免疫分型技术在恶性胸腔积液病因诊断中的应用(附2例临床报告)
作者：张学忠 王秀华 徐燕丽 曹世斌
单位：210006 南京医科大学附属南京第一医院
关键词：
中国综合临床990689 对恶性胸腔积液病因诊断常依靠病史、临床表现、胸水细菌学、细胞学、生化检查以及影像、胸膜活检、纤支镜等检查，但仍有少数病例病因不明，有时对疑难病例不得不考虑剖胸探查。我科利用免疫分型技术对2例以恶性胸腔积液为首发症状的粘膜相关淋巴瘤做胸水脱落细胞免疫表型的研究，探讨胸水脱落细胞免疫分型在恶性胸腔积液病因诊断中的价值。报告如下。
1 资料与方法
1.1 病历简介
例1：女，42岁。不明原因出现胸水、腹水1个月，体检未发现全身浅表淋巴结肿大；胸部及腹部CT未见肿瘤及肿大淋巴结征象；胸水检查示血性，未见瘤细胞。
, 百拇医药
例2：男，43岁。右侧胸痛2个月，胸部CT示右侧中央型肺癌伴胸腔积液，未见纵隔淋巴结肿大；胸水检查示血性，脱落细胞病理提示恶性淋巴瘤细胞可能性大。
1.2 实验方法
1.2.1 单克隆抗体 购自北京邦定生物医学公司，选用如下单抗：CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、HLA-DR、CD14、CD33、CD34。
1.2.2 胸水单个核细胞(MNC)涂片制备 抽取胸水10ml，离心，去除上清，用PBS稀释至2倍，加入到含有3ml淋巴细胞分离液的试管上层，离心(2 000转/min)20min，吸取MNC层，PBS洗涤1次，取细胞悬液涂片。
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1.2.3 免疫表型检测 采用APAAP免疫化学标记方法，按本室常规方法操作，各单抗阳性率标准为淋系≥30%，髓系≤20%。
2 结果
2.1 免疫表型结果 例1各单抗阳性 ：CD19 45%、CD20 63%、余HLA-DR、CD3、CD5、CD7、CD10、CD14、CD33、CD34均阴性，提示B细胞恶性淋巴瘤可能，例2各单抗阳性率示：CD3 98%、CD5 56%、余CD7、CD10、CD19、CD20、CD14、CD33、CD34HLA-DR均阴性，倾向T细胞恶性淋巴瘤。
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2.2 相关检测结果 例1进一步做胃镜病理活检示：原发于胃粘膜相关淋巴瘤。例2进一步做纤支镜病理活检示：原发于肺恶性淋巴瘤。均与胸水脱落细胞免疫分型结果相符。
2.3 治疗观察 例1、2均采用标准CHOP方案化疗。例1抽胸水2次，腹水1例；例2抽胸水1次。量均在500～800ml之间。经2个疗程化疗后，病情均明显好转，临床症状及体征消失，各项检查指标恢复正常。嘱定期化疗。
3 讨论
免疫分型技术已广泛应用于白血病及淋巴瘤的诊断，常用的取材是外周血和骨髓涂片或其MNC涂片，以及淋巴结印片或涂片(李家增，王鸿利，韩忠朝.血液实验学.上海：上海科学技术出版社，1997.84-93)。但由于一些粘膜相关淋巴瘤，可起源于胸腹脏器淋巴结的淋巴瘤，取材往往不易；手术探查创伤较大，不利于广泛使用；因此，对一些原因不明以胸水为首发症状的恶性肿瘤患者，采用胸水脱落细胞免疫表型检测可能对病因诊断具有一定的帮助。
上述2例经常规检查方法尚不能明确胸水病因，但经胸水MNC免疫分型提示恶性淋巴瘤可能，与进一步做纤支镜及胃镜检查结果相符，说明胸水MNC免疫分型可作为血液系统恶性肿瘤与其它实体瘤的鉴别诊断方法。所以，对经多种检查方法仍不能确定胸水病因者，可考虑做胸水脱落细胞免疫分型。因其取材方便，操作简单，鉴别诊断价值大，值得推广应用。
[收稿：1998-07-28], http://www.100md.com
