慢性病毒性肝炎CD44/CD54及Fas/FasL表达的意义
作者：郭琳琅 郭 颖 曹长安
单位：第一军医大学珠江医院病理科 广东省广州市 510282
关键词：肝炎/病毒；粘附分子CD44；粘附分子CD54；Fas基因；Fas配体基因
世界华人消化杂志990828
中国图书馆分类号 R512.6
Subject headings hepatitis/viral; adhesion molecule CD44; adhesion molecule CD54; Fas gene; FasL gene
细胞粘附分子及Fas/FasL与病毒性肝炎的关系研究国外已有较多报道[1-6]，而国内研究尚较少[7，8]. 我们采用免疫组化技术对33例慢性乙型肝炎和15例丙型肝炎组织中粘附分子CD44和CD54及Fas和FasL的表达进行原位观察，以探讨它们间的关系及在乙肝病毒和丙肝病毒致肝细胞慢性损伤中的作用.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 选自我院肝活检标本，经组织学和免疫组化证实慢性病毒性(HBsAg,HBcAg, HCV-NS5Ag阳性)40例，其中乙型肝炎33例，慢性活动性肝炎19例(简称慢活肝)；慢性迁延性肝炎14例(简称慢迁肝)，丙型肝炎15例，慢活肝9例，慢迁肝6例. 13例对照正常肝组织取自尸检和手术切除的肝胆管结石肝组织标本. 标本经福尔马林溶液固定，石蜡包埋，4μm切片. 第一抗体，兔抗Fas多克隆抗体、兔抗FasL多克隆抗体为美国Senta Cruz公司产品，鼠抗CD44单克隆抗体，鼠抗CD54单克隆抗体，为美国Zymed公司产品，皆购自武汉博士德公司；SP染色试剂盒为美国Zymed公司产品，购自福州迈新公司.
1.2 方法 采用免疫组化SP法染色，DAB显色. 染色强度分为阴性(-)，弱阳性(+)，阳性(++)和强阳性(+++).
2 结果
, http://www.100md.com
2.1 肝炎组织CD44和CD54的表达 正常肝细胞CD44和CD54均为阴性. 肝窦内皮细胞和枯否细胞可见CD44和CD54阳性表达，反应强度为+. 乙型肝炎和丙型肝炎中，肝细胞表面均出现CD54表达，反应强度为++～+++，而CD44均为阴性. 肝窦内皮细胞、枯否细胞及间质浸润的单核细胞和淋巴细胞CD44和CD54表达均较正常肝组织增加，乙型肝炎和丙型肝炎中CD44和CD54反应强度近似，染色强度分别为乙型肝炎，CD44：7例++，26例+++，CD54：9例++，24例+++. 丙型肝炎，CD44：6例++，9例+++，CD54：8例++，7例+++.
2.2 肝炎组织Fas和FasL的表达 正常肝细胞Fas和FasL均阴性. 33例乙型肝炎中Fas有25例阳性，阳性率为75.8%，FasL全部阳性，Fas阳性细胞为肝细胞浆出现棕黄色颗粒，FasL阳性细胞为间质浸润的淋巴细胞浆呈棕黄色染色. 14例慢迁肝中Fas有8例阳性，阳性率为57.1%，19例慢活肝中Fas有17例阳性，阳性率为89.5%，15例丙型肝炎中Fas阳性11例，阳性率为73.3%，FasL全部阳性. 阳性细胞分布与乙型肝炎一致. Fas和FasL阳性病例中以伴细胞坏死和炎细胞浸润区表达增加明显，反应强度为++～+++，无明显炎细胞浸润区Fas和FasL阳性反应强度为+.
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3 讨论
肝炎病毒致肝细胞损伤是一个复杂的免疫病理过程，其中可能有细胞粘附分子、凋亡相关基因等多种因素参与. CD44是与淋巴细胞归巢有关的分子，在介导淋巴细胞与内皮细胞的粘附过程中起着重要作用. CD54又称细胞间粘附分子(ICAM-1)，属免疫球蛋白超基因家族中一员，主要参与淋巴细胞间及淋巴细胞与内皮细胞间的相互识别和粘附.CD44和CD54与慢性病毒性肝炎关系的研究国外已有报道. Volpes et al[1]发现慢性肝炎组织中肝窦内皮细胞和枯否细胞CD44表达较正常肝组织增加. Stal et al[2]发现炎症性肝病中肝细胞弥漫性表达CD54. Fiore et al[3]在慢性丙型肝炎的研究中也发现CD54表达增加. 我们发现丙型肝炎和乙型肝炎中CD44和CD54表达变化近似，CD44和CD54在肝窦内皮细胞、枯否细胞及间质浸润的淋巴细胞和单核细胞表达增加，肝细胞表面还见CD54表达增加.
