二氨基萘分光光度法测定盐硒
作者：朱参胜 马长安 刘惠兰 孙巧珍 邓建霞
单位：陕西省地方病防治研究所，陕西 西安 710003
关键词：二氨基萘；盐硒；分光光度法
中国地方病学杂志990629 [摘要] 目的 建立适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的常规监测的分光光度法。方法 研究Se4+与二氨基萘反应的吸收光谱特性，干扰物质的干扰情况，对测定波长、试剂用量、反应时间、测定范围等进行了优化选择。结果 方法最低检出限为0.02μg，摩尔吸光系数ε365为1.8×104，对不同硒含量的盐样中硒的测定，批内变异小于6.2%，批间变异小于9.7%，准确度范围为97.9%～105.6%，该方法与其它法测定结果无显著性差异(P>0.2)。结论 该方法具有简便、经济、灵敏、准确等优点，适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的常规监测工作。
, 百拇医药
[中图分类号] R115 [文献标识码] A[文章编号]1000-4955(1999)06-0480-04
Spectrophotometric determination of salt selenium with diaminonaphthalene
ZHU Can-sheng,MA Chang-an,LIU Hui-lan,et al.
(Shanxi Provincial Institute for Endemic Disease Control,Xi'an 710003,China)
[Abstract] Objective To establish a spectrophotometric method for measurement salt selenium for routine salt quality monitoring.Methods Studying the spectrophotometric features of the reaction between Se4+ and 2,3-diaminonaphthalene,and elemination of interfering substances;Optimizing measurement wavelength,reagent,reaction periods,and determination range.Results Detecting limit of this method is 0.02μg ε365 is 1.8×104;Intra CV is less than 6.2%;There is no signifi cant difference between this method and flurometric method fo salt selenium defermination (P>0.2)，inter CV is less than 9.7%;recovery ranges between 97.9%～105.6%.Conclusions This method for salt selenium is convenient,economic,sensitive,and accurate,suitable for salt selenium monitoring.
, 百拇医药
[Key words] Diaminonaphthalene;Spectrophotometry;Salt Selenium
食盐加硒是人群补充硒简便、易行的方法。目前用于防制克山病、大骨节病，基层卫生防疫单位，应开展盐硒的常规监测，以控制盐中硒的含量。本文利用硒与二氨基萘反应后，溶液吸光值与硒含量有良好的线性关系，成功的建立了硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的分光光度法。
1 实验
1.1 原理 在pH1.5～2.0溶液中，2,3-二氨基萘选择性的与Se4+反应生成黄色的4,5-苯并苤硒脑，能为环己烷萃取，在365nm波长处，溶液吸光值与硒含量成直线关系。
1.2 仪器 本法首次使用的玻璃器皿，均须以1+1硝酸浸泡5h以上，并用自来水、纯水冲洗洁净。本法用过的玻璃器皿，以自来水冲洗后，于0.5%洗衣粉溶液中浸泡2h以上，并用自来水、纯水冲洗净。
, 百拇医药
200ml磨口三角；125ml分液漏斗(活塞均勿涂油)；10ml具塞试管；可调恒温水浴锅；振荡器；723型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
1.3 试剂 所用试剂除特别指明外，均为分析纯。
