高压氧对脑损伤患者血清皮质醇和T细胞亚群的影响
作者：刘 敏 朱双罗 陈新瑞 文 芳
单位：(第二附属医院康复科 长沙 410011)
关键词：脑损伤；高压氧；皮质醇；T细胞亚群；治疗应用
湖南医科大学学报990632 中国图书分类号 R459.6 R742
脑器质性病变如脑梗塞、颅脑外伤等常出现缺血缺氧的病理变化，而高压氧治疗这类病人，可获较好疗效。本研究对75例脑损伤患者经高压氧治疗前后检测血清皮质醇及T细胞亚群的变化试图探讨其机制。
1 对象与方法
1.1 对象 对确诊为脑梗塞、颅脑外伤后综合征及脑震荡患者75例，按年龄、性别分组：①高压氧综合治疗组(HBO组)40例，男27例，女13例，年龄19～68岁，其中脑梗塞24例，脑外伤后综合征7例，脑震荡9例。②对照组35例，男20例，女15例，年龄23～69岁，其中脑梗塞26例，脑外伤后综合征5例，脑震荡4例。
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1.2 方法
1.2.1 治疗方法 对照组仅用常规药物治疗，包括脑细胞活化剂(脑活素、胞二磷胆碱)、能量合剂、丹参、神经营养及支持治疗，10d为1疗程；HBO组患者在对照组治疗的基础上加用HBO治疗，采用90-Ⅱ型单人纯氧舱，20min内加压到2个绝对大气压(ATA)后，稳压40min(吸氧浓度78%左右)，中间洗舱5～10min，后用15～20min匀速减至环境压出舱，为控制舱内氧浓度，稳压全过程持续低流量等量换气，并在减压全过程一直予低流量氧气入舱，每日1次，10d为1疗程。两组患者中血压高者均用尼群地平、开搏通或络活喜降压。两组患者的病程均为10d～2月，在观察期间均未用影响免疫功能的药物。
1.2.2 检测指标 ①两组病例在治疗前后均采静脉血检测血清皮质醇及T细胞亚群。HBO组患者在首次进舱当日早晨8∶00及第10次出舱后次晨8∶00抽肘静脉血，测血清皮质醇和外周血中T细胞亚群。对照组在用药治疗1疗程(10d)前后早晨8∶00采肘静脉血检测上述指标。②T淋巴细胞亚群测定[4]，采用S*P法(Biotinstreptavidin-Peroxidase)。单克隆抗体CD3，CD4及CD8由北京元康医学技术有限公司提供(批号：980505)，淋巴细胞分离液由中国医学科学院血液研究所提供(批号：9501028)。由专人严格按照说明书操作，在OLYMPUS-coll光学显微镜下分别计数200个淋巴细胞并算出阳性细胞百分率。③血清皮质醇测定，采用瑞士Serono公司提供的皮质醇酶标免疫测定盒并按其说明书进行操作。
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1.3 统计学处理 各指标测定结果用均数±标准差(
±s)表示，采用t检验。
2 结 果
2.1 HBO组与对照组患者治疗前后，血清皮质醇检测 结果见表1。HBO组患者治疗后与对照组患者治疗后比较，血清皮质醇含量显著增高，差异有显著性(P<0.05)。
表1 HBO组与对照组治疗前后血清皮质醇含 量变化(±s，mmol.L-1) 组别
n
治疗前
, http://www.100md.com 治疗 后
HBO组
40
204.7±30.9
295.4±40.1
对照组
35
214.8±34.7
209.9±42.3
P
<0.05
2.2 两组患者外周血中T细胞亚群的变化 HBO组患者治疗后与对照组患者治疗后比较，外周血中CD3，CD4，CD8阳性细胞百分率明显降低(P<0.01)，但CD4/CD8值降低不明显(P>0.05)(表2)。表2 两组患者外周血中T细胞亚群变化(±s,%) 组别
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n
治疗前
治疗后
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
HBO组
40
, 百拇医药
61.3± 3.1
43.2±2.3
29.1±4.2
1.49±0.4
42.4±4.1①
29. 4±3.2①
20.2±2.3①
1.4±0.3②
对照组
35
62.2±4.2
