开心胶囊对糖尿病大鼠心肌缺血和内皮素的影响★
作者：薛 军 罗小星 陈镜合
单位：广州中医药大学98级博士研究生，广州市机场路12号大院(510405)；广州中医药大学第一附属医院(510405)
关键词：＠开心胶囊；治疗应用；内皮素；心肌缺血；动物模型；大鼠
新中医990619 提 要 为探讨开心胶囊防治糖尿病合并SMI的机理，采用链尿佐菌素和垂体后叶素致大鼠糖尿病合并心肌缺血模型，观察其对糖尿病大鼠的心肌缺血和内皮素及血脂的影响。结果表明：开心胶囊不仅能全面调节血脂代谢，而且能拮抗和阻断ET的释放，降低血浆ET水平，从而有效改善了外周血管和冠脉血管收缩所致的心肌缺血。提示：开心胶囊对糖尿病大鼠垂体后叶素引起的心肌缺血有明显的改善作用的机制之一是阻断ET的释放。
开心胶囊是我院内科陈镜合教授在临床中总结的治疗无症状心肌缺血(Silent Myocardial Ischemia，SMI)的中成药。为研究开心胶囊防治糖尿病合并SMI的机理，本实验观察了该方对糖尿病大鼠的心肌缺血、内皮素的影响和有关生化指标，现总结如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 动物及药物 Wistar大鼠，40只，雄性，体重250±10 g，由第一军医大学实验动物中心提供(动物合格证97A034)。
开心胶囊由西洋参、香附、苍术、栀子、蒲黄、五灵脂、川芎、神曲、山楂组成，广州中医药大学第一附属医院药剂科制备，每粒胶囊含生药0.45 g，用蒸馏水配成50%的悬浮液。消心痛由广州侨光制药厂生产，用蒸馏水配成36%的悬浮液。
1.2 模型建立方法 将40只大鼠随机分为正常组、模型组、消心痛组、开心胶囊组。按60 mg/kg*d腹腔注射链尿佐菌素(美国Sigma公司提供，溶于0.1 ml/L，pH 4.5柠檬酸磷酸缓冲液配制而成)。72 小时后测定血糖，空腹血糖>11.1 mmol/L者为所需糖尿病大鼠。自然喂养2周后，灌胃给药14 天，模型组灌服生理盐水4 ml/kg*d；消心痛组按6 mg/kg*d灌服36%的消心痛悬浮液；开心胶囊按2.18 g/kg*d的剂量灌服50%的开心胶囊悬浮液。第15 天按10 u/kg体重腹腔注射垂体后叶素，造成大鼠心肌缺血。24 小时后采血检测有关指标，正常对照组仅腹腔注射等体积的生理盐水，24 小时后采集标本。
, 百拇医药
1.3 观察指标和方法
1.3.1 一般情况 包括精神、饮食、毛色、体重等。
1.3.2 空腹血糖(己糖激酶法)。
1.3.3 血三脂(酶学法)。
1.3.4 心电图 腹腔注射垂体后叶素24 小时后，大鼠用20%的乌拉坦10 mg/kg*d麻醉，固定，记录心前区搏动最明显处心电图(胸前导联)，测量比较各组心电图J点上升、ST段上移及T波升高的变化，出现下列一项即为阳性心肌缺血：J点升高1.5 mV以上；T波低平(降低原T波50%以上)、双向、倒置；ST段水平下移0.5 mV，心律不齐〔1〕。
1.3.5 内皮素 严格按照药盒说明书要求的方法进行检测。
, 百拇医药 1.3.6 统计方法 组间按t检验方法做统计学处理。
2 结果
2.1 体重 消心痛组(304±40.5 g)和开心胶囊组(368±64 g)均可见大鼠体重增加，但开心胶囊组的效果更为显著，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。
2.2 血糖、血三脂的变化 见表1。
开心胶囊组对血脂三项均有改善作用；消心痛组仅能降低胆固醇。表明中药有较好的降低血脂的作用。2种药物对血糖均无影响。
2.3 内皮素和心电图的变化 见表2。
