大肠癌P53蛋白与PCNA表达的预后意义
作者：庄小强 赖日权 孙桂华 王晓怀 袁世珍
单位：庄小强 赖日权 孙桂华 王晓怀 广州军区总医院消化科 广东省广州市 510010; 袁世珍 广州孙逸仙医院消化科 广东省广州市 510120
关键词：结直肠肿瘤；P53；增殖细胞核抗原；预后
世界华人消化杂志990725
中国图书馆分类号 R735.34
Subject headings colorectal neoplasms; P53 protein; proliferating cell nuclear antigen; prognosis
1 材料和方法
, http://www.100md.com 1.1 材料 61例大肠癌为广州总医院1976/1992有5a随访资料的大肠癌手术切除存档石蜡标本，高、中、低(未)分化和粘液腺癌分别为13例、29例、12例和7例. 结肠镜及病理检查未发现明显异常的大肠粘膜活检标本15例. 组织经100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋，作连续切片，分别作常规HE染色、P53和PCNA免疫组化染色.
1.2 方法 免疫组化染色用LSAB法. 鼠抗人P53单抗DO7、鼠抗人PCNA单抗PC10和LSAB K-9002均购自Dako公司. P53工作浓度1∶50；PCNA抗体工作浓度1∶50. 阳性对照为已知P53和PCNA阳性的乳腺癌标本. 用PBS代替一抗作为阴性对照.每例随机计数1000个分布清晰的上皮细胞，计算其阳性细胞的比率(LI).
2 结果
2.1 正常大肠、大肠癌P53和PCNA表达 P53蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，P53在正常大肠粘膜未发现阳性表达. 大肠癌P53阳性率高达55.7%. PCNA蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，正常大肠粘膜阳性12例，阳性指数(PCNA-LI)为15.1%±5.4%. 大肠癌PCNA阳性50例，PCNA-LI(46.4%±26.5%)较正常粘膜明显增加(P<0.05).
, 百拇医药
2.2 P53和PCNA表达与大肠癌临床、病理特征的关系 P53蛋白和PCNA表达与大肠癌分化程度和Dukes分期有关(P<0.05).
大肠癌P53与PCNA的相关性分析，两者呈正相关(P<0.01)，P53过度表达和细胞增殖有显著相关性.
2.3 P53和PCNA表达与大肠癌生存率关系 P53和PCNA在≤25%、25%～65%和>65%三组阳性表达中，1a,2a生存率均未达到显著差异，而第5年生存率>65%组均明显低于≤25%表达组(P<0.05). P53和PCNA-LI与生存期之间有明显负相关，分别r=-0.285和r=-0.298，P均<0.05.
3 讨论
在人类肿瘤中抗癌基因p53是最常见的产生突变的基因，尤其频繁发生在大肠癌[1]. 本研究提示，正常大肠粘膜P53未见表达，而大肠癌显著表达. P53随分化程度的降低而升高，也与Dukes分期有关. 近年来发现PCNA研究对于大肠癌变过程诊断具有重要意义. PCNA具有DNA多聚酶δ辅助因子的功能，是一种细胞周期相关性核蛋白. 在G1中期浓度增加，S期早期达到高峰，S2/M期逐渐下降[2]. 我们的研究表明正常粘膜PCNA阳性表达指数明显低于大肠癌，而大肠癌中，低(未)分化腺癌及粘液腺癌PCNA-LI显著高于高分化组. Dukes C期及Dukes D期PCNA-LI也明显高于Dukes A期患者. Tanaks等在149例早期大肠癌研究中，表明PCNA在肿瘤分化类型、浸润深度、淋巴结转移方面均提示非常显著差别，与我们结果一致，说明PCNA在评估大肠癌的发生发展都是一项良好指标.
