八味丹坤方及其组分的水提物体外对老年小鼠IL-1、IL-2产生调整作用的对比研究
作者：李志新
单位：李志新(北京医科大学中西医结合教研室 北京 100083)
关键词：免疫衰老；白细胞介素1(IL-1)；白细胞介素2(IL-2)
摘 要 目的 为了验证补肾健脾化瘀法抗老的优越性 摘 要 目的 为了验证补肾健脾化瘀法抗老的优越性，本实验从体外对比观察了八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-1、IL-2产生的影响。方法 检测腹腔巨噬细胞产生的IL-1、脾淋巴细胞产生的IL-2的活性。结果 老年小鼠IL-1、IL-2的产生均明显低于青年小鼠。给药后，三组方药均有提高IL-1、IL-2产生的趋势；三组相比，以八味丹坤组作用最佳。结论 先天与后天并补佐以化瘀对改善免疫衰老确有重要意义。
中图分类号 R289.1；R2—031；R392.11
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八味丹坤方作为补肾化瘀的抗老经验方，本室曾对其进行了多方面研究，发现该方无论是在促进DNA损伤修复、改善自由基代谢，还是在提高免疫功能等方面均有明显的作用[1、2]，但由于该方除含补肾药外，还有健脾药。而且，据中医理论“肾为先天之本，脾为后天之本”；“先天生后天，后天养先天”。据此，为了验证八味丹坤组分配伍作用的异同，探讨补肾与健脾的相互关系，确证健脾补肾化瘀法抗老的优越性，本实验将该方(八味丹坤方)的主要成分——八味地黄汤进行了拆方，分别制成水提物，通过体外实验对比观察对老年小鼠IL-1和IL-2产生的影响。
材料
1 动物
C57BL/6小鼠，雄性，青年鼠3月龄，老年鼠20月龄左右。由本校实验动物部提供，本室饲养。
2 中药
, 百拇医药
由北京医科大学第三临床医院中药房代购，本室提取。八丹组(八味丹坤方水提物)，八丹ⅠⅡ组(前方去茯苓、山药后的水提物)，八丹Ⅱ组(八味丹坤方去附子、肉桂、山萸肉、熟地后的水提物)。实验前用RPMI-1640液溶解，过滤除菌，再用完全PRMI-1640液配成所需浓度待测。
3 试剂
Hank’s液 临用前加5%NBS及青链霉素各1万单位。完全RPMI-1640培养液(GIBCO)：用前加入10%NBS、100U/mL青霉素、100mg/L链霉素、5×10-5mol/L2-巯基乙醇、1%L-谷氨酰胺。ConA(Sigma产品，批号：81039)称量后按1mg/mL溶于RPMI-1640液中，过滤除菌，-30℃保存。LPS(Sigma产品)RPMI-1640配成1.0mg/mL，-30℃保存。消炎痛(北京医科大学实验药厂提供)用RPMI-1640配成20μl/mL3H-TdR(中国上海科学院原子核能研究所，批号：921228)，用Hank’s液配成10μCi/mL，4℃保存。闪烁液：称PPO(美国MERK药厂，批号：826L-543746)2.5g、POPOP(上海试剂一厂，批号：81-48-01)0.25g溶于500mL二甲苯中。
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方法
1 淋巴细胞增试验[3]
小鼠脾细胞悬液5×106/mL，加入96孔板中，每孔0.1mL，再分别加预先稀释的中药水提物0.1mL及ConA(终浓度2.5μg/mL)培养72hr，收集前6h加入3H-TdR 20μl1/孔(10μCi/mL)，液闪检测cpm值。
附注：用淋巴细胞增殖试验选择中药最适浓度(青年鼠)，发现三种水提物在2.5μg/mL左右作用最强。故中药水提物浓度暂定5μg/mL、2.5μg/mL、1.0μg/mL、0.5μg/mL。
2 IL-1上清液制备及检测[4]
腹腔巨噬细胞2×106/mL加入已配好的完全RPMI-1640培养液1.0mL(内含中药水提物2.5μg/mL，LPS10μg/mL，消炎痛20μg/mL)，培养48h后收集上清，检测参照文献[4]。
, 百拇医药
3 IL-2上清液制备及检测
3.1 IL-2上清制备[5]
