复方大黄涂膜剂中助透剂选择的研究

http://www.100md.com 《中草药》 1999年第12期

     作者：曾诠 黄诘迪 刘灿红 郑顺利 叶少兵

    单位：中国药科大学(南京 210009)

    关键词：大黄；涂膜剂；紫外分光光度法；比色法；透皮吸收

    中草药991210 摘 要 采用小鼠体外透皮实验，摸索复方大黄涂膜剂成膜材料及助透剂。结果表明：成膜材料、助透剂种类及浓度，影响透皮吸收，其中尤以5%油酸作助透剂、PVA作成膜材料，效果更佳。

    复方大黄散是治疗疼痛外敷有效方剂，由大黄、乳香、芒硝等中药组成。具有清热解毒，破积滞、行瘀血之功效。经多年实验研究，并用均匀设计法优选成膜工艺，现已制成易流动、易涂布、成膜时间短、膜表面光滑易揭的涂膜剂。本文重点研究涂膜剂的处方组成，用小鼠体外透皮实验^[1，2]和测蒽醌含量的方法^[3]研究成膜材料、不同种类、不同浓度的助透剂对涂膜剂中有效成分透过量的影响，从而确定其在处方中的用量。

    1 实验材料

    1.1 仪器：UV-752型分光光度计，单室扩散池，磁力搅拌器，501型超级恒温器，电子分析天平。

    1.2 药品：药材：均购于南京市药业股份有限公司，经鉴定为正品；大黄素对照品：楼凤昌教授赠送；复方大黄涂膜剂：按设计处方自制；试剂：0.9%生理盐水，自制；其它试剂均为分析纯。动物：体重为25 g左右的昆明种小白鼠，购于中国药科大学动物房。

    2 实验方法

    2.1 涂膜剂中蒽醌的含量测定

    2.1.1 测定波长的选择

    1)标准液的制备：精密称取大黄素对照品，加乙醚制成每1 mL含0.1 mg的溶液，摇匀。

    2)样品液的制备：取复方大黄涂膜剂药液，按膜剂测定项下方法制得乙酸乙酯液，回收至小体积并转移至10 mL容量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀备用。

    3)空白液的制备：按涂膜剂处方比例，取除去大黄的其他中药，制成模拟空白药液。精密称定该药液0.1 g，按膜剂测定项下方法制得乙酸乙酯液，以下操作同样品液的制备。

    取上述3种溶液各1 mL，挥去溶剂，加0.5%醋酸镁甲醇液定容至10 mL，显色摇匀，以0.5%醋酸镁甲醇液为空白对照，在500～520 nm波长范围内测定其吸收度，除空白溶液外，其它均在513 nm波长处有最大吸收，在此波长处样品的吸收度为0.418，而空白液的吸收度几乎为零，说明空白液(除大黄外其它中药)对样品的测定基本上无影响，故测定波长选择为513 nm。

    2.1.2 标准曲线的制备：精密吸取浓度为0.0948 mg/mL的标准液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.5，2.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，水浴挥去乙醚，残渣用0.5%醋酸镁甲醇液溶解并稀释至刻度，摇匀，以0.5%醛酸镁甲醇液为空白对照，于513 nm波长测其吸收度。得回归方程为：A=0.004981+4.03057C，r=0.9999。

    2.1.3 膜剂中蒽醌的测定：取复方大黄涂膜剂药液约0.16 g，精密称定，水浴蒸干。加30 mL蒸馏水溶解，过滤。滤液用乙酸乙酯萃取6次(15 mL×3，10 mL×3)，合并乙酸乙酯液，用10 mL蒸馏水洗，水洗液再用10 mL乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，加无水硫酸钠脱水，过滤回收乙酸乙酯至干，加0.5%醋酸镁甲醇液定容至10 mL，摇匀，精密吸取上述溶液1 mL置于10 mL量瓶中，加0.5%醋酸镁甲醇液至刻度，摇匀。以下操作同标准曲线，结果见表1。

    表1 膜剂含量测定 取样量

    吸收值(A)

    蒽醌含量(%)

    平均含量

    RSD%

    0.1629

    0.421

    0.5069

    0.1615

    0.418

    0.5076

    0.5073

    0.07

    0.1616

    0.418

    0.5073

    2.1.4 加样回收实验：精密称定已知蒽醌含量的复方大黄涂膜剂药液约0.16 g，精确加入大黄素对照液4.0 mL，从“水蒸干”起，按膜剂测定项下操作、定容测定，计算含量及回收率，结果平均回收率96.12%，RSD=0.55%(n=3)。