, 百拇医药
通讯作者 庄小强
4 参考文献
1 Levine AJ Perry ME, Chang A.The 1993 Wadter Hubert Lecture: the role of the p53 tomor-suppressor gene in tumorigenesis. Br J Cancer, 1994；69：409-413
2 Hall PA, Levrison S, Woods AL. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunolocalization in paraffin sections: an index of cell proliferation with evidence of deregulated expression in some neoplasms. J Pathol, 1990;162:185-189
收稿日期 1999-02-05 修回日期 1999-03-20, 百拇医药
单位：庄小强 赖日权 孙桂华 王晓怀 广州军区总医院消化科 广东省广州市 510010; 袁世珍 广州孙逸仙医院消化科 广东省广州市 510120
关键词：结直肠肿瘤；P53；增殖细胞核抗原；预后
世界华人消化杂志990725
中国图书馆分类号 R735.34
Subject headings colorectal neoplasms; P53 protein; proliferating cell nuclear antigen; prognosis
1 材料和方法
, http://www.100md.com 1.1 材料 61例大肠癌为广州总医院1976/1992有5a随访资料的大肠癌手术切除存档石蜡标本，高、中、低(未)分化和粘液腺癌分别为13例、29例、12例和7例. 结肠镜及病理检查未发现明显异常的大肠粘膜活检标本15例. 组织经100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋，作连续切片，分别作常规HE染色、P53和PCNA免疫组化染色.
1.2 方法 免疫组化染色用LSAB法. 鼠抗人P53单抗DO7、鼠抗人PCNA单抗PC10和LSAB K-9002均购自Dako公司. P53工作浓度1∶50；PCNA抗体工作浓度1∶50. 阳性对照为已知P53和PCNA阳性的乳腺癌标本. 用PBS代替一抗作为阴性对照.每例随机计数1000个分布清晰的上皮细胞，计算其阳性细胞的比率(LI).
2 结果
2.1 正常大肠、大肠癌P53和PCNA表达 P53蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，P53在正常大肠粘膜未发现阳性表达. 大肠癌P53阳性率高达55.7%. PCNA蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，正常大肠粘膜阳性12例，阳性指数(PCNA-LI)为15.1%±5.4%. 大肠癌PCNA阳性50例，PCNA-LI(46.4%±26.5%)较正常粘膜明显增加(P<0.05).
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2.2 P53和PCNA表达与大肠癌临床、病理特征的关系 P53蛋白和PCNA表达与大肠癌分化程度和Dukes分期有关(P<0.05).
大肠癌P53与PCNA的相关性分析，两者呈正相关(P<0.01)，P53过度表达和细胞增殖有显著相关性.
2.3 P53和PCNA表达与大肠癌生存率关系 P53和PCNA在≤25%、25%～65%和>65%三组阳性表达中，1a,2a生存率均未达到显著差异，而第5年生存率>65%组均明显低于≤25%表达组(P<0.05). P53和PCNA-LI与生存期之间有明显负相关，分别r=-0.285和r=-0.298，P均<0.05.
3 讨论
在人类肿瘤中抗癌基因p53是最常见的产生突变的基因，尤其频繁发生在大肠癌[1]. 本研究提示，正常大肠粘膜P53未见表达，而大肠癌显著表达. P53随分化程度的降低而升高，也与Dukes分期有关. 近年来发现PCNA研究对于大肠癌变过程诊断具有重要意义. PCNA具有DNA多聚酶δ辅助因子的功能，是一种细胞周期相关性核蛋白. 在G1中期浓度增加，S期早期达到高峰，S2/M期逐渐下降[2]. 我们的研究表明正常粘膜PCNA阳性表达指数明显低于大肠癌，而大肠癌中，低(未)分化腺癌及粘液腺癌PCNA-LI显著高于高分化组. Dukes C期及Dukes D期PCNA-LI也明显高于Dukes A期患者. Tanaks等在149例早期大肠癌研究中，表明PCNA在肿瘤分化类型、浸润深度、淋巴结转移方面均提示非常显著差别，与我们结果一致，说明PCNA在评估大肠癌的发生发展都是一项良好指标.
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通讯作者 庄小强
4 参考文献
1 Levine AJ Perry ME, Chang A.The 1993 Wadter Hubert Lecture: the role of the p53 tomor-suppressor gene in tumorigenesis. Br J Cancer, 1994；69：409-413
2 Hall PA, Levrison S, Woods AL. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunolocalization in paraffin sections: an index of cell proliferation with evidence of deregulated expression in some neoplasms. J Pathol, 1990;162:185-189
收稿日期 1999-02-05 修回日期 1999-03-20, 百拇医药