脾细胞悬液1×107/mL放入24孔板中，每孔0.75ml，等量加入已配好的中药水提物及ConA(10μg/mL)，对照组加等量完全RPMI-1640液(ConA终浓度为5μg/mL)。置培养箱内温育48h，离心收集上清，置-30℃冰箱中保存待测。
3.2 IL-2上清液检测
据Andersson氏法改进[6]。淋巴母细胞的制备：3月龄小鼠，脾细胞悬液5×106/mL，同时加ConA(终浓度7μg/mL)，培养72h。IL-2上清的检测：将上述淋巴母细胞配成2×106/mL，放入96孔板中，0.1mL/孔(待测IL-2上清已倍比稀释于此板中，0.1mL/孔)。培养24h，收集前6h加入3H-TdR20μg/孔(10μCi/mL)，收集细胞，液闪检测cpm值。
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结果
1 八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-1产生的影响
表1 中药复方水提物体外对老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的影响(
±sx)
组 别
稀 释 度
1：5
1：10
1：20
青年对照组
, 百拇医药
11174±1967
7891±515
4141±310
老年对照组
3112±463###
4224±361###
2921±382#
八丹Ⅰ组
3684±658
4549±273★
3183±227★
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八丹Ⅱ组
2781±161★★
5843±852*
2410±157★★
八丹组
4026±239*
5381±261*
4248±363*
注：与青年对照组比较：#P<0.05；###P<0.001；与老年对照组比较：*P<0.05；与八丹组比较：★P<0.05；★★P<0.01；药物浓度均为2.5μg/ml。
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老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力显著低于青年小鼠(P<0.05～P<0.001)。三种中药复方组水提物对老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力均有一定的促进作用。其中八味丹坤方水提物在1：5、1：10、1：20三个稀释度均可明显提高老年小鼠腹腔巨噬细胞IL-1的生成水平(P<0.05)；八丹Ⅱ方水提物仅在1∶10有显著的促进作用；八丹Ⅰ方组在三个稀释度均有提高的趋势，但与老年对照组比较均未有显著性差异。比较三组药物的作用，以八味丹坤方的作用最为明显。
2 八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-2产生的影响
从表2可以看出，老年小鼠脾淋巴细胞产生IL-2的能力明显降低，与青年小鼠比较有非常显著的差异(P<0.001)。三种复方水提取物均能促进老年小鼠脾淋巴细胞IL-2的产生，其中八味丹坤组和八丹Ⅰ组在各个浓度下(1.0μg/mL～5.0μg/mL)均有明显的增强作用(P<0.05～P<0.01)。三个给药组相比，以八味丹坤方的作用最为显著，八丹Ⅰ方的作用亦略优于八丹Ⅱ方。
, 百拇医药
表2 中药复方水提物体外对老年小鼠脾淋巴细胞产生IL-2的影响(±sx)
组 别
药 物 浓 度
5.0μg/mL
2.5μg/mL
1.0μg/mL
八丹Ⅰ组
2934±367*
5419±898**
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3954±586*
八丹Ⅱ组
2437±638
2813±740★
2687±657★
八丹组
3218±632*
5679±1363*
4132±699*
青年对照组
, 百拇医药 3978±86
老年对照组
2321±237###
