上皮源性恶性肿瘤患者P16/MTS1抑癌基因失活研究
作者：高居忠 朱章菱 肖白 王跃 迟闺珠 于莎莎 刘复兴 李正廷 张愚
单位：高居忠(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；朱章菱(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；肖 白(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；王 跃(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；迟闺珠(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；于莎莎(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；刘复兴(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；李正廷(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；张 愚(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)
关键词：
北京医学990609 P16基因是1994年4月报道的多肿瘤抑制基因(MTS1)。P16蛋白直接抑制周期依赖性激酶4(CDK4)，可阻断细胞周期进程而抑制癌细胞生长。为探讨P16基因失活与相关肿瘤发生、发展的关系，我们以上皮源性恶性肿瘤患者为研究对象，采用显微切割-聚合酶链反应(PCR)、异常甲基化分析和免疫组化方法，分析肿瘤组织中P16基因失活情况，并对肿瘤患者进行随访。本研究选取手术切除的新鲜或石蜡包埋肿瘤组织，肿瘤类型包括原发性肺癌、食管癌、卵巢癌、子宫内膜癌、喉癌和膀胱癌。
对108例患者进行了P16基因纯合缺失和异常甲基化分析，P16基因纯合缺失率为14%(15/108)。对12例肺癌、食管癌标本进行了显微切割-PCR与常规PCR对比研究，共发现5例纯合缺失标本，其中4例是经显微切割-PCR发现的，表明该方法的确能够提高纯合缺失的检出率。对未发现纯合缺失的新鲜标本进行P16基因异常甲基化检测，检出率为14%(8/58)，证明在中国人群肿瘤患者中甲基化异常同样是P16基因失活的重要途径。综合上述结果，近30%的上皮源性恶性肿瘤患者具有P16基因纯合缺失或甲基化异常。
用免疫组化法检测63例肺癌、喉癌和子宫内膜癌标本，P16蛋白表达缺失率为44%(28/63)。按组织学分级，P16蛋白表达缺失率分别为高分化组3/16(19%)，中分化组15/30(50%)，低分化组10/17(59%)。与高分化组比较，中、低分化组P16蛋白表达缺失率显著升高(P<0.05)。按肿瘤类型分，P16蛋白表达缺失率在肺癌中较高，为7/12(58%)；喉癌次之，为17/39(44%)；预后较好的子宫内膜癌缺失率较低，为4/12(33%)。表明P16蛋白表达缺失与肿瘤类型和病理分级有较密切的关系。
获得随访患者72例，P16基因失活者普遍预后差。肺癌、食管癌病例P16基因失活者手术后半年内41%发生死亡或转移；P16基因发生缺失和异常甲基化的膀胱癌患者复发率为67%，且病理分级呈逐渐上升趋势；子宫内膜癌患者预后较好，术后无复发和死亡，其P16基因失活频率也较低。
研究结果表明，P16基因失活在上皮源性恶性肿瘤患者中是较为常见的基因变化，与患者的病理分级和预后有密切关系。因此对P16基因的检测，为了解肿瘤的生物学特性，特别是判断预后提供了一种重要依据。■
基金项目：本课题为1996年北京市卫生局科学基金项目
收稿日期：1997-10-13 修回日期：1998-12-21, 百拇医药
单位：高居忠(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；朱章菱(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；肖 白(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；王 跃(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；迟闺珠(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；于莎莎(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；刘复兴(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；李正廷(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)；张 愚(北京红十字朝阳医院 邮政编码 100020)
关键词：
北京医学990609 P16基因是1994年4月报道的多肿瘤抑制基因(MTS1)。P16蛋白直接抑制周期依赖性激酶4(CDK4)，可阻断细胞周期进程而抑制癌细胞生长。为探讨P16基因失活与相关肿瘤发生、发展的关系，我们以上皮源性恶性肿瘤患者为研究对象，采用显微切割-聚合酶链反应(PCR)、异常甲基化分析和免疫组化方法，分析肿瘤组织中P16基因失活情况，并对肿瘤患者进行随访。本研究选取手术切除的新鲜或石蜡包埋肿瘤组织，肿瘤类型包括原发性肺癌、食管癌、卵巢癌、子宫内膜癌、喉癌和膀胱癌。
对108例患者进行了P16基因纯合缺失和异常甲基化分析，P16基因纯合缺失率为14%(15/108)。对12例肺癌、食管癌标本进行了显微切割-PCR与常规PCR对比研究，共发现5例纯合缺失标本，其中4例是经显微切割-PCR发现的，表明该方法的确能够提高纯合缺失的检出率。对未发现纯合缺失的新鲜标本进行P16基因异常甲基化检测，检出率为14%(8/58)，证明在中国人群肿瘤患者中甲基化异常同样是P16基因失活的重要途径。综合上述结果，近30%的上皮源性恶性肿瘤患者具有P16基因纯合缺失或甲基化异常。
用免疫组化法检测63例肺癌、喉癌和子宫内膜癌标本，P16蛋白表达缺失率为44%(28/63)。按组织学分级，P16蛋白表达缺失率分别为高分化组3/16(19%)，中分化组15/30(50%)，低分化组10/17(59%)。与高分化组比较，中、低分化组P16蛋白表达缺失率显著升高(P<0.05)。按肿瘤类型分，P16蛋白表达缺失率在肺癌中较高，为7/12(58%)；喉癌次之，为17/39(44%)；预后较好的子宫内膜癌缺失率较低，为4/12(33%)。表明P16蛋白表达缺失与肿瘤类型和病理分级有较密切的关系。
获得随访患者72例，P16基因失活者普遍预后差。肺癌、食管癌病例P16基因失活者手术后半年内41%发生死亡或转移；P16基因发生缺失和异常甲基化的膀胱癌患者复发率为67%，且病理分级呈逐渐上升趋势；子宫内膜癌患者预后较好，术后无复发和死亡，其P16基因失活频率也较低。
研究结果表明，P16基因失活在上皮源性恶性肿瘤患者中是较为常见的基因变化，与患者的病理分级和预后有密切关系。因此对P16基因的检测，为了解肿瘤的生物学特性，特别是判断预后提供了一种重要依据。■
基金项目：本课题为1996年北京市卫生局科学基金项目
收稿日期：1997-10-13 修回日期：1998-12-21, 百拇医药