml)；超级恒温水浴装置及磁力搅拌器；雄性SD大鼠(200～250 g，由本校实验动物中心提供)；阿昔洛韦软膏(市售，上海申光制药厂生产批号950401)。
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2 实验方法
2.1 处方与制备
2.1.1 乳膏基质 (1)处方：ACV 3 g，硬脂酸18 g，凡士林32 g，丙三醇15 g，三乙醇胺1.8 g，月桂氮酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g，蒸馏水加至100.0 g。(2)制备方法：将硬脂酸，凡士林，月桂氮酮水浴加热熔融。另将丙三醇、三乙醇胺、丙二醇、水加热至同温，细流加入上述熔融物中，搅拌至冷，加ACV、薄荷油搅匀，即得白色乳膏。
2.1.2 PEG基质 (1)处方：ACV 3 g，PEG400 4.5 g，PEG4000 12 g，月桂氮酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g。(2)制备方法：将PEG400、PEG4000置于蒸发皿中，水浴加热熔融，加入月桂氮酮、丙二醇混合搅拌至冷，加入药物、薄荷油混合均匀，即得白色软膏。
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2.1.3 Ⅰ号凝胶基质 (1)处方：ACV 3 g，卡巴浦3 g，三乙醇胺3 g，乙醇20 g，月桂氮酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g，蒸馏水加至100.0 g。(2)制备方法：将卡巴浦均匀撒布于适量水中，放置使充分溶胀，加入药物搅匀。取乙醇、丙二醇、月桂氮酮、薄荷油混合均匀，搅拌下加入。另取三乙醇胺溶于适量水中，搅拌下加入，加水至足量，搅拌均匀，即得白色凝胶。
2.1.4 Ⅱ号凝胶基质 处方：各成份同2.1.3，另加辅助促透剂2 g。制备方法同2.1.3。
2.2 药物经皮渗透实验
2.2.1 离体鼠皮的制备 将大鼠断颈处死，背部去毛，取下背部皮肤，去除皮下组织，用生理盐水浸洗后备用。
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2.2.2 实验装置与方法 用改良Franz扩散池，大鼠皮置于扩散池口，角质层面向供给室，真皮层面向接受室，接受液为生理盐水，恒温水浴温度为37℃。将软膏置于供给室。在持续搅拌下，在预定时间内将接受液全部抽出，并换以新鲜生理盐水，取出的接受液用0.8 μm微孔薄膜滤过，测定药物浓度。
2.2.3 建立分析方法及制备标准曲线 经分光光度计扫描，ACV最大吸收峰为251±1 nm，皮肤溶出物在此区域也有较大的吸收。采用双波长等吸收法[1]，可消除皮肤溶出物的干扰。经扫描分析248 nm(λ1)与275 nm(λ2)处为皮肤溶出物的等吸收点，ACV在该两处吸收度的差值为△A，该值为药物浓度的函数。将浓度为24.80，14.88，4.96 μg.ml-1的ACV分别加入空白试验的鼠皮接受液中，测定其回收率分别为95.7%±0.9%，98.8%±2.2%，98.0%±1.5%。标准曲线的制备：精密称取一定量的药物，溶于生理盐水中，配成一系列不同浓度的溶液，在248 nm与275 nm处测得A1与A2值，△A=A1-A2。在6～30 μg.ml-1浓度范围内，△A与浓度呈线性关系，其回归方程为：C=59.98△A+0.02，r=0.999 9。平均回收率为97.52%，RSD为1.6%，最低检测限度为1 μg.ml-1。
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2.2.4 接受液中药物浓度测定及数据处理 按上法测得药物吸收度(△A)后，根据标准曲线、接受室体积和有效扩散面积，求得单位面积累积药物渗透量，取达稳态后单位面积累积药物渗透量与时间回归得到的斜率为药物的透皮速率。
2.3 药物释放实验
用改良Franz扩散池，池口放一层玻璃纸，将软膏均匀涂布于膜上，接受液为蒸馏水，恒温水浴温度为37℃±1℃，在恒温持续搅拌下，在预定时间内将接受液全部抽出，并换以新鲜蒸馏水，取出接受液在251 nm处测定吸收度。经空白试验，各种基质对测定无影响。标准曲线为C=16.484 5A+0.175 5(r=0.999 7)。样品平均回收率为100.48%。RSD为0.7%。最低检出限度为2 μg.ml-1，线性范围为3～10 μg.ml-1。根据标准曲线、接受液体积和有效扩散面积，求得药物从基质中的释放量，将累积释放量与时间平方根作图，得药物释放图形，从直线的斜率求得释放速度。
