32例白血病免疫表型分析
作者：刘红斌 李濠德
单位：广州市第二人民医院血液内科(510150)
关键词：白血病；免疫表型
广东医学990718 【摘要】 目的 探讨白血病免疫表型在各类白血病中的分布和特征。方法 用16种单克隆抗体(CD)，以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫酶标法(APAAP)测定32例白血病病例。结果 急性淋巴细胞性白血病(ALL)，T-ALL除表达T系淋巴细胞抗原CD2、CD3、CD7、CD8外，同时也表达B-ALL抗原和髓系(M)白血病抗原；B-ALL表达B系抗原为HLA-DR，CD9、CD10、CD19、CD23，同时也表达B/M、T/B/M抗原；髓系白血病(ML)，表达髓系抗原依次为CD18、CD15、CD11b，同时也表达T/B/M、B/M、T/M；M3有显著特异性，CD13、CD33(+)、HLA-DR(-)。结论 白血病免疫分型表现真系列专一性和系列非专一性，为探索细胞起源开辟道路，同时FAB与免疫分型结合可互为弥补，提高诊断精确性。
, 百拇医药
在白血病诊断中，只靠形态学和组织化学诊断，仍有一定局限性和片面性，如结合免疫分型判断，可提高诊断精确性，并为细胞起源提供生物学特征的线索。我院于1994年起开展了白血病免疫分型，现把32例白血病免疫分型报道如下。
1 材料与方法
1.1 病例 本组32例患者为我院1994～1998年收治的住院病人，均经形态学和组织化学确认。男16例，女16例。年龄14～72岁，平均37.18±16.44岁。按FAB形态学分型，AML 19例，其中M1 2例， M2 7例，M3 8例，M4 2例； CML 7例，ALL 6例， 其中T-ALL 2例，B-ALL 4例。
1.2 CD的选择 由北京中国军事医学科学院提供白血病免疫分型试剂盒。识别T淋巴细胞的有：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD27；识别B淋巴细胞的有：HLA-DR、CD9、CD10、CD19、CD23、CD20；识别髓系细胞的有：CD18、CD11b、CD15、CD13、CD33。
, http://www.100md.com
1.3 表面标记检测 取初诊病人骨髓，肝素抗凝，按常规分离单个核细胞。采用APAAP法检测白血病细胞表面标记，着染细胞>30%为阳性细胞。
1.4 统计学处理 用χ2检验。
2 结果
各类白血病分型结果见表1，各类白血病免疫表型分布构成见表2。
表1 各类白血病免疫分型分布 白血病
类型
例数
T系CD
B系CD
M系CD
, http://www.100md.com
2
3
4
7
8
27
HLA-DR
9
10
19
20
23
11b
15
, http://www.100md.com
18
33
14
13
T-ALL
2
2
2
1
2
2
1
-
2
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2
1
-
-
-
-
2
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-
-
B-ALL
4
1
1
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-
3
3
3
-
-
2
-
1
3
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M1
2
-
-
-
-
-
1
-
-
-
1
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-
-
1
1
2
-
-
-
M2
7
1
-
-
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, 百拇医药
-
-
1
-
1
2
-
-
4
5
7
-
-
-
, 百拇医药
M3
8
1
-
-
-
-
-
-
3
2
-
-
1
, 百拇医药
2
6
8
3
-
3
M4
2
-
-
-
-
-
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, 百拇医药
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-
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-
1
2
2
1
-
-
CML
7
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1
-
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-
-
-
2
1
2
2
-
-
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-
-
表2 各类白血病表型分布构成(例) FAB
T/B/M
B
B/M
T/M
M
合计
AML
1
, http://www.100md.com