硒标准贮备液：称取0.1000g金属硒，溶于少量硝酸中，加入2ml过氯酸。在沸水浴上加热蒸去硝酸(约3～4h)，稍冷后加入8.4ml盐酸，继续加热2min,然后用纯水定容至100ml。此溶液1.00ml含1.00mg硒。或精确称取干燥 的亚硒酸钠1.095g溶于纯水中，稀至500ml(Se1.00mg/ml)。
硒标准溶液：将硒标准贮备液用0.1mol/L盐酸稀释成1.00ml含1.000μg硒。贮备于冰箱内备用。
1+4盐酸：量取100ml盐酸，加于400ml纯水中。
, 百拇医药
0.02%甲酚红溶液：称取20mg甲酚红，溶于少量纯水中，加1滴氨水，使完全溶解，加纯水稀释至100ml。
混合试剂：称取5g盐酸羟胺，溶于少量水中，另外称取37g乙二胺四乙酸二钠(简称EDTA-2Na)于约200ml水中，加热溶解。将盐酸羟受胺与EDTA-2Na溶液混合后，加入25ml 0.02%甲酚红溶液，用水稀释至5L。
0.1% 2,3-二氨基萘溶液：(此溶液需在暗室配制)称取100mg 2,3-二氨基萘(简称DAN)于200ml磨口三角瓶中，加入100ml 0.1mol/L盐酸，振摇至全部溶解(约15min)后，加入约20ml环已烷，继续振摇5min，静置分层后，将水相放回原三角瓶内，再用环已烷萃取多次(次数视DAN中杂质多少而定，一般需5～6次)。将此纯化的水溶液贮存于棕色瓶中，加一层约1cm厚的环己烷以隔绝空气，置冰箱内保存。经常使用以每月配置一次为宜，不经常使用可保存一年。
, 百拇医药
环己烷：用过的环己烷重蒸后可再用。
1.4 步骤 盐样充分混匀后，准确称取10g，用纯水稀释至100ml(必要时，可将溶液用双层定量滤纸过滤)。吸取10ml盐溶液(相当于1g盐样)及硒标准溶液0.00,1.00,2.00,4.00,6.00,8.00,10.00ml于200ml磨口三角瓶中。各瓶均加入10ml混合试剂，摇匀。用1+4盐酸或1+1氨水调至淡澄色。此时溶液pH为1.5～2.0。必要时用pH 0.5～5.0精密试纸检验。
图1 4，5-苯并苤硒脑的吸收谱线
注：Se4+与二氨基萘必须在酸性溶液中反应，以pH 1.5～2.0为最佳，过低时溶液易乳化，太高时测定结果偏高，误差大。
本步骤须在暗室黄色灯光下操作。向上述各瓶中加入0.1%2，3-二氨基萘溶液，摇匀，置沸水中加热6min，取出，放入凉水中冷却。吸取5.00ml环己烷于各瓶中，加塞盖严，振摇4min。将全部溶液移于分液漏斗中，待分层后，弃取水相，将环己烷相置于具塞试管内，盖严待测。
, 百拇医药
在分光光度计上，于365nm波长下，用1cm比色皿，以环己烷为参比，以浓度直读方式，测定标准回归曲线及样品硒含量。仪器给出的浓度即为盐中的硒含量(单位为mg/kg)。
2 结果
2.1 测定波长的选择 硒与二氨基萘反应后，生成4，5-苯并苤硒脑，在环己烷中的吸收谱线如图1所示。最大吸收峰在377nm处，但过锐易偏离比尔定律。在次大吸收峰365nm处附近10nm范围内，吸光度稳定，符合比尔定律，且摩尔吸光系数ε及最低检出量均可提高1.5倍，如表1所示。2.2 DAN用量的选择 取20ml硒标准溶液8份，考察反应所需DAN的量。如表2所示，DAN用量1.0ml时，吸光值接近量大，且基本恒定。所以本法取DAN 1.0ml。
表1 两种波长测定盐硒的几种指标 波长
(nm)
, 百拇医药
回归曲线
相关系数
摩尔吸光系数
ε
最低检出限
μg
377
365
0.9984
0.9998
1.1×104
1.8×104
, http://www.100md.com
0.03
0.02
表2 DAN用量对盐硒测定的影响 DAN用量ml
吸光值A
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
4.5
5.0
0.412
, 百拇医药
0.474
0.489
0.486
0.483
0.488
0.494
0.504
2.3 反应时间的选择 配制10%盐溶液，分别取10.0ml 8份，考察不同反应时间对盐硒测定的影响。如表3所示，反应6min(在沸水浴中加热)，吸光值接近最大，且基本恒定，所以本法取反应时间6min。表3 反应时间对盐硒测定的影响 反应时间min
吸光值A
2
, http://www.100md.com
4
6
8
10
0.242
0.295
0.333
0.338
0.337
2.4 混合试剂用量的选择 取10.0mo 10%盐溶液6份，加入不同量混合试剂。如表4所示，混合试剂用量2.0ml，吸光值接近最大，且基本恒定。考虑有些样品干扰物质含量可能较高，所以本法选取混合试剂10ml。
