联用红霉素对多索茶碱在大鼠体内药代动力学的影响
作者：李丽 詹丽芬 赫梅生 张玉芝 马建忠
单位：李丽(中国医科大学实验技术中心一部)；马建忠(基础医学院数学教研室)；李丽(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)；詹丽芬(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)；赫梅生(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
关键词：多索茶碱；红霉素；药代动力学；反相高效液相色谱
中国医科大学学报000105 摘要 目的：通过检测多索茶碱(Dox)在大鼠体内的血药浓度，分析红霉素对Dox药代动力学参数的影响。方法：用微量取血及反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测Dox的血药浓度，数据用“3P87”程序计算机处理。结果：红霉素使Dox吸收时间缩短，峰浓度略有下降，曲线下面积减小，对其消除过程基本无影响。结论：两药联用时，红霉素不增加多索茶碱的毒性，仅轻微影响其药效，而对Dox的代谢过程影响不大。
, 百拇医药
The Effect on Erythromycin on Doxophylline Pharmacokinetics in Rat
Li Li Zhan Lifen He Meisheng et al
(Department of Pharmacology, College of Basic Medical Sciences, China Medical Univercity, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective:Our purpose was to study the effect of erythromycin on doxophylline (Dox) pharmacokinetics.Methods: Dox in minimum serum is detected with reverse phase high performance liquid chromatography(RP-HPLC) and concentration data is done with “3 P 87” program in computer. Results: Comparing with Dox ig alone, its absorbance phase time is shortened after erythromycin ig. The top concentration and area under the curve were all decreased, but elimination process is not influenced. Conclusion: When Dox is administrated orally together with erythromycin, the latter can not increase Dox toxicity, but decrease its curative effect lightly, so it is relatively safer than theophylline.
, 百拇医药
KEY WORDS doxophylline; erythromycin; pharmacokinetics; reversed phase high performance liquid chromatography
多索茶碱(doxophylline, Dox)是一种新型黄嘌呤类抗支气管痉挛药，比传统药物茶碱和氨茶碱疗效高且毒性低，治疗气喘和慢性阻塞性肺病，效果是氨茶碱的10～15倍，且对中枢神经系统和胃肠等无影响，也不影响心功能[1～4]。临床上，红霉素常与茶碱类药物合用，治疗合并感染的支气管肺疾患。据报道，红霉素能抑制茶碱的代谢消除，使其产生毒性[5，6]。Dox与茶碱是同类作用药物，但结构略有不同。研究红霉素对Dox药代动力学参数的影响，可为此药物的临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
, http://www.100md.com
1.1.1 药品：受试物：Dox片剂(200 mg/片)，标准品纯度99.9%，浙江新昌制药股份有限公司提供，批号951025。红霉素片剂(12.5万U/片)， 中国医科大学制药厂提供，批号960318。内标物：茶碱标准品，纯度99.9%，山东新华制药厂提供，批号95121775。
1.1.2 试剂：甲醇，为北京化工厂产品，色谱纯；氯仿、异丙醇均为沈阳试剂厂产品，分析纯。
1.1.3 仪器：高效液相色谱仪为美国 Millipore
Waters公司产品(包括Model 490 检测器，Midel 510 高压泵，Waters 740 数据处理机，U 6 k进样器等)。
1.2 检测条件
Spherisorb C18 5 μm (250 mm×4.6 mm, ID)色谱柱，ResolveTM C18(5.0 mm×4.6 mm, D)预柱，流动相为甲醇和水(9∶11 v/v)，用前经滤膜过滤和超声波除气处理。流速1.0 ml/min；检测波长 273 nm，满格感量0.04 AUFS，柱压3 000 Psi。
, 百拇医药
1.3 标准曲线的制备