注：与青年对照组比较：###P<0.001；与老年对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；与八丹组比较：★P<0.05；IL-2的稀释度均为1∶2。讨论
越来越多的研究证明，肾虚、脾胃不足、血瘀与衰老密切相关，但这些因素在衰老过程中有何相互联系，何者更为主要，也即何者更接近于中医衰老的实质，至今尚有不同的认识[7、8、9]。在对中医基础理论、中西医衰老学说、老年临床流行病学调查及动物实验研究结果进行分析总结的基础上，我们认为正气虚衰(脾肾虚衰)是导致衰老的主要矛盾方面，但虚久必瘀(痰浊、血瘀)，瘀又进一步促进虚衰，虚与瘀相互影响促进衰老的进程。为此，我们提出了“正气虚挟瘀是衰老的主要机制，扶正化瘀是延缓衰老的理想途径”的观点[10]，其中正气虚的特点为脾胃虚衰、肾阴阳两虚偏于阳虚。肾虚是正虚的主要矛盾方面，瘀则包括痰浊、血瘀。正虚为因，因虚致瘀，瘀是果，痰浊血瘀又加重了虚衰。为此，我们曾研究了补肾、化瘀、补肾化瘀、补肾健脾、健脾化瘀、补肾健脾化瘀等多种治法对老年小鼠免疫功能、自由基代谢、DNA损伤修复、肾脏超微结构及皮肤等方面的调整和恢复作用[1、11、14、18、19]。结果发现，以补肾健脾化瘀法最佳，初步证实了“正气虚衰挟瘀是中医衰老的主要原因/机制及健脾补肾化瘀可能是延缓衰老的理想途径”观点的合理性。但上述大部分实验均为体内研究，因此，本实验重点从体外出发进一步证明本治法的优越性。
, 百拇医药
随着年龄的增长，老年机体患感染性疾病、自身免疫病、肿瘤等的机率明显增加。且老年机体多有肾虚、脾胃不足及血瘀的体质，同时大多存在免疫功能低下/紊乱的表现[15]。尤以T细胞受损最为明显，IL-2是T细胞分泌的主要因子，其作为免疫增强的因子之一已广泛被认同，目前是被用来检测免疫功能高低、免疫衰老的重要指标之一。IL-1的生物活性也极其广泛，在免疫系统几乎作用于所有免疫细胞。其中之一能辅助Th细胞产生IL-2，以及增加T细胞表面IL-2受体的表达。已有报道，老年机体IL-2产生能力的降低部分归因于巨噬细胞IL-1产生的减少[16]。因此，探讨补益或化瘀方药调整免疫衰老，特别是IL-1、IL-2等淋巴因子产生的调整作用，对衰老机理的研究具有重要意义。如王氏[17]报道山萸肉、附子、丹参三味中药的单体无论是单一还是两两配伍均能增加老年小鼠IL-2的产生，而且补肾化瘀组还优于各单味药组。蒋氏[19]研究发现化瘀药对IL-1、IL-2的产生起抑制作用，和补肾药配伍后则明显提高老年小鼠IL-1、IL-2的生成。陈氏[12]则证明补肾化瘀方药八味丹坤方在加入健脾药(党参、黄芪)成补肾健脾化瘀方(八味参芪丹坤方)后，在淋巴细胞增殖能力、IL-2的产生和抗过氧化氢损伤等方面都优于单纯的补肾化瘀(八味丹坤方)。说明补肾方药加入化瘀药后可明显增强其抗老作用，特别在补肾化瘀方中加入健脾药后效果更优。本实验结果也证明老年小鼠IL-1及IL-2的产生均显著下降。给药后，三组方药均能改善老年小鼠的免疫功能，但八丹Ⅰ组似优于八丹Ⅱ组，而八丹组从总体来说又较前两者为优。也即去掉其方中的补肾或健脾药物后，除八丹Ⅰ组对IL-2有显著作用外，均不如八味丹坤方组。说明了八味地黄汤确为脾肾双补之方，且先天与后天同补。说明先天与后天并补，佐以化瘀(即扶正化瘀)对改善免疫衰老具有更为显著的效果。
, 百拇医药
此外，从实验结果中还可看出，在提高IL-2方面，八丹Ⅰ方明显优于八丹Ⅱ方，似可说明延缓衰老培补先天是扶正的主要方面。体外条件下，八味丹坤方组增强IL-2产生虽然优于八丹Ⅰ方组，但统计学无意义，与整体实验中，补肾健脾化瘀调整免疫衰老明显优于补肾化瘀的结果不同，可能与整体条件下药物除直接作用于免疫细胞外还通过增强多环节的调整作用有关。
作者简介：李志新，男，32岁，讲师，1990年毕业于北京医科大学基础医学系，现工作于北京医科大学中西医结合教研室。研究方向：中西医衰老机制的探讨及预防；中医中药对免疫系统的影响。通讯地址：北京医科大学中西医结合教研室，邮编：100083，电话：010—62091404。
参考文献
1.蒋文跃，李顺成，王传社，等.补肾化瘀方药调整免疫衰老的机理研究.中国中西医结合杂志 1995；15(6)：353～355
