当前位置: 首页 > 期刊 > 《现代康复》 > 1999年第12期
编号:10247553
FMS基因突变在化疗后妇女及后代检测的意义
http://www.100md.com 《现代康复》 1999年第12期

     作者:王骅 张彦娜 黄必军 李艳芳 梁启万

    单位:中山医科大学肿瘤医院,广东广州510060

    关键词:化疗;FMS癌基因;突变

    现代康复/991204

    [摘要]目的:探索一种可用于了解妇科肿瘤患者及其后代受化疗影响的检测方法。方法:以部分未经化疗的妇癌患者为对照,对部分经化疗后痊愈的患者和后代用半巢式多聚酶链反应-单链构象多态性分析法(Semi-nesledPCR-SSCP法)检测FMS基因的突变。结果:实验组4个标本中,1个取自乳腺癌患者的血清本的FMS969密码子出现突变,其余3个实验组的标本和对照组全部标本均为野生型FMS。结论:由于在1例经过化疗的乳腺癌患者血清中检出FMS969密码子突变,而其子宫肌瘤组织则为野生型,无突变。对照组无1例突变。说明该患者FMS969密码子的突变并非先天遗传的,而是后天的改变,因为在其体细胞上仍呈正常的基因型。根据有关研究结果推测,这种畸变很可能是化疗药物引起的。FMS基因突变的检测对化疗后保留生育力的患者及所生的子女的随访是有意义的,是一种可用于了解妇科肿瘤患者及其后代受化疗影响的检测方法。

    [中图分类号]R394.2

    [文献标识码]A

    [文章编号]1007-5496(1999)12-1414-02

    Axamine gene FMS mutation meaning after

    chemotherapy woman and treir descerdant

    WANG Hua,HUANG Bi-jun,LI Yan-fang,et al.

    Zhongshan Medical College Tumour Hospital,Guangdong Guangzhou 510060,China

    [Abstract]Objective: To establish a method for monitoring of the gynecological malignancy patients with reservation of fertility and their children birthed after chemotherapy.Method: Using a semi-nested PCR SSCP technique to detect the FMS mutation in the patients and the controled group.Results: Among 4 specimens in study group,FMS mutation at codon 969 was found in a serum specimen from a patient with breast carcinoma ,treated with chemotherapy before her hysterectomy because of the diagnosis of leomyoma of the uterus .Interestingly ,wild type FMS gene was found in the leomyoma tissue of the same patients.Wild type FMS gene was also found in other 2 specimens of study group as well as in all specimens of control group.Conclusion: The mutation of FMS gene was found in serum specimen only,and the wild type of gene was found in the specimen obtained from the tissue of leomyoma from the same patient.This result implied that the mutation is acquired other than congenital,because the wild type gene was found in the body cells.According to the results of other researchers studies,the mutation should be caused by chemotherapy.Therefore,this study suggested that the detection of mutation of FMS gene may be used as a follow-up method for the patients with gynecologic malignancies cured by chemotherapy along and with reservation of fertility and their children born after the chemotherapy.However,the roll of the detection should be revaluated furthermore.

    [Key words]female;fertility;descendants;anticancer drugs;chemotherapy;gene FMS;mutation

    随着抗癌化疗研究的发展,大量抗癌药投入临床使用,而且由于治疗方法的进步,不少妇女单纯用化疗方法得到完全治愈并保存了生育功能。但是,抗癌药可能在人体上引起各种变化和影响,其中对生殖机能以及对所生的后代的影响特别引起人们的注意。

    我科自1964~1993年底对恶性滋养细胞瘤进行以化疗为主的综合治疗[1],其中有近20%的患者成功保留了生育功能,并有91.6%的患者怀孕成功,生育了121个活婴儿。已有研究发现:化疗可能引发继发性白血病,并发现继发性白血病患者常发生FMS基因的突变。为了探索一种可用于了解妇科肿瘤患者及其后代受化疗影响的检测方法,我们用半巢式PCR—SSCP法检测FMS基因的突变,以部分未经化疗的妇癌患者为对照,对部分经化疗后痊愈的患者和后代进行检查。现将研究结果作初步报告。