    2.1.5 稳定性实验：精确称取复方大黄涂膜剂药液约0.16 g，按膜剂测定项下操作、显色，测定吸收度，每隔10 min测定一次，结果表明，蒽醌化合物显色在1 h内稳定。

    2.2 涂膜剂透皮实验

    2.2.1 涂膜剂的制备

    1)成膜材料的选择：在药膏、溶剂及其它添加剂用量完全相同情况下，选用PVA，PVA-CMC-Na(2∶1)，PVA-CMC-Na(1∶1)，分别制备涂膜剂，8 h蒽醌透过量分别为0.0274，0.0233，0.0201 mg，以PVA为优。

    2)涂膜剂的制备：称取PVA，加5倍量水使其充分溶胀，于90 ℃水浴中搅拌使成匀浆状，加入药液及其它添加剂，再按表2，3设计方案加入不同种类、浓度的助透剂，脱气备用。

    2.2.2 透皮实验方法^[3]：取体重20～25 g的健康小鼠，雌雄兼用。脱毛后断颈处死，分离腹部皮肤，剔除脂肪及皮下组织，制成约4 cm²大小的鼠皮，用生理盐水冲洗干净。取鼠皮置于扩散池口，角质层面向上，真皮面向下，接受室中加满生理盐水，样品室中加入涂膜剂，夹层通37 ℃的恒温水，在持续搅拌下于4，8，12，16，20，24 h定时取出全部接受介质(供测定蒽醌含量)，并立即向接受室加入新的生理盐水。

    2.2.3 接收样品液的制备与测定：每次定时取出的接受介质，用乙酸乙酯萃取后，按膜剂测定项下操作，显色、测定，计算含量，结果见表2，3。表2 不同浓度的氮酮对透皮吸收的影响 助透剂浓度(%)

    1

    2

    3

    4

    蒽醌量(mg)

    1.9136

    1.9872

    2.3920

    1.6928

    4

    0.0077

    0.0293

    0.0310

    0.0268

    8

    0.0079

    0.0221

    0.0300

    0.0268

    12

    0.0077

    0.0169

    0.0263

    0.0266

    16

    0.0067

    0.0156

    0.0273

    0.0268

    20

    0.0050

    0.0164

    060213

    0.0199

    24

    0.0067

    0.0149

    0.0258

    0.0266

    透过总量(mg)

    0.0417

    0.1152

    0.1617

    0.1535

    透皮率(%)

    2.2

    5.8

    6.8

    9.2

    表3 不同浓度的油酸对透皮吸收的影响 助透剂浓度(%)

    1

    2

    3

    4

    蒽醌量(mg)

    1.9136

    1.8400

    1.7660

    1.766

    4

    0.0132

    0.0119

    0.0206

    0.0315

    8

    0.0092

    0.0129

    0.0213

    0.0310

    12

    0.0079

    0.0097

    0.0181

    0.0263

    16

    0.0084

    0.0119

    0.0184

    0.0337

    20

    0.0070

    0.0114

    0.0189

    0.0226

    24

    0.0067

    0.0141

    0.0191

    0.0328

    透过总量(mg)

    0.0524

    0.0719

    0.1164

    0.1779

    透皮率(%)

    2.8

    4.1

    6.3

    10.1

    3 讨论

    3.1 对于膜剂中蒽醌的测定，曾采用碱化有机溶剂法去杂质，酸化有机溶剂萃取蒽醌的方法来测定含量。实验中发现碱液酸化时产生沉淀，难以处理而采用本实验方法。用此法，复方中其它中药成分对测定几乎无干扰。

    3.2 制备离体小鼠皮时，毛要刮净，脂肪和皮下组织也要剔除干净，不能损伤鼠皮，尽量使用同一部位的鼠皮，以减少误差。

    3.3 在向扩散池中装接受介质时，要排除气泡，同时介质必须与皮肤充分接触。

    3.4 实验结果表明：成膜材料、助透剂的种类及其加入量，均影响透过率。氮酮和油酸均随着浓度的增加而透皮率增大。若由该实验选择处方组成，以5%油酸作助透剂，PVA作成膜材料效果可能较好些。透皮实验影响因素极其复杂，该项研究仍需进一步探讨。

    参考文献

    1 梁秉文.经皮给药制剂.北京：中国医药科技出版社，1992：250

    2 常天辉，等.中国医科大学学报，1992，21(1)：18

    3 孙小萍，等.中草药，1983，14(6)：15

    收稿日期：1999-05-13

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