比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量
作者：敖冬梅 陈树和 刘焱文 胡俊 姚亦之
单位：敖冬梅 陈树和 刘焱文(湖北中医学院 430061)；胡俊 姚亦之(黄石长征制药厂 435000)
关键词：
湖北中医杂志991145 薯蓣丸是由薯蓣、当归、桂枝、人参、干地黄等21味中药组成。具有调理脾胃，益气和营的功效。薯蓣为本品方中君药，主要含皂甙类成分，其甙元为薯蓣皂甙元。为了控制本品的质量，以薯蓣皂甙元为对照，采用比色法对本品中薯蓣皂甙元进行含量分析。
1 仪器与试药
uv-210A 型紫外分光光度计，薯蓣皂甙元对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用)，显色剂：5%香草醛溶液(500g香草醛溶于10ml冰醋酸；新鲜配制)0.2ml和高氯酸0.8ml。其他试剂均为分析纯。
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2 供试液的制备
对照溶液的制备：精密称取薯蓣皂甙元标准品5.6g，置10ml量瓶中，加氯仿使之溶解后，定容至10ml，摇匀，备用。
供试品溶液的制备：取本品2丸，研磨混匀，精密称取1.5g，加适量硅藻土拌匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取至无色。将提取液定量转移至蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用3mol/L盐酸溶液溶解，定量转移至三角锥瓶中，加3mol/L盐酸溶液至50ml，加热回流水解2小时，放冷，用石油醚(30～60℃)萃取5次，每次30ml，合并石油醚液，水洗至中性，回收石油醚至干，加氯仿适量溶解，定量转移至10ml容量瓶中，用氯仿定容至10ml，摇匀，备用。
3 方法与结果
3.1 实验条件选择 分别取对照品溶液，供试品溶液各0.5ml，依法显色，在200～600nm区间扫描测定，对照品溶液与供试品溶液的最大吸收波长约451nm。
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3.2 标准曲线的制备 精密吸取薯蓣皂甙元对照品溶液0.05，0.10，0.15，0.20，0.25ml，置10ml容量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，置70℃水浴上不断振摇保温20分钟，迅速冷却，加冰醋酯稀释至刻度，摇匀，备用。以5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，加冰醋酸稀至刻度的溶液为空白，在451nm波长处测定吸收度。以浓度(c，mg) 为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表1。
表1 浓度与吸收度的关系 浓度(mg)
0.028
0.056
0.084
0.0112
0.140
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吸收度
0.141
0.289
0.432
0.590
0.734
结果表明，薯蓣皂甙元在0.028～0.140mg范围内，吸收度呈良好线性关系，其回归方程为A=0.0089+5.3107℃，r=0.9999。
3.3 样品测定 取本品份，照供试品溶液制法制成供试品液，分别吸取上述供试液各0.5ml，对照品溶液0.2ml，置10ml量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，置70℃水浴上不断振摇，保温20分钟，迅速冷却，加冰醋酸稀释至刻度，摇匀，备用。在451nm波长处测定吸收度。按对照品比较法计算含量，结果见表2。表2 样品测定结果 样号
, 百拇医药
薯蓣皂甙元含量
(mg/g，以薯蓣皂甙元计)
(mg/g)
CV
(%)
1
0.1363
0.1363
0.1360
0.1362
, 百拇医药
2
0.1403
0.1405
0.1397
0.1402
3
0.1359
0.1359
0.1362
0.1360
1.25
4
0.1370
, 百拇医药
0.1365
0.1369
0.1368
5
0.1368
0.1371
0.1365
0.1368
3.4 回收率实验 取本品已知含量的同一批样品5份，各0.75g，精密称定，分别加入薯蓣皂甙元对照品各0.07mg，照供试品溶液制备方法同法制备，精密吸取上述溶液各0.5ml，挥尽溶剂，显色比色后，计算回收率。结果见表3。表3 回收率试验结果 样号
已知样品量(mg)
, 百拇医药
加入对照品量(mg)
测得量
回收率(%)
CV(%)±SD
1
0.0685
0.07
0.1348
95.23
2
, 百拇医药
0.0685
0.07
0.1408
103.74
3
0.0685
0.07
0.1413
104.47
3.93
100.05±3.93
4
0.0685
, 百拇医药
0.07
0.1372
98.68
5
0.0685
0.07
0.1368
98.13
3.5 稳定性实验 取薯蓣皂甙元对照品溶液，依法显色后，在不同时间测定其吸收度。结果在半小时内无变化。
3.6 重现性试验 取本品同一批样品5份，按供试品溶液制备方法平行制备，依法显色，于451nm波长处测定吸收度，并计算含量。结果见表4。表4 重现性实验 样号
, 百拇医药
1
2
3
4
5
含量(mg)
0.1371
0.1367
0.1343
0.1401
0.1362
, 百拇医药
0.1369
RSD(%)
1.53
测定结果表明，变异系数小于2.0%，方法重现性好。
4 讨论
据文献报道，薯蓣皂甙元的含量测定方法有比色法[1]，薄层扫描法[2]。本品薯蓣为君药，主含薯蓣皂甙，属甾体类成分。本文采用比色法，以薯蓣皂甙元为对照，测定了本品中薯蓣皂甙元含量，方法简便快速，灵敏度高，重现性好。
参考文献
1 郑慧丽，竺叶青，戊皓青.七叶一枝花酊剂薄层层析及其薯蓣皂甙元定量.上海医科大学学报，1995，22(1)：65～66
2 刘玉珍，钱本余，夏莉杰，等.蒺藜中薯蓣皂甙元的双波长薄层扫描定量法.中成药，1992，14(10)：35～36