    1 资料与方法

    1.1 病例 1996年10月~1997年8月对38例患者的39个标本(除1个组织标本外,其余均为外周血的血清标本。其中1例乳腺癌患者取了外周血和子宫肌瘤组织分别进行检测。),用半巢式多聚酶链反应-单FMS969密码子的突变情况进行检测。将38例分为2组:(1)实验组:曾接受化疗者或其后代3例(共取4个标本),其中恶性滋养叶细胞肿瘤化疗后1例,该患者所生男孩1例,乳腺癌手术并发化疗后1例(取外周血和子宫肌瘤组织2个标本。该例采用CMF方案化疗1疗程,共用5FU4.5g,CTX4.8g,MTX240mg。);(2)对照组:未化疗的妇癌患者35例,其中宫颈癌8例,子宫内膜癌4例,子宫肉瘤3例,卵巢恶性肿瘤16例,恶性滋养细胞肿瘤3例,阴道黑色素瘤1例。

    1.2 Semi-nesledPCR-SSCP检测法本研究采用Taylor[6]等应用的方法并作了改良。具体按下列步骤进行:

    1.2.1 标本处理采用外周血标本者用红细胞冻融法分离单核细胞(PBMC);采用组织标本者取组织块加裂解液,用匀浆机打碎。然后进行下列同样步骤处理。

    1.2.2 DNA提取 蛋白酶K消化后,用氯仿/酚抽提法提取DNA。-20℃保存待测。

    1.2.3 半巢式PCR-SSCP 第1次PCR,设计一对引物,将含有FMS-codon969片段(1.85bp)扩增出来。半巢式—PCR:3′端引物不变,5′端取185bp的片段内一引物,扩增出969bp片段,电泳鉴定。SSCP:将半巢式PCR产物变性,进行非变性胶的PAGE电泳,银染,观察结果见图1。

    图1 FMS癌基因突变检测(SEMI-NESTEDPCRSSCP法)的结果

    21、22FMS癌基因为野生型,标本取自对照组(妇癌病人未经化疗)。23FMS癌基因发生突变,标本取自实验组因乳腺癌术后并接受过化疗的病人的血清。24FMS癌基因为野生型,标本取自23的同一病人的子宫肌瘤组织。25FMS癌基因为野生型,标本取自实验组病人的血清。

    2 结果

    实验组4个标本中,1个取自乳腺癌患者的血清标本的FMS969密码子出现突变。其余3个实验组的标本(包括取自乳腺癌患者的子宫肌瘤标本)和对照组全部标本均为野生型FMS。

    3 讨论

    抗癌药对妇女生育力和后代的影响,由于它的日渐广泛的应用而受到越来越大的重视。人们关注的问题主要有两个:(1)患者生育力所受的抑制程度;(2)对患者本人及所生后代的影响。

    从目前多宗临床报道来看,第1个问题的答案似乎比较明确和肯定。即目前比较经常使用的抗癌药,对妇女的生育力的影响并不大,只要生殖器官保留完整或比较完整,治疗后再生育的可能性很大。我科自1964年6月治疗恶性滋养细胞肿瘤681例,保留生育功能的成功率为19.5%,妊娠率为91.8%。宋鸿钊等[2]报告410例恶性滋养细胞肿瘤成功保留子宫,其怀孕率为87.9%。国外还有多个研究报告了相似的结果[3~4]。除了恶性滋养细胞肿瘤之外,其他的恶性肿瘤也有治疗后成功保留生育力的报告[5~7]

    至于第2个问题,即抗癌药对所生后代的影响,则因情况比较复杂,答案尚未完全明确。目前大多数的研究报告都未发现有大的影响。我科报告的恶性滋养细胞肿瘤化疗后保留了生育力的妇女所生的婴儿共122名,除2名于婴儿期死亡外,其余在体格、精神和智力发育方面都正常。宋鸿钊等[2]报告的后代包括子代和孙代的体格发育和精神发育均正常,也未见智力低下的。日本SUZUKI[3]等报告化疗后生产的101个儿童的生长情况,其身高体重与日本全国婴幼儿发育情况相比无明显差异。应用婴幼儿童精神发育测定法检查他们的精神发育情况,也未发现明显精神发育迟钝。

