支气管肺泡灌洗液中二氧化硅含量的测定方法
作者：杨毅琴 刘正华 王新宁
单位：南京胸科医院，江苏 南京 210029
关键词：BALF；SiO2；浓酸；消化
中国工业医学杂志990630 Study on the measuring of silicon oxide content in BALF
YANG Yi-qin，LIU Zheng-hua，WANG Xin-ning
摘要：本文运用布点分析对取样的准确性、可靠性进行了研究。取样方法应为整体浓缩取样。应用5种方法处理 BALF，并对浓酸消化法及焦磷酸消化法作了回收实验比较，浓酸消化法的回收率为(96.7±6.0)%。并进行了应用。
中图分类号：R446.69 文献标识码：B
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文章编号：1002-221X(1999)06-0378-02
SiO2颗粒是矽肺的重要致病因素，因此BALF中洗出SiO2的量就成为评价灌洗效果的一个重要指标。由于BALF成分复杂，体积大，含盐量高，而SiO2的含量相对来说很少，因此，如何正确测定BALF中SiO2含量成为大家共同探讨的问题。目前已有多种方法[1～3]，但所测SiO2含量水平相差悬殊。笔者在BALF中SiO2含量的分布、消化处理方法的选择以及实际应用等方面进行了研究，报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
矽肺患者BALF，染尘兔及正常兔BALF，染尘猪BALF，标准石英粉(预防医科院劳卫所尘肺室提供)。
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1.2 BALF消化处理方法
1.2.1 浓酸消化法[4] 将BALF蒸发浓缩到一定体积(保证盐不析出，体积尽可能小)，加入适量的浓硝酸加热回流消化，直至溶液呈淡黄色，稍冷后，加入适量的浓硫酸，加热回流进一步消化，并将硝酸赶尽。当溶液由淡黄色变为黄褐色时，滴加高氯酸/硝酸(1∶1)混合酸，使黄褐色消失，阻止碳化，持续加热至高氯酸完全分解，然后在白烟状态下加热30min。
1.2.2 焦磷酸法[5] 蒸干的BALF灼烧、灰化后用制备的焦磷酸进行消化。
1.2.3 盐酸-氯酸钾法[4] BALF蒸发至稀糊状，加入适量的12.5%盐酸及适量氯酸钾，置水浴上加热，并时时振荡，每隔2～3分钟加氯酸钾0.3～0.5g。
1.2.4 直接蒸干灼烧灰化法 BALF水浴蒸干，转移至镍坩埚内以100℃/h程序升温加热至600℃灼烧灰化。
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1.2.5 过滤法 将BALF用定量滤纸过滤。
1.3 二氧化硅测定方法[5]
2 结果
2.1 BALF中SiO2的分布
为了使分析结果具有可靠性、准确性，首先在矽肺患者洗出的BALF的不同部位取样进行分析。将一病人的各瓶BALF集中倒入一洁净容器内，静置一夜后，将上清液转移至另一洁净容器内(注意不要使沉淀掀起)为A液。将沉淀混匀，完全转移至洁净的离心管中，3 000r/min离心15分钟，将此上清液和沉淀分离，上清液为C，沉淀为B。将A静置一夜后，在A液中距容器口较近的位置利用虹吸吸500ml为D，在离容器口较远的位置同样吸取500ml，将其用定量滤纸过滤，取滤液为E，滤纸部分为F。将B，C，D，E，F 5份标本均用方法1.2.4处理，然后进行测定，结果见表1。
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表1 不同部位取样BALF中SiO2含量 部位
B＃
C
D
E
F
E
标本量
0.3g
500ml
500ml
500ml
, 百拇医药
500ml
SiO2含量(mg)
0.33
0.28
0.46
1.13
3.2
2.0
＃沉淀蒸干烘干后的称重。
*另一病人BALF，方法1.2.4处理。
2.2 消化处理方法的选择