用甲醇配制Dox浓度分别为2.5，5，10，20，30，40 μg/ml的标准液。配制茶碱浓度47 μg/ml溶液作为内标液。吸取Dox标准液40 μl，内标液10 μl，挥发干，加入无药血清40 μl，配成Dox分别为2.5，5，10，20，30，40 μg/ml的血清标准液。加入萃取液(氯仿：异丙醇 v/v＝1∶1)1.4 ml，旋涡混合1 min， 3 000 r/min离心10 min。吸取上清液1.0 ml于40 ℃水浴中蒸干。残渣用0.1 ml甲醇溶解，进样10 μl。重复测定 3 次取其均值，以内标法绘制标准曲线。计算回归方程和相关系数。多次实验(n＝5)，测定回收率及精密度。
1.4 动物分组及处理
8只大鼠，雌雄兼用，体重(230±10)g，由中国医科大学实验动物部提供。动物在实验室饲养3 d后开始实验。给药前禁食12 h，每只动物分别给予Dox(水溶液14.8 mg/ml,ig) 74 mg/kg。大鼠乙醚麻醉后，在给药前及给药后0.083，0.25，0.5，1，2，3，5，7，9 h鼠尾取血0.1 ml于EP管中，迅速置于4 ℃冰箱中保存待测。
, 百拇医药
2 d后给红霉素，按50 000 U/kg ig 浓度为10 000 U/ml红霉素葡萄糖水溶液(现配)，q 8 h,持续10 d。于第10日晚禁食12 h，次日给Dox，采血时间及方法同上。
1.5 数据处理
应用“3 P 87”程序计算机处理血药浓度数据，通过权重分析选择最佳房室模型，计算出给红霉素前后Dox药代动力学参数，进行比较。
2 结果
2.1 Dox血清标准曲线见图1。
图1 血清标准曲线
Figure 1 Standard curve of serum
, http://www.100md.com
其直线回归方程为：Y＝0.0106+0.0489X, r＝0.998。回收率为96.9%～103.3%，日内日间变异(CV%)< 3 %。
2.2 药代动力学参数结果
8只大鼠用红霉素前后Dox药代动力学参数变化见表1。与单用Dox组比较，参数Ke， T1/2Ke变化不大，吸收相参数略有变化，峰浓度下降，AUC减低。说明红霉素对Dox吸收过程有影响，对其消除相影响不大。
表1 Dox给红霉素前后药代动力学参数的比较
Table 1 The comparison of Dox pharmacokinetic parameters without/after erythromycin ig 参数
给药
, http://www.100md.com
鼠号
±s
1
2
3
4
5
6
7
8
K
Dox
0.145
, http://www.100md.com 0.348
0.346
0.349
0.176
0.502
0.530
0.446
0.361±0.140
(1/h)
Dox+Ery
0.360
0.322
0.189
, http://www.100md.com
0.177
0.214
0.327
0.631
0.354
0.322±0.146
Ka
Dox
2.679
3.177
0.544
0.496
2.107
, 百拇医药
1.050
0.704
0.623
1.423±1.072
(1/h)
Dox+Ery
2.342
6.308
4.924
4.397
1.048
1.842
, 百拇医药 0.678
0.471
2.751±2.186
T1/2α
Dox
0.239
0.218
1.275
1.397
0.329
0.660
0.984
, 百拇医药 1.112
0.779±0.475
(h)
Dox+Ery
0.296
0.110
0.141
0.158
0.662
0.376
1.022
1.471
0.529±0.491
, 百拇医药
T1/2β
Dox
4.777
1.991
2.002
1.749
3.940
1.386
1.307
1.553
2.338±1.291
(h)
, 百拇医药
Dox+Ery
1.925
2.152
3.667
3.917
3.238
2.119
1.098
1.958
2.510±0.984
Tp
Dox
0.479
, http://www.100md.com
0.782
2.286
2.250
0.483
1.349
1.631
1.887
1.394±0.744
(h)
Dox+Ery
0.945
0.497
0.332
, 百拇医药
0.761
1.907
1.141
1.528
2.441
1.194±0.723
Ctp
Dox
12.10
14.92
12.01
11.84
19.64
, 百拇医药
29.42
5.588
11.42
14.62±7.144
(μg/ml)
Dox+Ery
10.04
9.910
22.38
13.09
13.67
19.01
, 百拇医药 1.579
2.615
11.92±6.673
Vd/F
Dox
5.703
3.777
2.795
2.562
3.460
1.281
5.576
2.790
, 百拇医药
3.493±1.514
(L/Kg)
Dox+Ery
5.245
6.369
3.105
4.942
3.601
2.679
6.159
11.79
5.487±2.890
, 百拇医药
AUC
Dox
89.42
56.26
76.50
72.86
121.5
115.5
25.02
59.44
77.07±31.80
(h.mg/L)
, 百拇医药
Dox+Ery
39.19
36.04
126.1
84.64
96.20
84.46
19.03
17.73
62.91±40.14
3 讨论
红霉素是常用的口服抗菌素，临床上常与茶碱合用，据报道，红霉素可抑制茶碱类药物的代谢消除，使其血药浓度升高，产生毒性。所以，临床用药常需监测血中茶碱浓度。二者合并用药5 d对氨茶碱药代动力学参数有影响，用药10 d则影响显著[5]。其机理是红霉素能抑制使茶碱代谢消除的肝药酶。
, 百拇医药
本实验红霉素用药 10 d，不仅红霉素达到了稳态血药浓度，且到了能够抑制肝药酶的时间长度，但对Dox的消除过程影响不明显，提示Dox与红霉素合用没有与氨茶碱等类似的影响。另外，红霉素用药后，Dox的达峰时间略有改变，Ctp稍有降低，AUC亦下降，这可能是由于红霉素特殊的胃动力作用。Dox副作用较茶碱小，其血药浓度易于控制在安全水平，与红霉素合用时又没有明显的血药浓度的增加，因此应用于临床比茶碱具有更好的安全性和适用范围。