    上述结果,由于病例数量较少,观察时间也较短,所以还需进一步积累更多的病例,观察更长的时间,才能得出较准确的结论。而且,上述研究仅限于临床观察,还没有从细胞生物学及生物遗传学的角度进行更深入的研究。

    本研究正是从这一点出发,应用FMS基因突变的检测技术对保留生育功能的妇女和她们所生的子女进行研究。一般认为:化疗药物进入人体后,除了作用于肿瘤细胞外,还可能作用于其他细胞以及控制这些细胞生长的基因。其中负责携带遗传密码的DNA受到的影响尤其引人注意。化疗引起继发性白血病便是一个突出的例子。Kaldol等[8]报告了一组国际型合作的肿瘤研究资料,在存活的99113例卵巢癌中,发现114例化疗后继发性白血病。Taylor等[9]用分子遗传学方法检查50例儿童期患淋巴性白血病而目前血液学检查已完全缓解的患者。他们用PCR及寡核苷酸杂交(ONH)法检测RAS基因密码子12、13、61和FMS基因密码子969。结果发现3例(6%)N12RAS畸变,其中1例同时伴有FMS969的畸变。作者认为临床追踪这些病人可

    能有助于发现这些畸变在继发性白血病的发生过程中所起的作用。基于这些发现,本研究对化疗后的患者及其后代用经过改良的半透膜PCR-SSCP法(Semi-nesledPCR-SSCP)检测FMS969的突变。结果在1例经过化疗的乳腺癌患者血清中检出这种突变,而其子宫肌瘤组织则为野生型,无突变。对照组无1例突变。这种现象说明:该患者FMS969密码子的突变并非先天遗传的,而是后天的改变,因为在其体细胞上仍呈正常的基因型,根据Taylor的研究,这种畸变很可能是化疗药物引起的。

    总之,本研究结果表明:FMS969的检测对化疗后保留生育力的患者及所生的子女的随访是有意义的,是一种可用于了解妇科肿瘤患者及其后代受化疗影响的检测方法。不过,其意义还需进一步观察。

    作者简介:王骅(1943-),广东人,男,副主任医师,副主任。研究方向:妇科肿瘤诊治,尤其是妇癌保留生育力及化疗可致继发性疾病的鉴测。1986~1987年曾在美国威斯康星州医学院妇科进修一年多。

    参考文献

    [1]王骅,李孟达.恶性妊娠性滋养细胞肿瘤患者保留生育力的研究[J].现代妇产科进展,1997,6(2):127

    [2]宋鸿钊,杨秀玉.恶性滋养细胞肿瘤化疗后所生子代和孙代的长期随访结果[J].上海:全国第六届妇产科会议

    [3] Suzuki L.Pregnancy after chemotherapy for trophoblastic dis eases and psychosomatic development in the progeny[J].AciaOceania J Obstet Gynecol,1993,19(4):407

    [4] Cobanoglu O.Reproductive outcome after chemotherapy for gestational trophoblastic diseases(meeting abstract)8 th Inter national Meeting of European Society of Gynecological Oncolo-gy,Spain:Barcelona,1993:9~ 12

    [5] Forney JP, et al.Pregnancy following removal and chemotherapy forendodermal sinus tumor[J].Obste Gynecol,1978,52:360

    [6] Pectasides D,et al.Fertility after chemotherapy for ovarian germcell tumors[J].Br J Obstet Gynecol,1987,94:477

    [7] Wu P E,et al.Treatment of malignant germ cell tumors withp-reservation of fertility[J].A report of 28 cases,1991,40:2

    [8] Kaldor J.M,et al.Leukemia following chemotherapy for ovarian cancers[J].The New Englang J of Medicine ,1990,322(1): 1~ 6

    [9] Taylor ,et al.RAS and FMS mutations following cytotoxic therapy for childhood lymphoblastic leukaemia[J].Leukaemia,1995,9 (3):466~470

