电针对犬幽门括约肌压力的影响及与胃粘膜组织中脑肠肽的关系
作者：孙大勇 黄裕新 褚自宏 高巍 王庆莉
单位：孙大勇 黄裕新 高巍 王庆莉 中国人民解放军第四军医大学唐都医院 消化内科 陕西省西安市 710038；褚自宏 中国人民解放军第四军医大学唐都医院 中医科 陕西省西安市 710038
关键词：电针；胃压力；脑肠肽；胃粘膜
世界华人消化杂志991128 中国图书馆分类号 R 245
Subject headings electroacupuncture; gastric pressure; brain-gut peptide; gastric mucosa
现代临床观察和实验研究表明，电针对胃肠道功能具有良好的调整作用，但调控机制尚不清楚. 曾有学者报告，电针可调节幽门括约肌压力[1]，影响部分脑肠肽(BGP)的合成与释放[2]，但其调节机制以及两者之间可能存在的内在联系尚未被完全阐明；有关电针对幽门压力的影响及其与部分BGP关系的同步研究，国内外也未见同类报道. 我们在实验中观察了EA对犬幽门括约肌压力的影响和胃粘膜组织中MTL，SS，NOS含量的变化，并进行了同步实验研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 健康♂杂种犬20条，体质量15 kg～20 kg，随机分为4组，每组5条：足三里组、下巨虚组、非经非穴组、空白对照组. 实验前禁食24 h，自由饮水，25 g/ L戊巴比妥钠1 mg/ kg，iv麻醉，腹部正中切口，暴露胃体，于胃体前壁切开0.5 cm小口，将胃压测量仪(WYY-1型，航天医学工程研究所制)测压导管插入幽门管部固定，压力传感器按需测压并自动同步记录压力图形.
1.2 方法 穴位选择双侧足阳明胃经足三里穴与下巨虚穴[3]，非经非穴点选双侧腓骨小头与外髁中点距腓骨外侧缘1 cm处，位于足三里与下巨虚穴之间. 空白对照组不行电针刺，与上述各组同步记录各项监测指标，并取胃粘膜组织标本. 6805-A型电针仪(上海医疗仪器厂生产)参数设置：断续波，频率50Hz，强度20V，时间30min，以双下肢轻微颤抖为宜. 电针前及电针后90min内每隔10min测压1次，每次记录2min，并在电针前及电针30min各取胃体、胃窦部胃粘膜组织约3 g，吸去血迹，100℃生理盐水中煮5min，刮下粘膜称重，加入1 N HAC 1 mL，碾磨、匀浆，2 h～3 h后加入等容积1 N NaOH， 4℃ 3500 r/ min离心15min，取上清液-70℃保存待测MTL，SS，NOS. MTL，SS测定采用放免分析法，复管，放免药盒分别由北京东亚免疫技术研究所和第二军医大学神经生物教研室提供，采用FJ-2003-50G型γ计数仪(国营二六二工厂生产)测定样品含量值. NOS测定采用生化法，药盒由军事医学科学院放射医学研究所提供，于752型分光光度计上读取A(OD值)，通过计算获得结果，质控符合标准.
, 百拇医药
统计学处理 结果均以
±s表示，采用NOSA统计软件作统计处理.
2 结果
电针30min后足三里组幽门括约肌总压力、基础压均显著下降(P<0.05)，高压波频率减少(P<0.05)；胃体粘膜组织中SS含量显著下降(P<0.05)，MTL，NOS无显著变化；胃窦粘膜组织中MTL，SS，NOS均发生了显著变化，其中MTL，SS含量下降，NOS含量显著上升(P<0.05). 而下巨虚组电针后只出现了胃体粘膜组织中SS含量显著下降(P<0.05，表1)，其他指标电针前后无显著变化. 非经非穴组、空白对照组所有监测指标电针前后均无显著变化.
