低分子量肝素对阿霉素肾病大鼠的抗凝作用
作者：林志翔 梅长林 林志跃 高国华 许静 张晓英
单位：林志翔(解放军422医院(524005))；梅长林 林志跃 高国华(第二军医大学长征医院(200003))；许 静 张晓英(第二军医大学长海医院(200433))
关键词：肾病综合征；低分子量肝素；大鼠
广东医学991206 【摘要】 目的 观察低分子量肝素(LMWH)对阿霉素(soxorubicim)肾病大鼠的抗凝作用。方法 采用阿霉素复制肾病综合征模型大鼠，并随机分为4组，以0.9% NaCl注射液为对照组，以不同剂量的低分子量肝素为观察组Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ。结果 观察各组的凝血因子Ⅹ、凝血因子Ⅱ的活性明显低于对照组(P<0.05)，观察组Ⅲ与观察组Ⅰ比较差异也有显著性(P<0.05)，观察各组的肝素辅因子Ⅰ明显低于对照组(P<0.05)；观察各组的蛋白S明显高于对照组(P<0.05)。结论 低分子量肝素能改善肾病综合征的高凝状态，且抗凝作用与剂量成正相关。
, 百拇医药
The anticoagulative effect of low-molecular-weight heparin on rats with adriamycin nephropathy
Lin Zhixiang, Mei Changlin, Lin Zhiyue, et al.
Department of Nephrology 422 Hospital of PLA, Zhanjiang 524005
【Abstract】 Objective To investigate the articoagulative effect of LMWH on rats with ADR nephropathy. Methods Rats were injected with ADR intraverously to establish nephrotic syndrome modle and were divided into 4 groups. Group Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ were given LMWH of various doses for one month. The remaining group was as controls. Results Plasma factors X, factors Ⅱ and AT-Ⅲ in group Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ were significantly lower than those in controls (P<0.05). Plasma protein S in group Ⅰ， Ⅱ and Ⅲ was significantly higher than that in controls (P<0.05). Conclusion LMWH can attenuate hypercoagulability of nephrotic syndrome in a dose-dependent manner.
, 百拇医药
【Key words】 Nephrotic syndrome Low molecular-weight heparin Rat
高凝状态，血栓形成是肾病综合征(NS)重要的病理生理改变之一，严重影响肾病综合征的疗效及预后，是NS病人常见的致残、致死的原因。为探讨低分子量肝素治疗肾病综合征的抗凝效果，我们选用类似人类微小病变的阿霉素肾病大鼠模型，以不同剂量的低分子量肝素治疗，观察低分子量肝素抗凝作用的量效关系，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 模型制备 取健康SD雄性大鼠80只，体重220～250 g，由上海计划生育研究所动物中心提供，尾静脉一次注入阿霉素6.5 mg/kg，以标准饲料饲养，自由摄食及饮水。存活的大鼠于注射药后第7，14天放入代谢笼中留24 h尿测蛋白，若蛋白定量>100 mg/24 h，为模型复制成功，随机分为4组，每组17只鼠。
, 百拇医药
1.2 给药方法 对照组予0.9% NaCl注射液1 mL，观察组Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ分别予低分子量肝素(法玛西亚普强公司提供)100，200， 400 IU/kg，均为腹膜内注射，1次/d，疗程为1个月。
1.3 观察指标 各组所有存活大鼠于实验结束时抽血查凝血因子X(FXa)、凝血因子Ⅱ(FⅡa)，蛋白S(PS)、蛋白C(CP，用凝固法)，肝素辅因子Ⅰ(AT-Ⅲ)(用产色底物法)。
1.4 统计学方法 采用Number Cruncher Statistical system统计软件处理，计量资料以
±s表示，检验方法为方差分析及作两两比较。
2 结果
观察各组的FXa，FⅡa及AT-Ⅲ活性明显低于对照组(P<0.05)，观察组Ⅲ的FXa，Ⅱ活性明显低于观察组Ⅰ(<.05)，观察组Ⅱ，Ⅲ间的，Ⅱ活性差异无显著性(>.05)；观察组间的T-Ⅲ活性差异无显著性(<.05)；观察组Ⅰ，Ⅲ的活性明显高于对照组(<.05)；各观察组间的活性无明显差异(>.05)；各组间的活性差异无显著性(>.05)。见表。
, 百拇医药
表1 4组大鼠凝血与抗凝血指标测定结果 (±s，%) 组别
例数
FXa
FⅡa
AT-Ⅲ
PS
PC
对照
6
112±7
110±5
, http://www.100md.com 55.9±1.9
14.9±0.6
30.2±0.8
观察Ⅰ
10
74±4*
84±2*
34±7*
21.8±2.6*
26±5
观察Ⅱ
11
, 百拇医药
66.83±0.17*
75±8*
34.2±6.7*
19±5
24.40±0.25
观察Ⅲ
11
58.9±2.0△▲
64±5*▲
29±3*
22.8±0.7*