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42.5±5.4
28.6±3.7
1.50±0.1
59.4±5.3
44.7±3.5
29.4±4.2
1.5±0.2
①与治疗后对照组比较P<0.01；②与治疗后对照组比较P>0.05
3 讨 论
从表1实验结果可知，对脑梗塞、脑外伤后综合征、脑震荡患者，高血压氧综合治疗组(HBO组)患者血清中皮质醇含量较对照组显著增高(P<0.05)。高压氧对机体的影响包括高气压与高浓度氧两种因素的作用。研究证明在高压氧环境下机体处于一种应激状态[5～8]，可使肾上腺重量增加[2]，肾上腺皮质细胞处于分泌旺盛状态[3]，而皮质醇作为反映肾上腺皮质功能的重要指标，本研究结果表明高压氧环境下人体血清皮质醇浓度明显增高，与张海鹏等的实验结果相符[1]，说明高压氧下人体肾上腺皮质功能处于激活状态。众所周知，应激是机体的一种防御反应，而皮质醇分泌增多对机体抵抗有害刺激起着重要作用，故高压氧下，有利于机体抗炎、抗休克、抗移植排斥及改善脑功能等积极作用，但应注意防止高压氧治疗造成氧中毒。从表2实验结果可知，对脑梗塞、脑外伤后综合征及脑震荡患者，高压氧综合治疗组患者外周血中CD3，CD4及CD8较对照组明显下降(P<0.01)，而CD3，CD4及CD8均为T细胞表面的主要分化抗原，其中CD3是一种多链的糖蛋白。它以δ-ε链和г-ε链二异聚体形式分别与TCR的α链与β链相结合，组成TCR-CD3复合物，通过P59fyn诱发信号传递；CD4是一种单链糖蛋白，肽链结构与免疫球蛋白相似，CD4与MHC-Ⅱ类分子结合，介导细胞粘附(间接)，通过P56ICK诱发信号传递；CD8分子是由α链和β链组成的同二聚体或异二聚体，CD8与MHC-Ⅰ类分子结合介导细胞粘附(间接)，通过P56ICK诱发信号传递[10]。本研究结果表明高压氧环境下对人体细胞免疫功能有抑制作用，与张海鹏等的实验结果相符[1]，但CD4/CD8值下降不明显(P>0.05)，说明高压氧对人体细胞免疫功能的抑制为非特异性。此结果与高压氧下活性氧对细胞膜的非选择性破坏有关，从而使得CD4/CD8值变化不大。有人通过动物实验观察到高压氧处理后大鼠肾上腺皮质增厚，束状带加宽及重量增加，而作为细胞免疫的中枢器官-胸腺则失去正常结构，重量比正常组轻[9]。这些结果证明高压氧使细胞免疫功能降低可能与肾上腺皮质功能活跃有关。而本实验结果也进一步说明高压氧对人体细胞免疫功能的抑制同样可能与血清中皮质醇增加有关。在高压氧环境下，机体细胞免疫功能降低，利用这一作用，可治疗免疫亢进性疾病，延长移植器官的存活时间，因为高压氧不但可抑制排斥反应，又可改善移植器官的微循环氧供应，从而为扩大高压氧的应用提供可观前景。
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参 考 文 献
1 张海鹏.高压氧对小鼠血清皮质醇、脾T淋巴细胞及其亚群的影响.中华理疗杂志，1994，17：72～73
2 张海鹏.高压氧对大鼠末梢血淋巴细胞ANAE活性及胸腺、 肾上腺环核苷酸的影响.中华理疗杂志，1987，9：67～69
3 张海鹏，郝鸣政.高压氧处理后大鼠肾上腺皮质细胞的形态学观察.中华理疗杂志，1987，10：5～7
4 王丽君.检测正常人外周血T淋巴细胞亚群三种方法的比较.中华微生物和免疫学杂志，1989，9：35～37
5 木 神原欣作.高气压酸素治疗法て酸素の生体作用.ワンニカ，1980，7：521～522
6 伊坪喜八郎.高气压酸素の副肾皮质机能しニおよはす影响.日本卫生学杂志，1981，35：807～809
7 中田瑛浩.高血压自然发症ラツトの副肾カテコラミンの升压こ果す役割リおよべ高气压酸素の副肾力カテコテシンこ与える影响.日本内分泌学会杂志，1983，59(增刊)：1043～1045
8 田村好弘.引气压へンゥム高压暴露こ对するにトの内分泌の反应.环境医研年报，1981，32：157～158
9 李文学.高压氧处理后胸腺超微结构实验观察.中华理疗杂志，1989，3：138～140
10 余传霖.现代免疫学.上海：上海医科大学出版社，1998：34～36, 百拇医药