表1 电针穴位前后犬幽门压力及胃粘膜组织MTL，SS，NOS浓度变化 (n=5,±s) 参数
, 百拇医药
足三里组
下巨虚组
非经非穴组
空白对照组
针前
针30min
针前
针30min
针前
针30min
针前
针30min
总压力(Kpa)
, http://www.100md.com
28.7±2.3
23.3±2.7b
26.1±3.3
26.3±4.8
26.9±0.8
25.3±3.2
28.2±3.2
28.5±2.7
基础压(Kpa)
17.7±1.8
13.2±2.9a
, 百拇医药
15.8±0.6
16.0±6.9
16.2±2.4
15.6±1.7
16.7±1.9
17.3±3.8
频率(min-1)
4.8±0.6
4.1±0.3a
4.7±0.6
4.6±0.9
, 百拇医药 5.1±0.7
4.9±1.3
4.6±0.3
4.8±0.5
体MTL(ng/ L)
147.2±22.8
156.3±18.1
164.7±21.5
159.8±15.3
127.6±28.7
129.1±38.4
186.9±21.2
, 百拇医药
173.5±29.7
体SS(ng/ L)
169.5±25.3
128.2±29.3a
143.4±19.5
102.8±21.3a
197.1±18.5
177.3±26.7
149.7±21.5
156.9±36.3
体NOS(ng/ L)
, 百拇医药
4.5±0.7
5.5±1.7
4.5±1.2
4.0±2.7
4.7±0.3
4.9±0.8
5.2±2.0
4.5±2.4
窦MTL(ng/ L)
209.4±23.3
156.0±29.2a
235.1±31.6
, 百拇医药
210.8±40.3
224.7±19.8
216.2±28.0
241.2±27.8
235.7±31.3
窦SS(ng/ L)
87.9±7.7
71.8±10.7a
81.2±9.9
86.9±13.1
75.7±18.9
, 百拇医药
68.6±12.7
73.1±21.2
81.8±26.9
窦NOS(ng/ L)
2.7±0.3
2.1±0.4a
2.5±0.7
2.8±1.0
3.2±0.4
3.0±0.5
2.5±0.2
2.6±0.4
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs 电针前.3 讨论
EA可调控胃运动功能，其中医理论基础为“经络内属脏腑，外络于肢节”，EA人中穴对胃窦部收缩振幅和频率有明显抑制作用[4]，EA足三里穴对胃动力减弱患者起兴奋作用、胃动力增强患者起抑制作用[5]. 本结果表明，EA足三里穴使幽门括约肌总压力、基础压、高压波频率显著下降，说明电针足三里穴调控胃功能的途径之一是通过影响幽门括约肌功能实现的，下巨虚穴与足三里穴同属足阳明胃经，电针下巨虚穴及与足三里穴、下巨虚穴邻近的非经非穴点幽门括约肌压力却无明显变化，这与祖国传统医学认为足三里穴是胃经的下合穴，下巨虚穴是小肠经的下合穴，“合治内脏”的观点相一致，也进一步说明针刺对胃功能的调控作用具有一定的经络和穴位特异性.
分泌MTL的Mo细胞主要分布于十二指肠粘膜、空肠粘膜中，MTL主要生理作用是强烈刺激上消化道的机械活动和电活动，引发消化间期移行性运动综合波(MMC)，加速胃的固体和液体排空[6]. 胃内SS大部分局限于胃体和幽门部粘膜D细胞内，对胃的多种生理功能具有抑制作用，包括抑制几乎所有脑肠肽的分泌和胃运动[7]. NOS是NO合成过程中唯一合成酶，在幽门括约肌肌间神经丛中含量明显高于周围组织，可使胃肠平滑肌松弛，在调节幽门功能方面起到十分重要作用[8]. 本实验电针刺犬30min发现，足三里组、下巨虚组胃体粘膜组织中SS含量下降，与胃体粘膜情况不同的是，足三里组胃窦粘膜组织电针后MTL，SS含量下降，NOS含量上升，而下巨虚组却无明显变化. 此结果提示：电针可引起胃粘膜组织中MTL，SS，NOS等多种BGP及其合成酶含量的变化，这种影响作用对不同部位胃粘膜组织是不同的，对胃窦粘膜组织中BGP的种类及程度的影响更广泛、更明显. 这可能与BGP分泌细胞在胃肠道的分布有关. 电针不同穴位对BGP的影响也具有特异的穴位选择性. 影响最明显的为足三里穴，其次为下巨虚穴，而非经非穴组和空白对照组则无影响.
