庚型肝炎病毒母婴传播的研究*
作者：李春灵 陈 赤 邬质彬
单位：李春灵 邬质彬 广西医科大学公共卫生学院(南宁 530021)；陈 赤 广西壮族自治区妇幼保健院
关键词：
广西预防医学990604
摘要 用ELISA法对110 名健康孕产妇进行血清抗-HGV测定，阳性和可疑阳性者再用 RT-PCR检测血清HGV RNA，并对HGV RNA 阳性孕产妇的新生儿脐血和婴儿血进行HGV RNA检测。结果110名孕产妇中有7人(6.36%)抗-HGV阳性，8人可疑阳性。其中4人被检测到HGV RNA，阳性率26.66%(4/15) 。她们所产的4名婴儿中2 人血清HGV RNA阳性，提示 HGV 的母婴传播率为50%(2/4)，剖宫产可能具有减轻 HGV母婴传播的作用。
Mother-to-infant transmission of hepatitis G virus
, http://www.100md.com
Li Chunling,Chen Chi,Wu Zhibin.Departmant of Epidemiology, Guangxi Medical University,Nanning 5300021
Abstract To explore the significance and machanism of mother to infant transmission of hepatitis G virus(HGV),serum antibodies against hepatitis G virus (anti-HGV) were detected with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 110 pregnant women and puerpera;anti-HGV positive or anti-HGV dubious positive sera were further tested for HGV RNA by RT- PCR, and HGV RNA in the newborn's umbilical cord blood and infant blood was detected, if their mothers were HGV RNA positive. In addition, the mode of delivery and breast-fed circumstances were also investigated. The results showed that7(6.36%)sera of these women were anti-HGV positive and 8 were anti-HGV dubious positive.HGV RNA were detected for them. 4 were detected HGV RNA positive. Among 4 viremia mothers, 3 were delivered by birth canal,1 was by cesarean section. We were able to detect HGV RNA in 1 newborn's serum of cord blood, another infant's viremia was detected at the age 1 year, the other two infants were peresistant HGV RNA seronegative, including 1 baby delivered by cesarean section.All of these 4 infants were breast-feeding for 6～12 months.We conclude that the prevalance rate of HGV infection among the ordinary pregnant women or puerpera was 6.36%(take anti-HGV as infective mark);The mother-to-infant transmission rate of HGV was 50%(2/4);Cesarean section might have the protection to keep infant from HGV infection.
, http://www.100md.com
Key words HGV Mother-to-infant transmission Polymerase chain reaction
近两年来，国际上有关庚型肝炎病毒(HGV)母婴传播的报道有所增加[1～4]， 但国内鲜见报道。为探讨我国HGV母婴传播的情况，我们采用 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 技术进行了专题研究，现将研究结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 血清标本及筛检步骤 于 1998年3 月至10 月间对在广西壮族自治区妇幼保健院就诊的部分孕产妇采空腹静脉血、新生儿脐血及部分婴儿 (9个月～1岁龄)颈静脉血各2ml，及时分离血清并置-20℃保存待检。共采集110 名孕产妇血清。
首先对孕产妇血清用ELISA 法测定抗庚型肝炎病毒抗体(抗-HGV IgG)， 阳性及可疑阳性者再用RT-PCR检测 HGV RNA。最后对HGV RNA阳性母亲的新生儿脐血和婴儿静脉血检测 HGV RNA。 1.2 抗-HGV IgG 测定 采用山东 3V 生物工程有限公司出品的酶联测定HGV IgG抗体试剂盒(批号：99-1-1)， 测定操作按试剂盒说明书进行。检测结果用酶标仪(台湾， ∑960型)判断，以 样本OD值≥0.25+(阴性对照平均OD值)为阳性，否则为阴性。样本OD 值达不到阳性的标准但颜色与阳性对照相似者判断为可疑阳性。
, http://www.100md.com
1.3 HGV RNA 的提取、 合成与扩增 应用广州中山医科大学达安基因诊断中心出品的 HGV RNA PCR诊断试剂(批号：990401)。 引物随试剂盒提供，其序列如下：
