复方降脂胶囊质量标准的研究
作者：马 莉* 张 丽** 戴广训
单位：天津药物研究所 300193
关键词：复方降脂胶囊；芍药苷；HPLC；薄层层析；显微鉴别
中草药990912 摘 要 对复方降脂胶囊进行了定性定量研究。显微方法鉴别红花；薄层色谱法对照药材鉴别决明子；HPLC法测定芍药苷的含量，十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-5mmol/L柠檬酸水溶液-异丙醇(25∶75∶2)为流动相，紫外检测波长240nm，芍药苷与其它杂质得到有效分离。回收率为100.52%，RSD=1.92%，测定结果所用药材赤芍中芍药苷的含量为4.46%，三批样品的平均含量为12.69mg/g，暂定芍药苷的含量在10.14mg/g以上。
复方降脂胶囊是治疗高血脂症的新药，由决明子、赤芍、红花等味中药组成。为有效控制其质量，我们采用了HPLC法对其主要药味赤芍进行了含量测定。本方法灵敏度高，重现性好，其他成分无干扰。针对本制剂为原粉制剂的特点，以显微鉴别与薄层色谱法相结合，对其处方中决明子、红花进行了定性鉴别研究，结果满意。
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1 仪器与试药
仪器：Waters高效液相色谱仪，510型输液泵，U6K手动进样器，CR6A数据处理机，4L紫外检测器。
试剂：甲醇为色谱纯，其他均为分析纯
样品：批号970201，970202，970203由武警医学院天宝药厂提供。
对照品：芍药苷、对照药材决明子均购自中国药品生物制品检定所。
2 定性鉴别
2.1 红花的鉴别：取本品粉末少许，置显微镜下观察：花粉粒呈类圆形，椭圆形或橄榄形，直径约40～60μm，具有3个萌发孔，外壁有齿状突起。
2.2 决明子的鉴别：取本品4粒，加正己烷20mL，振摇，回流提取0.5h，滤过，滤液浓缩至0.5 mL，作为供试品溶液。另取决明子对照药材0.5 g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G高效薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇(10∶1∶1)的上层溶液为展开剂。展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中与对照药材色谱相应位置显相同橙黄色荧光斑点(见图1)。
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图1 决明子薄层图
3 赤芍中芍药苷的含量测定
3.1 色谱条件与系统适用性试验：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料(4.6 mm×250 mm)；流动相甲醇-5 mmol/L柠檬酸水溶液-异丙醇(25∶75∶2)；检测波长240 nm；流速0.9 mL/min；灵敏度0.2；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1 650，芍药苷与其他杂质得到有效分离。
3.2 供试品溶液的制备：取本品约1 g，精密称定，置50 mL圆底烧瓶中，加甲醇10 mL，置水浴中回流提取2 h，放冷，滤过。精密吸取续滤液2 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品50 mg置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(50 μg/mL芍药苷)。
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3.4 线性关系的考察：准确吸取对照品溶液6，8，10，12，14 μL进样，以峰面积的芍药苷进行线性回归，得回归方程Y=3.044×10-4X+0.2059×10-4;r=0.9999，结果表明芍药苷量在0.2465～0.5753 μg之间具有良好的线性关系。
3.5 精密度试验：精密吸取上述对照品溶液重复进样5次，精密度良好，RSD=0.95%。
3.6 重复性试验：取同一批号的复方降脂胶囊样品8份，按供试品溶液制备项下制备，分别依法测定。结果表明，本法重复性良好，RSD=1.69%。
3.7 回收率试验：采用加样回收法，取已知含量的复方降脂胶囊，分别添加芍药苷对照品依法测定回收率，结果平均回收率为100.52%，RSD=1.92%(n=5)。
3.8 3批样品含量测定：取3批样品依法测定，结果见表1，图2。
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3.9 药材的含量测定：取芍药药材细粉1g，按法测定，芍药苷含量为4.46%。
表1 3批样品含量测定 批号
含量(mg)
平均含量(mg/g)
970201
12.68
970202
12.37
12.69
970203
13.03
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图2 样品HPLC图
4 讨论
4.1 方中决明子中蒽醌类成分较多，但方中同时含有等量何首乌，主要成分也为蒽醌类，共同斑点较多，采用决明子对照药材对照，365 nm下有特征斑点，阴性无干扰。
4.2 本方为原粉制剂，方中红花为唯一花类，故采用显微鉴别，观察其专属性强的花粉粒为鉴别依据。实验中虽也观察到花柱等其他特征，但均不如花粉粒特征明显。
4.3 赤芍的主要活性成分为芍药苷，对生药中芍药苷的含量测定方法主要有薄层扫描法、分光光度法和HPLC法[1]。本提取方法简单，分离度好，结果准确，相对误差小，我们对复方降脂胶囊三批测定结果表明芍药苷含量基本稳定，可做为其质控手段。
收稿日期：1998-11-03, 百拇医药(马 莉* 张 丽** 戴广训)
