凋亡相关基因bcl-2, bax在人类大肠腺癌中的表达意义
作者：乔 庆 吴金生 张 静 马庆久 赖大年
单位：中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科 陕西省西安市 710038
关键词：bcl-2; bax；细胞凋亡/ 凋亡指数(AI)；大肠腺癌；HE染色；免疫组织化学
世界华人消化杂志991105 摘要 目的 探讨bcl-2和bax在人类大肠腺癌中的表达及其意义. 方法 运用HE染色和免疫组织化学方法对72例人类大肠腺癌进行研究，并采用5例正常人类结肠组织作为对照. 结果 ①大肠腺癌的细胞凋亡随肿瘤分化的不同，而有显著的差异(P<0.01)，肿瘤的分化程度越高，凋亡指数AI值越大. ②bcl-2和bax基因在大肠腺癌中均具有较高程度的表达. ③bcl-2和bax基因均与大肠腺癌的分化程度有关(P<0.05)，肿瘤分化越低，其表达也就越低. ④bcl-2和bax基因在大肠腺癌组织中阳性反应呈显著正相关(P<0.05，γ=0.523). 结论 HE染色切片可以识别典型的凋亡细胞，大肠腺癌中的细胞凋亡与肿瘤的恶性程度有关，恶性程度越大，细胞凋亡越少；bcl-2与bax基因均与大肠腺癌的细胞凋亡的调控有关，在此过程中二者也相互作用，并且可能在大肠腺癌分化的中晚期共同调控，以抑制细胞凋亡作用为主.
, 百拇医药
中国图书馆分类号 R 735.34
Expression and significance of apoptosis related gene bcl-2, bax in human large intestine adenocar-cinoma
QIAO Qing, WU Jin-Sheng, ZHANG Jing, MA Qing-Jiu and LAI Da-Nian
Department of General Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi＇an 710038, Shaanxi Province, China
Abstract AIM To evaluate the expression and significance of bcl-2 and bax genes in the modulation of apoptosis in human large intestine adenocarcinoma. METHODS Seventy-two human large intestine adenocarcinomas were detected by HE stain and immunohistochemistry, five normal human colon tissues were used as control. RESULTS ① Apoptosis in large intestine adenocarcinoma was different with differentiation of neoplasm (P<0.01), the higher the differentiation, the higher the apoptosis index (AI). ② bcl-2 and bax genes were all expressed in large intestine adenocarcinoma to a greater degree. ③ In large intestine adenocarcinoma, bcl-2 and bax genes all had relationship with differentiation of neoplasm (P<0.05). They were expressed lower in moderate, poorly differentiated specimens and higher in well differentiated specimens. ④ There was prominently positive correlation between bcl-2 and bax genes in immunoreactivity (P<0.05，r=0.523). CONCLUSION HE stain could distinguish typical apoptotic cells. Apoptosis is less frequently observed in tumors with higher malignant potential. bcl-2 and bax genes all have relationship with the modulation of apoptosis in large intestine adenocarcinoma. They might act together and have anti-apoptosis action in middle and late stages of differentiation of large intestine adenocarcinoma.
, http://www.100md.com
Subject headings bcl-2; bax; apoptosis; large intestine adenocarcinoma; HE stain immunohistochemistry
0 引言
原发性大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率处于逐年上升趋势，其中大肠腺癌在大肠癌各个亚型中的发病率居首位. 细胞凋亡与肿瘤的发生、发展关系密切，肿瘤的细胞凋亡受到多种基因网络式调控，在肿瘤的细胞凋亡调控系统中，bcl-2基因家族的作用备受重视，bcl-2的主要作用是抑制细胞凋亡[1]，而bax通过抑制bcl-2的功能，从而促进细胞凋亡. 由于bcl-2,bax基因在不同肿瘤中的表达和意义不尽相同，因此通过对大肠腺癌细胞凋亡调控进行研究，对了解其他肿瘤的发病机制具有重要的意义，并且在实践上也可为肿瘤治疗提供一些新的思路和方法.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 人类大肠腺癌标本72例取自西京医院外科手术及活检标本，5例正常人类结肠组织取自尸检组织(排除有结肠疾病). 全部标本经100 mL/ L福尔马林固定；石蜡包埋，常规连续切片，厚度5 μm. HE染色，病理诊断证实. SABC试剂盒(anti-rabbit, anti-rat)购自武汉博士德公司；兔抗Bax多克隆抗体(N-20)购自美国Santa Cruze Biotechnology, Inc；鼠抗Bcl-2单克隆抗体(clone124)购自丹麦Dako公司.