单位：(第二附属医院康复科 长沙 410011)
关键词：脑损伤；高压氧；皮质醇；T细胞亚群；治疗应用
湖南医科大学学报990632 中国图书分类号 R459.6 R742
脑器质性病变如脑梗塞、颅脑外伤等常出现缺血缺氧的病理变化，而高压氧治疗这类病人，可获较好疗效。本研究对75例脑损伤患者经高压氧治疗前后检测血清皮质醇及T细胞亚群的变化试图探讨其机制。
1 对象与方法
1.1 对象 对确诊为脑梗塞、颅脑外伤后综合征及脑震荡患者75例，按年龄、性别分组：①高压氧综合治疗组(HBO组)40例，男27例，女13例，年龄19～68岁，其中脑梗塞24例，脑外伤后综合征7例，脑震荡9例。②对照组35例，男20例，女15例，年龄23～69岁，其中脑梗塞26例，脑外伤后综合征5例，脑震荡4例。
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1.2 方法
1.2.1 治疗方法 对照组仅用常规药物治疗，包括脑细胞活化剂(脑活素、胞二磷胆碱)、能量合剂、丹参、神经营养及支持治疗，10d为1疗程；HBO组患者在对照组治疗的基础上加用HBO治疗，采用90-Ⅱ型单人纯氧舱，20min内加压到2个绝对大气压(ATA)后，稳压40min(吸氧浓度78%左右)，中间洗舱5～10min，后用15～20min匀速减至环境压出舱，为控制舱内氧浓度，稳压全过程持续低流量等量换气，并在减压全过程一直予低流量氧气入舱，每日1次，10d为1疗程。两组患者中血压高者均用尼群地平、开搏通或络活喜降压。两组患者的病程均为10d～2月，在观察期间均未用影响免疫功能的药物。
1.2.2 检测指标 ①两组病例在治疗前后均采静脉血检测血清皮质醇及T细胞亚群。HBO组患者在首次进舱当日早晨8∶00及第10次出舱后次晨8∶00抽肘静脉血，测血清皮质醇和外周血中T细胞亚群。对照组在用药治疗1疗程(10d)前后早晨8∶00采肘静脉血检测上述指标。②T淋巴细胞亚群测定[4]，采用S*P法(Biotinstreptavidin-Peroxidase)。单克隆抗体CD3，CD4及CD8由北京元康医学技术有限公司提供(批号：980505)，淋巴细胞分离液由中国医学科学院血液研究所提供(批号：9501028)。由专人严格按照说明书操作，在OLYMPUS-coll光学显微镜下分别计数200个淋巴细胞并算出阳性细胞百分率。③血清皮质醇测定，采用瑞士Serono公司提供的皮质醇酶标免疫测定盒并按其说明书进行操作。
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1.3 统计学处理 各指标测定结果用均数±标准差(
±s)表示，采用t检验。2 结 果
2.1 HBO组与对照组患者治疗前后，血清皮质醇检测 结果见表1。HBO组患者治疗后与对照组患者治疗后比较，血清皮质醇含量显著增高，差异有显著性(P<0.05)。
表1 HBO组与对照组治疗前后血清皮质醇含 量变化(
±s，mmol.L-1) 组别n
治疗前
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HBO组
40
204.7±30.9
295.4±40.1
对照组
35
214.8±34.7
209.9±42.3
P
<0.05
2.2 两组患者外周血中T细胞亚群的变化 HBO组患者治疗后与对照组患者治疗后比较，外周血中CD3，CD4，CD8阳性细胞百分率明显降低(P<0.01)，但CD4/CD8值降低不明显(P>0.05)(表2)。表2 两组患者外周血中T细胞亚群变化(
±s,%) 组别, http://www.100md.com
n
治疗前
治疗后
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
CD3
CD4
CD8
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HBO组
40
, 百拇医药
61.3± 3.1
43.2±2.3
29.1±4.2
1.49±0.4
42.4±4.1①
29. 4±3.2①
20.2±2.3①
1.4±0.3②
对照组
35
62.2±4.2