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3 结果
3.1 药物从软膏基质中的释放 ACV从各处方中的释放结果如图1，药物的释放量(M)与时间平方根(t1/2)线性相关，其释放直线方程：
商品软膏M=1 592.5t1/2-436.7(r=0.996 7)，乳膏基质M=1 693.98t1/2-522.85(r=0.992 2)，Ⅱ号凝胶基质M=2 718.8t1/2-1 067.3(r=0.993 4)，PEG基质M=3 189.7t1/2-1 205.2(r=0.996 0)，Ⅰ号凝胶基质为M=3 357.6t1/2-1 336.2(r=0.993 1)。
图 1 ACV的累积释放量与时间的关系
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◆Ⅱ号凝胶 ○PEG基质 *Ⅰ号凝胶 △乳膏基质 × 商品软膏
从以上数据可见，药物从处方中的释放速率大小呈以下顺序：Ⅰ号凝胶>PEG基质>Ⅱ号凝胶>乳膏基质>商品软膏。
3.2 药物经皮渗透结果 各处方中ACV经皮渗透结果如图2。ACV的透皮速率分别为：商品软膏1.1±0.3，乳膏基质3.0±0.5，Ⅰ号凝胶5.6±0.8，PEG基质14.4±1.1，Ⅱ号凝胶20.2±2.1 μg.cm-2.h-1。在商品软膏中，ACV的透皮速率最小，ACV累积渗透量也较低，后四种处方基质的药物透皮速率分别为它的2.47，4.98，12.79与17.85倍。
图 2 ACV的累积透皮量与时间的关系
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◆Ⅱ号凝胶 ○PEG基质 *Ⅰ号凝胶 △乳膏基质 × 商品软膏
4 讨论
国外有资料报道[2]：ACV软膏基质的体外透皮速率(J)与在体动物实验时病毒的各项抑制指标，如病灶减少数目、病灶减少面积及病毒滴定度等有很强的相关性，相关系数分别为0.95，0.94及0.92。另一资料也表明[3]：ACV在两种不同处方中的透皮速率分别为0.05±0.01与3.93±0.11 μg.cm-2.h-1，动物皮肤感染病毒后给药，病灶降低百分率从34%升至83%。本实验采用体外透皮速率指标来评价筛选软膏处方，具有一定的实用价值。
五种处方均易涂布，与皮肤耦合性好，并易清洗除去，不污染衣物。本实验设计的四种处方中的月桂氮酮、丙二醇、薄荷油为常用的透皮促进剂，它们之间有协同作用[4]。由于各处方中药物浓度相同，因此释放速率的差异可能与软膏基质的性能有关。从实验可见药物从软膏中的释放过程不是药物透皮的限速过程，故ACV的透皮速率与释放速率无相关性。药物的透皮速率主要与基质成份对药物的渗透促进作用有关。Ⅱ号凝胶基质的药物渗透速率、累积渗透量在五种软膏中居首位，它的处方组成，与Ⅰ号凝胶相比，仅增加了少量的辅助促透剂，就使其透皮速率高达Ⅰ号凝胶的3.58倍，20 h和30 h的药物渗透量分别增至2.44与3.51倍。结果表明：辅助促透剂与月桂氮酮、丙二醇、薄荷油有协同的经皮渗透促进作用。
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* 浙医大药学院93级专题实习生
参考文献
1 陈国珍，黄贤如，刘文远.紫外-可见分光光度法.第一版，北京：原子能出版社，1987：178
2 Donna J,Freeman,Spotswood L,et al.Efficacy of topical treatment for herpes virus infections:predictions form and index of drug characteristics in vitro.J Infect Dis,1986,153(1):64
3 Spotswood L,Spruance,Donna J,et al.Comparison of foscarnet cream,acyclovir cream,and acyclovir ointment in the topical treatment of experimental cutaneous herpes simplex virus type Ⅰ infection.Antimicrobial Agents and Chemotherapy,1986,30(1):196