1.2 方法 ①常规组织切片及染色，光镜下观察凋亡细胞，每一组标本在400倍光镜下随机选取2个具有癌巢的视野，用血细胞记数仪分别记取癌细胞中的凋亡细胞，累计凋亡细胞的百分率作为该组织的凋亡指数AI. ②免疫组织化学方法：石蜡切片常规脱蜡至水，95℃微波处理20min，1 mL/ L H2O2封闭30min；20 mL/ L正常羊血清封闭30min后，分别滴加Bcl-2,Bax抗体4℃冰箱过夜，次日37℃孵育30min；滴加羊抗鼠或羊抗兔IgG 37℃ 30min；滴加SABC复合物37℃ 30min，以上各步骤均用0.1 mL/ L PBS (pH 7.4)振洗5min×3次；DAB-H2O2显色5min～10min；苏木精衬染，脱水透明，DPX封固. 所有实验均设立对照实验：用正常鼠血清或PBS替代一抗做阴性对照，并用正常结肠组织作为对照. 结果判定：标本无阳性反应细胞、阳性反应细胞率<10%或背景同阳性对照者为阴性(-)；标本阳性细胞呈淡棕黄色或阳性细胞率介于10%～50%为弱阳性(+)；标本阳性细胞呈深棕黄色或阳性细胞率大于50%为强阳性(++).
, http://www.100md.com
统计学处理 AI值与肿瘤分化间关系行Student t检验，阳性率用χ2检验，P<0.05为显著差异，P<0.01为非常显著，P>0.05为无差异，Bcl-2与Bax间行相关性分析.
2 结果
2.1 AI与大肠腺癌 在大肠腺癌中表现为肿瘤分化越低，AI越小，在高、中分化，中、低分化，高、低分化大肠腺癌之间AI均存在显著差异(P<0.01，表1).
表1 AI值与不同分化程度的大肠腺癌的关系 分化程度
n
AI(
±s)
高分化
, http://www.100md.com
56
4.86±0.03
中分化
12
1.82±0.58
低分化
4
1.07±0.45
总计
72
2.20±1.37
2.2 Bcl-2,Bax在大肠腺癌中的表达 Bcl-2和Bax阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要位于阳性标本的大肠腺癌细胞胞质内，正常对照的结肠组织部分腺管也可呈弱阳性反应；在腺癌组织中，Bcl-2和Bax阳性细胞以弥漫性分布为主，少数也可呈局灶性分布；一部分腺癌组织中可有Bcl-2和Bax同时阳性，在一些典型的凋亡细胞中，可同时呈现Bcl-2和Bax阳性反应，但通常是Bax强阳性(图1，2). 免疫组织化学所有空白对照及替代对照均为阴性. Bcl-2在大肠腺癌组织中的阳性率为61.1%，其中结肠腺癌中的阳性率为68.8%；直、乙结肠腺癌阳性率为87.5%；直肠腺癌阳性率为54.1%. 3种组织之间无明显差异(P>0.05). 5例正常对照的结肠组织中有4例在腺管底部细胞内有Bcl-2微弱表达. 72例大肠腺癌组织中，呈Bax阳性反应者52例，阳性率为72.2%，其中16例结肠腺癌阳性者为13例，阳性率为81.3%；8例直、乙结肠腺癌阳性者为7例，阳性率为87.5%；48例直肠腺癌中阳性者为32例，阳性率为66.7%. 3种组织未见显著差异(P>0.05). 5例正常对照的结肠组织中均可见部分腺管上皮细胞中有Bax弱阳性表达.