HGV外正向引物: 5'-TGG ACG GGT GAT GAC AGG GTT-3'
HGV外反向引物: 5'-CTG GGT GGC CCC ATG CAT TTC-3'
HGV内正向引物: 5'-GGT AGC CAC TAT AGG TGG GTC TTA A-3'
HGV内反向引物: 5'-CAC TGG TCC TTG TCA ACT CGC CG-3'
2 结果
共筛检健康孕产妇110人， 7人抗-HGV阳性，阳性率为6.36%，8人为可疑抗-HGV 阳性。 用RT-PCR对这15份血清直接检测HGV RNA，其中4例为阳性，占26.67%( 4/15)。在她们所产的4名婴儿中，1例脐血HGV RNA阳性，另1 例婴儿在 1岁时 HGV RNA 阳性。其余 2 例均未检测出 HGV RNA，见表1。
, 百拇医药
表1 4例母婴血清HGV标志物的检测情况 编号
母血
脐血
HGV RNA
婴儿血
HGV RNA
分娩
方式
HBV
“两对半"
抗-HGV
HGV RNA
, http://www.100md.com 1
+/-
+
+
*
产道
-
2
+/-
+
-
+
产道
-
, http://www.100md.com
3
+
+
-
-
产道
-
4
+
+
-
-
剖宫产
大三阳
, http://www.100md.com
注:*为失访
3 讨论
本研究的110名健康孕产妇中，有7人抗-HGV阳性，占6.67%。通过筛查检出HGV RNA 阳性者4人，占2.8%，与台湾同类人群的感染率(2.1%) 接近[3]。4名由HGV RNA 阳性母亲所产的婴儿中有2人发生了HGV 感染， 母婴传播率为50%(2/4)，与其它学者的研究结果相似[1～4]。2名被感染的婴儿1人是在出生时已被感染(脐血 HGV RNA阳性)，另1人是出生后被感染(1岁时血清 HGV RNA 阳转)， 说明HGV的母婴传播感染可发生于宫内，亦可发生于宫外。
产后的授乳及密切的生活接触是否可引起HGV母婴传播，倍受人们关注。虽然产妇的唾液和乳汁均有被检测到HGV RNA或抗-HGV抗体的报道[5～6]，但本研究中3名脐血HGV RNA阴性的婴儿均母乳喂养6～12个月，亦主要由母亲护理，结果1 人在1岁时血清HGV RNA阳性， 2人在9个月和1岁时仍保持HGV RNA阴性。因此产后HGV 母婴传播的机制和影响因素等问题尚需进行深入研究。
, 百拇医药
分娩过程中感染是由于分娩时母血经过胎盘的微细裂口进入胎儿血循环、 或接触母亲阴道分泌物所致。 剖宫产因避免了胎儿与传播媒体的直接接触， 故可防止胎儿遭受感染。本研究中例4的母亲是HGV合并HBV感染( “两对半”大三阳)，其剖宫产的婴儿直到1 岁时仍为HGV RNA阴性。台湾Lin 的两项研究结果也都证实了这一作用[3,7]。 故认为剖宫产可能是切断HGV母婴传播途径的一项有效措施。
4 小结
本研究用ELISA 法检测孕产妇的抗-HGV抗体，阳性率为6.36%(7/110) ， 证明孕产妇与其它人群一样也受到了HGV的感染。用RT-PCR法检测母婴血清HGV RNA，HGV的母婴传播率为50%(2/4)，证实HGV可通过母婴途径传播，但母婴传播的详细机制及影响因素，还有待今后的深入研究。本研究的结果还提示剖宫产可能对减轻HGV的母婴传播具有积极意义。
(广西区妇幼保健院倪少娟医师、王勇副院长，本院一附院检验科秦雪主任、 覃锦耀医师等参加了部分研究工作，特此致谢。)
, http://www.100md.com
*广西壮族自治区教育厅资助课题
参考文献
1 Feucht HH , Zollner B , Polywka S , et al. Vertical transmission of hepatitis G.Lancet, 1996,347:615
2 Viazov S , Riffelmann M , Sarrr S, et al. Transmission of GBV-C/HGV from-drug- addicted mothers to their babies. J Hepatol,1997, 27(1):85
3 Lin HH, Kao JH , Kao YY, et al. Mother- to-infant transmission of GB virus C/hepatitis G virus: The role of high titered maternal viremia and mode of delivery. JID, 1998,177:1202～6
, http://www.100md.com
4 Znett S AR, Tanzi E,Romano L,et al.Multic-enter trial on mother-to-infant transmission of GBV-C virus.The lombardy study group on ver-tical/perinatal hepatitis viruse transmission. J Med virol,1998,54(2):107
5 Fischler B , Lara C, Chen M , et al. Genetic evidence for mother-to-infant transmission of hepatitis G virus. JID ,1997, 176:281
6 马 力, 曲以琴, 赵桂珍，等. 乙型肝炎病毒感染及健康人群庚型肝炎病毒抗体检测报告. 中国公共卫生学报, 1997,16(4):224
7 Lin HH, Kao JH, Chen PJ,et al. Mechanism of vertical transmission of hepatitis G. Lancet,1996, 347: 1116
1999-09-10收稿。1999-10-25修回。, 百拇医药
单位：李春灵 邬质彬 广西医科大学公共卫生学院(南宁 530021)；陈 赤 广西壮族自治区妇幼保健院
关键词：
广西预防医学990604