消心痛及开心胶囊均有降低内皮素水平(P<0.05)和降低心肌缺血阳性率的作用，其中开心胶囊组的作用更为显著。
, 百拇医药
表1 各组大鼠血糖、血三酯的比较(
±s，mmol/L)
组别
剂量
g/kg*d
n
胆固醇
甘油三酯
高密度脂蛋白
血糖
正常组
-
, http://www.100md.com 10
1.2±0.09
0.5±0.07
0.5±0.06
10.3±0.90
模型组
-
10
1.5±0.20※
2.4±1.20※
0.6±0.10
23.2±3.20※
, 百拇医药
消心痛组
0.06
10
1.5±0.10
1.2±0.30＃
0.4±0.10
23.4±2.80
开心胶囊组
2.18
10
1.3±0.13＃
0.8±0.10＃
, 百拇医药
1.1±0.59＃
23.4±2.80
注：※与正常对照组相比P<0.05，＃与模型组相比P<0.05
表2 各组大鼠内皮素(±s，PG/ml)和心电图的比较
组别
剂量
g/kg*d
n
内皮素
心肌缺血(%)
, 百拇医药
阳性率
阴性率
正常组
-
10
202.3±18.5
13.0
87.0
模型组
-
10
277.7±10.2※
11.7
, http://www.100md.com
88.3
消心痛组
0.06
10
182.1±10.2＃
58.6
41.4＃
开心胶囊组
2.18
10
163.8±23.8＃＃
74.3
, http://www.100md.com
25.7＃
注：※与正常组相比P<0.05；＃与模型组相比P<0.05；＃＃与模型组相比P<0.01
3 讨论
SMI是指患者虽有心肌缺血的客观证据(如心电图典型的缺血性ST段改变，核医学或超声心动图检查所示的灌注缺损及/或室壁运动异常)，但不伴随各种类型心绞痛症状，是冠心病的一种特殊类型〔2〕。由于SMI无明显临床症状，常被人们忽视，但它可导致急性心肌梗塞、猝死等心脏急性事件，从而影响冠心病患者的预后。
我们曾报道糖尿病病人SMI的发生率远较非糖尿病病人高，其症状要比非糖尿病的冠心病患者严重和隐蔽〔3〕。许多研究结果表明，在糖尿病及心血管疾病患者中，ET明显升高〔3〕。本实验结果进一步证实了大鼠糖尿病合并心肌缺血时血浆ET与正常对照组相比显著升高(P<0.05)。目前的研究还显示，ET可反映心肌缺血/再灌注损伤情况，应用ET特异拮抗剂或ET合成抑制剂可以改善心肌的心肌缺血/再灌注损伤程度。探寻有效的药物拮抗和阻断ET的致病作用已成为目前治疗心血管病的一条新途径。ET的拮抗剂治疗可以有效地防止外周血管和冠脉血管收缩所致的高血压和冠心病，缓解休克和心衰程度。
, 百拇医药
本实验结果表明，开心胶囊有较好的改善心肌缺血的作用。它不仅可以全面调节血脂代谢，而且能拮抗和阻断ET的释放，降低血浆ET水平，从而有效改善了外周血管和冠脉血管收缩所致的心肌缺血。提示开心胶囊对糖尿病大鼠垂体后叶素引起的心肌缺血有明显的改善作用的机制之一，是阻断ET的释放。
★国家中医药管理局资助重点课题(95B134)
参考文献
[1] 李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版，1991.115～116
[2] 李 静.无症状心肌缺血及中西医结合治疗.中国中西医结合杂志，1992，12(9)∶548
[3] 罗小星，陈镜合，周 英.334例非胰岛素依赖型糖尿病患者无症状性心肌缺血的检出率及其中医辨证分型特点.中西医结合实用临床急救，1998，(5)∶248～251
[4] 周丽诺，朱禧星.Ⅱ型糖尿病人血浆中内皮素-1含量增值的临床意义.上海医科大学学报，1994，21(6)：437