, http://www.100md.com
图1 Bcl-2阳性物质为棕黄色颗粒，位于癌细胞胞质中，凋亡小体呈弱阳性反应. 400× (SABC)
图2 Bax阳性物质为棕黄色颗粒，位于癌细胞胞质中，凋亡小体呈阳性反应. 400× (SABC)
Bcl-2在高分化大肠腺癌中的阳性率为71.4%，在中、低分化的大肠腺癌中的阳性率为25.0%，χ2=5.644，P<0.05；Bax在56例高分化大肠腺癌的阳性率为82.1%，16例中、低分化的大肠腺癌中的阳性率为37.5%，χ2=6.181，P<0.05，说明Bcl-2, Bax在高分化及中、低分化的大肠腺癌中的阳性表达率均有显著差异，但它们在高分化及中、低分化的大肠腺癌中的阳性表达强弱没有显著差异(表2).
表2 Bcl-2, Bax在不同分化的大肠腺癌中的表达 分化程度
, 百拇医药
n
阴性
弱阳性
阳性
Bcl-2
Bax
Bcl-2
Bax
Bcl-2
Bax
高分化
56
16
, 百拇医药
10
12
8
28
38
中分化
12
10
8
0
2
2
2
低分化
, 百拇医药
4
2
2
0
0
2
2
总 计
72
28
20
12
10
32
, 百拇医药
42
2.3 Bcl-2和Bax之间的关系 在大肠腺癌组织中，有76.9%的Bax阳性组织同时表达Bcl-2阳性，经统计学计算，二者呈显著正相关(P<0.05，γ=0.523)，但在癌旁组织中未见二者有密切关系.
3 讨论
随着对细胞凋亡的深入研究，人们已认识到许多疾病如肿瘤，均可以看作是细胞凋亡异常性疾病. 细胞凋亡和细胞坏死不仅在形态上有显著区别，而且它还是在基因调控下的细胞自我消亡的过程，在长期的进化过程中，它形成了具有高度保守性和适应性的精细调控网络，其中bcl-2基因家族在细胞凋亡的分子调控中占有重要地位. 业已证实，细胞内的Bcl-2与Bax的比例调节了细胞凋亡的发生；Bax同源二聚体的形成可诱导凋亡，随着Bcl-2蛋白的表达量的升高，越来越多的Bax二聚体分开，与Bcl-2形成比Bax-Bax更稳定的Bax-Bcl-2异源二聚体，从而“中和”了Bax诱导凋亡的作用[2].
, 百拇医药
近年来用HE染色识别凋亡细胞成为确定组织凋亡状态的重要指标[3]，一般认为，以HE切片中的典型凋亡细胞计数所得的凋亡指数AI，可以反映肿瘤中的细胞凋亡的基本状况，是较为可靠的. 肿瘤细胞凋亡状况与肿瘤分化关系目前仍不明确，我们发现，在直、结肠腺癌、直、乙结肠腺癌中的凋亡状况是基本一致的，大肠腺癌的分化程度越高，AI值就越大，这些结果与Sugamura et al[4]在大肠癌中的研究结果是吻合的，表明在大肠腺癌中细胞凋亡随肿瘤分化的成熟而逐渐降低，结合分化成熟的肿瘤恶性程度低，我们认为AI可能也间接地反映了肿瘤的恶性程度.
在本研究中，我们发现bcl-2，bax均不同程度地参与了大部分大肠腺癌的细胞凋亡的调控过程，但它们在直肠腺癌、直、乙结肠腺癌及结肠腺癌中的表达未见显著差异，说明由bcl-2和bax介导的大肠肿瘤细胞调控不存在组织的特异性. 在高分化的大肠腺癌Bcl-2与Bax的阳性率明显高于中、低分化的大肠腺癌，说明它们在高分化大肠腺癌的表达明显多于中、低分化的大肠腺癌，结合AI值，提示bcl-2的抗凋亡作用可能主要体现在分化的中晚期，这与Baretton et al[5]的结果是一致的；而在高分化大肠腺癌凋亡调控中也可能还有bax之外的促凋亡蛋白参与.