用5种方法处理BALF发现，由于病人BALF粘稠，体积大，过滤速度慢，还未过滤完滤纸即已堵塞。因BALF含盐量较大，方法1.2.4只能用于小体积BALF，而且镍坩埚灼烧时遭破坏。盐酸-氯酸钾法试剂耗量大，最后仍有油状物消化不掉。方法1.2.2由于需蒸干，灼烧，灰化也只适用于小体积BALF，因用焦磷酸消化，灼烧灰化于瓷坩埚中进行。方法1.2.1既可用于小体积BALF，也适用于大体积BALF，试剂用量适当，消化完全。由于方法1.2.1和1.2.2均可行之有效地处理小体积BALF，为比较两方法孰优作了回收实验对照，步骤如下：取一病人BALF集中倒入一洁净容器内，静置一夜，在离容器口较近的位置吸取2 000ml BALF，在3 500r/min下离心半小时，然后利用虹吸从各离心杯大致相同的位置吸取大致相等的上清液装满1 000ml烧杯。准备8只干净的250ml的烧杯，6只装有称好的标准石英粉，2只做空白用。将1 000ml上清液在充分搅拌下利用虹吸注入这8只烧杯，每只120ml，第一份做前空白，最后一份做后空白，其余6只分别做浓酸消化和焦磷酸消化法回收实验，结果见表2。
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表2 浓酸及焦磷酸消化法回收实验结果
mg 方法
加入SiO2量
回收SiO2量
回收率(%)
浓酸消化法
17.65
16.60
94
17.90
16.30
91
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15.85
16.60
105
焦磷酸消化法
13.00
8.00
62
20.00
12.00
60
14.90
8.90
60
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空白 前空白：0.33mg 后空白：0.43mg
注：空白即本底，忽略不计。
2.3 实际应用
用整体浓缩浓酸消化碱熔钼蓝法测试了正常兔BALF5例，染尘兔3组，1组为生理盐水(NS)灌洗组，其余2组为药物组915，916，共28例，染尘猪2组，一组为生理盐水组，一组为药物组917共8例，病人10例，结果见表3。
表3 各类BALF中SiO2量测定结果
mg 种类
组别
n
, http://www.100md.com
s
兔正常
NS
5
1.14
0.24
915
8
3.10
1.50
兔染尘
916
10
, http://www.100md.com 3.72
1.75
NS
10
4.81
2.84
猪染尘
917
4
14.0
8.0
NS
4
, 百拇医药 11.3
3.3
病人灌洗液组
NS
10
131.0
55.2
3 讨论
3.1 由于BALF是一种体积较大的研究材料，如能找到在BALF某一部分SiO2的含量即能代表整体BALF的量，那么可以使标本预处理趋于简单。但是经过布点分析，结果显示，只有取全部BALF才能客观反映BALF中SiO2的含量，其他取样方法都会产生不可忽视的误差。
, http://www.100md.com 3.2 消化处理方法回收实验中，由于焦磷酸粘稠，过滤用定量滤纸，浓酸消化后，用蒸馏水稀释至适量，用0.3μm滤膜过滤，转移沉淀时外包定量滤纸。回收实验结果显示方法1.2.1优于方法1.2.2，滤纸存在严重的穿滤，方法1.2.1能有效截留小颗粒SiO2。
3.3 碱熔钼蓝法中，用Na2CO3/NaCl代替了NaHCO3/NaCl。因为NaHCO3在270℃下即分解。
3.4 整个实验结果显示整体浓缩浓酸消化BALF碱熔钼蓝法测定SiO2是BALF中SiO2含量测定的适宜方法，证实BALF中SiO2含量是评价灌洗效果的一个有效指标。在各类尘肺BALF中，消化液中有的存在絮状白色沉淀，而有的没有，这可能是SiO2的不同形态，有待进一步深入研究。作者简介：杨毅琴(1968—)，女，江西南昌人，硕士，主管技师。碱熔钼蓝法。
, 百拇医药
参考文献：
[1]郭鼐，田琳，张慧峰.肺灌洗治疗尘肺的现状与诌见[J].中华劳动卫生职业病杂志，1994，12(4)：194.
[2]田琳，姚汝林，刘保连.全肺灌洗回收液中粉尘含量测定[J].中华劳动卫生职业病杂志1994，12(4)：208.
[3]张群卫，张琪凤.支气管肺泡灌洗术排尘治疗矽肺的研究[J].中华劳动卫生职业病杂志，1994，12(4)：212.
[4]周恒铎.职业中毒检验[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1976.81～84.338.
[5]顾学箕，王NE464兰.劳动卫生学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1985.365.
[6]中南矿冶学院分析化学教研室.化学分析手册[M].第2版.北京：科学出版社，1972.273.