(修回日期：1998-12-24), 百拇医药
单位：广州中医药大学98级博士研究生，广州市机场路12号大院(510405)；广州中医药大学第一附属医院(510405)
关键词：＠开心胶囊；治疗应用；内皮素；心肌缺血；动物模型；大鼠
新中医990619 提 要 为探讨开心胶囊防治糖尿病合并SMI的机理，采用链尿佐菌素和垂体后叶素致大鼠糖尿病合并心肌缺血模型，观察其对糖尿病大鼠的心肌缺血和内皮素及血脂的影响。结果表明：开心胶囊不仅能全面调节血脂代谢，而且能拮抗和阻断ET的释放，降低血浆ET水平，从而有效改善了外周血管和冠脉血管收缩所致的心肌缺血。提示：开心胶囊对糖尿病大鼠垂体后叶素引起的心肌缺血有明显的改善作用的机制之一是阻断ET的释放。
开心胶囊是我院内科陈镜合教授在临床中总结的治疗无症状心肌缺血(Silent Myocardial Ischemia，SMI)的中成药。为研究开心胶囊防治糖尿病合并SMI的机理，本实验观察了该方对糖尿病大鼠的心肌缺血、内皮素的影响和有关生化指标，现总结如下。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 动物及药物 Wistar大鼠，40只，雄性，体重250±10 g，由第一军医大学实验动物中心提供(动物合格证97A034)。
开心胶囊由西洋参、香附、苍术、栀子、蒲黄、五灵脂、川芎、神曲、山楂组成，广州中医药大学第一附属医院药剂科制备，每粒胶囊含生药0.45 g，用蒸馏水配成50%的悬浮液。消心痛由广州侨光制药厂生产，用蒸馏水配成36%的悬浮液。
1.2 模型建立方法 将40只大鼠随机分为正常组、模型组、消心痛组、开心胶囊组。按60 mg/kg*d腹腔注射链尿佐菌素(美国Sigma公司提供，溶于0.1 ml/L，pH 4.5柠檬酸磷酸缓冲液配制而成)。72 小时后测定血糖，空腹血糖>11.1 mmol/L者为所需糖尿病大鼠。自然喂养2周后，灌胃给药14 天，模型组灌服生理盐水4 ml/kg*d；消心痛组按6 mg/kg*d灌服36%的消心痛悬浮液；开心胶囊按2.18 g/kg*d的剂量灌服50%的开心胶囊悬浮液。第15 天按10 u/kg体重腹腔注射垂体后叶素，造成大鼠心肌缺血。24 小时后采血检测有关指标，正常对照组仅腹腔注射等体积的生理盐水，24 小时后采集标本。
, 百拇医药
1.3 观察指标和方法
1.3.1 一般情况 包括精神、饮食、毛色、体重等。
1.3.2 空腹血糖(己糖激酶法)。
1.3.3 血三脂(酶学法)。
1.3.4 心电图 腹腔注射垂体后叶素24 小时后，大鼠用20%的乌拉坦10 mg/kg*d麻醉，固定，记录心前区搏动最明显处心电图(胸前导联)，测量比较各组心电图J点上升、ST段上移及T波升高的变化，出现下列一项即为阳性心肌缺血：J点升高1.5 mV以上；T波低平(降低原T波50%以上)、双向、倒置；ST段水平下移0.5 mV，心律不齐〔1〕。
1.3.5 内皮素 严格按照药盒说明书要求的方法进行检测。
, 百拇医药 1.3.6 统计方法 组间按t检验方法做统计学处理。
2 结果
2.1 体重 消心痛组(304±40.5 g)和开心胶囊组(368±64 g)均可见大鼠体重增加，但开心胶囊组的效果更为显著，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。
2.2 血糖、血三脂的变化 见表1。
开心胶囊组对血脂三项均有改善作用；消心痛组仅能降低胆固醇。表明中药有较好的降低血脂的作用。2种药物对血糖均无影响。
2.3 内皮素和心电图的变化 见表2。
消心痛及开心胶囊均有降低内皮素水平(P<0.05)和降低心肌缺血阳性率的作用，其中开心胶囊组的作用更为显著。