, 百拇医药
bcl-2和bax的作用是相辅相成、密不可分的，二者关系密切，本研究的结果也证实了这一点，说明Bcl-2发挥抗凋亡的作用必须和Bax结合[6]，在大肠腺癌的中晚期，它们之间相互作用，共同显示抗凋亡. 总之，肿瘤细胞凋亡受到精细的网络式调控，各因素并非独立地起作用. 从对大肠腺癌组织原位的bcl-2和bax表达间相互关系的相关分析中，我们可以看到，bcl-2和bax对大肠腺癌的凋亡调控作用也是密切联系的.
通讯作者 乔庆，710038，陕西省西安市新寺路，中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科.
作者简介：乔庆，男，1969-04-04，陕西省西安市人，汉族. 1994年毕业于第四军医大学，1999年于第四军医大学获普通外科硕士，现任第四军医大学唐都医院普通外科住院医生，发表论文2篇.
Correspondence to:Qiao Qing, Department of General Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi＇an 710038, Shaanxi Province, China
, http://www.100md.com
Tel. +86.29.2521357(H), 3577731(O)
4 参考文献
1 Korsmeyer SJ. Bcl-2: a repressor of lymphocyte death. Immunol Today, 1992;13:285-288
2 Li CH, etc. In: Progress on tumor moleculogy. Beijing: Military Medical Scientific Press, 1996：80-81
3 Hino N, Higashi T, Nouso K, Nakatsukasa H, Tsuji T. Apoptosis and proliferation of human hepatocellular carcinoma. Liver, 1996;16:123-129
, http://www.100md.com
4 Sugamura K, Makino M, Kaibara N. Apoptosis is prognostic factor in colorectal carcinoma. Surg Today, 1998;28:145-150
5 Baretton GB, Diebold J, Christoforis G, Vogt M, Müller C, Dofer K, Schneiderbanger K, Schmidt M, Lhrs U. Apoptosis and immunohistochemical bcl-2 expression in colorectal adenomas and carcinomas. Cancer, 1996;77:255-264
6 Yang E, Korsmeyer SJ. Molecular the apoptosis: a discover on the BCL2 family and cell death. Blood, 1996;88:386-401
收稿日期 1999-09-22, http://www.100md.com
单位：中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科 陕西省西安市 710038
关键词：bcl-2; bax；细胞凋亡/ 凋亡指数(AI)；大肠腺癌；HE染色；免疫组织化学
世界华人消化杂志991105 摘要 目的 探讨bcl-2和bax在人类大肠腺癌中的表达及其意义. 方法 运用HE染色和免疫组织化学方法对72例人类大肠腺癌进行研究，并采用5例正常人类结肠组织作为对照. 结果 ①大肠腺癌的细胞凋亡随肿瘤分化的不同，而有显著的差异(P<0.01)，肿瘤的分化程度越高，凋亡指数AI值越大. ②bcl-2和bax基因在大肠腺癌中均具有较高程度的表达. ③bcl-2和bax基因均与大肠腺癌的分化程度有关(P<0.05)，肿瘤分化越低，其表达也就越低. ④bcl-2和bax基因在大肠腺癌组织中阳性反应呈显著正相关(P<0.05，γ=0.523). 结论 HE染色切片可以识别典型的凋亡细胞，大肠腺癌中的细胞凋亡与肿瘤的恶性程度有关，恶性程度越大，细胞凋亡越少；bcl-2与bax基因均与大肠腺癌的细胞凋亡的调控有关，在此过程中二者也相互作用，并且可能在大肠腺癌分化的中晚期共同调控，以抑制细胞凋亡作用为主.