, 百拇医药
2.王传社，李顺成，李志新，等.八味地黄汤、丹坤方及八味丹坤方对老年小鼠自由基代谢调整作用的对比研究.北京医科大学学报 1996；28(6)：432～438
3.关惠贞，匡颜德，秦慧莲，等.四种检测白细胞介素2(IL-2)方法的比较.上海免疫学杂志 1986；6(5)：298～301
4.丁桂凤，尚红生，徐晗，等.单核因子的研究.中国免疫学杂志 1986；2(6)：336～339
5.Andrew J.H.Gearing,Alan P.Johnstone and Robin Thorpe.Production and Assay of the Interleukins.J Immunological Methods.1985；83:1～27
6.J Andersson,Kiell-Olov Gronvik,Eva-Lotta Larsson,et al.Studies on T lymphocyte activation.Eur.J.Immunol.1979；9:581～587
, 百拇医药
7.颜德馨，胡泉材，王平平，等.气虚血瘀是衰老的主要机制.中国医药学报 1989；4(2)：10～12
8.姜惟.肾虚、痰瘀与衰老的关系初探.辽宁中医杂志 1994；21(3)：106～108
9.韩明向，周宜轩，李平，等.“虚—瘀—衰老”模式初探.安徽中医学院学报 1992；11(3)：2～6
10.李顺成，蒋文跃，王传社，等.正虚夹瘀是衰老的主要机制.中国医药学报 1992；7(6)：324～327
11.Jiang WY,Li SC,Wang CS,et al.Comparative study of effects of three kinds of herbal mixture decoctions on improving immune senescence and free radical metabolism.Chinese Medical Journal,1997；110(10):750～754
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12.陈丰，李顺成.补肾化瘀及补肾健脾化瘀调整小鼠免疫衰老的对比研究.中国医药学报 1997；12(2)：5～10
13.杨新海，李顺成，饶用清，等.八味地黄汤改善老年小鼠脾淋巴细胞DNA损伤及修复能力的初步观察.北京医科大学学报 1993；25(6)：42
14.孔祥田，邹万忠，李顺成，等.青老年小鼠肾结构的比较及补肾方药对老年小鼠肾的影响.中华老年医学杂志 1994；13(1)：53
15.郑频如，张书东，王桂珍，等.322例健康老年人白细胞介素-2(IL-2)活性及淋巴细胞转化率的研究.白求恩医科大学学报 1990；16(2)：183～4
16.Bruley-Resset-M,Vergnon I.Interleukin-1 synthesis and activity in aged mice.Mechanism of Aging and Development.1984；24:247
17.王玉明，李顺成.补肾化瘀中药提取物体外对老年小鼠IL-2产生的影响.中华医学会首届全国老年基础医学学术会议论文集.1992：58
18.王传社，李顺成.健脾化瘀法对老年小鼠心肝脑LPO及红细胞SOD活性的影响.中药药理与临床 1996；12(3)：1～3
19.蒋文跃，李顺成，王玉明.补肾方和化瘀方对老年小鼠淋巴因子产生的影响.中国老年学杂志 1995；15(5)：281～282
(收稿日期 1998—11—02 修回日期 1999—01—22), http://www.100md.com
单位：李志新(北京医科大学中西医结合教研室 北京 100083)
关键词：免疫衰老；白细胞介素1(IL-1)；白细胞介素2(IL-2)