摘要 用ELISA法对110 名健康孕产妇进行血清抗-HGV测定，阳性和可疑阳性者再用 RT-PCR检测血清HGV RNA，并对HGV RNA 阳性孕产妇的新生儿脐血和婴儿血进行HGV RNA检测。结果110名孕产妇中有7人(6.36%)抗-HGV阳性，8人可疑阳性。其中4人被检测到HGV RNA，阳性率26.66%(4/15) 。她们所产的4名婴儿中2 人血清HGV RNA阳性，提示 HGV 的母婴传播率为50%(2/4)，剖宫产可能具有减轻 HGV母婴传播的作用。
Mother-to-infant transmission of hepatitis G virus
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Li Chunling,Chen Chi,Wu Zhibin.Departmant of Epidemiology, Guangxi Medical University,Nanning 5300021
Abstract To explore the significance and machanism of mother to infant transmission of hepatitis G virus(HGV),serum antibodies against hepatitis G virus (anti-HGV) were detected with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 110 pregnant women and puerpera;anti-HGV positive or anti-HGV dubious positive sera were further tested for HGV RNA by RT- PCR, and HGV RNA in the newborn's umbilical cord blood and infant blood was detected, if their mothers were HGV RNA positive. In addition, the mode of delivery and breast-fed circumstances were also investigated. The results showed that7(6.36%)sera of these women were anti-HGV positive and 8 were anti-HGV dubious positive.HGV RNA were detected for them. 4 were detected HGV RNA positive. Among 4 viremia mothers, 3 were delivered by birth canal,1 was by cesarean section. We were able to detect HGV RNA in 1 newborn's serum of cord blood, another infant's viremia was detected at the age 1 year, the other two infants were peresistant HGV RNA seronegative, including 1 baby delivered by cesarean section.All of these 4 infants were breast-feeding for 6～12 months.We conclude that the prevalance rate of HGV infection among the ordinary pregnant women or puerpera was 6.36%(take anti-HGV as infective mark);The mother-to-infant transmission rate of HGV was 50%(2/4);Cesarean section might have the protection to keep infant from HGV infection.
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Key words HGV Mother-to-infant transmission Polymerase chain reaction
近两年来，国际上有关庚型肝炎病毒(HGV)母婴传播的报道有所增加[1～4]， 但国内鲜见报道。为探讨我国HGV母婴传播的情况，我们采用 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 技术进行了专题研究，现将研究结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 血清标本及筛检步骤 于 1998年3 月至10 月间对在广西壮族自治区妇幼保健院就诊的部分孕产妇采空腹静脉血、新生儿脐血及部分婴儿 (9个月～1岁龄)颈静脉血各2ml，及时分离血清并置-20℃保存待检。共采集110 名孕产妇血清。
首先对孕产妇血清用ELISA 法测定抗庚型肝炎病毒抗体(抗-HGV IgG)， 阳性及可疑阳性者再用RT-PCR检测 HGV RNA。最后对HGV RNA阳性母亲的新生儿脐血和婴儿静脉血检测 HGV RNA。 1.2 抗-HGV IgG 测定 采用山东 3V 生物工程有限公司出品的酶联测定HGV IgG抗体试剂盒(批号：99-1-1)， 测定操作按试剂盒说明书进行。检测结果用酶标仪(台湾， ∑960型)判断，以 样本OD值≥0.25+(阴性对照平均OD值)为阳性，否则为阴性。样本OD 值达不到阳性的标准但颜色与阳性对照相似者判断为可疑阳性。
, http://www.100md.com
1.3 HGV RNA 的提取、 合成与扩增 应用广州中山医科大学达安基因诊断中心出品的 HGV RNA PCR诊断试剂(批号：990401)。 引物随试剂盒提供，其序列如下：
HGV外正向引物: 5'-TGG ACG GGT GAT GAC AGG GTT-3'
HGV外反向引物: 5'-CTG GGT GGC CCC ATG CAT TTC-3'
HGV内正向引物: 5'-GGT AGC CAC TAT AGG TGG GTC TTA A-3'