    [收稿日期]1998-11-26

    [修回日期]1999-10-09
    濠电姷鏁告慨鐑藉极閹间礁纾块柟瀵稿Т缁躲倝鏌﹀Ο渚&婵炲樊浜濋崑鎰版偣閸ヮ亜鐨烘い锔诲幖閳规垿鎮╃紒妯婚敪濠电偛鐪伴崐婵嬨€佸鑸电劶鐎广儱妫涢崢鍗炩攽閻愭潙鐏ョ€规洦鍓熷鎼佸Χ閸℃劒绨婚梺鍐叉惈閸燁偊宕㈤幘顔界厸閻忕偛澧介埥澶愭煃閽樺妯€鐎规洩绻濋幃娆忣啅椤斾粙鐛庨梻鍌欑閹碱偊藝椤愶箑鐤炬繝濠傚悩濞戙垹绀冩い鏃囧閹芥洖鈹戦悙鏉戠仸閼裤倝鏌$€n亪鍙勯柣鎿冨亰瀹曞爼濡搁敃鈧惃鎴︽⒑缁嬫鍎愰柟姝屽吹缁骞掗弬鍝勪壕闁挎繂绨肩花浠嬫煕閺冩挾鐣辨い顏勫暣婵″爼宕卞Δ鈧ḿ鎴︽⒑缁嬫鍎愰柟鐟版喘瀵鈽夐姀鈥充汗閻庤娲栧ú銏ゅ焵椤掍礁绗氬ǎ鍥э躬瀹曪絾寰勬繝鍌ゆ綋闂備礁鐤囬~澶愬垂閸喚鏆﹂柛顐f礀閻撴﹢鏌i幇闈涘濞存粍鐟╁铏规嫚閺屻儺鈧绱掗悩鑼х€规洘娲熷畷锟犳倷瀹ュ棛鈽夐柍钘夘樀婵偓闁绘﹢娼ф慨锔戒繆閻愵亜鈧牜鏁幒妞濆洭顢涢悙鏉戔偓鍫曟煥閺冨倻鎽傛繛鍫滅矙閺岋綁骞囬浣叉灆闂佺ǹ瀛╁褰掋€冮妷鈺傚€烽柛娆忣槸閺嬬姴顪冮妶鍐ㄧ仾婵☆偄鍟悾鐑藉Ω閳哄﹥鏅i梺缁樺姍濞佳囧箹缁嬪簱鏀介柣妯虹仛閺嗏晠鏌涚€n剙鈻堟鐐存崌椤㈡棃宕卞Δ鍐摌闂備浇顕栭崹濂告倶閹邦優娲敂閸曨収鍚呴梻浣虹帛閿氶柛姘e亾缂備焦顨呴ˇ闈涱潖濞差亜绠伴幖杈剧悼閻g敻姊洪悷鏉挎Щ妞ゆ垵顦悾鐑芥偨缁嬪潡鍞跺┑鐘焺娴滄繂螞閸愵喖鏋侀柛灞剧矌妞规娊鎮楅敐搴濈盎濠碘€炽偢濮婄粯鎷呴崨濠冨枑闂佺ǹ顑囬崑銈夌嵁閹版澘绠柦妯侯槼閹芥洟姊洪崫鍕偍闁搞劌缍婇悰顕€濮€閵堝棛鍘搁梺鎼炲劗閺呮稑鐡┑鐘殿暯閳ь剝灏欓惌娆撴煛瀹€瀣М濠殿喒鍋撻梺瀹犳〃閼宠埖绂掗埡鍐=闁稿本姘ㄥ瓭闂佹寧娲︽禍顏堟偘椤旂晫绡€闁搞儯鍔嶅▍銏ゆ⒑缂佹〒鍦焊濞嗘挻鍋柍褜鍓氭穱濠囨倷椤忓嫧鍋撻弽顓炵濡わ絽鍟壕濠氭煟閺傛寧鎲告い鈺冨厴閺岀喖骞嶉纰辨毉闂佹娊鏀遍崹鍧楀蓟濞戙垺鏅滈悹鍥ㄥ絻缁楀矂姊洪懡銈呮瀾闁革絾娼欑叅妞ゅ繐瀚€瑜旈弻娑㈠Ψ椤旀儳甯ュ┑鐐跺亹閸犳牕顫忓ú顏勭闁告瑥顦伴崕鎾绘⒑閻熸澘鏆辨慨姗堝閹广垹顫濋懜纰樻嫽婵炶揪绲介幊娆掋亹閹烘垵鐝樺銈嗗笒閸婂鎯屽▎鎾寸厵闁绘垶锕╁▓鏇㈡煕婵犲倻浠涢柕鍥у瀵剟宕归瑙勫瘱缂備胶鍋撻崕鎶藉Χ閹间礁钃熼柨鐔哄Т缁€鍐煏婵炲灝鍔楅柛瀣尵缁瑩骞愭惔銏㈡婵犵數濮烽弫鍛婃叏椤撱垹绠柛鎰靛枛缁€瀣煕椤垵浜為柡澶婄秺閺岋絾鎯旈姀鈺佹櫛闂佸摜濮甸悧鐘诲箖閵夆晜鍋傞幖杈剧稻濞堟儳鈹戦濮愪粶闁稿鎸搁埞鎴﹀焺閸愵亝鎲欏銈忛檮婵炲﹪寮诲☉銏犵闁哄鍨规禒鍝ョ磽娴h櫣甯涚紒瀣崌閸┾偓妞ゆ帊鑳堕埊鏇炵暆閿濆懏鍋ラ柟顖氭湰缁绘繈宕戦懞銉︻棃闁诡喒鏅犲畷锝嗗緞鐎n亝鐎鹃梻鍌欐祰濡椼劎娆㈤敓鐘查棷闁挎繂顦埀顑跨窔瀵挳濮€閳╁啯鐝曢梻浣藉Г閿氭い锔跨矙閸┾偓妞ゆ帊鑳堕埥澶愭煃鐟欏嫬鐏撮柡浣哥Ч瀹曠喖顢曢敍鍕礋婵犵數濮幏鍐川椤旂晫褰х紓鍌欑贰閸犳鎮烽敂鐐床婵犻潧顑呴悙濠囨煏婵炑冨暙缁犵増绻濋悽闈浶為柛銊у帶閳绘柨鈽夐姀鈩冩珖闂侀潧鐗嗛ˇ顖毿ч弻銉︾厸闁搞儮鏅涢弸鎴︽煕濞嗗繒绠婚柡宀嬬秮閹垽鎮℃惔婵嗘瀳婵犵妲呴崹顏堝磻閹剧粯鈷掑ù锝堝Г閵嗗啰绱掗埀顒佹媴閾忓湱鐓嬮梺鍦檸閸犳宕戦埡鍌滅瘈闂傚牊渚楅崕蹇曠磼閳ь剟宕橀埞澶哥盎濡炪倖鎸鹃崰搴ㄦ倶閿濆鐓欓悗鐢登归崢瀛樻叏婵犲嫮甯涢柟宄版噽缁數鈧綆浜濋悾浼存⒒娴e憡鎲稿┑顔炬暬楠炴垿宕惰閺嗭附绻濋棃娑冲姛闁汇倐鍋撴繝鐢靛仦閸ㄥ吋銇旈幖浣哥柧闁挎繂娲ㄧ壕浠嬫煕鐏炲墽鎳呴柛鏂跨Т閻f繈鏁愰崨顔间淮闂佺硶鏂傞崹钘夘嚕椤曗偓瀹曞ジ鎮㈤崫鍕闂傚倷鑳堕幊鎾活敋椤撱垹纾块柟瀵稿仧閻熻绻涢幋娆忕仾闁绘挻娲熼弻锟犲磼濮樺彉铏庨梺鍝勬4缂嶄線寮婚垾宕囨殕閻庯綆鍓涢惁鍫ユ倵鐟欏嫭绀冮悽顖涘浮閿濈偛鈹戠€e灚鏅i梺缁橈耿濞佳囩嵁閳ь剛绱撻崒姘偓鎼佸磹閻戣姤鍊块柨鏇炲€堕埀顒€鍟村畷銊ヮ潰閵堝懏鍠橀柡灞芥椤撳ジ宕ㄩ姘曞┑锛勫亼閸婃牜鏁幒妤€绐楁慨姗嗗厳缂傛岸鏌熼柇锕€鏋ょ痪鎯у悑閵囧嫰寮崶褌姹楃紓浣哄Т椤兘寮婚妸銉㈡斀闁割偅绻€濡叉劙姊烘潪鎵槮闁哥喐娼