, http://www.100md.com
MTL可引起胃平滑肌的强烈收缩，NO则使胃平滑肌松弛. 电针足三里穴后胃窦粘膜组织中MTL含量下降，减弱了平滑肌收缩强度，NOS含量增加，使NO合成增加，加强了平滑肌的松弛作用，二者协调作用的结果使幽门括约肌压力下降，收缩频率减少，这与本实验中同步观察到电针足三里穴后幽门括约肌压力变化的情况一致，电针下巨虚穴胃窦部粘膜组织中BGP含量无明显变化，幽门括约肌压力同样无明显改变，说明电针对胃粘膜组织中部分BGP含量的影响参与了电针对幽门括约肌的调控作用. 我们还观察到电针后足三里组胃体、胃粘膜组织中SS含量明显下降，而SS的主要生理作用之一可抑制胃肠道运动，当SS含量下降可使这种抑制作用减弱，从而使胃运动加强，幽门括约肌压上升，这与本实验同步观察到幽门括约肌压力变化情况不符，分析其原因可能为：①电针引起MTL，NOS变化产生对胃运动的抑制作用足以克服了由SS含量下降带来的间接胃运动增强作用；②电针还可能通过其他途径来影响胃运动功能，其确切机制有待进一步研究.
注：国家自然科学基金资助项目，No.39570885
, http://www.100md.com
通讯作者 孙大勇
Tel.+86.29.3510595 Ext.78121
4 参考文献
1 Myrzabaeva NA. The effect of laser puncture and electopuncture on the indices of intragastric prl-metry impatients with gastroesophageal reflux. Lik Sprava, 1998;(3/ 0):137-138
2 Asauliuk IK. The combined treatment of peptic ulcer with the differentiateduse of nontraditional physio-therapeutic methods. Lik Sprava, 1996;(10-12):110-322
, 百拇医药
3 Yu C. Traditional Chinese veterinary acupuncture and moxibustion. Beijing: China Agricalture Press, 1989:147-163
4 周吕，柳力公，谢益宽. 针刺对狗胃运动的影响及其作用机制的研究. 中华消化杂志，1989；8：30-32
5 邵雷. B超显像观察针刺足三里对胃蠕动的影响. 上海针灸学杂志，1991；4：13-14
6 Itoh Z, Mizumoto A, Iwanaga Y. Involvement of 5-hydroxytryptamine 3 receptors in regulation of interdigestive gastric contractions by motilin in the dog. Gastroenterology, 1991;100:901-980
, 百拇医药
7 Neri M, Cuccuru F, Mariiol . Effect of somatostiontin on gall bladder volume and small intestinal motor activity in humans. Gastroenterology, 1990;98:316-317
8 Furness JB, Li ZS, Young HM. Nitric oxide synthase in the enteric nervous system of the guinea pig: a quantitative description. Cell Tissue Res, 1994;277:139-145
收稿日期 1999-07-11, 百拇医药
单位：孙大勇 黄裕新 高巍 王庆莉 中国人民解放军第四军医大学唐都医院 消化内科 陕西省西安市 710038；褚自宏 中国人民解放军第四军医大学唐都医院 中医科 陕西省西安市 710038
关键词：电针；胃压力；脑肠肽；胃粘膜
世界华人消化杂志991128 中国图书馆分类号 R 245
Subject headings electroacupuncture; gastric pressure; brain-gut peptide; gastric mucosa
现代临床观察和实验研究表明，电针对胃肠道功能具有良好的调整作用，但调控机制尚不清楚. 曾有学者报告，电针可调节幽门括约肌压力[1]，影响部分脑肠肽(BGP)的合成与释放[2]，但其调节机制以及两者之间可能存在的内在联系尚未被完全阐明；有关电针对幽门压力的影响及其与部分BGP关系的同步研究，国内外也未见同类报道. 我们在实验中观察了EA对犬幽门括约肌压力的影响和胃粘膜组织中MTL，SS，NOS含量的变化，并进行了同步实验研究.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 健康♂杂种犬20条，体质量15 kg～20 kg，随机分为4组，每组5条：足三里组、下巨虚组、非经非穴组、空白对照组. 实验前禁食24 h，自由饮水，25 g/ L戊巴比妥钠1 mg/ kg，iv麻醉，腹部正中切口，暴露胃体，于胃体前壁切开0.5 cm小口，将胃压测量仪(WYY-1型，航天医学工程研究所制)测压导管插入幽门管部固定，压力传感器按需测压并自动同步记录压力图形.