单位：天津药物研究所 300193
关键词：复方降脂胶囊；芍药苷；HPLC；薄层层析；显微鉴别
中草药990912 摘 要 对复方降脂胶囊进行了定性定量研究。显微方法鉴别红花；薄层色谱法对照药材鉴别决明子；HPLC法测定芍药苷的含量，十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-5mmol/L柠檬酸水溶液-异丙醇(25∶75∶2)为流动相，紫外检测波长240nm，芍药苷与其它杂质得到有效分离。回收率为100.52%，RSD=1.92%，测定结果所用药材赤芍中芍药苷的含量为4.46%，三批样品的平均含量为12.69mg/g，暂定芍药苷的含量在10.14mg/g以上。
复方降脂胶囊是治疗高血脂症的新药，由决明子、赤芍、红花等味中药组成。为有效控制其质量，我们采用了HPLC法对其主要药味赤芍进行了含量测定。本方法灵敏度高，重现性好，其他成分无干扰。针对本制剂为原粉制剂的特点，以显微鉴别与薄层色谱法相结合，对其处方中决明子、红花进行了定性鉴别研究，结果满意。
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1 仪器与试药
仪器：Waters高效液相色谱仪，510型输液泵，U6K手动进样器，CR6A数据处理机，4L紫外检测器。
试剂：甲醇为色谱纯，其他均为分析纯
样品：批号970201，970202，970203由武警医学院天宝药厂提供。
对照品：芍药苷、对照药材决明子均购自中国药品生物制品检定所。
2 定性鉴别
2.1 红花的鉴别：取本品粉末少许，置显微镜下观察：花粉粒呈类圆形，椭圆形或橄榄形，直径约40～60μm，具有3个萌发孔，外壁有齿状突起。
2.2 决明子的鉴别：取本品4粒，加正己烷20mL，振摇，回流提取0.5h，滤过，滤液浓缩至0.5 mL，作为供试品溶液。另取决明子对照药材0.5 g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G高效薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇(10∶1∶1)的上层溶液为展开剂。展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中与对照药材色谱相应位置显相同橙黄色荧光斑点(见图1)。
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图1 决明子薄层图
3 赤芍中芍药苷的含量测定
3.1 色谱条件与系统适用性试验：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料(4.6 mm×250 mm)；流动相甲醇-5 mmol/L柠檬酸水溶液-异丙醇(25∶75∶2)；检测波长240 nm；流速0.9 mL/min；灵敏度0.2；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1 650，芍药苷与其他杂质得到有效分离。
3.2 供试品溶液的制备：取本品约1 g，精密称定，置50 mL圆底烧瓶中，加甲醇10 mL，置水浴中回流提取2 h，放冷，滤过。精密吸取续滤液2 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3.3 对照品溶液的制备：精密称取芍药苷对照品50 mg置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(50 μg/mL芍药苷)。
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3.4 线性关系的考察：准确吸取对照品溶液6，8，10，12，14 μL进样，以峰面积的芍药苷进行线性回归，得回归方程Y=3.044×10-4X+0.2059×10-4;r=0.9999，结果表明芍药苷量在0.2465～0.5753 μg之间具有良好的线性关系。
3.5 精密度试验：精密吸取上述对照品溶液重复进样5次，精密度良好，RSD=0.95%。
3.6 重复性试验：取同一批号的复方降脂胶囊样品8份，按供试品溶液制备项下制备，分别依法测定。结果表明，本法重复性良好，RSD=1.69%。
3.7 回收率试验：采用加样回收法，取已知含量的复方降脂胶囊，分别添加芍药苷对照品依法测定回收率，结果平均回收率为100.52%，RSD=1.92%(n=5)。
3.8 3批样品含量测定：取3批样品依法测定，结果见表1，图2。
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3.9 药材的含量测定：取芍药药材细粉1g，按法测定，芍药苷含量为4.46%。
表1 3批样品含量测定 批号
含量(mg)
平均含量(mg/g)
970201
12.68
970202
12.37
12.69
970203
13.03
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图2 样品HPLC图
4 讨论
4.1 方中决明子中蒽醌类成分较多，但方中同时含有等量何首乌，主要成分也为蒽醌类，共同斑点较多，采用决明子对照药材对照，365 nm下有特征斑点，阴性无干扰。
4.2 本方为原粉制剂，方中红花为唯一花类，故采用显微鉴别，观察其专属性强的花粉粒为鉴别依据。实验中虽也观察到花柱等其他特征，但均不如花粉粒特征明显。
4.3 赤芍的主要活性成分为芍药苷，对生药中芍药苷的含量测定方法主要有薄层扫描法、分光光度法和HPLC法[1]。本提取方法简单，分离度好，结果准确，相对误差小，我们对复方降脂胶囊三批测定结果表明芍药苷含量基本稳定，可做为其质控手段。
收稿日期：1998-11-03, 百拇医药(马 莉* 张 丽** 戴广训)