作者单位：张玉芝(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
马建忠(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
参考文献
1，Franzone JS, Reboani MC, Fonzo D, et al. Pharmacological researches on 2-(7-theophyllinemethyl)-1,3-dioxolane. Farmaco Ed Scient, 1981, 36: 201-219
, 百拇医药
2，Cravanzola C, Reboani MC, Franzone JS. Doxofylline in rat brain in relation to locomotor activity. Drug Metab Dispos, 1989, 17(4): 437-440(E)
3，Lazzaroni M, Grossi E, Porro GB. The effect of intravenous doxophylline or aminophylline on gastric secretion in duodenal ulcer patients. Aliment Pharmacol Ther, 1990, 4(6): 643-649
4，Cirillo R, Grossi E, Franzone JS. Doxofylline, an adenosine nonblocking xanthine, does not induce cardiostimulant effects. Res Commun Chem Pathol Pharmacol, 1989, 65(1): 21-34(E)
5，叶丽卡，李国秀，韩广轩，等.慢性阻塞性肺疾病患者服用红霉素对稳态时氨茶碱药代动力学的影响.中国临床药学杂志， 1991， 7(4)： 221～224
6，Cummins LH, Kozal PP, Gilman SA. Erythromycin's effect on theophylline blood levels. Pediatrics, 1977, 59: 144-145
收稿1998-12-30, 百拇医药
单位：李丽(中国医科大学实验技术中心一部)；马建忠(基础医学院数学教研室)；李丽(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)；詹丽芬(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)；赫梅生(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
关键词：多索茶碱；红霉素；药代动力学；反相高效液相色谱
中国医科大学学报000105 摘要 目的：通过检测多索茶碱(Dox)在大鼠体内的血药浓度，分析红霉素对Dox药代动力学参数的影响。方法：用微量取血及反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测Dox的血药浓度，数据用“3P87”程序计算机处理。结果：红霉素使Dox吸收时间缩短，峰浓度略有下降，曲线下面积减小，对其消除过程基本无影响。结论：两药联用时，红霉素不增加多索茶碱的毒性，仅轻微影响其药效，而对Dox的代谢过程影响不大。
, 百拇医药
The Effect on Erythromycin on Doxophylline Pharmacokinetics in Rat
Li Li Zhan Lifen He Meisheng et al
(Department of Pharmacology, College of Basic Medical Sciences, China Medical Univercity, Shenyang, 110001)
ABSTRACT Objective:Our purpose was to study the effect of erythromycin on doxophylline (Dox) pharmacokinetics.Methods: Dox in minimum serum is detected with reverse phase high performance liquid chromatography(RP-HPLC) and concentration data is done with “3 P 87” program in computer. Results: Comparing with Dox ig alone, its absorbance phase time is shortened after erythromycin ig. The top concentration and area under the curve were all decreased, but elimination process is not influenced. Conclusion: When Dox is administrated orally together with erythromycin, the latter can not increase Dox toxicity, but decrease its curative effect lightly, so it is relatively safer than theophylline.