欓悾鐑藉箳閹搭厽鍍甸梺鍛婎殘閸嬬偤骞夐姀銈嗏拻濞达綀妫勯崥鐟扳攽閻愨晛浜剧紓鍌氬€搁崐褰掓嚌妤e啫鐓濈€广儱顦伴弲鏌ユ煕閵夈垺娅囬柣鎾愁儔濮婃椽宕滈懠顒€甯ラ梺鍝ュУ閹瑰洭宕洪埀顒併亜閹哄秶顦︾紒妤佸笚閵囧嫰顢曢敐鍥╃杽濡炪們鍨洪敃銏ゅ箖閳哄拋鏁冮柨婵嗗缂嶅矂姊婚崒姘偓椋庢濮橆兗缂氱憸宥囧弲闂侀潧鐗嗛幃鍨洪鍕庘晠鏌嶆潪鎷屽厡闁告棑绠戦—鍐Χ閸℃鐟ㄩ梺绋款儏濡繂顕i妸鈺傚亱闁割偁鍨婚鏇熺節閵忥絾纭炬い鎴濇搐鐓ら悗鐢电《閸嬫挾鎲撮崟顒傦紭闂佹悶鍔忔慨銈嗙┍婵犲洤閱囬柡鍥╁仧閸婄偤姊洪棃娴ㄥ綊宕曢悜妯侯嚤闁哄洢鍨洪悡鐔兼煟閺傛寧鎲搁柣顓炶嫰椤儻顦虫い銊ョ墦瀵偊顢欓崲澶嬫瀹曨亪宕橀鍡忔(婵犵數濮伴崹濂稿春閺嶎厼绀夐柡宥庡幖绾惧鏌ㄥ┑鍡╂Ч闁绘挻娲熼弻鏇熷緞濡櫣浠╁銈傛櫓閸撴瑩鍩ユ径鎰闁荤喐澹嗗В銏㈢磽娴d粙鍝洪悽顖涱殔宀h儻绠涘☉妯溾晝鎲歌箛娑欏仼濠靛倸鎲¢埛鎴犳喐閻楀牆淇俊顐e灥閳规垿鎮欓埡浣峰闂傚倷娴囬鏍窗濡ゅ啫鍨濋柟鎹愵嚙缁犳澘鈹戦悩鎻掓殭缂佸墎鍋涢…璺ㄦ崉閾忓湱浼囧┑顔硷功閸嬫挾鎹㈠┑瀣仺闂傚牊绋愮划璺侯渻閵堝棙澶勯柛妯圭矙楠炲牓濡搁敂鍝勪簼闂佸憡鍔戦崝宥呂i鍕拺闁告繂瀚埢澶愭煕濡亽鍋㈢€规洖缍婂畷鎺楁倷鐎电ǹ甯惧┑鐘垫暩閸嬬喖宕戦幘鏂ユ瀺闁糕剝绋掗悡鏇㈡倵閿濆啫濡煎┑鈥炽偢濡焦寰勯幇顓犲弳濠电娀娼уΛ娆撳闯瑜版帗鐓涢柛鈩冪懃閺嬫垵菐閸パ嶈含妞ゃ垺绋戦~婵嬪础閻愨晛寰嶅┑鐘愁問閸犳牠鏁冮妷銉富濞寸姴顑冮埀顑跨窔瀵挳濮€閳╁啯鐝抽梻浣虹《閸撴繈鎮烽敃鍌ゆ晣濠电姵纰嶉埛鎺懨归敐鍫燁仩閻㈩垱鐩弻鐔哄枈閸楃偘绨介梺鐟扮畭閸ㄥ綊鍩為幋鐘亾閿濆骸澧紒渚婄畵閺岋絾鎯旈婊呅i梺鍝ュУ閻楁粎鍒掓繝姘櫜闁糕剝鐟ч惁鍫熺節閻㈤潧孝闁稿﹥鎮傞、鏃堫敃閿旂晫鍘甸梺鍝勵儛閸嬪嫭鎱ㄩ崒娑欏弿濠电姴鍟妵婵囶殽閻愭潙濮堥柟顖涙閺佹劙宕掑☉杈ㄧ秾闂傚倸鍊风粈渚€骞栭锔藉亱婵犲﹤鐗嗙粈鍫ユ煟閺冨牜妫戦柡鍡畵閺岋綁鎮㈢粙娆炬闂佸壊鍋掓禍顏堝蓟濞戙垹鍗抽柕濞垮劚鐎涳絽