收稿日期：1998-05-26 修回日期：1999-02-05, 百拇医药
单位：南京胸科医院，江苏 南京 210029
关键词：BALF；SiO2；浓酸；消化
中国工业医学杂志990630 Study on the measuring of silicon oxide content in BALF
YANG Yi-qin，LIU Zheng-hua，WANG Xin-ning
摘要：本文运用布点分析对取样的准确性、可靠性进行了研究。取样方法应为整体浓缩取样。应用5种方法处理 BALF，并对浓酸消化法及焦磷酸消化法作了回收实验比较，浓酸消化法的回收率为(96.7±6.0)%。并进行了应用。
中图分类号：R446.69 文献标识码：B
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文章编号：1002-221X(1999)06-0378-02
SiO2颗粒是矽肺的重要致病因素，因此BALF中洗出SiO2的量就成为评价灌洗效果的一个重要指标。由于BALF成分复杂，体积大，含盐量高，而SiO2的含量相对来说很少，因此，如何正确测定BALF中SiO2含量成为大家共同探讨的问题。目前已有多种方法[1～3]，但所测SiO2含量水平相差悬殊。笔者在BALF中SiO2含量的分布、消化处理方法的选择以及实际应用等方面进行了研究，报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
矽肺患者BALF，染尘兔及正常兔BALF，染尘猪BALF，标准石英粉(预防医科院劳卫所尘肺室提供)。
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1.2 BALF消化处理方法
1.2.1 浓酸消化法[4] 将BALF蒸发浓缩到一定体积(保证盐不析出，体积尽可能小)，加入适量的浓硝酸加热回流消化，直至溶液呈淡黄色，稍冷后，加入适量的浓硫酸，加热回流进一步消化，并将硝酸赶尽。当溶液由淡黄色变为黄褐色时，滴加高氯酸/硝酸(1∶1)混合酸，使黄褐色消失，阻止碳化，持续加热至高氯酸完全分解，然后在白烟状态下加热30min。
1.2.2 焦磷酸法[5] 蒸干的BALF灼烧、灰化后用制备的焦磷酸进行消化。
1.2.3 盐酸-氯酸钾法[4] BALF蒸发至稀糊状，加入适量的12.5%盐酸及适量氯酸钾，置水浴上加热，并时时振荡，每隔2～3分钟加氯酸钾0.3～0.5g。
1.2.4 直接蒸干灼烧灰化法 BALF水浴蒸干，转移至镍坩埚内以100℃/h程序升温加热至600℃灼烧灰化。
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1.2.5 过滤法 将BALF用定量滤纸过滤。
1.3 二氧化硅测定方法[5]
2 结果
2.1 BALF中SiO2的分布
为了使分析结果具有可靠性、准确性，首先在矽肺患者洗出的BALF的不同部位取样进行分析。将一病人的各瓶BALF集中倒入一洁净容器内，静置一夜后，将上清液转移至另一洁净容器内(注意不要使沉淀掀起)为A液。将沉淀混匀，完全转移至洁净的离心管中，3 000r/min离心15分钟，将此上清液和沉淀分离，上清液为C，沉淀为B。将A静置一夜后，在A液中距容器口较近的位置利用虹吸吸500ml为D，在离容器口较远的位置同样吸取500ml，将其用定量滤纸过滤，取滤液为E，滤纸部分为F。将B，C，D，E，F 5份标本均用方法1.2.4处理，然后进行测定，结果见表1。
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表1 不同部位取样BALF中SiO2含量 部位
B＃
C
D
E
F
E
标本量
0.3g
500ml
500ml
500ml
, 百拇医药
500ml
SiO2含量(mg)
0.33
0.28
0.46
1.13
3.2
2.0
＃沉淀蒸干烘干后的称重。
*另一病人BALF，方法1.2.4处理。
2.2 消化处理方法的选择
用5种方法处理BALF发现，由于病人BALF粘稠，体积大，过滤速度慢，还未过滤完滤纸即已堵塞。因BALF含盐量较大，方法1.2.4只能用于小体积BALF，而且镍坩埚灼烧时遭破坏。盐酸-氯酸钾法试剂耗量大，最后仍有油状物消化不掉。方法1.2.2由于需蒸干，灼烧，灰化也只适用于小体积BALF，因用焦磷酸消化，灼烧灰化于瓷坩埚中进行。方法1.2.1既可用于小体积BALF，也适用于大体积BALF，试剂用量适当，消化完全。由于方法1.2.1和1.2.2均可行之有效地处理小体积BALF，为比较两方法孰优作了回收实验对照，步骤如下：取一病人BALF集中倒入一洁净容器内，静置一夜，在离容器口较近的位置吸取2 000ml BALF，在3 500r/min下离心半小时，然后利用虹吸从各离心杯大致相同的位置吸取大致相等的上清液装满1 000ml烧杯。准备8只干净的250ml的烧杯，6只装有称好的标准石英粉，2只做空白用。将1 000ml上清液在充分搅拌下利用虹吸注入这8只烧杯，每只120ml，第一份做前空白，最后一份做后空白，其余6只分别做浓酸消化和焦磷酸消化法回收实验，结果见表2。