2.5 共存离子的干扰 配制各种干扰离子溶液，测定对盐硒测定的影响，如表5所示，含量为1%Mg2+,2mg/L Pb2+,10mg/L Fe2+,Cu2+,Cr6+,Zn2+,20mg/L Mn2+,40mg/L Ba2+,Li+,1mol/L NO3,100mg/L IO3等不干扰硒的测定，Sn4+浓度小于40mg/L时，干扰不超过9%，KI存在干扰硒的测定(但目前KI强化食盐较少)。表4 混合试剂用量对盐硒测定的影响 混合试剂用量ml
, 百拇医药
吸光值A
0.00
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
0.271
0.319
0.321
0.299
0.304
0.311
, http://www.100md.com
表5 不同盐硒含量测定的精密度 批内
批间
硒含量
n
x±s(mg/kg)
CV%
n
x±s(mg/kg)
CV%
低
中
高
6
, 百拇医药
6
6
2.27±0.14
4.92±0.26
14.73±0.44
6.2
5.3
3.0
5
5
5
2.36±0.23
5.26±0.79
, 百拇医药
12.61±0.75
9.7
7.1
5.9
2.6 测定范围的选择 取不同量的硒标准溶液，分别测定其吸光值，以浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。结果表明，硒含量在0～16μg范围内，线性关系良好，回归方程为C=22.32A-0.09，相关系数R=0.9998。实际测定时，1g样品中硒含量不超过10μg，故取测定范围为0～10μg。
2.7 精密度与准确度试验 取低、中、高三种浓度盐样，分别测定方法批内精密度和批间精密度。如表5所示，批内变异系数小于6.2%，批间变异系数小于9.7%。取低、中、高三种浓度盐样，分别加入4μg硒标准，测定方法的准确度，结果见表6。方法准确度(回收率)97.9%～105.6%。表6 盐硒含量测定的准确度 硒含量
, 百拇医药
n
样品硒
含量μg
加标量
μg
回收率%
平均值
范围
低
中
高
4
4
4
, 百拇医药
2.36
5.26
12.61
4.00
4.00
4.00
100.5
103.0
99.7
991～102.8
99.0～105.6
97.9～100.7
, http://www.100md.com 2.8 与荧光分光光度法的比较 取36份盐样，分别用本法与荧光分光光度法(经典法)测定硒含量，两法测定结果有高度相关性，相关系数r=0.9869(P<0.001)，回归方程为y=0.93x+0.53(y为分光光度法测定结果，x为荧光法)；经t检验表明，两法测定盐硒，结果无显著性差异(P>0.2)。
3 讨论
硒的光度法报道较多，其中二氨基联苯胺分光光度法应用较为普遍，但此法操作步骤略显烦琐，且用挥发性强及毒性较大的甲苯萃取，对操作人员有一定的危害。近年催化动力光度法的报道不少[1～6]，这些方法虽提高了光度法测定硒的灵敏度，但一般都要严格控制反应温度及时间，方法不宜掌握。
2，3-二氨基萘(英文名为2，3-Diaminonaphthalene,分子式为C10H10N2)能与Se4+发生螯合反应，生成4，5-苯并苤硒脑，在激发波长376nm,发射波长为520nm处产生荧光，可用荧光分光光度法测定。该法灵敏度高，是测定硒的经典方法，已用于各种样品中微量硒的测定7～10。本研究表明Se4+与二氨基萘反应后，生物苯并基硒脑具有特征吸收光谱，可用EDTA和盐酸羟胺掩蔽其它离子对反应的干扰，并优化选择了测定波长，试剂用量、反应时间及测定范围，确定了二氨基萘分光光度法测定硒的适宜条件，成功的建立了盐硒的分光光度法。
, 百拇医药
该法最低检出限为0.02μg，摩尔吸光系数为1.8×104，对不同浓度的盐样中硒的测定，批内变异小于6.2%，批间变异小于9.7%，准确度范围为97.9%～105.6%，该方法与荧光法比较，测定结果无显著性差异(P>0.2)。该法具有简便、经济、灵敏、准确等优点，适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒含量的常规检测工作。(本课题得到了陕西省地方病防治办公室霍玉福、陈学文主任，及陕西省地方病防治研究所陈均阳所长、白广禄副所长等的支持，在此一并致谢!)
参考文献
[1] 加贝.环境中硒的次甲基蓝动力学-荧光测定法[J].国外医学卫生学分册，1987，3：168.
[2] 中南矿业学院分析化学教研室.化学分析手册[M].科学出版社，1984：495.
, 百拇医药
[3] 刘长久,严进.催化动力学法测定痕量硒[J].分析化学，1997，25(5)：615.
[4] 尹赔东，那晓琳.Se-KI-CTMAB-Tween-80体系高灵敏分光光度测定微量硒的研究[J].微量元素与健康研究，1997，14(1)：5.
