系统性红斑狼疮C4零基因对C4活性的影响
作者：张宏宇 王宗发 陈仁馨
单位：张宏宇 解放军177医院皮肤科(510317)；王宗发 第一军医大学南方医院皮肤科(510515)；陈仁馨 第一军医大学免疫学教研室(510515)
关键词：红斑狼疮，系统性；补体C4；C4零基因；C4活性
广东医学990606 摘要：目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)C4零基因的存在对C4活性的影响。方法 采用国际参考实验室的方法及计算机凝胶图像光密度分析系统检测45例广东籍汉族人SLE患者C4零基因，同时用氨溶血法检测这些患者血清中补体C4活性。结果 含C4零基因的SLE患者血清中补体C4活性低于不含C4零基因患者的C4活性(P<0.01)。结论 SLE C4零基因的存在对C4活性有影响，C4零基因能引起 SLE患者血清中补体C4活性的下降。
Influence of the C4 null alleles in systemic lupus erythematosus on C4 activity
, 百拇医药
Zhang Hongyu, Wang Zongfa, Chen Renxin.
Department of Dematology, The 177th Hospital of PLA, Guangzhou 510317
Abstract Objective To study the influence of the C4 null alleles in systemic lupus erythematosus on C4 activity. Methods The C4*Q0 genes of 45 patients with SLE in Hans in Guangdong were examined with the methods adopted from the International Refrence Lab and Computer Gel Documentation Analysis System and examined the C4 activity of these patients with Ammonia Hemolysis Test.Results The C4 activity in SLE patients with C4 null alleles was obviously lower than that without C4 null alleles(P<0.01). Conclusion The exsistance of C4 null alleles in SLE has a adverse influence on serum C4 activity.
, 百拇医药
Key words Lupus erythematosus, systemic Complement C4 C4 null alleles C4 activity
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)发病机理一直未甚明了，但是近年的研究已从多因素、多方面对其进行了探讨，遗传因素在其中可能起重要作用，尤其是HLA-Ⅲ类基因中补体成分C4的遗传性缺陷，即补体C4零基因(C4*Q0基因)与 SLE患者遗传易感性有密切相关[1,2]，而 C4*Q0基因与 SLE易感性相关的可能作用机制的研究尚缺乏详细资料报道。我们通过检测45例广东籍汉族人SLE患者C4*Q0基因与其血清中补体C4活性，并对C4零基因的存在与C4活性的影响进行了研究分析。现将我们的资料报道如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象 45份广东籍汉族人SLE患者静脉血(EDTA抗凝)，30 min内置4℃冷冻离心15 min，将血清于-75℃保存备用。标本取自南方医院皮肤科门诊就诊及病房住院的患者，SLE诊断符合1982年美国风湿病学会制定的SLE诊断标准。
, http://www.100md.com
1.2 方法 C4零基因测定按照国际参考实验室介绍的方法[3,4]，先测定C4的同种异型，然后以计算机凝胶图像光密度分析系统扫描分析，即将上述血清标本用神经氨酸酶和羧肽酶处理去除C4末端唾液酸，以琼脂糖凝胶高压电泳将此处理过的血清进行分离，然后用抗C4血清免疫固定，显带进行别型鉴定，同时用C4敏感性溶血覆盖技术区分 C4A与 C4B，最后用英国UVP公司生产的CGDA7500计算机凝胶图像光密度分析系统( CGDAS)扫描分析并定出 C4A与 C4B比率，依此进一步判定结果,求取C4零基因。补体C4活性的测定采用氨溶血法。
1. 3 C4同种异型判读 参照第四届国际补体遗传专题讨论会上命名小组提出的C4同种异型的命名法进行。
1. 4 统计学处理 两组均数之间的比较采用t检验。
2 结果
, 百拇医药
我们在45例SLE患者中检测发现，C4A-7、4、3、2四个同种异型， C4B-5、3、21、2、12、11、1七个同种异型，其中含C4*Q0基因的SLE患者28名，不含C4*Q0基因的SLE患者17名；45例SLE患者C4活性测定结果如表1。
表1 含C4*Q0基因与不含C4*Q0基因SLE
患者血清中C4活性比较 组别
n
±s(U/mL)
SLE(含C4*Q0)
28
397.75±236.06
SLE(不含C4*Q0)
, 百拇医药
17
613.2±245.36
将含C4*Q0基因与不含C4*Q0基因的SLE患者血清中C4活性进行比较并经t检验，两组均数有统计学差异(t =2.924 , P<0.01)。说明含C4*Q0基因的SLE患者C4活性低于不含C4*Q0基因的SLE患者C4活性，C4*Q0基因的存在可引起SLE患者血清中补体C4活性下降。
3 讨论