, 百拇医药
KEY WORDS doxophylline; erythromycin; pharmacokinetics; reversed phase high performance liquid chromatography
多索茶碱(doxophylline, Dox)是一种新型黄嘌呤类抗支气管痉挛药，比传统药物茶碱和氨茶碱疗效高且毒性低，治疗气喘和慢性阻塞性肺病，效果是氨茶碱的10～15倍，且对中枢神经系统和胃肠等无影响，也不影响心功能[1～4]。临床上，红霉素常与茶碱类药物合用，治疗合并感染的支气管肺疾患。据报道，红霉素能抑制茶碱的代谢消除，使其产生毒性[5，6]。Dox与茶碱是同类作用药物，但结构略有不同。研究红霉素对Dox药代动力学参数的影响，可为此药物的临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
, http://www.100md.com
1.1.1 药品：受试物：Dox片剂(200 mg/片)，标准品纯度99.9%，浙江新昌制药股份有限公司提供，批号951025。红霉素片剂(12.5万U/片)， 中国医科大学制药厂提供，批号960318。内标物：茶碱标准品，纯度99.9%，山东新华制药厂提供，批号95121775。
1.1.2 试剂：甲醇，为北京化工厂产品，色谱纯；氯仿、异丙醇均为沈阳试剂厂产品，分析纯。
1.1.3 仪器：高效液相色谱仪为美国 Millipore
Waters公司产品(包括Model 490 检测器，Midel 510 高压泵，Waters 740 数据处理机，U 6 k进样器等)。
1.2 检测条件
Spherisorb C18 5 μm (250 mm×4.6 mm, ID)色谱柱，ResolveTM C18(5.0 mm×4.6 mm, D)预柱，流动相为甲醇和水(9∶11 v/v)，用前经滤膜过滤和超声波除气处理。流速1.0 ml/min；检测波长 273 nm，满格感量0.04 AUFS，柱压3 000 Psi。
, 百拇医药
1.3 标准曲线的制备
用甲醇配制Dox浓度分别为2.5，5，10，20，30，40 μg/ml的标准液。配制茶碱浓度47 μg/ml溶液作为内标液。吸取Dox标准液40 μl，内标液10 μl，挥发干，加入无药血清40 μl，配成Dox分别为2.5，5，10，20，30，40 μg/ml的血清标准液。加入萃取液(氯仿：异丙醇 v/v＝1∶1)1.4 ml，旋涡混合1 min， 3 000 r/min离心10 min。吸取上清液1.0 ml于40 ℃水浴中蒸干。残渣用0.1 ml甲醇溶解，进样10 μl。重复测定 3 次取其均值，以内标法绘制标准曲线。计算回归方程和相关系数。多次实验(n＝5)，测定回收率及精密度。
1.4 动物分组及处理
8只大鼠，雌雄兼用，体重(230±10)g，由中国医科大学实验动物部提供。动物在实验室饲养3 d后开始实验。给药前禁食12 h，每只动物分别给予Dox(水溶液14.8 mg/ml,ig) 74 mg/kg。大鼠乙醚麻醉后，在给药前及给药后0.083，0.25，0.5，1，2，3，5，7，9 h鼠尾取血0.1 ml于EP管中，迅速置于4 ℃冰箱中保存待测。
, 百拇医药
2 d后给红霉素，按50 000 U/kg ig 浓度为10 000 U/ml红霉素葡萄糖水溶液(现配)，q 8 h,持续10 d。于第10日晚禁食12 h，次日给Dox，采血时间及方法同上。
1.5 数据处理
应用“3 P 87”程序计算机处理血药浓度数据，通过权重分析选择最佳房室模型，计算出给红霉素前后Dox药代动力学参数，进行比较。
2 结果
2.1 Dox血清标准曲线见图1。
图1 血清标准曲线
Figure 1 Standard curve of serum
, http://www.100md.com
其直线回归方程为：Y＝0.0106+0.0489X, r＝0.998。回收率为96.9%～103.3%，日内日间变异(CV%)< 3 %。
2.2 药代动力学参数结果
8只大鼠用红霉素前后Dox药代动力学参数变化见表1。与单用Dox组比较，参数Ke， T1/2Ke变化不大，吸收相参数略有变化，峰浓度下降，AUC减低。说明红霉素对Dox吸收过程有影响，对其消除相影响不大。
表1 Dox给红霉素前后药代动力学参数的比较
Table 1 The comparison of Dox pharmacokinetic parameters without/after erythromycin ig 参数
给药
, http://www.100md.com
鼠号
±s1
2
3
4
5
6
7
8
K
Dox
0.145
, http://www.100md.com 0.348
0.346
0.349
0.176
0.502
0.530
0.446
0.361±0.140
(1/h)
Dox+Ery