[5] 姚凤姬.催化光度法测定痕量硒，北京大学学报(自然科学版)[J].1990，26(6)：657.
[6] 陈思钦.催化动力学光度法测定痕量硒[J].江西大学学报(自然科学版)，1989，13(3)：36-40.
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[8] 王光亚，周瑞华，孙淑庄，等.生物样品、水及土壤中痕量硒的荧光测定法[J].营养学报，1985，7(1)：39.
[9] 陈国珍，黄贤智，许金钩，等.荧光分析法[J].北京：科学出版社，1990，432-433.
[10] 宗青文，杨晓弟，张旗，等.使用930型荧光计测定发硒[J].中华预防医学杂志，1995，29(3)：180-181., 百拇医药
单位：陕西省地方病防治研究所，陕西 西安 710003
关键词：二氨基萘；盐硒；分光光度法
中国地方病学杂志990629 [摘要] 目的 建立适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的常规监测的分光光度法。方法 研究Se4+与二氨基萘反应的吸收光谱特性，干扰物质的干扰情况，对测定波长、试剂用量、反应时间、测定范围等进行了优化选择。结果 方法最低检出限为0.02μg，摩尔吸光系数ε365为1.8×104，对不同硒含量的盐样中硒的测定，批内变异小于6.2%，批间变异小于9.7%，准确度范围为97.9%～105.6%，该方法与其它法测定结果无显著性差异(P>0.2)。结论 该方法具有简便、经济、灵敏、准确等优点，适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的常规监测工作。
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[中图分类号] R115 [文献标识码] A[文章编号]1000-4955(1999)06-0480-04
Spectrophotometric determination of salt selenium with diaminonaphthalene
ZHU Can-sheng,MA Chang-an,LIU Hui-lan,et al.
(Shanxi Provincial Institute for Endemic Disease Control,Xi'an 710003,China)
[Abstract] Objective To establish a spectrophotometric method for measurement salt selenium for routine salt quality monitoring.Methods Studying the spectrophotometric features of the reaction between Se4+ and 2,3-diaminonaphthalene,and elemination of interfering substances;Optimizing measurement wavelength,reagent,reaction periods,and determination range.Results Detecting limit of this method is 0.02μg ε365 is 1.8×104;Intra CV is less than 6.2%;There is no signifi cant difference between this method and flurometric method fo salt selenium defermination (P>0.2)，inter CV is less than 9.7%;recovery ranges between 97.9%～105.6%.Conclusions This method for salt selenium is convenient,economic,sensitive,and accurate,suitable for salt selenium monitoring.
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[Key words] Diaminonaphthalene;Spectrophotometry;Salt Selenium
食盐加硒是人群补充硒简便、易行的方法。目前用于防制克山病、大骨节病，基层卫生防疫单位，应开展盐硒的常规监测，以控制盐中硒的含量。本文利用硒与二氨基萘反应后，溶液吸光值与硒含量有良好的线性关系，成功的建立了硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒的分光光度法。
1 实验
1.1 原理 在pH1.5～2.0溶液中，2,3-二氨基萘选择性的与Se4+反应生成黄色的4,5-苯并苤硒脑，能为环己烷萃取，在365nm波长处，溶液吸光值与硒含量成直线关系。
1.2 仪器 本法首次使用的玻璃器皿，均须以1+1硝酸浸泡5h以上，并用自来水、纯水冲洗洁净。本法用过的玻璃器皿，以自来水冲洗后，于0.5%洗衣粉溶液中浸泡2h以上，并用自来水、纯水冲洗净。