摘 要 目的 为了验证补肾健脾化瘀法抗老的优越性 摘 要 目的 为了验证补肾健脾化瘀法抗老的优越性，本实验从体外对比观察了八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-1、IL-2产生的影响。方法 检测腹腔巨噬细胞产生的IL-1、脾淋巴细胞产生的IL-2的活性。结果 老年小鼠IL-1、IL-2的产生均明显低于青年小鼠。给药后，三组方药均有提高IL-1、IL-2产生的趋势；三组相比，以八味丹坤组作用最佳。结论 先天与后天并补佐以化瘀对改善免疫衰老确有重要意义。
中图分类号 R289.1；R2—031；R392.11
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八味丹坤方作为补肾化瘀的抗老经验方，本室曾对其进行了多方面研究，发现该方无论是在促进DNA损伤修复、改善自由基代谢，还是在提高免疫功能等方面均有明显的作用[1、2]，但由于该方除含补肾药外，还有健脾药。而且，据中医理论“肾为先天之本，脾为后天之本”；“先天生后天，后天养先天”。据此，为了验证八味丹坤组分配伍作用的异同，探讨补肾与健脾的相互关系，确证健脾补肾化瘀法抗老的优越性，本实验将该方(八味丹坤方)的主要成分——八味地黄汤进行了拆方，分别制成水提物，通过体外实验对比观察对老年小鼠IL-1和IL-2产生的影响。
材料
1 动物
C57BL/6小鼠，雄性，青年鼠3月龄，老年鼠20月龄左右。由本校实验动物部提供，本室饲养。
2 中药
, 百拇医药
由北京医科大学第三临床医院中药房代购，本室提取。八丹组(八味丹坤方水提物)，八丹ⅠⅡ组(前方去茯苓、山药后的水提物)，八丹Ⅱ组(八味丹坤方去附子、肉桂、山萸肉、熟地后的水提物)。实验前用RPMI-1640液溶解，过滤除菌，再用完全PRMI-1640液配成所需浓度待测。
3 试剂
Hank’s液 临用前加5%NBS及青链霉素各1万单位。完全RPMI-1640培养液(GIBCO)：用前加入10%NBS、100U/mL青霉素、100mg/L链霉素、5×10-5mol/L2-巯基乙醇、1%L-谷氨酰胺。ConA(Sigma产品，批号：81039)称量后按1mg/mL溶于RPMI-1640液中，过滤除菌，-30℃保存。LPS(Sigma产品)RPMI-1640配成1.0mg/mL，-30℃保存。消炎痛(北京医科大学实验药厂提供)用RPMI-1640配成20μl/mL3H-TdR(中国上海科学院原子核能研究所，批号：921228)，用Hank’s液配成10μCi/mL，4℃保存。闪烁液：称PPO(美国MERK药厂，批号：826L-543746)2.5g、POPOP(上海试剂一厂，批号：81-48-01)0.25g溶于500mL二甲苯中。
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方法
1 淋巴细胞增试验[3]
小鼠脾细胞悬液5×106/mL，加入96孔板中，每孔0.1mL，再分别加预先稀释的中药水提物0.1mL及ConA(终浓度2.5μg/mL)培养72hr，收集前6h加入3H-TdR 20μl1/孔(10μCi/mL)，液闪检测cpm值。
附注：用淋巴细胞增殖试验选择中药最适浓度(青年鼠)，发现三种水提物在2.5μg/mL左右作用最强。故中药水提物浓度暂定5μg/mL、2.5μg/mL、1.0μg/mL、0.5μg/mL。
2 IL-1上清液制备及检测[4]
腹腔巨噬细胞2×106/mL加入已配好的完全RPMI-1640培养液1.0mL(内含中药水提物2.5μg/mL，LPS10μg/mL，消炎痛20μg/mL)，培养48h后收集上清，检测参照文献[4]。
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3 IL-2上清液制备及检测
3.1 IL-2上清制备[5]
脾细胞悬液1×107/mL放入24孔板中，每孔0.75ml，等量加入已配好的中药水提物及ConA(10μg/mL)，对照组加等量完全RPMI-1640液(ConA终浓度为5μg/mL)。置培养箱内温育48h，离心收集上清，置-30℃冰箱中保存待测。
3.2 IL-2上清液检测