0.360
0.322
0.189
, http://www.100md.com
0.177
0.214
0.327
0.631
0.354
0.322±0.146
Ka
Dox
2.679
3.177
0.544
0.496
2.107
, 百拇医药
1.050
0.704
0.623
1.423±1.072
(1/h)
Dox+Ery
2.342
6.308
4.924
4.397
1.048
1.842
, 百拇医药 0.678
0.471
2.751±2.186
T1/2α
Dox
0.239
0.218
1.275
1.397
0.329
0.660
0.984
, 百拇医药 1.112
0.779±0.475
(h)
Dox+Ery
0.296
0.110
0.141
0.158
0.662
0.376
1.022
1.471
0.529±0.491
, 百拇医药
T1/2β
Dox
4.777
1.991
2.002
1.749
3.940
1.386
1.307
1.553
2.338±1.291
(h)
, 百拇医药
Dox+Ery
1.925
2.152
3.667
3.917
3.238
2.119
1.098
1.958
2.510±0.984
Tp
Dox
0.479
, http://www.100md.com
0.782
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2.250
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1.887
1.394±0.744
(h)
Dox+Ery
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, 百拇医药
0.761
1.907
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2.441
1.194±0.723
Ctp
Dox
12.10
14.92
12.01
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19.64
, 百拇医药
29.42
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(μg/ml)
Dox+Ery
10.04
9.910
22.38
13.09
13.67
19.01
, 百拇医药 1.579
2.615
11.92±6.673
Vd/F
Dox
5.703
3.777
2.795
2.562
3.460
1.281
5.576
2.790
, 百拇医药
3.493±1.514
(L/Kg)
Dox+Ery
5.245
6.369
3.105
4.942
3.601
2.679
6.159
11.79
5.487±2.890
, 百拇医药
AUC
Dox
89.42
56.26
76.50
72.86
121.5
115.5
25.02
59.44
77.07±31.80
(h.mg/L)
, 百拇医药
Dox+Ery
39.19
36.04
126.1
84.64
96.20
84.46
19.03
17.73
62.91±40.14
3 讨论
红霉素是常用的口服抗菌素，临床上常与茶碱合用，据报道，红霉素可抑制茶碱类药物的代谢消除，使其血药浓度升高，产生毒性。所以，临床用药常需监测血中茶碱浓度。二者合并用药5 d对氨茶碱药代动力学参数有影响，用药10 d则影响显著[5]。其机理是红霉素能抑制使茶碱代谢消除的肝药酶。
, 百拇医药
本实验红霉素用药 10 d，不仅红霉素达到了稳态血药浓度，且到了能够抑制肝药酶的时间长度，但对Dox的消除过程影响不明显，提示Dox与红霉素合用没有与氨茶碱等类似的影响。另外，红霉素用药后，Dox的达峰时间略有改变，Ctp稍有降低，AUC亦下降，这可能是由于红霉素特殊的胃动力作用。Dox副作用较茶碱小，其血药浓度易于控制在安全水平，与红霉素合用时又没有明显的血药浓度的增加，因此应用于临床比茶碱具有更好的安全性和适用范围。
作者单位：张玉芝(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
马建忠(中国医科大学基础医学院药理学教研室，沈阳 110001)
参考文献
1，Franzone JS, Reboani MC, Fonzo D, et al. Pharmacological researches on 2-(7-theophyllinemethyl)-1,3-dioxolane. Farmaco Ed Scient, 1981, 36: 201-219
, 百拇医药
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收稿1998-12-30, 百拇医药