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200ml磨口三角；125ml分液漏斗(活塞均勿涂油)；10ml具塞试管；可调恒温水浴锅；振荡器；723型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
1.3 试剂 所用试剂除特别指明外，均为分析纯。
硒标准贮备液：称取0.1000g金属硒，溶于少量硝酸中，加入2ml过氯酸。在沸水浴上加热蒸去硝酸(约3～4h)，稍冷后加入8.4ml盐酸，继续加热2min,然后用纯水定容至100ml。此溶液1.00ml含1.00mg硒。或精确称取干燥 的亚硒酸钠1.095g溶于纯水中，稀至500ml(Se1.00mg/ml)。
硒标准溶液：将硒标准贮备液用0.1mol/L盐酸稀释成1.00ml含1.000μg硒。贮备于冰箱内备用。
1+4盐酸：量取100ml盐酸，加于400ml纯水中。
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0.02%甲酚红溶液：称取20mg甲酚红，溶于少量纯水中，加1滴氨水，使完全溶解，加纯水稀释至100ml。
混合试剂：称取5g盐酸羟胺，溶于少量水中，另外称取37g乙二胺四乙酸二钠(简称EDTA-2Na)于约200ml水中，加热溶解。将盐酸羟受胺与EDTA-2Na溶液混合后，加入25ml 0.02%甲酚红溶液，用水稀释至5L。
0.1% 2,3-二氨基萘溶液：(此溶液需在暗室配制)称取100mg 2,3-二氨基萘(简称DAN)于200ml磨口三角瓶中，加入100ml 0.1mol/L盐酸，振摇至全部溶解(约15min)后，加入约20ml环已烷，继续振摇5min，静置分层后，将水相放回原三角瓶内，再用环已烷萃取多次(次数视DAN中杂质多少而定，一般需5～6次)。将此纯化的水溶液贮存于棕色瓶中，加一层约1cm厚的环己烷以隔绝空气，置冰箱内保存。经常使用以每月配置一次为宜，不经常使用可保存一年。
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环己烷：用过的环己烷重蒸后可再用。
1.4 步骤 盐样充分混匀后，准确称取10g，用纯水稀释至100ml(必要时，可将溶液用双层定量滤纸过滤)。吸取10ml盐溶液(相当于1g盐样)及硒标准溶液0.00,1.00,2.00,4.00,6.00,8.00,10.00ml于200ml磨口三角瓶中。各瓶均加入10ml混合试剂，摇匀。用1+4盐酸或1+1氨水调至淡澄色。此时溶液pH为1.5～2.0。必要时用pH 0.5～5.0精密试纸检验。
图1 4，5-苯并苤硒脑的吸收谱线
注：Se4+与二氨基萘必须在酸性溶液中反应，以pH 1.5～2.0为最佳，过低时溶液易乳化，太高时测定结果偏高，误差大。
本步骤须在暗室黄色灯光下操作。向上述各瓶中加入0.1%2，3-二氨基萘溶液，摇匀，置沸水中加热6min，取出，放入凉水中冷却。吸取5.00ml环己烷于各瓶中，加塞盖严，振摇4min。将全部溶液移于分液漏斗中，待分层后，弃取水相，将环己烷相置于具塞试管内，盖严待测。
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在分光光度计上，于365nm波长下，用1cm比色皿，以环己烷为参比，以浓度直读方式，测定标准回归曲线及样品硒含量。仪器给出的浓度即为盐中的硒含量(单位为mg/kg)。
2 结果
2.1 测定波长的选择 硒与二氨基萘反应后，生成4，5-苯并苤硒脑，在环己烷中的吸收谱线如图1所示。最大吸收峰在377nm处，但过锐易偏离比尔定律。在次大吸收峰365nm处附近10nm范围内，吸光度稳定，符合比尔定律，且摩尔吸光系数ε及最低检出量均可提高1.5倍，如表1所示。2.2 DAN用量的选择 取20ml硒标准溶液8份，考察反应所需DAN的量。如表2所示，DAN用量1.0ml时，吸光值接近量大，且基本恒定。所以本法取DAN 1.0ml。
表1 两种波长测定盐硒的几种指标 波长
(nm)
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回归曲线
相关系数
摩尔吸光系数
ε
最低检出限
μg
377
365
0.9984
0.9998
1.1×104
1.8×104
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0.03
0.02
表2 DAN用量对盐硒测定的影响 DAN用量ml
吸光值A
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
4.5
5.0
0.412
, 百拇医药
0.474
0.489
0.486
0.483
0.488
0.494
0.504
2.3 反应时间的选择 配制10%盐溶液，分别取10.0ml 8份，考察不同反应时间对盐硒测定的影响。如表3所示，反应6min(在沸水浴中加热)，吸光值接近最大，且基本恒定，所以本法取反应时间6min。表3 反应时间对盐硒测定的影响 反应时间min
吸光值A
2