据Andersson氏法改进[6]。淋巴母细胞的制备：3月龄小鼠，脾细胞悬液5×106/mL，同时加ConA(终浓度7μg/mL)，培养72h。IL-2上清的检测：将上述淋巴母细胞配成2×106/mL，放入96孔板中，0.1mL/孔(待测IL-2上清已倍比稀释于此板中，0.1mL/孔)。培养24h，收集前6h加入3H-TdR20μg/孔(10μCi/mL)，收集细胞，液闪检测cpm值。
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结果
1 八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-1产生的影响
表1 中药复方水提物体外对老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的影响(
±sx)组 别
稀 释 度
1：5
1：10
1：20
青年对照组
, 百拇医药
11174±1967
7891±515
4141±310
老年对照组
3112±463###
4224±361###
2921±382#
八丹Ⅰ组
3684±658
4549±273★
3183±227★
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八丹Ⅱ组
2781±161★★
5843±852*
2410±157★★
八丹组
4026±239*
5381±261*
4248±363*
注：与青年对照组比较：#P<0.05；###P<0.001；与老年对照组比较：*P<0.05；与八丹组比较：★P<0.05；★★P<0.01；药物浓度均为2.5μg/ml。
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老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力显著低于青年小鼠(P<0.05～P<0.001)。三种中药复方组水提物对老年小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力均有一定的促进作用。其中八味丹坤方水提物在1：5、1：10、1：20三个稀释度均可明显提高老年小鼠腹腔巨噬细胞IL-1的生成水平(P<0.05)；八丹Ⅱ方水提物仅在1∶10有显著的促进作用；八丹Ⅰ方组在三个稀释度均有提高的趋势，但与老年对照组比较均未有显著性差异。比较三组药物的作用，以八味丹坤方的作用最为明显。
2 八味丹坤方及其组分的水提物对老年小鼠IL-2产生的影响
从表2可以看出，老年小鼠脾淋巴细胞产生IL-2的能力明显降低，与青年小鼠比较有非常显著的差异(P<0.001)。三种复方水提取物均能促进老年小鼠脾淋巴细胞IL-2的产生，其中八味丹坤组和八丹Ⅰ组在各个浓度下(1.0μg/mL～5.0μg/mL)均有明显的增强作用(P<0.05～P<0.01)。三个给药组相比，以八味丹坤方的作用最为显著，八丹Ⅰ方的作用亦略优于八丹Ⅱ方。
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表2 中药复方水提物体外对老年小鼠脾淋巴细胞产生IL-2的影响(
±sx)组 别
药 物 浓 度
5.0μg/mL
2.5μg/mL
1.0μg/mL
八丹Ⅰ组
2934±367*
5419±898**
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3954±586*
八丹Ⅱ组
2437±638
2813±740★
2687±657★
八丹组
3218±632*
5679±1363*
4132±699*
青年对照组
, 百拇医药 3978±86
老年对照组
2321±237###
注：与青年对照组比较：###P<0.001；与老年对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；与八丹组比较：★P<0.05；IL-2的稀释度均为1∶2。讨论