HGV内反向引物: 5'-CAC TGG TCC TTG TCA ACT CGC CG-3'
2 结果
共筛检健康孕产妇110人， 7人抗-HGV阳性，阳性率为6.36%，8人为可疑抗-HGV 阳性。 用RT-PCR对这15份血清直接检测HGV RNA，其中4例为阳性，占26.67%( 4/15)。在她们所产的4名婴儿中，1例脐血HGV RNA阳性，另1 例婴儿在 1岁时 HGV RNA 阳性。其余 2 例均未检测出 HGV RNA，见表1。
, 百拇医药
表1 4例母婴血清HGV标志物的检测情况 编号
母血
脐血
HGV RNA
婴儿血
HGV RNA
分娩
方式
HBV
“两对半"
抗-HGV
HGV RNA
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+/-
+
+
*
产道
-
2
+/-
+
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+
产道
-
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3
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+
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-
产道
-
4
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剖宫产
大三阳
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注:*为失访
3 讨论
本研究的110名健康孕产妇中，有7人抗-HGV阳性，占6.67%。通过筛查检出HGV RNA 阳性者4人，占2.8%，与台湾同类人群的感染率(2.1%) 接近[3]。4名由HGV RNA 阳性母亲所产的婴儿中有2人发生了HGV 感染， 母婴传播率为50%(2/4)，与其它学者的研究结果相似[1～4]。2名被感染的婴儿1人是在出生时已被感染(脐血 HGV RNA阳性)，另1人是出生后被感染(1岁时血清 HGV RNA 阳转)， 说明HGV的母婴传播感染可发生于宫内，亦可发生于宫外。
产后的授乳及密切的生活接触是否可引起HGV母婴传播，倍受人们关注。虽然产妇的唾液和乳汁均有被检测到HGV RNA或抗-HGV抗体的报道[5～6]，但本研究中3名脐血HGV RNA阴性的婴儿均母乳喂养6～12个月，亦主要由母亲护理，结果1 人在1岁时血清HGV RNA阳性， 2人在9个月和1岁时仍保持HGV RNA阴性。因此产后HGV 母婴传播的机制和影响因素等问题尚需进行深入研究。
, 百拇医药
分娩过程中感染是由于分娩时母血经过胎盘的微细裂口进入胎儿血循环、 或接触母亲阴道分泌物所致。 剖宫产因避免了胎儿与传播媒体的直接接触， 故可防止胎儿遭受感染。本研究中例4的母亲是HGV合并HBV感染( “两对半”大三阳)，其剖宫产的婴儿直到1 岁时仍为HGV RNA阴性。台湾Lin 的两项研究结果也都证实了这一作用[3,7]。 故认为剖宫产可能是切断HGV母婴传播途径的一项有效措施。
4 小结
本研究用ELISA 法检测孕产妇的抗-HGV抗体，阳性率为6.36%(7/110) ， 证明孕产妇与其它人群一样也受到了HGV的感染。用RT-PCR法检测母婴血清HGV RNA，HGV的母婴传播率为50%(2/4)，证实HGV可通过母婴途径传播，但母婴传播的详细机制及影响因素，还有待今后的深入研究。本研究的结果还提示剖宫产可能对减轻HGV的母婴传播具有积极意义。
(广西区妇幼保健院倪少娟医师、王勇副院长，本院一附院检验科秦雪主任、 覃锦耀医师等参加了部分研究工作，特此致谢。)
, http://www.100md.com
*广西壮族自治区教育厅资助课题
参考文献
1 Feucht HH , Zollner B , Polywka S , et al. Vertical transmission of hepatitis G.Lancet, 1996,347:615
2 Viazov S , Riffelmann M , Sarrr S, et al. Transmission of GBV-C/HGV from-drug- addicted mothers to their babies. J Hepatol,1997, 27(1):85
3 Lin HH, Kao JH , Kao YY, et al. Mother- to-infant transmission of GB virus C/hepatitis G virus: The role of high titered maternal viremia and mode of delivery. JID, 1998,177:1202～6
, http://www.100md.com
4 Znett S AR, Tanzi E,Romano L,et al.Multic-enter trial on mother-to-infant transmission of GBV-C virus.The lombardy study group on ver-tical/perinatal hepatitis viruse transmission. J Med virol,1998,54(2):107
5 Fischler B , Lara C, Chen M , et al. Genetic evidence for mother-to-infant transmission of hepatitis G virus. JID ,1997, 176:281
6 马 力, 曲以琴, 赵桂珍，等. 乙型肝炎病毒感染及健康人群庚型肝炎病毒抗体检测报告. 中国公共卫生学报, 1997,16(4):224
7 Lin HH, Kao JH, Chen PJ,et al. Mechanism of vertical transmission of hepatitis G. Lancet,1996, 347: 1116
1999-09-10收稿。1999-10-25修回。, 百拇医药