, 百拇医药
肝炎病毒能诱导Fas和FasL表达增强[4-8]. Hiramatsu et al[6]检测丙肝患者肝细胞中Fas基因的表达，发现受丙肝病毒感染的肝细胞，尤其是濒临死亡的细胞中普遍存在Fas基因的表达. 国内Luo et al[7]和秦波 et al[8]发现慢性乙型肝炎中Fas和FasL的表达与病灶炎细胞的浸润程度有关. 我们同时对乙型肝炎和丙型肝炎组织中Fas和FasL的表达进行了研究，发现两种肝炎中Fas和FasL的表达情况近似.
通讯作者 郭琳琅
Email. gllg@gzsums edu.cn
4 参考文献
1 Volpes R, Van Den Oord JJ, Desmet VJ. Vascular adhesion molecules in acute and chronic liver inflammation. Hepatology, 1992;15:269-275
, 百拇医药
2 Stal P, Broome U, Scheynius A, Befrits R, Hultcrantz R. Kupffer's cell iron overload induces intercellular adhesion molecule_1 expression on hepatocytes in genetic hemochromatosis. Hepatology, 1995;21:1008-1016
3 Fiore G, Angarano I, Caccetta L, Serrone M, Jirillo E, Schiraldi O, Antonaci S. In-situ immunophenotyping study of hepatic-infiltrating cytotoxic cells in chronic active hepatitis C. Eur J Gastroenterol Hepatol, 1997;9:491-496
, http://www.100md.com
4 Ryo K, Kamogawa Y, Ikeda I. Fas and Fas ligand strongly expressed in liver of fulminant hepatitis patients. Hepatology, 1995;22:(Pt.2):230-236A
5 Ohishi M, Sakisaka S, Koga H. The localization of HCV and the expression of Fas antigen in the liver of HCV-related chronic liver disease. Hepatology, 1995;22:(Pt.2):274-279A
6 Hiramatsu N, Hayashi N, Katayama K, Mochizuki K, Kawanishi Y, Kasahara A, Fusamoto H, Kamada T. Immunohistochemical detection of Fas antigen in liver tissues of patients with chronic hepatitis C. Hepatology, 1994;19:1354-1359
7 Luo KX, Zhu YF, Zhang LX, He HT, Wang XS, Zhang L. In situ investigation of Fas/FasL expression in chronic hepatitis B infection and related liver diseases. J Viral Hepat, 1997;4:303-307
8 秦波，张定凤，马英，范开. 乙型肝炎患者肝组织Fas/FasL表达及其在肝细胞凋亡中的作用. 中华肝脏病杂志，1997；5：88-90
收稿日期 1999-01-19 修回日期 1999-03-02, 百拇医药
单位：第一军医大学珠江医院病理科 广东省广州市 510282
关键词：肝炎/病毒；粘附分子CD44；粘附分子CD54；Fas基因；Fas配体基因
世界华人消化杂志990828
中国图书馆分类号 R512.6
Subject headings hepatitis/viral; adhesion molecule CD44; adhesion molecule CD54; Fas gene; FasL gene
细胞粘附分子及Fas/FasL与病毒性肝炎的关系研究国外已有较多报道[1-6]，而国内研究尚较少[7，8]. 我们采用免疫组化技术对33例慢性乙型肝炎和15例丙型肝炎组织中粘附分子CD44和CD54及Fas和FasL的表达进行原位观察，以探讨它们间的关系及在乙肝病毒和丙肝病毒致肝细胞慢性损伤中的作用.
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1 材料和方法
1.1 材料 选自我院肝活检标本，经组织学和免疫组化证实慢性病毒性(HBsAg,HBcAg, HCV-NS5Ag阳性)40例，其中乙型肝炎33例，慢性活动性肝炎19例(简称慢活肝)；慢性迁延性肝炎14例(简称慢迁肝)，丙型肝炎15例，慢活肝9例，慢迁肝6例. 13例对照正常肝组织取自尸检和手术切除的肝胆管结石肝组织标本. 标本经福尔马林溶液固定，石蜡包埋，4μm切片. 第一抗体，兔抗Fas多克隆抗体、兔抗FasL多克隆抗体为美国Senta Cruz公司产品，鼠抗CD44单克隆抗体，鼠抗CD54单克隆抗体，为美国Zymed公司产品，皆购自武汉博士德公司；SP染色试剂盒为美国Zymed公司产品，购自福州迈新公司.
1.2 方法 采用免疫组化SP法染色，DAB显色. 染色强度分为阴性(-)，弱阳性(+)，阳性(++)和强阳性(+++).
2 结果
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2.1 肝炎组织CD44和CD54的表达 正常肝细胞CD44和CD54均为阴性. 肝窦内皮细胞和枯否细胞可见CD44和CD54阳性表达，反应强度为+. 乙型肝炎和丙型肝炎中，肝细胞表面均出现CD54表达，反应强度为++～+++，而CD44均为阴性. 肝窦内皮细胞、枯否细胞及间质浸润的单核细胞和淋巴细胞CD44和CD54表达均较正常肝组织增加，乙型肝炎和丙型肝炎中CD44和CD54反应强度近似，染色强度分别为乙型肝炎，CD44：7例++，26例+++，CD54：9例++，24例+++. 丙型肝炎，CD44：6例++，9例+++，CD54：8例++，7例+++.