0
6
3
9
19
CML
1
0
2
1
3
7
ALL
3
, 百拇医药
1
2
0
0
6
合计
5
1
10
4
12
32
经χ2检验，P>0.05，各类白血病表型分布构成无差异3 讨论
, 百拇医药
根据上述结果，可将白血病免疫表型分为二类：①系列专一性，即纯髓系抗原表达和纯淋巴细胞系统抗原表达。②系列非专一性：即ALL可伴有AML的标记(M+ALL)或AML可伴有ALL的标记(Ly+AML)。T-ALL大部分起源于T细胞系列CD2、CD3、CD7及CD4、CD8。国外Cheryl根据胸腺成熟阶段分三个阶段，认为前者为早期的胸腺标记，后者为第一阶段标记，不排除有各阶段的共同表现[1]。B-ALL亦然，B系抗原占主要分布，与国内邵剑峰等[2]报道相仿。无论T或B-ALL均伴有系列非专一性细胞T/M、B、T/B/M、国内张明珙等[3]亦报道35例ALL同时表达T、B细胞标记，而APAAP法不能区分多系表型。作者认为此类肿瘤细胞可能起源于早期淋巴细胞较早分化阶段。在AML中各型髓系细胞表达率依次为CD18、CD15、CD11b分别为100%、75%、71.4%，纯髓系占47%，余为系列非专一性表型：T/B/M、B/M、T/M。M3型出现HLA-DR(-)、CD9、CD13(+)，表明细胞起源于已分化为较成熟的粒系祖细胞，与国内邵剑峰等报道一致。在AML或ALL中，出现LY+AML或M+ALL现象，国外学者Bender认为正常人外周血、骨髓中存在少量的CD34、CD19、CD7(+)细胞，说明了各系血细胞的同源性。淋、髓系抗原的共性是早期造血细胞分化过程中的一个阶段，是恶性转化过程中保留了早期造血细胞的标记特征[4]。通过对白血病免疫表型的分析，可以看出其抗原表达是高度异质性，非专一性的恶性克隆性疾病。在诊断时需与形态、免疫、基因(MIC)结合分析作出正确判断。可指导化疗方案的应用。免疫表型对阐明和探讨造血细胞的起源、增殖、分化、成熟规律有重要意义。
, 百拇医药
参考文献
1 Cheryl Hirsch-Ginsbery. Advances in the diagnosis of acute leukemia. Hematolog/Oncology Clinics of North Amrica, 1993, 7(1):5
2 邵剑峰，陈珊珊，傅家瑜，等.白血病免疫分型分析.白血病杂志，1997， 12：250
3 张明珙，王鲁群，宋 强，等.426例急性白血病细胞免疫表型与临床特点.内科急危重杂志，1996，2(1)：18
4 Bender JG, Unverzagt KL, Walker DE, et al. Indentification and comparison of CD+34 cells and their subpopulation from normal peripheral blood and bone marrow using FCM. Blood, 1991, 77:2591, http://www.100md.com
单位：广州市第二人民医院血液内科(510150)
关键词：白血病；免疫表型
广东医学990718 【摘要】 目的 探讨白血病免疫表型在各类白血病中的分布和特征。方法 用16种单克隆抗体(CD)，以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫酶标法(APAAP)测定32例白血病病例。结果 急性淋巴细胞性白血病(ALL)，T-ALL除表达T系淋巴细胞抗原CD2、CD3、CD7、CD8外，同时也表达B-ALL抗原和髓系(M)白血病抗原；B-ALL表达B系抗原为HLA-DR，CD9、CD10、CD19、CD23，同时也表达B/M、T/B/M抗原；髓系白血病(ML)，表达髓系抗原依次为CD18、CD15、CD11b，同时也表达T/B/M、B/M、T/M；M3有显著特异性，CD13、CD33(+)、HLA-DR(-)。结论 白血病免疫分型表现真系列专一性和系列非专一性，为探索细胞起源开辟道路，同时FAB与免疫分型结合可互为弥补，提高诊断精确性。
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在白血病诊断中，只靠形态学和组织化学诊断，仍有一定局限性和片面性，如结合免疫分型判断，可提高诊断精确性，并为细胞起源提供生物学特征的线索。我院于1994年起开展了白血病免疫分型，现把32例白血病免疫分型报道如下。
1 材料与方法
1.1 病例 本组32例患者为我院1994～1998年收治的住院病人，均经形态学和组织化学确认。男16例，女16例。年龄14～72岁，平均37.18±16.44岁。按FAB形态学分型，AML 19例，其中M1 2例， M2 7例，M3 8例，M4 2例； CML 7例，ALL 6例， 其中T-ALL 2例，B-ALL 4例。
1.2 CD的选择 由北京中国军事医学科学院提供白血病免疫分型试剂盒。识别T淋巴细胞的有：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD27；识别B淋巴细胞的有：HLA-DR、CD9、CD10、CD19、CD23、CD20；识别髓系细胞的有：CD18、CD11b、CD15、CD13、CD33。