4 Eric W,Smith,Howard I.Maibach,Percutaneous penetration enhancers.CRC Press.Inc,1995:175,229
(1998年3月15日收稿), 百拇医药(马晓微 何飞燕* 梁文权)
单位：浙江医科大学药剂教研室 杭州310006
关键词：阿昔洛韦；软膏剂；透皮促进剂；释放速率；透皮速率
中国医院药学杂志990501 摘要 目的:探讨不同的软膏基质对阿昔洛韦(ACV)透皮性能的影响。方法:设计四种不同基质的处方，测定ACV从处方中的释放与经皮渗透性质，并与商品ACV软膏进行比较。结果:四种软膏基质中ACV的释放速率与透皮速率均大于商品ACV软膏，乳膏基质、Ⅰ号凝胶基质、PEG基质、Ⅱ号凝胶基质中药物的透皮速率分别是商品软膏的2.47，4.98，12.79与17.85倍。结论:由卡巴浦、月桂氮
酮、丙二醇、薄荷油及辅助促透剂组成的ACV软膏为较好的处方。, http://www.100md.com The comparison of five ointment formulations of acyclovir on release rate and percutaneous rate in vitro
Ma Xiaowei,He Feiyan,Liang Wenquan (The Department of pharmacy Zhejiang Medical University，Hangzhou 310006)
ABSTRACT OBJECTIVE:The four ointment formulations of acyclovir (ACV) were prepared to select optimal formulation for ACV.METHODS:The release rate and percutaneous rate through rat skin in vitro were measured using the modified Franz diffusion cell and an ACV ointment from a commercial source was used as reference preparation.RESULTS:The result showed that the release rates of ACV from four formulations were all larger than that of the reference preparation.The percutaneous rates of ACV from cream,gel (Ⅰ),PEG and gel (Ⅱ) ointment bases were 2.5,5.0,12.8 and 17.9-fold larger than that of the reference.CONCLUSIONS:The formulation which was made of carbomer and contains laurocapram,propylene glycol,methanol oil and an assist percutaneous enhancer is better than others.
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KEY WORDS acyclovir,ointment,percutaneous enhancer,release rate,percutaneous rate
阿昔洛韦(Acyclovir,ACV)为核苷类抗病毒药，目前广泛用于皮肤科的各种疱疹病毒感染。除口服、注射给药外，皮肤局部用药仍为低毒、有效的给药途径，尤其作为非处方药物，其应用前景较为广泛。虽国内外已有含药为3%软膏剂上市，但如何提高其临床疗效还值得进一步研究。本实验比较了五种ACV软膏处方，通过测定药物从基质中的释放量、体外皮肤渗透速率等性质来评价与筛选处方。
1 仪器与试药
阿昔洛韦(浙江武义制药厂提供，批号931202)；月桂氮
酮(Azone福建寿宁美菲思生物化学品厂，批号960606)；乙醇、丙二醇为分析纯，软膏基质、薄荷油为药用标准。751-G型分光光度计(上海分析仪器厂)；改进Franz扩散池(扩散面积4.52 cm2，接受室体积13 ml)；超级恒温水浴装置及磁力搅拌器；雄性SD大鼠(200～250 g，由本校实验动物中心提供)；阿昔洛韦软膏(市售，上海申光制药厂生产批号950401)。, http://www.100md.com