, 百拇医药
中国图书馆分类号 R 735.34
Expression and significance of apoptosis related gene bcl-2, bax in human large intestine adenocar-cinoma
QIAO Qing, WU Jin-Sheng, ZHANG Jing, MA Qing-Jiu and LAI Da-Nian
Department of General Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi＇an 710038, Shaanxi Province, China
Abstract AIM To evaluate the expression and significance of bcl-2 and bax genes in the modulation of apoptosis in human large intestine adenocarcinoma. METHODS Seventy-two human large intestine adenocarcinomas were detected by HE stain and immunohistochemistry, five normal human colon tissues were used as control. RESULTS ① Apoptosis in large intestine adenocarcinoma was different with differentiation of neoplasm (P<0.01), the higher the differentiation, the higher the apoptosis index (AI). ② bcl-2 and bax genes were all expressed in large intestine adenocarcinoma to a greater degree. ③ In large intestine adenocarcinoma, bcl-2 and bax genes all had relationship with differentiation of neoplasm (P<0.05). They were expressed lower in moderate, poorly differentiated specimens and higher in well differentiated specimens. ④ There was prominently positive correlation between bcl-2 and bax genes in immunoreactivity (P<0.05，r=0.523). CONCLUSION HE stain could distinguish typical apoptotic cells. Apoptosis is less frequently observed in tumors with higher malignant potential. bcl-2 and bax genes all have relationship with the modulation of apoptosis in large intestine adenocarcinoma. They might act together and have anti-apoptosis action in middle and late stages of differentiation of large intestine adenocarcinoma.
, http://www.100md.com
Subject headings bcl-2; bax; apoptosis; large intestine adenocarcinoma; HE stain immunohistochemistry
0 引言
原发性大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率处于逐年上升趋势，其中大肠腺癌在大肠癌各个亚型中的发病率居首位. 细胞凋亡与肿瘤的发生、发展关系密切，肿瘤的细胞凋亡受到多种基因网络式调控，在肿瘤的细胞凋亡调控系统中，bcl-2基因家族的作用备受重视，bcl-2的主要作用是抑制细胞凋亡[1]，而bax通过抑制bcl-2的功能，从而促进细胞凋亡. 由于bcl-2,bax基因在不同肿瘤中的表达和意义不尽相同，因此通过对大肠腺癌细胞凋亡调控进行研究，对了解其他肿瘤的发病机制具有重要的意义，并且在实践上也可为肿瘤治疗提供一些新的思路和方法.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 人类大肠腺癌标本72例取自西京医院外科手术及活检标本，5例正常人类结肠组织取自尸检组织(排除有结肠疾病). 全部标本经100 mL/ L福尔马林固定；石蜡包埋，常规连续切片，厚度5 μm. HE染色，病理诊断证实. SABC试剂盒(anti-rabbit, anti-rat)购自武汉博士德公司；兔抗Bax多克隆抗体(N-20)购自美国Santa Cruze Biotechnology, Inc；鼠抗Bcl-2单克隆抗体(clone124)购自丹麦Dako公司.
1.2 方法 ①常规组织切片及染色，光镜下观察凋亡细胞，每一组标本在400倍光镜下随机选取2个具有癌巢的视野，用血细胞记数仪分别记取癌细胞中的凋亡细胞，累计凋亡细胞的百分率作为该组织的凋亡指数AI. ②免疫组织化学方法：石蜡切片常规脱蜡至水，95℃微波处理20min，1 mL/ L H2O2封闭30min；20 mL/ L正常羊血清封闭30min后，分别滴加Bcl-2,Bax抗体4℃冰箱过夜，次日37℃孵育30min；滴加羊抗鼠或羊抗兔IgG 37℃ 30min；滴加SABC复合物37℃ 30min，以上各步骤均用0.1 mL/ L PBS (pH 7.4)振洗5min×3次；DAB-H2O2显色5min～10min；苏木精衬染，脱水透明，DPX封固. 所有实验均设立对照实验：用正常鼠血清或PBS替代一抗做阴性对照，并用正常结肠组织作为对照. 结果判定：标本无阳性反应细胞、阳性反应细胞率<10%或背景同阳性对照者为阴性(-)；标本阳性细胞呈淡棕黄色或阳性细胞率介于10%～50%为弱阳性(+)；标本阳性细胞呈深棕黄色或阳性细胞率大于50%为强阳性(++).
, http://www.100md.com
统计学处理 AI值与肿瘤分化间关系行Student t检验，阳性率用χ2检验，P<0.05为显著差异，P<0.01为非常显著，P>0.05为无差异，Bcl-2与Bax间行相关性分析.