, http://www.100md.com
30.8±0.4
观察Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组vs对照组，*P<0.05，△P<0.01
观察Ⅱ，Ⅲ组vs观察Ⅰ组，▲P<0.053 讨论
低分子量肝素是通过酶法或层析法从普通肝素中获得的，与普通肝素相比，其主要以抗FXa活性为主，抗FXa活性/抗FⅡa活性比为2～5/1，具有半衰期长，生物利用度高，量效关系明确，血小板减少、自发性出血少见，无须实验室监测等优点[1]，国外已普遍用于需肝素抗凝的疾病[2]。而且低分子量肝素具有抗炎、抗增殖作用，可促进系膜细胞释放组织因子途径抑制物防治肾小球内凝血[3]。Rostoken等报道，低分子量肝素治疗65例成人肾病综合征病人，有效防治了血栓栓塞并发症[4]。Achence等报道，低分子量肝素治疗6例成人肾病综合征病人，发现60 IU/kg未能明显改善NS的高凝状态[5]。但作者未见报道低分子量肝素在治疗NS中的量效关系。我们选NS模型的大鼠，予不同剂量的低分子量肝素治疗，结果发现低分子量肝素在NS抗凝治疗中主要通过抗FXa，FⅡa活性为主，且抗凝作用与剂量成正相关，即低分子量肝素在治疗肾病综合征中，抗凝效果随剂量增大而增强。
, http://www.100md.com
本动物实验结果提示，低分子量肝素应用于肾病综合征模型大鼠，可明显缓解肾病综合征的高凝状态，且抗凝效果随剂量增大而增强。虽然动物实验与临床应用存在差异，但对临床用药仍有一定的指导作用。
参考文献
1 王振义.血栓与止血——基础理论与临床.第2版.上海：上海科学技术出版社，1996.396～404
2 尤 蓓.低分子量肝素与血管疾病.国外医学心血管疾病分册，1997，24：19
3 Yamabe H， Osawa H, Lnuma H, et al. Tissue factor pathway production by human mesangial cells in culture. Thormb Haemost,1996,76:215
4 Rostoker G, Durand I, Petit P, et al. Prevention of thrombotic complications of the nephrotic syndrome by the low-molecular-weight heparin. Enoxaparin,1995,69:20
5 Alhenc M, Rossert J. Jacquot c, et al. Pharmacokinetic study of the low-molecular-weight heparin fraxiparin in patients with nephrotic syndrome. Nephron, 1995,71:149, 百拇医药
单位：林志翔(解放军422医院(524005))；梅长林 林志跃 高国华(第二军医大学长征医院(200003))；许 静 张晓英(第二军医大学长海医院(200433))
关键词：肾病综合征；低分子量肝素；大鼠
广东医学991206 【摘要】 目的 观察低分子量肝素(LMWH)对阿霉素(soxorubicim)肾病大鼠的抗凝作用。方法 采用阿霉素复制肾病综合征模型大鼠，并随机分为4组，以0.9% NaCl注射液为对照组，以不同剂量的低分子量肝素为观察组Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ。结果 观察各组的凝血因子Ⅹ、凝血因子Ⅱ的活性明显低于对照组(P<0.05)，观察组Ⅲ与观察组Ⅰ比较差异也有显著性(P<0.05)，观察各组的肝素辅因子Ⅰ明显低于对照组(P<0.05)；观察各组的蛋白S明显高于对照组(P<0.05)。结论 低分子量肝素能改善肾病综合征的高凝状态，且抗凝作用与剂量成正相关。
, 百拇医药
The anticoagulative effect of low-molecular-weight heparin on rats with adriamycin nephropathy
Lin Zhixiang, Mei Changlin, Lin Zhiyue, et al.
Department of Nephrology 422 Hospital of PLA, Zhanjiang 524005
【Abstract】 Objective To investigate the articoagulative effect of LMWH on rats with ADR nephropathy. Methods Rats were injected with ADR intraverously to establish nephrotic syndrome modle and were divided into 4 groups. Group Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ were given LMWH of various doses for one month. The remaining group was as controls. Results Plasma factors X, factors Ⅱ and AT-Ⅲ in group Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ were significantly lower than those in controls (P<0.05). Plasma protein S in group Ⅰ， Ⅱ and Ⅲ was significantly higher than that in controls (P<0.05). Conclusion LMWH can attenuate hypercoagulability of nephrotic syndrome in a dose-dependent manner.
