复合骨形成蛋白生物膜促进牙周组织再生的实验研究
作者：刘英群 刘文珠 陈 力 王 锐 马艳萍
单位：刘英群 刘文珠 陈 力 王 锐 马艳萍 哈尔滨医科大学第一临床医学院口腔科，150001
关键词：
中国急救医学991127 骨形成蛋白(bone morphogenic protein以下简称BMP)自问世以来在诱导骨形成方面显示出了巨大的优越性，因此受到了广大学者的重视。BMP是一种具有骨诱导活性的多肽生长因子。但由于在体内吸收快，无支架和填充作用，给其应用带来不少困难。所以有关BMP载体问题逐渐被人们所重视。硫酸钙盐生物膜是一种生物降解膜，有良好的生物相容性和骨引导活性，它可创造一个屏障环境，阻止结缔组织生长。因此我们采用硫酸钙盐生物膜作为BMP的载体。为探讨BMP复合硫酸钙盐生物膜促进牙周骨缺损的再生和修复，设计了本实验。
1 资料与方法
1.1 硫酸钙盐生物膜的制备 将硫酸钙20 g，P.V.A10 g，生理盐水150 ml加工成1 cm×0.7 cm左右的“U”型片，经5%次氯酸钠浸泡，流水冲洗，烘干，高压消毒备用。
1.2 骨形成蛋白复合硫酸钙盐生物膜的制备 取一定量的BMP溶于适量4 mol/L盐酸胍溶液中，放入硫酸钙盐生物膜“U”型片，负压抽抵真空后，对蒸馏水透析、冻干、环氧乙烷消毒备用。
1.3 实验动物及手术方法 选6只健康成年杂种狗，随机分为A、B两组，每组3只。在实验动物麻醉、消毒后，作下颌磨牙常规翻瓣手术，暴露两个磨牙颊侧骨壁，用裂钻分别制备“U”型骨壁缺损达釉牙骨质界下约5 mm。
在原骨缘顶及缺损底相应根面处制备切迹作为组织学观察的标志，刮除以上暴露根面的牙周膜和牙骨质，并做根面平整，生理盐水冲洗后，一侧置入BMP复合硫酸钙盐生物膜作为实验组，另一侧不置入膜作为对照组，龈瓣复位缝合，覆塞活剂。A组于术后3周，B组于术后9周分别处死动物，切取下颌骨，分别制备颊舌向1 mm厚牙及牙周组织标本，作成6～8 μm石腊切片，染色后光学显微镜下观查：
①骨缺损高度(ED)：冠方切迹底至新生牙骨质冠方顶距离；
②新生牙骨质高度(NC)：牙根切迹至新生牙骨质冠方顶距离；
③新生牙槽骨高度(NB)：牙根切迹底至新生牙槽骨冠方顶间距离。
2 结果
2.1 肉眼观察各组织动物实验牙位处无明显的牙石和软骺，牙龈附着愈合良好，软组织色、形、质正常，龈沟深度均在1 mm以上，无炎症表现或牙周袋形成，狗的日常活动和状态良好。
2.2 组织学观察测量：A、B两组实验组增多较对照组新生牙糟骨和新生牙骨质样组织的高度大，经统计学配对资料t检验，P值均小于0.01差异有显著性，并且新生牙槽骨的高度大于新生牙骨质样组织，各组均未发现根骨粘连现象。
B组较A组有关更多的新生牙槽骨和新生牙骨质样组织生长，并且B组新生硬组织的钙化程度较A组明显最高。
3周时，组织学观察实验组较对照组新生牙槽骨及牙骨质样组织的高度大，经t检验P<0.01，有显著差异性。可见到增生活跃的成骨细胞和成牙骨样细胞以及较多的毛细血管。各组未发现根骨粘连现象。并且由表中可见新生牙槽骨高度大于新生牙骨质样组织；新生硬组的钙化程度极低。
9周时，组织学观察与3周时相同，实验组较对照组有更多的新生牙槽骨和新生牙骨质样组织生长，P值均<0.01，有显著差异性。可见更多的成骨细胞和成牙骨质样细胞增生以及新生的毛细血管，与3周时相似，新生硬组织的钙化程度较3周时明显增高。各组也未发现根骨粘连现象。
3 讨论
本研究通过动物实验观察本研究通过动物实验观察BMP复合硫酸钙盐生物膜对牙周硬组织再生修复的影响和意义，探讨用硫酸钙盐生物膜作为rhBMP2的载体以及用rhBMP2复合硫酸钙盐生物膜诱导牙周骨缺损处新生牙槽骨考核新生牙骨质样组织再生修复的研究和应用，可望应用临床促进牙周疾病的所至牙周骨缺损的再生修复，使患牙周疾病的牙齿能长期存活下去。
本研究采用硫酸钙盐生物膜作为BMP的载体，制备成BMP复合硫酸钙盐生物膜诱导促进牙周骨缺损的再生修复。硫酸钙盐生物膜有良好的生物相容性、生物降解性，在体内能够被吸收和被新骨取代；同时该膜具有一定的力学强度，可创造一个屏障环境，阻止纤维结缔组织生长。
通过以上实验我们认为：硫酸钙盐生物膜可以作为BMP的载体；BMP复合硫酸钙盐生物膜能诱导牙周组织骨缺损的再生修复。
收稿：1998-10-20
修回：1999-03-19