2 结果
2.1 AI与大肠腺癌 在大肠腺癌中表现为肿瘤分化越低，AI越小，在高、中分化，中、低分化，高、低分化大肠腺癌之间AI均存在显著差异(P<0.01，表1).
表1 AI值与不同分化程度的大肠腺癌的关系 分化程度
n
AI(
±s)高分化
, http://www.100md.com
56
4.86±0.03
中分化
12
1.82±0.58
低分化
4
1.07±0.45
总计
72
2.20±1.37
2.2 Bcl-2,Bax在大肠腺癌中的表达 Bcl-2和Bax阳性物质呈棕黄色颗粒状，主要位于阳性标本的大肠腺癌细胞胞质内，正常对照的结肠组织部分腺管也可呈弱阳性反应；在腺癌组织中，Bcl-2和Bax阳性细胞以弥漫性分布为主，少数也可呈局灶性分布；一部分腺癌组织中可有Bcl-2和Bax同时阳性，在一些典型的凋亡细胞中，可同时呈现Bcl-2和Bax阳性反应，但通常是Bax强阳性(图1，2). 免疫组织化学所有空白对照及替代对照均为阴性. Bcl-2在大肠腺癌组织中的阳性率为61.1%，其中结肠腺癌中的阳性率为68.8%；直、乙结肠腺癌阳性率为87.5%；直肠腺癌阳性率为54.1%. 3种组织之间无明显差异(P>0.05). 5例正常对照的结肠组织中有4例在腺管底部细胞内有Bcl-2微弱表达. 72例大肠腺癌组织中，呈Bax阳性反应者52例，阳性率为72.2%，其中16例结肠腺癌阳性者为13例，阳性率为81.3%；8例直、乙结肠腺癌阳性者为7例，阳性率为87.5%；48例直肠腺癌中阳性者为32例，阳性率为66.7%. 3种组织未见显著差异(P>0.05). 5例正常对照的结肠组织中均可见部分腺管上皮细胞中有Bax弱阳性表达.
, http://www.100md.com
图1 Bcl-2阳性物质为棕黄色颗粒，位于癌细胞胞质中，凋亡小体呈弱阳性反应. 400× (SABC)
图2 Bax阳性物质为棕黄色颗粒，位于癌细胞胞质中，凋亡小体呈阳性反应. 400× (SABC)
Bcl-2在高分化大肠腺癌中的阳性率为71.4%，在中、低分化的大肠腺癌中的阳性率为25.0%，χ2=5.644，P<0.05；Bax在56例高分化大肠腺癌的阳性率为82.1%，16例中、低分化的大肠腺癌中的阳性率为37.5%，χ2=6.181，P<0.05，说明Bcl-2, Bax在高分化及中、低分化的大肠腺癌中的阳性表达率均有显著差异，但它们在高分化及中、低分化的大肠腺癌中的阳性表达强弱没有显著差异(表2).
表2 Bcl-2, Bax在不同分化的大肠腺癌中的表达 分化程度
, 百拇医药
n
阴性
弱阳性
阳性
Bcl-2
Bax
Bcl-2
Bax
Bcl-2
Bax
高分化
56
16
, 百拇医药
10
12
8
28
38
中分化
12
10
8
0
2
2
2
低分化
, 百拇医药
4
2
2
0
0
2
2
总 计
72
28
20
12
10
32
, 百拇医药
42
2.3 Bcl-2和Bax之间的关系 在大肠腺癌组织中，有76.9%的Bax阳性组织同时表达Bcl-2阳性，经统计学计算，二者呈显著正相关(P<0.05，γ=0.523)，但在癌旁组织中未见二者有密切关系.
3 讨论
随着对细胞凋亡的深入研究，人们已认识到许多疾病如肿瘤，均可以看作是细胞凋亡异常性疾病. 细胞凋亡和细胞坏死不仅在形态上有显著区别，而且它还是在基因调控下的细胞自我消亡的过程，在长期的进化过程中，它形成了具有高度保守性和适应性的精细调控网络，其中bcl-2基因家族在细胞凋亡的分子调控中占有重要地位. 业已证实，细胞内的Bcl-2与Bax的比例调节了细胞凋亡的发生；Bax同源二聚体的形成可诱导凋亡，随着Bcl-2蛋白的表达量的升高，越来越多的Bax二聚体分开，与Bcl-2形成比Bax-Bax更稳定的Bax-Bcl-2异源二聚体，从而“中和”了Bax诱导凋亡的作用[2].