2.2 肝炎组织Fas和FasL的表达 正常肝细胞Fas和FasL均阴性. 33例乙型肝炎中Fas有25例阳性，阳性率为75.8%，FasL全部阳性，Fas阳性细胞为肝细胞浆出现棕黄色颗粒，FasL阳性细胞为间质浸润的淋巴细胞浆呈棕黄色染色. 14例慢迁肝中Fas有8例阳性，阳性率为57.1%，19例慢活肝中Fas有17例阳性，阳性率为89.5%，15例丙型肝炎中Fas阳性11例，阳性率为73.3%，FasL全部阳性. 阳性细胞分布与乙型肝炎一致. Fas和FasL阳性病例中以伴细胞坏死和炎细胞浸润区表达增加明显，反应强度为++～+++，无明显炎细胞浸润区Fas和FasL阳性反应强度为+.
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3 讨论
肝炎病毒致肝细胞损伤是一个复杂的免疫病理过程，其中可能有细胞粘附分子、凋亡相关基因等多种因素参与. CD44是与淋巴细胞归巢有关的分子，在介导淋巴细胞与内皮细胞的粘附过程中起着重要作用. CD54又称细胞间粘附分子(ICAM-1)，属免疫球蛋白超基因家族中一员，主要参与淋巴细胞间及淋巴细胞与内皮细胞间的相互识别和粘附.CD44和CD54与慢性病毒性肝炎关系的研究国外已有报道. Volpes et al[1]发现慢性肝炎组织中肝窦内皮细胞和枯否细胞CD44表达较正常肝组织增加. Stal et al[2]发现炎症性肝病中肝细胞弥漫性表达CD54. Fiore et al[3]在慢性丙型肝炎的研究中也发现CD54表达增加. 我们发现丙型肝炎和乙型肝炎中CD44和CD54表达变化近似，CD44和CD54在肝窦内皮细胞、枯否细胞及间质浸润的淋巴细胞和单核细胞表达增加，肝细胞表面还见CD54表达增加.
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肝炎病毒能诱导Fas和FasL表达增强[4-8]. Hiramatsu et al[6]检测丙肝患者肝细胞中Fas基因的表达，发现受丙肝病毒感染的肝细胞，尤其是濒临死亡的细胞中普遍存在Fas基因的表达. 国内Luo et al[7]和秦波 et al[8]发现慢性乙型肝炎中Fas和FasL的表达与病灶炎细胞的浸润程度有关. 我们同时对乙型肝炎和丙型肝炎组织中Fas和FasL的表达进行了研究，发现两种肝炎中Fas和FasL的表达情况近似.
通讯作者 郭琳琅
Email. gllg@gzsums edu.cn
4 参考文献
1 Volpes R, Van Den Oord JJ, Desmet VJ. Vascular adhesion molecules in acute and chronic liver inflammation. Hepatology, 1992;15:269-275
, 百拇医药
2 Stal P, Broome U, Scheynius A, Befrits R, Hultcrantz R. Kupffer's cell iron overload induces intercellular adhesion molecule_1 expression on hepatocytes in genetic hemochromatosis. Hepatology, 1995;21:1008-1016
3 Fiore G, Angarano I, Caccetta L, Serrone M, Jirillo E, Schiraldi O, Antonaci S. In-situ immunophenotyping study of hepatic-infiltrating cytotoxic cells in chronic active hepatitis C. Eur J Gastroenterol Hepatol, 1997;9:491-496
, http://www.100md.com
4 Ryo K, Kamogawa Y, Ikeda I. Fas and Fas ligand strongly expressed in liver of fulminant hepatitis patients. Hepatology, 1995;22:(Pt.2):230-236A
5 Ohishi M, Sakisaka S, Koga H. The localization of HCV and the expression of Fas antigen in the liver of HCV-related chronic liver disease. Hepatology, 1995;22:(Pt.2):274-279A
6 Hiramatsu N, Hayashi N, Katayama K, Mochizuki K, Kawanishi Y, Kasahara A, Fusamoto H, Kamada T. Immunohistochemical detection of Fas antigen in liver tissues of patients with chronic hepatitis C. Hepatology, 1994;19:1354-1359
7 Luo KX, Zhu YF, Zhang LX, He HT, Wang XS, Zhang L. In situ investigation of Fas/FasL expression in chronic hepatitis B infection and related liver diseases. J Viral Hepat, 1997;4:303-307
8 秦波，张定凤，马英，范开. 乙型肝炎患者肝组织Fas/FasL表达及其在肝细胞凋亡中的作用. 中华肝脏病杂志，1997；5：88-90
收稿日期 1999-01-19 修回日期 1999-03-02, 百拇医药