C4零基因(C4A零基因和C4B零基因)与 SLE遗传易感性有密切相关，这已为许多学者所证实[1,2]，但是 C4零基因与SLE易感性相关的作用机制尚不清楚，值得人们进行广泛而深入的探讨[2]。
我们曾对C4*Q0基因与SLE患者体内自身抗体的产生进行了相关研究，发现它们二者之间无相关性，可能是HLA-Ⅱ类分子在自身抗体的产生中起了重要作用[5]。我们这次研究结果表明，含C4*Q0基因的SLE患者C4活性低于不含C4*Q0基因的SLE患者C4活性，C4*Q0基因的存在可引起SLE患者血清中补体C4活性下降。这对C4*Q0基因与SLE易感性相关的可能作用机制研究，提供了有价值的资料报道，为系统性红斑狼疮发病机理的研究提供了一定的理论基础。它可能是由于 C4B蛋白易于与红细胞表面的糖抗原相结合，使 C4B蛋白具有较高的溶血活性，而SLE患者因C4零基因，特别是C4B零基因的存在，引起了其基因产物 C4B蛋白的缺失，从而造成C4溶血活性的下降[6]；也可能是由于C4零基因的存在，引起C4活化调节力的不足，使C4的功能发生了改变，最终导致 SLE的病理改变发生，进而表现出对 SLE的易感性增高[7]。 参考文献
, http://www.100md.com
1 Brai M,Accardo P,Bellavia D. Polymorphism of the complement components in human pathology. Ann Ital Med Int, 1994,9(3):167
2 张宏宇，陈立菌，王宗发，等.广东籍汉族人系统性红斑狼疮的易感性与补体C4零基因相关分析. 中华风湿病学杂志，1999， 3 (1): 20
3 Sim E,Cross ST. Phenotyping of human complement component C4 allotypes, a class-III HLA antigen. Biochem J,1986, 239: 763
4 陈仁馨，黄为民，聂晓波,等. 中国广东地区汉族人MHC补体单倍型的分析.中国免疫学杂志，1993, 4: 205
, http://www.100md.com
5 张宏宇，王宗发，陈仁馨.补体C4零基因与系统性红斑狼疮自身抗体相关性分析.岭南皮肤性病科杂志，1997, 4(3):1
6 Isenman DE,Young JR. The molecular basis for the difference in immune hemolysis activity of the chido and rodgers isotypes of human complement component C4. J Immunol,1984,132(6):3019
7 Briggs DC,Isenberg DA,Welsh KI,et al. Influence of C4 null allels on C4 activation in systemic lupus erythematosus. Ann Rheum Dis,1991,50(4):251, http://www.100md.com
单位：张宏宇 解放军177医院皮肤科(510317)；王宗发 第一军医大学南方医院皮肤科(510515)；陈仁馨 第一军医大学免疫学教研室(510515)
关键词：红斑狼疮，系统性；补体C4；C4零基因；C4活性
广东医学990606 摘要：目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)C4零基因的存在对C4活性的影响。方法 采用国际参考实验室的方法及计算机凝胶图像光密度分析系统检测45例广东籍汉族人SLE患者C4零基因，同时用氨溶血法检测这些患者血清中补体C4活性。结果 含C4零基因的SLE患者血清中补体C4活性低于不含C4零基因患者的C4活性(P<0.01)。结论 SLE C4零基因的存在对C4活性有影响，C4零基因能引起 SLE患者血清中补体C4活性的下降。
Influence of the C4 null alleles in systemic lupus erythematosus on C4 activity
, 百拇医药
Zhang Hongyu, Wang Zongfa, Chen Renxin.
Department of Dematology, The 177th Hospital of PLA, Guangzhou 510317
Abstract Objective To study the influence of the C4 null alleles in systemic lupus erythematosus on C4 activity. Methods The C4*Q0 genes of 45 patients with SLE in Hans in Guangdong were examined with the methods adopted from the International Refrence Lab and Computer Gel Documentation Analysis System and examined the C4 activity of these patients with Ammonia Hemolysis Test.Results The C4 activity in SLE patients with C4 null alleles was obviously lower than that without C4 null alleles(P<0.01). Conclusion The exsistance of C4 null alleles in SLE has a adverse influence on serum C4 activity.