2 实验方法
2.1 处方与制备
2.1.1 乳膏基质 (1)处方：ACV 3 g，硬脂酸18 g，凡士林32 g，丙三醇15 g，三乙醇胺1.8 g，月桂氮
酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g，蒸馏水加至100.0 g。(2)制备方法：将硬脂酸，凡士林，月桂氮酮水浴加热熔融。另将丙三醇、三乙醇胺、丙二醇、水加热至同温，细流加入上述熔融物中，搅拌至冷，加ACV、薄荷油搅匀，即得白色乳膏。2.1.2 PEG基质 (1)处方：ACV 3 g，PEG400 4.5 g，PEG4000 12 g，月桂氮
酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g。(2)制备方法：将PEG400、PEG4000置于蒸发皿中，水浴加热熔融，加入月桂氮酮、丙二醇混合搅拌至冷，加入药物、薄荷油混合均匀，即得白色软膏。, 百拇医药
2.1.3 Ⅰ号凝胶基质 (1)处方：ACV 3 g，卡巴浦3 g，三乙醇胺3 g，乙醇20 g，月桂氮
酮5 g，丙二醇5 g，薄荷油0.5 g，蒸馏水加至100.0 g。(2)制备方法：将卡巴浦均匀撒布于适量水中，放置使充分溶胀，加入药物搅匀。取乙醇、丙二醇、月桂氮酮、薄荷油混合均匀，搅拌下加入。另取三乙醇胺溶于适量水中，搅拌下加入，加水至足量，搅拌均匀，即得白色凝胶。2.1.4 Ⅱ号凝胶基质 处方：各成份同2.1.3，另加辅助促透剂2 g。制备方法同2.1.3。
2.2 药物经皮渗透实验
2.2.1 离体鼠皮的制备 将大鼠断颈处死，背部去毛，取下背部皮肤，去除皮下组织，用生理盐水浸洗后备用。
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2.2.2 实验装置与方法 用改良Franz扩散池，大鼠皮置于扩散池口，角质层面向供给室，真皮层面向接受室，接受液为生理盐水，恒温水浴温度为37℃。将软膏置于供给室。在持续搅拌下，在预定时间内将接受液全部抽出，并换以新鲜生理盐水，取出的接受液用0.8 μm微孔薄膜滤过，测定药物浓度。
2.2.3 建立分析方法及制备标准曲线 经分光光度计扫描，ACV最大吸收峰为251±1 nm，皮肤溶出物在此区域也有较大的吸收。采用双波长等吸收法[1]，可消除皮肤溶出物的干扰。经扫描分析248 nm(λ1)与275 nm(λ2)处为皮肤溶出物的等吸收点，ACV在该两处吸收度的差值为△A，该值为药物浓度的函数。将浓度为24.80，14.88，4.96 μg.ml-1的ACV分别加入空白试验的鼠皮接受液中，测定其回收率分别为95.7%±0.9%，98.8%±2.2%，98.0%±1.5%。标准曲线的制备：精密称取一定量的药物，溶于生理盐水中，配成一系列不同浓度的溶液，在248 nm与275 nm处测得A1与A2值，△A=A1-A2。在6～30 μg.ml-1浓度范围内，△A与浓度呈线性关系，其回归方程为：C=59.98△A+0.02，r=0.999 9。平均回收率为97.52%，RSD为1.6%，最低检测限度为1 μg.ml-1。
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2.2.4 接受液中药物浓度测定及数据处理 按上法测得药物吸收度(△A)后，根据标准曲线、接受室体积和有效扩散面积，求得单位面积累积药物渗透量，取达稳态后单位面积累积药物渗透量与时间回归得到的斜率为药物的透皮速率。
2.3 药物释放实验
用改良Franz扩散池，池口放一层玻璃纸，将软膏均匀涂布于膜上，接受液为蒸馏水，恒温水浴温度为37℃±1℃，在恒温持续搅拌下，在预定时间内将接受液全部抽出，并换以新鲜蒸馏水，取出接受液在251 nm处测定吸收度。经空白试验，各种基质对测定无影响。标准曲线为C=16.484 5A+0.175 5(r=0.999 7)。样品平均回收率为100.48%。RSD为0.7%。最低检出限度为2 μg.ml-1，线性范围为3～10 μg.ml-1。根据标准曲线、接受液体积和有效扩散面积，求得药物从基质中的释放量，将累积释放量与时间平方根作图，得药物释放图形，从直线的斜率求得释放速度。
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3 结果