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4
6
8
10
0.242
0.295
0.333
0.338
0.337
2.4 混合试剂用量的选择 取10.0mo 10%盐溶液6份，加入不同量混合试剂。如表4所示，混合试剂用量2.0ml，吸光值接近最大，且基本恒定。考虑有些样品干扰物质含量可能较高，所以本法选取混合试剂10ml。
2.5 共存离子的干扰 配制各种干扰离子溶液，测定对盐硒测定的影响，如表5所示，含量为1%Mg2+,2mg/L Pb2+,10mg/L Fe2+,Cu2+,Cr6+,Zn2+,20mg/L Mn2+,40mg/L Ba2+,Li+,1mol/L NO3,100mg/L IO3等不干扰硒的测定，Sn4+浓度小于40mg/L时，干扰不超过9%，KI存在干扰硒的测定(但目前KI强化食盐较少)。表4 混合试剂用量对盐硒测定的影响 混合试剂用量ml
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吸光值A
0.00
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
0.271
0.319
0.321
0.299
0.304
0.311
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表5 不同盐硒含量测定的精密度 批内
批间
硒含量
n
x±s(mg/kg)
CV%
n
x±s(mg/kg)
CV%
低
中
高
6
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6
6
2.27±0.14
4.92±0.26
14.73±0.44
6.2
5.3
3.0
5
5
5
2.36±0.23
5.26±0.79
, 百拇医药
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9.7
7.1
5.9
2.6 测定范围的选择 取不同量的硒标准溶液，分别测定其吸光值，以浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。结果表明，硒含量在0～16μg范围内，线性关系良好，回归方程为C=22.32A-0.09，相关系数R=0.9998。实际测定时，1g样品中硒含量不超过10μg，故取测定范围为0～10μg。
2.7 精密度与准确度试验 取低、中、高三种浓度盐样，分别测定方法批内精密度和批间精密度。如表5所示，批内变异系数小于6.2%，批间变异系数小于9.7%。取低、中、高三种浓度盐样，分别加入4μg硒标准，测定方法的准确度，结果见表6。方法准确度(回收率)97.9%～105.6%。表6 盐硒含量测定的准确度 硒含量
, 百拇医药
n
样品硒
含量μg
加标量
μg
回收率%
平均值
范围
低
中
高
4
4
4
, 百拇医药
2.36
5.26
12.61
4.00
4.00
4.00
100.5
103.0
99.7
991～102.8
99.0～105.6
97.9～100.7
, http://www.100md.com 2.8 与荧光分光光度法的比较 取36份盐样，分别用本法与荧光分光光度法(经典法)测定硒含量，两法测定结果有高度相关性，相关系数r=0.9869(P<0.001)，回归方程为y=0.93x+0.53(y为分光光度法测定结果，x为荧光法)；经t检验表明，两法测定盐硒，结果无显著性差异(P>0.2)。
3 讨论
硒的光度法报道较多，其中二氨基联苯胺分光光度法应用较为普遍，但此法操作步骤略显烦琐，且用挥发性强及毒性较大的甲苯萃取，对操作人员有一定的危害。近年催化动力光度法的报道不少[1～6]，这些方法虽提高了光度法测定硒的灵敏度，但一般都要严格控制反应温度及时间，方法不宜掌握。
2，3-二氨基萘(英文名为2，3-Diaminonaphthalene,分子式为C10H10N2)能与Se4+发生螯合反应，生成4，5-苯并苤硒脑，在激发波长376nm,发射波长为520nm处产生荧光，可用荧光分光光度法测定。该法灵敏度高，是测定硒的经典方法，已用于各种样品中微量硒的测定7～10。本研究表明Se4+与二氨基萘反应后，生物苯并基硒脑具有特征吸收光谱，可用EDTA和盐酸羟胺掩蔽其它离子对反应的干扰，并优化选择了测定波长，试剂用量、反应时间及测定范围，确定了二氨基萘分光光度法测定硒的适宜条件，成功的建立了盐硒的分光光度法。
, 百拇医药
该法最低检出限为0.02μg，摩尔吸光系数为1.8×104，对不同浓度的盐样中硒的测定，批内变异小于6.2%，批间变异小于9.7%，准确度范围为97.9%～105.6%，该方法与荧光法比较，测定结果无显著性差异(P>0.2)。该法具有简便、经济、灵敏、准确等优点，适合于硒碘(Na2SeO3-KIO3)盐中硒含量的常规检测工作。(本课题得到了陕西省地方病防治办公室霍玉福、陈学文主任，及陕西省地方病防治研究所陈均阳所长、白广禄副所长等的支持，在此一并致谢!)
参考文献
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