, 百拇医药
Key words Lupus erythematosus, systemic Complement C4 C4 null alleles C4 activity
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)发病机理一直未甚明了，但是近年的研究已从多因素、多方面对其进行了探讨，遗传因素在其中可能起重要作用，尤其是HLA-Ⅲ类基因中补体成分C4的遗传性缺陷，即补体C4零基因(C4*Q0基因)与 SLE患者遗传易感性有密切相关[1,2]，而 C4*Q0基因与 SLE易感性相关的可能作用机制的研究尚缺乏详细资料报道。我们通过检测45例广东籍汉族人SLE患者C4*Q0基因与其血清中补体C4活性，并对C4零基因的存在与C4活性的影响进行了研究分析。现将我们的资料报道如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象 45份广东籍汉族人SLE患者静脉血(EDTA抗凝)，30 min内置4℃冷冻离心15 min，将血清于-75℃保存备用。标本取自南方医院皮肤科门诊就诊及病房住院的患者，SLE诊断符合1982年美国风湿病学会制定的SLE诊断标准。
, http://www.100md.com
1.2 方法 C4零基因测定按照国际参考实验室介绍的方法[3,4]，先测定C4的同种异型，然后以计算机凝胶图像光密度分析系统扫描分析，即将上述血清标本用神经氨酸酶和羧肽酶处理去除C4末端唾液酸，以琼脂糖凝胶高压电泳将此处理过的血清进行分离，然后用抗C4血清免疫固定，显带进行别型鉴定，同时用C4敏感性溶血覆盖技术区分 C4A与 C4B，最后用英国UVP公司生产的CGDA7500计算机凝胶图像光密度分析系统( CGDAS)扫描分析并定出 C4A与 C4B比率，依此进一步判定结果,求取C4零基因。补体C4活性的测定采用氨溶血法。
1. 3 C4同种异型判读 参照第四届国际补体遗传专题讨论会上命名小组提出的C4同种异型的命名法进行。
1. 4 统计学处理 两组均数之间的比较采用t检验。
2 结果
, 百拇医药
我们在45例SLE患者中检测发现，C4A-7、4、3、2四个同种异型， C4B-5、3、21、2、12、11、1七个同种异型，其中含C4*Q0基因的SLE患者28名，不含C4*Q0基因的SLE患者17名；45例SLE患者C4活性测定结果如表1。
表1 含C4*Q0基因与不含C4*Q0基因SLE
患者血清中C4活性比较 组别
n
±s(U/mL)SLE(含C4*Q0)
28
397.75±236.06
SLE(不含C4*Q0)
, 百拇医药
17
613.2±245.36
将含C4*Q0基因与不含C4*Q0基因的SLE患者血清中C4活性进行比较并经t检验，两组均数有统计学差异(t =2.924 , P<0.01)。说明含C4*Q0基因的SLE患者C4活性低于不含C4*Q0基因的SLE患者C4活性，C4*Q0基因的存在可引起SLE患者血清中补体C4活性下降。
3 讨论
C4零基因(C4A零基因和C4B零基因)与 SLE遗传易感性有密切相关，这已为许多学者所证实[1,2]，但是 C4零基因与SLE易感性相关的作用机制尚不清楚，值得人们进行广泛而深入的探讨[2]。
我们曾对C4*Q0基因与SLE患者体内自身抗体的产生进行了相关研究，发现它们二者之间无相关性，可能是HLA-Ⅱ类分子在自身抗体的产生中起了重要作用[5]。我们这次研究结果表明，含C4*Q0基因的SLE患者C4活性低于不含C4*Q0基因的SLE患者C4活性，C4*Q0基因的存在可引起SLE患者血清中补体C4活性下降。这对C4*Q0基因与SLE易感性相关的可能作用机制研究，提供了有价值的资料报道，为系统性红斑狼疮发病机理的研究提供了一定的理论基础。它可能是由于 C4B蛋白易于与红细胞表面的糖抗原相结合，使 C4B蛋白具有较高的溶血活性，而SLE患者因C4零基因，特别是C4B零基因的存在，引起了其基因产物 C4B蛋白的缺失，从而造成C4溶血活性的下降[6]；也可能是由于C4零基因的存在，引起C4活化调节力的不足，使C4的功能发生了改变，最终导致 SLE的病理改变发生，进而表现出对 SLE的易感性增高[7]。 参考文献
, http://www.100md.com
1 Brai M,Accardo P,Bellavia D. Polymorphism of the complement components in human pathology. Ann Ital Med Int, 1994,9(3):167
2 张宏宇，陈立菌，王宗发，等.广东籍汉族人系统性红斑狼疮的易感性与补体C4零基因相关分析. 中华风湿病学杂志，1999， 3 (1): 20
3 Sim E,Cross ST. Phenotyping of human complement component C4 allotypes, a class-III HLA antigen. Biochem J,1986, 239: 763
4 陈仁馨，黄为民，聂晓波,等. 中国广东地区汉族人MHC补体单倍型的分析.中国免疫学杂志，1993, 4: 205
, http://www.100md.com
5 张宏宇，王宗发，陈仁馨.补体C4零基因与系统性红斑狼疮自身抗体相关性分析.岭南皮肤性病科杂志，1997, 4(3):1
6 Isenman DE,Young JR. The molecular basis for the difference in immune hemolysis activity of the chido and rodgers isotypes of human complement component C4. J Immunol,1984,132(6):3019
7 Briggs DC,Isenberg DA,Welsh KI,et al. Influence of C4 null allels on C4 activation in systemic lupus erythematosus. Ann Rheum Dis,1991,50(4):251, http://www.100md.com