3.1 药物从软膏基质中的释放 ACV从各处方中的释放结果如图1，药物的释放量(M)与时间平方根(t1/2)线性相关，其释放直线方程：
商品软膏M=1 592.5t1/2-436.7(r=0.996 7)，乳膏基质M=1 693.98t1/2-522.85(r=0.992 2)，Ⅱ号凝胶基质M=2 718.8t1/2-1 067.3(r=0.993 4)，PEG基质M=3 189.7t1/2-1 205.2(r=0.996 0)，Ⅰ号凝胶基质为M=3 357.6t1/2-1 336.2(r=0.993 1)。
图 1 ACV的累积释放量与时间的关系
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◆Ⅱ号凝胶 ○PEG基质 *Ⅰ号凝胶 △乳膏基质 × 商品软膏
从以上数据可见，药物从处方中的释放速率大小呈以下顺序：Ⅰ号凝胶>PEG基质>Ⅱ号凝胶>乳膏基质>商品软膏。
3.2 药物经皮渗透结果 各处方中ACV经皮渗透结果如图2。ACV的透皮速率分别为：商品软膏1.1±0.3，乳膏基质3.0±0.5，Ⅰ号凝胶5.6±0.8，PEG基质14.4±1.1，Ⅱ号凝胶20.2±2.1 μg.cm-2.h-1。在商品软膏中，ACV的透皮速率最小，ACV累积渗透量也较低，后四种处方基质的药物透皮速率分别为它的2.47，4.98，12.79与17.85倍。
图 2 ACV的累积透皮量与时间的关系
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◆Ⅱ号凝胶 ○PEG基质 *Ⅰ号凝胶 △乳膏基质 × 商品软膏
4 讨论
国外有资料报道[2]：ACV软膏基质的体外透皮速率(J)与在体动物实验时病毒的各项抑制指标，如病灶减少数目、病灶减少面积及病毒滴定度等有很强的相关性，相关系数分别为0.95，0.94及0.92。另一资料也表明[3]：ACV在两种不同处方中的透皮速率分别为0.05±0.01与3.93±0.11 μg.cm-2.h-1，动物皮肤感染病毒后给药，病灶降低百分率从34%升至83%。本实验采用体外透皮速率指标来评价筛选软膏处方，具有一定的实用价值。
五种处方均易涂布，与皮肤耦合性好，并易清洗除去，不污染衣物。本实验设计的四种处方中的月桂氮
酮、丙二醇、薄荷油为常用的透皮促进剂，它们之间有协同作用[4]。由于各处方中药物浓度相同，因此释放速率的差异可能与软膏基质的性能有关。从实验可见药物从软膏中的释放过程不是药物透皮的限速过程，故ACV的透皮速率与释放速率无相关性。药物的透皮速率主要与基质成份对药物的渗透促进作用有关。Ⅱ号凝胶基质的药物渗透速率、累积渗透量在五种软膏中居首位，它的处方组成，与Ⅰ号凝胶相比，仅增加了少量的辅助促透剂，就使其透皮速率高达Ⅰ号凝胶的3.58倍，20 h和30 h的药物渗透量分别增至2.44与3.51倍。结果表明：辅助促透剂与月桂氮酮、丙二醇、薄荷油有协同的经皮渗透促进作用。, http://www.100md.com
* 浙医大药学院93级专题实习生
参考文献
1 陈国珍，黄贤如，刘文远.紫外-可见分光光度法.第一版，北京：原子能出版社，1987：178
2 Donna J,Freeman,Spotswood L,et al.Efficacy of topical treatment for herpes virus infections:predictions form and index of drug characteristics in vitro.J Infect Dis,1986,153(1):64
3 Spotswood L,Spruance,Donna J,et al.Comparison of foscarnet cream,acyclovir cream,and acyclovir ointment in the topical treatment of experimental cutaneous herpes simplex virus type Ⅰ infection.Antimicrobial Agents and Chemotherapy,1986,30(1):196
4 Eric W,Smith,Howard I.Maibach,Percutaneous penetration enhancers.CRC Press.Inc,1995:175,229
(1998年3月15日收稿), 百拇医药(马晓微 何飞燕* 梁文权)