鈹戦悙瀛樼稇閻庢凹鍓熼垾鏃堝礃椤斿槈褔鏌涢埄鍐炬畼闁荤喐鍔欏铏圭磼濡椽鍤嬬紓浣哄У閹告悂顢氶敐澶婄缂佹稑顑嗛弲婊堟⒑閸撴彃浜為柛鐘虫崌瀹曘垽鏌嗗鍡忔嫼闂佽崵鍠撴晶妤呭箚閸垻纾煎璺侯儐缂嶆垿鏌i敐鍥ㄦ毈鐎规洖宕埥澶娾枎閹存繂绗氶梺鑽ゅ枑缁秶鍒掗幘宕囨殾婵犲﹤鍠氬ḿ鈺傘亜閹烘埈妲归柛宥囨暬濮婃椽妫冨ù銉ョ墦瀵彃饪伴崼婵堬紱闂佺ǹ鐬奸崑鐐烘偂閵夆晜鐓熼柡鍌涘閹牏鈧稒绻堥弻锝夋偄閸濄儲鍤傜紓浣哄У閹瑰洭鎮伴鈧浠嬵敇閻愭鍟囨俊鐐€栭幐楣冨磻閻斿摜顩锋い鏍ㄧ矌绾捐棄霉閿濆棗绲诲ù婊呭亾缁绘繈濮€閿濆棛銆愰梺鎰佸灡濞叉繈濡甸幇鏉跨闁瑰濯Σ顖炴⒒娴e懙鍦崲濡ゅ懎纾婚柟閭﹀厴閺嬫棃鏌曢崼婵愭Ч闁抽攱鍨圭槐鎾存媴鐠愵垳绱扮紓浣哄У閻楃娀寮婚敐澶婄厸濠电姴鍊绘禒鈺呮⒑娴兼瑧鎮奸柛蹇旓耿瀵偊骞樼紒妯轰汗闂佽偐鈷堥崜锕€危娴煎瓨鈷掑ù锝堟娴滃綊鏌嶅畡鎵ⅵ鐎规洘绮岄~婵囷紣濠靛洦娅撻梻浣侯攰閹活亪姊介崟顖氱厱闁硅揪闄勯崑锝夋煕閵夘垳宀涢柛瀣崌閹煎綊顢曢妶鍕寜闂傚倸鍊风粈渚€骞夐敓鐘茶摕闁靛⿵瀵屽▓浠嬫煙闂傚顦﹂柣鎾寸箞閺岀喖骞戦幇闈涙缂備胶濯寸紞渚€寮婚敐澶婄疀妞ゆ挾鍠撶粙鍥ь渻閵堝懎顒㈤柟鍛婃倐閸╃偤骞嬮敂钘変汗闁荤姴娉ч崘褏鐭楅梻鍌欑閹芥粓宕抽妷鈺佸瀭闁割偅娲滃畵渚€鏌涢埄鍐槈缁炬儳鍚嬮幈銊╂晲鎼粹€崇缂傚倸绉撮敃顏堢嵁閸愵喖鐓涢柛娑卞幘椤斿矂姊洪崷顓炲妺缂佽鍊规穱濠囨煥鐎n剛鐦堥梺姹囧灲濞佳嗏叴闂備胶枪椤戝棝骞戦崶顒€钃熼柣鏂跨殱閺嬫棃鏌涢…鎴濇灍闁诲繑鎸剧槐鎺撱偅閸愵亞鏆紓浣哄У閻楃姴顕f繝姘亜閻炴稈鈧厖澹曢梺姹囧灮濞呫儵鎮烽悧鍫熺槑闂備浇宕甸崰鎰垝鎼淬垺娅犳俊銈呮噺閸嬪倿鏌ㄩ悢鍝勑㈤柦鍐枑缁绘盯骞嬪▎蹇曚患缂備胶濮垫繛濠囧蓟閿熺姴纾兼慨妯块哺閻ㄦ垿姊洪崫鍕靛剰闁瑰啿閰i崺鐐哄箣閿旇棄鈧兘鏌涘▎蹇fЦ婵炲拑缍佸缁樻媴缁嬭法鐩庣紓浣藉皺閸嬫挾绮氭潏銊х瘈闁搞儜鍜佸晪婵$偑鍊栧Λ浣规叏閵堝應鏋嶉柕蹇嬪€栭埛鎴︽偣閹帒濡兼繛鍛姍閺岀喖宕欓妶鍡楊伓