, 百拇医药
表1 各组大鼠血糖、血三酯的比较(
±s，mmol/L)组别
剂量
g/kg*d
n
胆固醇
甘油三酯
高密度脂蛋白
血糖
正常组
-
, http://www.100md.com 10
1.2±0.09
0.5±0.07
0.5±0.06
10.3±0.90
模型组
-
10
1.5±0.20※
2.4±1.20※
0.6±0.10
23.2±3.20※
, 百拇医药
消心痛组
0.06
10
1.5±0.10
1.2±0.30＃
0.4±0.10
23.4±2.80
开心胶囊组
2.18
10
1.3±0.13＃
0.8±0.10＃
, 百拇医药
1.1±0.59＃
23.4±2.80
注：※与正常对照组相比P<0.05，＃与模型组相比P<0.05
表2 各组大鼠内皮素(
±s，PG/ml)和心电图的比较组别
剂量
g/kg*d
n
内皮素
心肌缺血(%)
, 百拇医药
阳性率
阴性率
正常组
-
10
202.3±18.5
13.0
87.0
模型组
-
10
277.7±10.2※
11.7
, http://www.100md.com
88.3
消心痛组
0.06
10
182.1±10.2＃
58.6
41.4＃
开心胶囊组
2.18
10
163.8±23.8＃＃
74.3
, http://www.100md.com
25.7＃
注：※与正常组相比P<0.05；＃与模型组相比P<0.05；＃＃与模型组相比P<0.01
3 讨论
SMI是指患者虽有心肌缺血的客观证据(如心电图典型的缺血性ST段改变，核医学或超声心动图检查所示的灌注缺损及/或室壁运动异常)，但不伴随各种类型心绞痛症状，是冠心病的一种特殊类型〔2〕。由于SMI无明显临床症状，常被人们忽视，但它可导致急性心肌梗塞、猝死等心脏急性事件，从而影响冠心病患者的预后。
我们曾报道糖尿病病人SMI的发生率远较非糖尿病病人高，其症状要比非糖尿病的冠心病患者严重和隐蔽〔3〕。许多研究结果表明，在糖尿病及心血管疾病患者中，ET明显升高〔3〕。本实验结果进一步证实了大鼠糖尿病合并心肌缺血时血浆ET与正常对照组相比显著升高(P<0.05)。目前的研究还显示，ET可反映心肌缺血/再灌注损伤情况，应用ET特异拮抗剂或ET合成抑制剂可以改善心肌的心肌缺血/再灌注损伤程度。探寻有效的药物拮抗和阻断ET的致病作用已成为目前治疗心血管病的一条新途径。ET的拮抗剂治疗可以有效地防止外周血管和冠脉血管收缩所致的高血压和冠心病，缓解休克和心衰程度。
, 百拇医药
本实验结果表明，开心胶囊有较好的改善心肌缺血的作用。它不仅可以全面调节血脂代谢，而且能拮抗和阻断ET的释放，降低血浆ET水平，从而有效改善了外周血管和冠脉血管收缩所致的心肌缺血。提示开心胶囊对糖尿病大鼠垂体后叶素引起的心肌缺血有明显的改善作用的机制之一，是阻断ET的释放。
★国家中医药管理局资助重点课题(95B134)
参考文献
[1] 李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科学技术出版，1991.115～116
[2] 李 静.无症状心肌缺血及中西医结合治疗.中国中西医结合杂志，1992，12(9)∶548
[3] 罗小星，陈镜合，周 英.334例非胰岛素依赖型糖尿病患者无症状性心肌缺血的检出率及其中医辨证分型特点.中西医结合实用临床急救，1998，(5)∶248～251
[4] 周丽诺，朱禧星.Ⅱ型糖尿病人血浆中内皮素-1含量增值的临床意义.上海医科大学学报，1994，21(6)：437
(修回日期：1998-12-24), 百拇医药