原发性肝癌患者乙型肝炎病毒表面标志物及DNA检测
作者：林金容 周兰 郑琼珍 王晓怀 周殿元
单位：林金容 周兰 郑琼珍 王晓怀 广州军区广州总医院放射肿瘤中心(510010)；周殿元 第一军医大学南方医院消化病研究所(510515)
关键词：原发性肝癌；乙型肝炎病毒；病因学
广东医学991018 【摘要】 目的 探讨原发性肝癌(PHC)患者乙型肝炎病毒感染状况。方法 应用酶联免疫吸附技术及聚合酶链反应同步检测216例PHC及100例非肝病患者为对照组血液中HBV-M及HBV-DNA。结果 PHC组中，HBV阳性[HBV-M及(或)HBV-DNA阳性]195例(90.3%)，其中HBV-M阳性195例(90.3%)，HBV-DNA阳性71例(32.9%)，均分别显著地高于对照组的41例(41.0%，P<0.01)及9例(9.0%，P<0.01)，PHC患者血液中，仅约三分之一存在HBV。结论 PHC发生与HBV感染有关，HBV是PHC发生发展的主要病因之一。
原发性肝癌(PHC)与乙型病毒性肝炎病毒(HBV)之间的密切关系已有不少报道，在我国，HBV是PHC的主要病因，大多数PHC患者血液中乙型肝炎病毒表面标志物(marker-hepatitis B virus, HBV-M)阳性[1]，显著地高于非肝病患者及健康人群血液中的HBV-M。本文应用ELISA及PCR同步检测PHC患者外周血中HBV-M及HBV-DNA，旨在探讨PHC患者血液中HBV感染状况。
1 材料与方法
1.1 病人选择 216例PHC患者为1992年1月～1998年9月在我院住院患者，经过手术、病理、影像学方法确诊。入院次晨禁食抽血，4℃保存备用。男182例，女34例，年龄25～82岁，平均40.2岁。100例同时期住院非肝病患者为对照组，男77例，女23例，年龄17～25岁，平均32.7岁。
1.2 HBV-M及HBV-DNA检测 ①HBV-M检测：HBV-M试剂盒购自厦门新创有限公司，参照说明书采用ELISA方法检测。②HBV-DNA检测：HBV-DNA试剂盒购自华美生物工程公司，参照说明书操作。
1.3 统计学处理 χ2检验
2 结果
PHC患者中，HBV阳性[HBV-M及(或)HBV-DNA阳性]195例，总感染率为90.3%，HBV-M及HBV-DNA阳性分别为195例(90.3%)及71例(32.9%)，均分别显著地高于对照组的41例(41.0%，P<0.01)及9例(9.0%，P<0.01)；HBV-M阳性PHC患者中，HBsAg、HBeAb及HBcAb三项阳性最多，120例(61.5%)，其中HBV-DNA阳性31/120例(25.8%)，14例HBcAb阳性，11例HBsAb及HBcAb二项阳性PHC患者，HBV-DNA阳性分别为2例(0.9%)及1例(0.5%)。21例HBV-M阴性患者，HBV-DNA均阴性。详见表1。
表1 两组患者血液中HBV-M及HBV-DNA检测结果比较
HBsAg
HBsAb
HBeAg
HBeAb
HBcAb
阳性例数(%)
HBV-DNA
PHC组
+
—
—
+
+
120(55.6)*
31(25.8)*
+
—
+
—
+
12(5.6)
12(5.6)*
+
—
—
—
+
25(11.6)*
25(11.6)*
—
+
—
—
+
11(5.1)
1(0.5)
—
+
—
—
—
13(6.0)
0(0.0)
—
—
—
—
+
14(8.3)
2(0.9)
总数(例)
157*
24
12
120*
168
195(90.3)*
71(32.9)*
对照组
+
—
—
+
+
9(9.0)
2(2.0)
+
—
+
—
+
4(4.0)
4(4.0)
+
—
—
—
+
2(2.0)
2(2.0)
—
+
—
—
+
3(3.0)
0(0.0)
—
+
—
—
—
17(17.0)
0(0.0)
—
—
—
—
+
6(6.0)
1(1.0)
总数(例)
15
20
4
9
24
41(41.0)
9(9.0)
*与对照组同项指标比较，P<0.01
3 讨论
我们应用ELISA方法检测PHC患者血液中HBV-M，结果表明PHC患者血液中HBV-M阳性率非常显著地高于同时期非肝病住院患者(P<0.01)，进一步支持PHC的发生与HBV感染有关，但是PHC患者血液中HBV-DNA阳性率非常显著地低于HBV-M阳性率(P<0.01)，表明大部分PHC患者血液中并不在HBV[2]，说明HBV活动与否并非是PHC发生的主要原因，另外还提示HBV也可能通过其蛋白产物及(或)直接作用于肝细胞，促使肝细胞恶性转化。通常认为HBsAg阳性表明患者体内存在HBV，HBeAg阳性表明患者具有传染性，HBcAb阳性表明患者体内存在HBV，并且伴HBV持续复制，HBeAb阳性表明患者处于HBV感染晚期阶段，HBsAb阳性表明患者对HBV具有免疫力，处于恢复期状态，所以一般认为HBsAg、HBeAg及HBcAb中任何一项阳性即表示患者体内存在HBV、HBV-DNA，本文中HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性或HBsAg、HBcAb二项阳性患者血液中，HBV-DNA均阳性，说明在这二种情况下，ELISA阳性均可表示患者体内存在HBV感染，两者的意义是一样的。但是本文中HBsAg、HBeAb及HBcAb三项阳性患者，外周血HBV-DNA阳性率非常显著地低于HBsAg、HBeAb及HBcAb三项阳性率(P<0.01)，可能与下列因素有关：①HBV出现变异株。②HBeAb阳性表明患者处于HBV感染晚期阶段，此时HBV已经嵌合到肝癌细胞染色体中，导致血液中HBV-DNA阴性。③本文选用琼脂糖凝胶电泳鉴定HBV-DNA，敏感性略差，如果选用巢式PCR或银染聚丙烯酰胺凝胶电泳可能进一步提高阳性率。我们的研究结果还提示：PHC患者血液中HBV-DNA仍然较高，非常显著地高于对照组(P<0.01)，说明PHC患者中仍然存在严重的HBV感染状况，具有传染性，因此，尽管PHC本身不具有传染性，不需要隔离，但是由于HBV具有传染性，所以对于HBV-DNA阳性患者，应该与普通肝炎一样，采取适当的隔离手段，而且在抗肿瘤治疗的同时，应该进行抗病毒治疗。本组病例中，2例HBV-M阴性及1例HBsAb阳性患者血液中也检测到HBV-DNA，表明这些患者血液中也存在HBV活动，说明PCR方法敏感性较ELISA高，因此有必要对所有的患者进行HBV的检测，以决定是否需要进行抗HBV治疗。 4 参考文献
1 林金容，王晓怀，郑琼珍，等.48例原发性肝癌患者血清丙型肝炎抗体检测.现代消化病及内镜杂志，1996，1(1)：37
2 袁爱力，罗元辉.应用多聚酶链反应技术进一步探讨原发性肝癌与HBV感染的关系.中华消化杂志，1996，13(3)：138
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