   闂傚倸鍊峰ù鍥敋瑜嶉湁闁绘垼妫勯弸浣糕攽閻樺疇澹樼痪鎹愵嚙閳规垿鎮╅崣澶嬫倷缂備焦鍔栭〃濠囧蓟閿熺姴鐐婇柍杞扮劍閻忎線姊哄畷鍥ㄥ殌缂佸鎸抽崺鐐哄箣閿旇棄浜归梺鍛婄懃椤︿即骞冨▎蹇婃斀闁宠棄妫楁禍婵嬫煥閺囨ê鐏茬€殿喛顕ч埥澶愬閻樻牓鍔戦弻鏇$疀婵犲倸鈷夐梺缁樼箖閻楃娀骞冨畡鎵冲牚闁告劑鍔庨惄搴ㄦ⒑閻熸澘娈╅柟鍑ゆ嫹  闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柤鍝ユ暩娴犳氨绱撻崒娆掑厡缂侇噮鍨堕妴鍐川閺夋垹鍘洪悗骞垮劚椤︻垶宕¢幎鑺ョ厪闊洦娲栨牎闂佽瀵掗崜鐔奉潖閾忓湱纾兼俊顖氭惈椤酣姊虹粙璺ㄦ槀闁稿﹥绻傞悾鐑藉即閻愬灚娈曢梺鍛婃处閸撴盯宕㈡禒瀣拺闂侇偅绋戝畵鍡樼箾娴e啿瀚▍鐘炽亜閺傛娼熷ù婊勭矒楠炴牠骞栭鐐典画闁诲孩鐔幏锟�  闂傚倸鍊搁崐宄懊归崶褏鏆﹂柛顭戝亝閸欏繘鏌℃径瀣婵炲樊浜滃洿闂佹悶鍎荤徊鑺ョ閻愵剚鍙忔俊顖滃帶鐢爼鏌h箛銉╂闁靛洤瀚版慨鈧柨娑樺閸f澘螖閻橀潧浠滄い鎴濐樀瀵偊宕橀鑲╁姦濡炪倖甯掗崐濠氭儗閸℃稒鐓曢柡鍥ュ妼閻忥繝鏌i幘璺烘瀾濞e洤锕、娑樷攽閹邦剚顔勭紓鍌欐祰鐏忣亜鐣烽悽鍨潟闁圭偓鍓氶崥瀣叓閸ャ劍鐓ユい蹇ユ嫹  闂傚倸鍊搁崐鎼佸磹閻戣姤鍤勯柛顐f礀缁犵娀鏌熼幑鎰靛殭閻熸瑱绠撻幃妤呮晲鎼粹€愁潻闂佹悶鍔嶇换鍫ョ嵁閺嶎灔搴敆閳ь剚淇婇懖鈺冩/闁诡垎浣镐划闂佸搫鏈ú妯兼崲濞戙垺鍊锋い鎺嶈兌瑜板懘姊绘担鍛婂暈妞ゃ劌妫欑换娑欑節閸パ嗘憰闂佹枼鏅涢崯顐ゆ閻愮儤鍊甸柨婵嗙凹缁ㄤ粙鏌涢弮鍋冲綊鍩為幋锕€鐓¢柛鈩冾殘娴煎牓姊洪悷鏉挎闁瑰嚖鎷