越来越多的研究证明，肾虚、脾胃不足、血瘀与衰老密切相关，但这些因素在衰老过程中有何相互联系，何者更为主要，也即何者更接近于中医衰老的实质，至今尚有不同的认识[7、8、9]。在对中医基础理论、中西医衰老学说、老年临床流行病学调查及动物实验研究结果进行分析总结的基础上，我们认为正气虚衰(脾肾虚衰)是导致衰老的主要矛盾方面，但虚久必瘀(痰浊、血瘀)，瘀又进一步促进虚衰，虚与瘀相互影响促进衰老的进程。为此，我们提出了“正气虚挟瘀是衰老的主要机制，扶正化瘀是延缓衰老的理想途径”的观点[10]，其中正气虚的特点为脾胃虚衰、肾阴阳两虚偏于阳虚。肾虚是正虚的主要矛盾方面，瘀则包括痰浊、血瘀。正虚为因，因虚致瘀，瘀是果，痰浊血瘀又加重了虚衰。为此，我们曾研究了补肾、化瘀、补肾化瘀、补肾健脾、健脾化瘀、补肾健脾化瘀等多种治法对老年小鼠免疫功能、自由基代谢、DNA损伤修复、肾脏超微结构及皮肤等方面的调整和恢复作用[1、11、14、18、19]。结果发现，以补肾健脾化瘀法最佳，初步证实了“正气虚衰挟瘀是中医衰老的主要原因/机制及健脾补肾化瘀可能是延缓衰老的理想途径”观点的合理性。但上述大部分实验均为体内研究，因此，本实验重点从体外出发进一步证明本治法的优越性。
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随着年龄的增长，老年机体患感染性疾病、自身免疫病、肿瘤等的机率明显增加。且老年机体多有肾虚、脾胃不足及血瘀的体质，同时大多存在免疫功能低下/紊乱的表现[15]。尤以T细胞受损最为明显，IL-2是T细胞分泌的主要因子，其作为免疫增强的因子之一已广泛被认同，目前是被用来检测免疫功能高低、免疫衰老的重要指标之一。IL-1的生物活性也极其广泛，在免疫系统几乎作用于所有免疫细胞。其中之一能辅助Th细胞产生IL-2，以及增加T细胞表面IL-2受体的表达。已有报道，老年机体IL-2产生能力的降低部分归因于巨噬细胞IL-1产生的减少[16]。因此，探讨补益或化瘀方药调整免疫衰老，特别是IL-1、IL-2等淋巴因子产生的调整作用，对衰老机理的研究具有重要意义。如王氏[17]报道山萸肉、附子、丹参三味中药的单体无论是单一还是两两配伍均能增加老年小鼠IL-2的产生，而且补肾化瘀组还优于各单味药组。蒋氏[19]研究发现化瘀药对IL-1、IL-2的产生起抑制作用，和补肾药配伍后则明显提高老年小鼠IL-1、IL-2的生成。陈氏[12]则证明补肾化瘀方药八味丹坤方在加入健脾药(党参、黄芪)成补肾健脾化瘀方(八味参芪丹坤方)后，在淋巴细胞增殖能力、IL-2的产生和抗过氧化氢损伤等方面都优于单纯的补肾化瘀(八味丹坤方)。说明补肾方药加入化瘀药后可明显增强其抗老作用，特别在补肾化瘀方中加入健脾药后效果更优。本实验结果也证明老年小鼠IL-1及IL-2的产生均显著下降。给药后，三组方药均能改善老年小鼠的免疫功能，但八丹Ⅰ组似优于八丹Ⅱ组，而八丹组从总体来说又较前两者为优。也即去掉其方中的补肾或健脾药物后，除八丹Ⅰ组对IL-2有显著作用外，均不如八味丹坤方组。说明了八味地黄汤确为脾肾双补之方，且先天与后天同补。说明先天与后天并补，佐以化瘀(即扶正化瘀)对改善免疫衰老具有更为显著的效果。
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此外，从实验结果中还可看出，在提高IL-2方面，八丹Ⅰ方明显优于八丹Ⅱ方，似可说明延缓衰老培补先天是扶正的主要方面。体外条件下，八味丹坤方组增强IL-2产生虽然优于八丹Ⅰ方组，但统计学无意义，与整体实验中，补肾健脾化瘀调整免疫衰老明显优于补肾化瘀的结果不同，可能与整体条件下药物除直接作用于免疫细胞外还通过增强多环节的调整作用有关。
作者简介：李志新，男，32岁，讲师，1990年毕业于北京医科大学基础医学系，现工作于北京医科大学中西医结合教研室。研究方向：中西医衰老机制的探讨及预防；中医中药对免疫系统的影响。通讯地址：北京医科大学中西医结合教研室，邮编：100083，电话：010—62091404。
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(收稿日期 1998—11—02 修回日期 1999—01—22), http://www.100md.com