(收稿日期：1999-02-10), http://www.100md.com
单位：敖冬梅 陈树和 刘焱文(湖北中医学院 430061)；胡俊 姚亦之(黄石长征制药厂 435000)
关键词：
湖北中医杂志991145 薯蓣丸是由薯蓣、当归、桂枝、人参、干地黄等21味中药组成。具有调理脾胃，益气和营的功效。薯蓣为本品方中君药，主要含皂甙类成分，其甙元为薯蓣皂甙元。为了控制本品的质量，以薯蓣皂甙元为对照，采用比色法对本品中薯蓣皂甙元进行含量分析。
1 仪器与试药
uv-210A 型紫外分光光度计，薯蓣皂甙元对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用)，显色剂：5%香草醛溶液(500g香草醛溶于10ml冰醋酸；新鲜配制)0.2ml和高氯酸0.8ml。其他试剂均为分析纯。
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2 供试液的制备
对照溶液的制备：精密称取薯蓣皂甙元标准品5.6g，置10ml量瓶中，加氯仿使之溶解后，定容至10ml，摇匀，备用。
供试品溶液的制备：取本品2丸，研磨混匀，精密称取1.5g，加适量硅藻土拌匀，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取至无色。将提取液定量转移至蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用3mol/L盐酸溶液溶解，定量转移至三角锥瓶中，加3mol/L盐酸溶液至50ml，加热回流水解2小时，放冷，用石油醚(30～60℃)萃取5次，每次30ml，合并石油醚液，水洗至中性，回收石油醚至干，加氯仿适量溶解，定量转移至10ml容量瓶中，用氯仿定容至10ml，摇匀，备用。
3 方法与结果
3.1 实验条件选择 分别取对照品溶液，供试品溶液各0.5ml，依法显色，在200～600nm区间扫描测定，对照品溶液与供试品溶液的最大吸收波长约451nm。
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3.2 标准曲线的制备 精密吸取薯蓣皂甙元对照品溶液0.05，0.10，0.15，0.20，0.25ml，置10ml容量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，置70℃水浴上不断振摇保温20分钟，迅速冷却，加冰醋酯稀释至刻度，摇匀，备用。以5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，加冰醋酸稀至刻度的溶液为空白，在451nm波长处测定吸收度。以浓度(c，mg) 为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表1。
表1 浓度与吸收度的关系 浓度(mg)
0.028
0.056
0.084
0.0112
0.140
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吸收度
0.141
0.289
0.432
0.590
0.734
结果表明，薯蓣皂甙元在0.028～0.140mg范围内，吸收度呈良好线性关系，其回归方程为A=0.0089+5.3107℃，r=0.9999。
3.3 样品测定 取本品份，照供试品溶液制法制成供试品液，分别吸取上述供试液各0.5ml，对照品溶液0.2ml，置10ml量瓶中，挥尽溶剂，分别精密加入5%香草醛溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，置70℃水浴上不断振摇，保温20分钟，迅速冷却，加冰醋酸稀释至刻度，摇匀，备用。在451nm波长处测定吸收度。按对照品比较法计算含量，结果见表2。表2 样品测定结果 样号
, 百拇医药
薯蓣皂甙元含量
(mg/g，以薯蓣皂甙元计)
(mg/g)
CV
(%)
1
0.1363
0.1363
0.1360
0.1362
, 百拇医药
2
0.1403
0.1405
0.1397
0.1402
3
0.1359
0.1359
0.1362
0.1360
1.25
4
0.1370
, 百拇医药
0.1365
0.1369
0.1368
5
0.1368
0.1371
0.1365
0.1368
3.4 回收率实验 取本品已知含量的同一批样品5份，各0.75g，精密称定，分别加入薯蓣皂甙元对照品各0.07mg，照供试品溶液制备方法同法制备，精密吸取上述溶液各0.5ml，挥尽溶剂，显色比色后，计算回收率。结果见表3。表3 回收率试验结果 样号
已知样品量(mg)
, 百拇医药
加入对照品量(mg)
测得量
回收率(%)
CV(%)
±SD1
0.0685
0.07
0.1348
95.23
2
, 百拇医药
0.0685
0.07
0.1408
103.74
3
0.0685
0.07
0.1413
104.47
3.93
100.05±3.93
4
0.0685
, 百拇医药
0.07
0.1372
98.68
5
0.0685
0.07
0.1368
98.13
3.5 稳定性实验 取薯蓣皂甙元对照品溶液，依法显色后，在不同时间测定其吸收度。结果在半小时内无变化。
3.6 重现性试验 取本品同一批样品5份，按供试品溶液制备方法平行制备，依法显色，于451nm波长处测定吸收度，并计算含量。结果见表4。表4 重现性实验 样号
, 百拇医药
1
2
3
4
5
含量(mg)
0.1371
0.1367
0.1343
0.1401
0.1362
, 百拇医药
0.1369
RSD(%)
1.53
测定结果表明，变异系数小于2.0%，方法重现性好。
4 讨论
据文献报道，薯蓣皂甙元的含量测定方法有比色法[1]，薄层扫描法[2]。本品薯蓣为君药，主含薯蓣皂甙，属甾体类成分。本文采用比色法，以薯蓣皂甙元为对照，测定了本品中薯蓣皂甙元含量，方法简便快速，灵敏度高，重现性好。
参考文献
1 郑慧丽，竺叶青，戊皓青.七叶一枝花酊剂薄层层析及其薯蓣皂甙元定量.上海医科大学学报，1995，22(1)：65～66
2 刘玉珍，钱本余，夏莉杰，等.蒺藜中薯蓣皂甙元的双波长薄层扫描定量法.中成药，1992，14(10)：35～36
(收稿日期：1999-02-10), http://www.100md.com