1.2 方法 穴位选择双侧足阳明胃经足三里穴与下巨虚穴[3]，非经非穴点选双侧腓骨小头与外髁中点距腓骨外侧缘1 cm处，位于足三里与下巨虚穴之间. 空白对照组不行电针刺，与上述各组同步记录各项监测指标，并取胃粘膜组织标本. 6805-A型电针仪(上海医疗仪器厂生产)参数设置：断续波，频率50Hz，强度20V，时间30min，以双下肢轻微颤抖为宜. 电针前及电针后90min内每隔10min测压1次，每次记录2min，并在电针前及电针30min各取胃体、胃窦部胃粘膜组织约3 g，吸去血迹，100℃生理盐水中煮5min，刮下粘膜称重，加入1 N HAC 1 mL，碾磨、匀浆，2 h～3 h后加入等容积1 N NaOH， 4℃ 3500 r/ min离心15min，取上清液-70℃保存待测MTL，SS，NOS. MTL，SS测定采用放免分析法，复管，放免药盒分别由北京东亚免疫技术研究所和第二军医大学神经生物教研室提供，采用FJ-2003-50G型γ计数仪(国营二六二工厂生产)测定样品含量值. NOS测定采用生化法，药盒由军事医学科学院放射医学研究所提供，于752型分光光度计上读取A(OD值)，通过计算获得结果，质控符合标准.
, 百拇医药
统计学处理 结果均以
±s表示，采用NOSA统计软件作统计处理.2 结果
电针30min后足三里组幽门括约肌总压力、基础压均显著下降(P<0.05)，高压波频率减少(P<0.05)；胃体粘膜组织中SS含量显著下降(P<0.05)，MTL，NOS无显著变化；胃窦粘膜组织中MTL，SS，NOS均发生了显著变化，其中MTL，SS含量下降，NOS含量显著上升(P<0.05). 而下巨虚组电针后只出现了胃体粘膜组织中SS含量显著下降(P<0.05，表1)，其他指标电针前后无显著变化. 非经非穴组、空白对照组所有监测指标电针前后均无显著变化.
表1 电针穴位前后犬幽门压力及胃粘膜组织MTL，SS，NOS浓度变化 (n=5,
±s) 参数, 百拇医药
足三里组
下巨虚组
非经非穴组
空白对照组
针前
针30min
针前
针30min
针前
针30min
针前
针30min
总压力(Kpa)
, http://www.100md.com
28.7±2.3
23.3±2.7b
26.1±3.3
26.3±4.8
26.9±0.8
25.3±3.2
28.2±3.2
28.5±2.7
基础压(Kpa)
17.7±1.8
13.2±2.9a
, 百拇医药
15.8±0.6
16.0±6.9
16.2±2.4
15.6±1.7
16.7±1.9
17.3±3.8
频率(min-1)
4.8±0.6
4.1±0.3a
4.7±0.6
4.6±0.9
, 百拇医药 5.1±0.7
4.9±1.3
4.6±0.3
4.8±0.5
体MTL(ng/ L)
147.2±22.8
156.3±18.1
164.7±21.5
159.8±15.3
127.6±28.7
129.1±38.4
186.9±21.2
, 百拇医药
173.5±29.7
体SS(ng/ L)
169.5±25.3
128.2±29.3a
143.4±19.5
102.8±21.3a
197.1±18.5
177.3±26.7
149.7±21.5
156.9±36.3
体NOS(ng/ L)
, 百拇医药
4.5±0.7
5.5±1.7
4.5±1.2
4.0±2.7
4.7±0.3
4.9±0.8
5.2±2.0
4.5±2.4
窦MTL(ng/ L)
209.4±23.3
156.0±29.2a
235.1±31.6
, 百拇医药
210.8±40.3
224.7±19.8
216.2±28.0
241.2±27.8
235.7±31.3
窦SS(ng/ L)
87.9±7.7
71.8±10.7a
81.2±9.9
86.9±13.1
75.7±18.9
, 百拇医药
68.6±12.7
73.1±21.2
81.8±26.9
窦NOS(ng/ L)
2.7±0.3
2.1±0.4a
2.5±0.7
2.8±1.0
3.2±0.4
3.0±0.5
2.5±0.2
2.6±0.4
, http://www.100md.com
aP<0.05，bP<0.01，vs 电针前.3 讨论
EA可调控胃运动功能，其中医理论基础为“经络内属脏腑，外络于肢节”，EA人中穴对胃窦部收缩振幅和频率有明显抑制作用[4]，EA足三里穴对胃动力减弱患者起兴奋作用、胃动力增强患者起抑制作用[5]. 本结果表明，EA足三里穴使幽门括约肌总压力、基础压、高压波频率显著下降，说明电针足三里穴调控胃功能的途径之一是通过影响幽门括约肌功能实现的，下巨虚穴与足三里穴同属足阳明胃经，电针下巨虚穴及与足三里穴、下巨虚穴邻近的非经非穴点幽门括约肌压力却无明显变化，这与祖国传统医学认为足三里穴是胃经的下合穴，下巨虚穴是小肠经的下合穴，“合治内脏”的观点相一致，也进一步说明针刺对胃功能的调控作用具有一定的经络和穴位特异性.