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表2 浓酸及焦磷酸消化法回收实验结果
mg 方法
加入SiO2量
回收SiO2量
回收率(%)
浓酸消化法
17.65
16.60
94
17.90
16.30
91
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15.85
16.60
105
焦磷酸消化法
13.00
8.00
62
20.00
12.00
60
14.90
8.90
60
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空白 前空白：0.33mg 后空白：0.43mg
注：空白即本底，忽略不计。
2.3 实际应用
用整体浓缩浓酸消化碱熔钼蓝法测试了正常兔BALF5例，染尘兔3组，1组为生理盐水(NS)灌洗组，其余2组为药物组915，916，共28例，染尘猪2组，一组为生理盐水组，一组为药物组917共8例，病人10例，结果见表3。
表3 各类BALF中SiO2量测定结果
mg 种类
组别
n
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s
兔正常
NS
5
1.14
0.24
915
8
3.10
1.50
兔染尘
916
10
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1.75
NS
10
4.81
2.84
猪染尘
917
4
14.0
8.0
NS
4
, 百拇医药 11.3
3.3
病人灌洗液组
NS
10
131.0
55.2
3 讨论
3.1 由于BALF是一种体积较大的研究材料，如能找到在BALF某一部分SiO2的含量即能代表整体BALF的量，那么可以使标本预处理趋于简单。但是经过布点分析，结果显示，只有取全部BALF才能客观反映BALF中SiO2的含量，其他取样方法都会产生不可忽视的误差。
, http://www.100md.com 3.2 消化处理方法回收实验中，由于焦磷酸粘稠，过滤用定量滤纸，浓酸消化后，用蒸馏水稀释至适量，用0.3μm滤膜过滤，转移沉淀时外包定量滤纸。回收实验结果显示方法1.2.1优于方法1.2.2，滤纸存在严重的穿滤，方法1.2.1能有效截留小颗粒SiO2。
3.3 碱熔钼蓝法中，用Na2CO3/NaCl代替了NaHCO3/NaCl。因为NaHCO3在270℃下即分解。
3.4 整个实验结果显示整体浓缩浓酸消化BALF碱熔钼蓝法测定SiO2是BALF中SiO2含量测定的适宜方法，证实BALF中SiO2含量是评价灌洗效果的一个有效指标。在各类尘肺BALF中，消化液中有的存在絮状白色沉淀，而有的没有，这可能是SiO2的不同形态，有待进一步深入研究。作者简介：杨毅琴(1968—)，女，江西南昌人，硕士，主管技师。碱熔钼蓝法。
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参考文献：
[1]郭鼐，田琳，张慧峰.肺灌洗治疗尘肺的现状与诌见[J].中华劳动卫生职业病杂志，1994，12(4)：194.
[2]田琳，姚汝林，刘保连.全肺灌洗回收液中粉尘含量测定[J].中华劳动卫生职业病杂志1994，12(4)：208.
[3]张群卫，张琪凤.支气管肺泡灌洗术排尘治疗矽肺的研究[J].中华劳动卫生职业病杂志，1994，12(4)：212.
[4]周恒铎.职业中毒检验[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1976.81～84.338.
[5]顾学箕，王NE464兰.劳动卫生学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1985.365.
[6]中南矿冶学院分析化学教研室.化学分析手册[M].第2版.北京：科学出版社，1972.273.
收稿日期：1998-05-26 修回日期：1999-02-05, 百拇医药