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1.3 表面标记检测 取初诊病人骨髓，肝素抗凝，按常规分离单个核细胞。采用APAAP法检测白血病细胞表面标记，着染细胞>30%为阳性细胞。
1.4 统计学处理 用χ2检验。
2 结果
各类白血病分型结果见表1，各类白血病免疫表型分布构成见表2。
表1 各类白血病免疫分型分布 白血病
类型
例数
T系CD
B系CD
M系CD
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2
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HLA-DR
9
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19
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11b
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T-ALL
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B-ALL
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M1
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1
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M2
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CML
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表2 各类白血病表型分布构成(例) FAB
T/B/M
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经χ2检验，P>0.05，各类白血病表型分布构成无差异3 讨论
, 百拇医药
根据上述结果，可将白血病免疫表型分为二类：①系列专一性，即纯髓系抗原表达和纯淋巴细胞系统抗原表达。②系列非专一性：即ALL可伴有AML的标记(M+ALL)或AML可伴有ALL的标记(Ly+AML)。T-ALL大部分起源于T细胞系列CD2、CD3、CD7及CD4、CD8。国外Cheryl根据胸腺成熟阶段分三个阶段，认为前者为早期的胸腺标记，后者为第一阶段标记，不排除有各阶段的共同表现[1]。B-ALL亦然，B系抗原占主要分布，与国内邵剑峰等[2]报道相仿。无论T或B-ALL均伴有系列非专一性细胞T/M、B、T/B/M、国内张明珙等[3]亦报道35例ALL同时表达T、B细胞标记，而APAAP法不能区分多系表型。作者认为此类肿瘤细胞可能起源于早期淋巴细胞较早分化阶段。在AML中各型髓系细胞表达率依次为CD18、CD15、CD11b分别为100%、75%、71.4%，纯髓系占47%，余为系列非专一性表型：T/B/M、B/M、T/M。M3型出现HLA-DR(-)、CD9、CD13(+)，表明细胞起源于已分化为较成熟的粒系祖细胞，与国内邵剑峰等报道一致。在AML或ALL中，出现LY+AML或M+ALL现象，国外学者Bender认为正常人外周血、骨髓中存在少量的CD34、CD19、CD7(+)细胞，说明了各系血细胞的同源性。淋、髓系抗原的共性是早期造血细胞分化过程中的一个阶段，是恶性转化过程中保留了早期造血细胞的标记特征[4]。通过对白血病免疫表型的分析，可以看出其抗原表达是高度异质性，非专一性的恶性克隆性疾病。在诊断时需与形态、免疫、基因(MIC)结合分析作出正确判断。可指导化疗方案的应用。免疫表型对阐明和探讨造血细胞的起源、增殖、分化、成熟规律有重要意义。
, 百拇医药
参考文献
1 Cheryl Hirsch-Ginsbery. Advances in the diagnosis of acute leukemia. Hematolog/Oncology Clinics of North Amrica, 1993, 7(1):5
2 邵剑峰，陈珊珊，傅家瑜，等.白血病免疫分型分析.白血病杂志，1997， 12：250
3 张明珙，王鲁群，宋 强，等.426例急性白血病细胞免疫表型与临床特点.内科急危重杂志，1996，2(1)：18
4 Bender JG, Unverzagt KL, Walker DE, et al. Indentification and comparison of CD+34 cells and their subpopulation from normal peripheral blood and bone marrow using FCM. Blood, 1991, 77:2591, http://www.100md.com