分泌MTL的Mo细胞主要分布于十二指肠粘膜、空肠粘膜中，MTL主要生理作用是强烈刺激上消化道的机械活动和电活动，引发消化间期移行性运动综合波(MMC)，加速胃的固体和液体排空[6]. 胃内SS大部分局限于胃体和幽门部粘膜D细胞内，对胃的多种生理功能具有抑制作用，包括抑制几乎所有脑肠肽的分泌和胃运动[7]. NOS是NO合成过程中唯一合成酶，在幽门括约肌肌间神经丛中含量明显高于周围组织，可使胃肠平滑肌松弛，在调节幽门功能方面起到十分重要作用[8]. 本实验电针刺犬30min发现，足三里组、下巨虚组胃体粘膜组织中SS含量下降，与胃体粘膜情况不同的是，足三里组胃窦粘膜组织电针后MTL，SS含量下降，NOS含量上升，而下巨虚组却无明显变化. 此结果提示：电针可引起胃粘膜组织中MTL，SS，NOS等多种BGP及其合成酶含量的变化，这种影响作用对不同部位胃粘膜组织是不同的，对胃窦粘膜组织中BGP的种类及程度的影响更广泛、更明显. 这可能与BGP分泌细胞在胃肠道的分布有关. 电针不同穴位对BGP的影响也具有特异的穴位选择性. 影响最明显的为足三里穴，其次为下巨虚穴，而非经非穴组和空白对照组则无影响.
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MTL可引起胃平滑肌的强烈收缩，NO则使胃平滑肌松弛. 电针足三里穴后胃窦粘膜组织中MTL含量下降，减弱了平滑肌收缩强度，NOS含量增加，使NO合成增加，加强了平滑肌的松弛作用，二者协调作用的结果使幽门括约肌压力下降，收缩频率减少，这与本实验中同步观察到电针足三里穴后幽门括约肌压力变化的情况一致，电针下巨虚穴胃窦部粘膜组织中BGP含量无明显变化，幽门括约肌压力同样无明显改变，说明电针对胃粘膜组织中部分BGP含量的影响参与了电针对幽门括约肌的调控作用. 我们还观察到电针后足三里组胃体、胃粘膜组织中SS含量明显下降，而SS的主要生理作用之一可抑制胃肠道运动，当SS含量下降可使这种抑制作用减弱，从而使胃运动加强，幽门括约肌压上升，这与本实验同步观察到幽门括约肌压力变化情况不符，分析其原因可能为：①电针引起MTL，NOS变化产生对胃运动的抑制作用足以克服了由SS含量下降带来的间接胃运动增强作用；②电针还可能通过其他途径来影响胃运动功能，其确切机制有待进一步研究.
注：国家自然科学基金资助项目，No.39570885
, http://www.100md.com
通讯作者 孙大勇
Tel.+86.29.3510595 Ext.78121
4 参考文献
1 Myrzabaeva NA. The effect of laser puncture and electopuncture on the indices of intragastric prl-metry impatients with gastroesophageal reflux. Lik Sprava, 1998;(3/ 0):137-138
2 Asauliuk IK. The combined treatment of peptic ulcer with the differentiateduse of nontraditional physio-therapeutic methods. Lik Sprava, 1996;(10-12):110-322
, 百拇医药
3 Yu C. Traditional Chinese veterinary acupuncture and moxibustion. Beijing: China Agricalture Press, 1989:147-163
4 周吕，柳力公，谢益宽. 针刺对狗胃运动的影响及其作用机制的研究. 中华消化杂志，1989；8：30-32
5 邵雷. B超显像观察针刺足三里对胃蠕动的影响. 上海针灸学杂志，1991；4：13-14
6 Itoh Z, Mizumoto A, Iwanaga Y. Involvement of 5-hydroxytryptamine 3 receptors in regulation of interdigestive gastric contractions by motilin in the dog. Gastroenterology, 1991;100:901-980
, 百拇医药
7 Neri M, Cuccuru F, Mariiol . Effect of somatostiontin on gall bladder volume and small intestinal motor activity in humans. Gastroenterology, 1990;98:316-317
8 Furness JB, Li ZS, Young HM. Nitric oxide synthase in the enteric nervous system of the guinea pig: a quantitative description. Cell Tissue Res, 1994;277:139-145
收稿日期 1999-07-11, 百拇医药