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【Key words】 Nephrotic syndrome Low molecular-weight heparin Rat
高凝状态，血栓形成是肾病综合征(NS)重要的病理生理改变之一，严重影响肾病综合征的疗效及预后，是NS病人常见的致残、致死的原因。为探讨低分子量肝素治疗肾病综合征的抗凝效果，我们选用类似人类微小病变的阿霉素肾病大鼠模型，以不同剂量的低分子量肝素治疗，观察低分子量肝素抗凝作用的量效关系，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 模型制备 取健康SD雄性大鼠80只，体重220～250 g，由上海计划生育研究所动物中心提供，尾静脉一次注入阿霉素6.5 mg/kg，以标准饲料饲养，自由摄食及饮水。存活的大鼠于注射药后第7，14天放入代谢笼中留24 h尿测蛋白，若蛋白定量>100 mg/24 h，为模型复制成功，随机分为4组，每组17只鼠。
, 百拇医药
1.2 给药方法 对照组予0.9% NaCl注射液1 mL，观察组Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ分别予低分子量肝素(法玛西亚普强公司提供)100，200， 400 IU/kg，均为腹膜内注射，1次/d，疗程为1个月。
1.3 观察指标 各组所有存活大鼠于实验结束时抽血查凝血因子X(FXa)、凝血因子Ⅱ(FⅡa)，蛋白S(PS)、蛋白C(CP，用凝固法)，肝素辅因子Ⅰ(AT-Ⅲ)(用产色底物法)。
1.4 统计学方法 采用Number Cruncher Statistical system统计软件处理，计量资料以
±s表示，检验方法为方差分析及作两两比较。2 结果
观察各组的FXa，FⅡa及AT-Ⅲ活性明显低于对照组(P<0.05)，观察组Ⅲ的FXa，Ⅱ活性明显低于观察组Ⅰ(<.05)，观察组Ⅱ，Ⅲ间的，Ⅱ活性差异无显著性(>.05)；观察组间的T-Ⅲ活性差异无显著性(<.05)；观察组Ⅰ，Ⅲ的活性明显高于对照组(<.05)；各观察组间的活性无明显差异(>.05)；各组间的活性差异无显著性(>.05)。见表。
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表1 4组大鼠凝血与抗凝血指标测定结果 (
±s，%) 组别例数
FXa
FⅡa
AT-Ⅲ
PS
PC
对照
6
112±7
110±5
, http://www.100md.com 55.9±1.9
14.9±0.6
30.2±0.8
观察Ⅰ
10
74±4*
84±2*
34±7*
21.8±2.6*
26±5
观察Ⅱ
11
, 百拇医药
66.83±0.17*
75±8*
34.2±6.7*
19±5
24.40±0.25
观察Ⅲ
11
58.9±2.0△▲
64±5*▲
29±3*
22.8±0.7*
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30.8±0.4
观察Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组vs对照组，*P<0.05，△P<0.01
观察Ⅱ，Ⅲ组vs观察Ⅰ组，▲P<0.053 讨论
低分子量肝素是通过酶法或层析法从普通肝素中获得的，与普通肝素相比，其主要以抗FXa活性为主，抗FXa活性/抗FⅡa活性比为2～5/1，具有半衰期长，生物利用度高，量效关系明确，血小板减少、自发性出血少见，无须实验室监测等优点[1]，国外已普遍用于需肝素抗凝的疾病[2]。而且低分子量肝素具有抗炎、抗增殖作用，可促进系膜细胞释放组织因子途径抑制物防治肾小球内凝血[3]。Rostoken等报道，低分子量肝素治疗65例成人肾病综合征病人，有效防治了血栓栓塞并发症[4]。Achence等报道，低分子量肝素治疗6例成人肾病综合征病人，发现60 IU/kg未能明显改善NS的高凝状态[5]。但作者未见报道低分子量肝素在治疗NS中的量效关系。我们选NS模型的大鼠，予不同剂量的低分子量肝素治疗，结果发现低分子量肝素在NS抗凝治疗中主要通过抗FXa，FⅡa活性为主，且抗凝作用与剂量成正相关，即低分子量肝素在治疗肾病综合征中，抗凝效果随剂量增大而增强。
, http://www.100md.com
本动物实验结果提示，低分子量肝素应用于肾病综合征模型大鼠，可明显缓解肾病综合征的高凝状态，且抗凝效果随剂量增大而增强。虽然动物实验与临床应用存在差异，但对临床用药仍有一定的指导作用。
参考文献
1 王振义.血栓与止血——基础理论与临床.第2版.上海：上海科学技术出版社，1996.396～404
2 尤 蓓.低分子量肝素与血管疾病.国外医学心血管疾病分册，1997，24：19
3 Yamabe H， Osawa H, Lnuma H, et al. Tissue factor pathway production by human mesangial cells in culture. Thormb Haemost,1996,76:215
4 Rostoker G, Durand I, Petit P, et al. Prevention of thrombotic complications of the nephrotic syndrome by the low-molecular-weight heparin. Enoxaparin,1995,69:20
5 Alhenc M, Rossert J. Jacquot c, et al. Pharmacokinetic study of the low-molecular-weight heparin fraxiparin in patients with nephrotic syndrome. Nephron, 1995,71:149, 百拇医药