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42.5±5.4
28.6±3.7
1.50±0.1
59.4±5.3
44.7±3.5
29.4±4.2
1.5±0.2
①与治疗后对照组比较P<0.01；②与治疗后对照组比较P>0.05
3 讨 论
从表1实验结果可知，对脑梗塞、脑外伤后综合征、脑震荡患者，高血压氧综合治疗组(HBO组)患者血清中皮质醇含量较对照组显著增高(P<0.05)。高压氧对机体的影响包括高气压与高浓度氧两种因素的作用。研究证明在高压氧环境下机体处于一种应激状态[5～8]，可使肾上腺重量增加[2]，肾上腺皮质细胞处于分泌旺盛状态[3]，而皮质醇作为反映肾上腺皮质功能的重要指标，本研究结果表明高压氧环境下人体血清皮质醇浓度明显增高，与张海鹏等的实验结果相符[1]，说明高压氧下人体肾上腺皮质功能处于激活状态。众所周知，应激是机体的一种防御反应，而皮质醇分泌增多对机体抵抗有害刺激起着重要作用，故高压氧下，有利于机体抗炎、抗休克、抗移植排斥及改善脑功能等积极作用，但应注意防止高压氧治疗造成氧中毒。从表2实验结果可知，对脑梗塞、脑外伤后综合征及脑震荡患者，高压氧综合治疗组患者外周血中CD3，CD4及CD8较对照组明显下降(P<0.01)，而CD3，CD4及CD8均为T细胞表面的主要分化抗原，其中CD3是一种多链的糖蛋白。它以δ-ε链和г-ε链二异聚体形式分别与TCR的α链与β链相结合，组成TCR-CD3复合物，通过P59fyn诱发信号传递；CD4是一种单链糖蛋白，肽链结构与免疫球蛋白相似，CD4与MHC-Ⅱ类分子结合，介导细胞粘附(间接)，通过P56ICK诱发信号传递；CD8分子是由α链和β链组成的同二聚体或异二聚体，CD8与MHC-Ⅰ类分子结合介导细胞粘附(间接)，通过P56ICK诱发信号传递[10]。本研究结果表明高压氧环境下对人体细胞免疫功能有抑制作用，与张海鹏等的实验结果相符[1]，但CD4/CD8值下降不明显(P>0.05)，说明高压氧对人体细胞免疫功能的抑制为非特异性。此结果与高压氧下活性氧对细胞膜的非选择性破坏有关，从而使得CD4/CD8值变化不大。有人通过动物实验观察到高压氧处理后大鼠肾上腺皮质增厚，束状带加宽及重量增加，而作为细胞免疫的中枢器官-胸腺则失去正常结构，重量比正常组轻[9]。这些结果证明高压氧使细胞免疫功能降低可能与肾上腺皮质功能活跃有关。而本实验结果也进一步说明高压氧对人体细胞免疫功能的抑制同样可能与血清中皮质醇增加有关。在高压氧环境下，机体细胞免疫功能降低，利用这一作用，可治疗免疫亢进性疾病，延长移植器官的存活时间，因为高压氧不但可抑制排斥反应，又可改善移植器官的微循环氧供应，从而为扩大高压氧的应用提供可观前景。
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参 考 文 献
1 张海鹏.高压氧对小鼠血清皮质醇、脾T淋巴细胞及其亚群的影响.中华理疗杂志，1994，17：72～73
2 张海鹏.高压氧对大鼠末梢血淋巴细胞ANAE活性及胸腺、 肾上腺环核苷酸的影响.中华理疗杂志，1987，9：67～69
3 张海鹏，郝鸣政.高压氧处理后大鼠肾上腺皮质细胞的形态学观察.中华理疗杂志，1987，10：5～7
4 王丽君.检测正常人外周血T淋巴细胞亚群三种方法的比较.中华微生物和免疫学杂志，1989，9：35～37
5 木 神原欣作.高气压酸素治疗法て酸素の生体作用.ワンニカ，1980，7：521～522
6 伊坪喜八郎.高气压酸素の副肾皮质机能しニおよはす影响.日本卫生学杂志，1981，35：807～809
7 中田瑛浩.高血压自然发症ラツトの副肾カテコラミンの升压こ果す役割リおよべ高气压酸素の副肾力カテコテシンこ与える影响.日本内分泌学会杂志，1983，59(增刊)：1043～1045
8 田村好弘.引气压へンゥム高压暴露こ对するにトの内分泌の反应.环境医研年报，1981，32：157～158
9 李文学.高压氧处理后胸腺超微结构实验观察.中华理疗杂志，1989，3：138～140
10 余传霖.现代免疫学.上海：上海医科大学出版社，1998：34～36, 百拇医药