单位：210006 南京医科大学附属南京第一医院
关键词：
中国综合临床990689 对恶性胸腔积液病因诊断常依靠病史、临床表现、胸水细菌学、细胞学、生化检查以及影像、胸膜活检、纤支镜等检查，但仍有少数病例病因不明，有时对疑难病例不得不考虑剖胸探查。我科利用免疫分型技术对2例以恶性胸腔积液为首发症状的粘膜相关淋巴瘤做胸水脱落细胞免疫表型的研究，探讨胸水脱落细胞免疫分型在恶性胸腔积液病因诊断中的价值。报告如下。
1 资料与方法
1.1 病历简介
例1：女，42岁。不明原因出现胸水、腹水1个月，体检未发现全身浅表淋巴结肿大；胸部及腹部CT未见肿瘤及肿大淋巴结征象；胸水检查示血性，未见瘤细胞。
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例2：男，43岁。右侧胸痛2个月，胸部CT示右侧中央型肺癌伴胸腔积液，未见纵隔淋巴结肿大；胸水检查示血性，脱落细胞病理提示恶性淋巴瘤细胞可能性大。
1.2 实验方法
1.2.1 单克隆抗体 购自北京邦定生物医学公司，选用如下单抗：CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、HLA-DR、CD14、CD33、CD34。
1.2.2 胸水单个核细胞(MNC)涂片制备 抽取胸水10ml，离心，去除上清，用PBS稀释至2倍，加入到含有3ml淋巴细胞分离液的试管上层，离心(2 000转/min)20min，吸取MNC层，PBS洗涤1次，取细胞悬液涂片。
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1.2.3 免疫表型检测 采用APAAP免疫化学标记方法，按本室常规方法操作，各单抗阳性率标准为淋系≥30%，髓系≤20%。
2 结果
2.1 免疫表型结果 例1各单抗阳性 ：CD19 45%、CD20 63%、余HLA-DR、CD3、CD5、CD7、CD10、CD14、CD33、CD34均阴性，提示B细胞恶性淋巴瘤可能，例2各单抗阳性率示：CD3 98%、CD5 56%、余CD7、CD10、CD19、CD20、CD14、CD33、CD34HLA-DR均阴性，倾向T细胞恶性淋巴瘤。
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2.2 相关检测结果 例1进一步做胃镜病理活检示：原发于胃粘膜相关淋巴瘤。例2进一步做纤支镜病理活检示：原发于肺恶性淋巴瘤。均与胸水脱落细胞免疫分型结果相符。
2.3 治疗观察 例1、2均采用标准CHOP方案化疗。例1抽胸水2次，腹水1例；例2抽胸水1次。量均在500～800ml之间。经2个疗程化疗后，病情均明显好转，临床症状及体征消失，各项检查指标恢复正常。嘱定期化疗。
3 讨论
免疫分型技术已广泛应用于白血病及淋巴瘤的诊断，常用的取材是外周血和骨髓涂片或其MNC涂片，以及淋巴结印片或涂片(李家增，王鸿利，韩忠朝.血液实验学.上海：上海科学技术出版社，1997.84-93)。但由于一些粘膜相关淋巴瘤，可起源于胸腹脏器淋巴结的淋巴瘤，取材往往不易；手术探查创伤较大，不利于广泛使用；因此，对一些原因不明以胸水为首发症状的恶性肿瘤患者，采用胸水脱落细胞免疫表型检测可能对病因诊断具有一定的帮助。
上述2例经常规检查方法尚不能明确胸水病因，但经胸水MNC免疫分型提示恶性淋巴瘤可能，与进一步做纤支镜及胃镜检查结果相符，说明胸水MNC免疫分型可作为血液系统恶性肿瘤与其它实体瘤的鉴别诊断方法。所以，对经多种检查方法仍不能确定胸水病因者，可考虑做胸水脱落细胞免疫分型。因其取材方便，操作简单，鉴别诊断价值大，值得推广应用。
[收稿：1998-07-28], http://www.100md.com