, 百拇医药
近年来用HE染色识别凋亡细胞成为确定组织凋亡状态的重要指标[3]，一般认为，以HE切片中的典型凋亡细胞计数所得的凋亡指数AI，可以反映肿瘤中的细胞凋亡的基本状况，是较为可靠的. 肿瘤细胞凋亡状况与肿瘤分化关系目前仍不明确，我们发现，在直、结肠腺癌、直、乙结肠腺癌中的凋亡状况是基本一致的，大肠腺癌的分化程度越高，AI值就越大，这些结果与Sugamura et al[4]在大肠癌中的研究结果是吻合的，表明在大肠腺癌中细胞凋亡随肿瘤分化的成熟而逐渐降低，结合分化成熟的肿瘤恶性程度低，我们认为AI可能也间接地反映了肿瘤的恶性程度.
在本研究中，我们发现bcl-2，bax均不同程度地参与了大部分大肠腺癌的细胞凋亡的调控过程，但它们在直肠腺癌、直、乙结肠腺癌及结肠腺癌中的表达未见显著差异，说明由bcl-2和bax介导的大肠肿瘤细胞调控不存在组织的特异性. 在高分化的大肠腺癌Bcl-2与Bax的阳性率明显高于中、低分化的大肠腺癌，说明它们在高分化大肠腺癌的表达明显多于中、低分化的大肠腺癌，结合AI值，提示bcl-2的抗凋亡作用可能主要体现在分化的中晚期，这与Baretton et al[5]的结果是一致的；而在高分化大肠腺癌凋亡调控中也可能还有bax之外的促凋亡蛋白参与.
, 百拇医药
bcl-2和bax的作用是相辅相成、密不可分的，二者关系密切，本研究的结果也证实了这一点，说明Bcl-2发挥抗凋亡的作用必须和Bax结合[6]，在大肠腺癌的中晚期，它们之间相互作用，共同显示抗凋亡. 总之，肿瘤细胞凋亡受到精细的网络式调控，各因素并非独立地起作用. 从对大肠腺癌组织原位的bcl-2和bax表达间相互关系的相关分析中，我们可以看到，bcl-2和bax对大肠腺癌的凋亡调控作用也是密切联系的.
通讯作者 乔庆，710038，陕西省西安市新寺路，中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科.
作者简介：乔庆，男，1969-04-04，陕西省西安市人，汉族. 1994年毕业于第四军医大学，1999年于第四军医大学获普通外科硕士，现任第四军医大学唐都医院普通外科住院医生，发表论文2篇.
Correspondence to:Qiao Qing, Department of General Surgery, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi＇an 710038, Shaanxi Province, China
, http://www.100md.com
Tel. +86.29.2521357(H), 3577731(O)
4 参考文献
1 Korsmeyer SJ. Bcl-2: a repressor of lymphocyte death. Immunol Today, 1992;13:285-288
2 Li CH, etc. In: Progress on tumor moleculogy. Beijing: Military Medical Scientific Press, 1996：80-81
3 Hino N, Higashi T, Nouso K, Nakatsukasa H, Tsuji T. Apoptosis and proliferation of human hepatocellular carcinoma. Liver, 1996;16:123-129
, http://www.100md.com
4 Sugamura K, Makino M, Kaibara N. Apoptosis is prognostic factor in colorectal carcinoma. Surg Today, 1998;28:145-150
5 Baretton GB, Diebold J, Christoforis G, Vogt M, Müller C, Dofer K, Schneiderbanger K, Schmidt M, Lhrs U. Apoptosis and immunohistochemical bcl-2 expression in colorectal adenomas and carcinomas. Cancer, 1996;77:255-264
6 Yang E, Korsmeyer SJ. Molecular the apoptosis: a discover on the BCL2 family and cell death. Blood, 1996;88:386-401
收稿日期 1999-09-22, http://www.100md.com