淋巴细胞性白血病/淋巴瘤bcl-2基因重排的研究
作者：向直富 李慧玉 陈燕
单位：广西医科大学第一附属医院血液科 南宁 530021
关键词：bcl-2基因；基因重排；淋巴细胞性白血病；淋巴瘤
广西医科大学学报000112
摘要 目的：探讨bcl-2/IgH基因重排的临床意义。方法：应用多聚酶链反应技术检测9种恶性淋巴瘤细胞系和不同类型 淋巴系统恶性肿瘤临床标本中bcl-2/IgH基因重排情况。结果：2种细胞系，1例慢性淋巴细胞白血病及6例非霍奇金淋巴瘤( NHL)有bcl-2/IgH基因重排，其中，36.4%滤泡型NHL及18.2%弥漫性NHL有重排。bcl-2 基因断裂点绝大多数(8/9)位于主要断裂区(MBR)。结论：bcl-2/IgH基因重排是恶性淋巴瘤一种常见的染色体异常， 主要与低度恶性NHL有关，重排的检测有助于淋巴瘤发生、演变机制的研究及对预后的评估 。
, http://www.100md.com
中国图书资料分类法分类号 R733.3
STUDY ON bcl-2 GENE REARRANGEMENT IN LYMPHOID MALIGNANCIES
Xiang Zhifu,Li Huiyu,Chen Yan
(Department of Hematology,First Affiliate d Hospital,Guangxi Medical University,Nanning,530021 China)
Abstract Objective:To elucidate the clinical significance of bcl-2/IgH gene rearrangement in varied lymphoid malignancies.Methods:Using polymerase chain reaction technique,two patterns of bcl-2/IgH gene rearrangement were detected in 9 strains of malignant lympho ma cell lines and clinical specimens of varied lymphoid malignancies.Results:2 kinds of lymphoma cell lines,1 of 11 cases of chroni c lymphocytic leukemia and 6 of 29 cases of non-Hodgkin's lymphomas(NHL) demons trated bcl-2 gene rearrangement.Most breakpoints of bcl-2 gene occurred in ma jor breakpoint region(MBR).In NHL,36.4% follicular NHL and 18.2% diffuse NHL revealed bcl-2 rearrangement.Conclusion:bcl-2/IgH gene rearrangement is most common geneti c abnormality in lymphoma,especially in low-grade follicular NHL.Detection of bcl-2 rearrangement may be helpful to understand the molecular mechanism of pa thogenesis and development of lymphoma and to evaluate the prognosis.
, 百拇医药
Key words bcl-2 gene;gene rearrangement;lymphocytic leukemi a;lymphoma
bcl-2基因是著名的凋亡抑制基因，过度表达和(或)重排与恶性血液病的发生、发展有 十分密切的关系[1]，特别是在恶性淋巴瘤中，bcl-2基因重排是淋巴瘤发生的分 子生物学病因[2]，我们应用多聚酶链反应对9种淋巴瘤细胞系和不同类型的淋巴系 统恶性肿瘤的临床标本进行bcl-2基因重排的检测，以探讨bcl-2基因重排的临床意义。
1 材料与方法
1.1研究对象
1.1.1 细胞系：9种恶性淋巴瘤细胞系分别为 Su-DHL-1，Su-DHL-4， Su-DHL-6,S u-DHL-8,Su-DHL-9，Su-DHL-10,Daudi,8392,SB,由美国国立癌症研究所提供。均为B 细胞性非霍奇金淋巴瘤细胞。
, 百拇医药
1.1.2 淋巴细胞性白血病:27例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,男15例,女12例,年龄18～ 59岁;11例慢性淋巴细胞白血病(CLL),男10例,女1例,年龄56～78岁。所有病例均经临床、骨 髓细胞学、细胞化学及免疫分型确诊。
1.1.3 非霍奇金淋巴瘤(NHL):29例NHL石蜡包埋标本为门诊及住院患者淋巴结活检存档 标本，男21例，女8例，经临床、组织病理学和免疫分型确诊并按NHL国际工作组分类标准分 型，其中滤泡型NHL 11例，弥漫型NHL18例；免疫学分型B细胞性22例，T细胞性7例。此外尚 有9例霍奇金病淋巴结活检石蜡标本，其中淋巴细胞为主型5例，结节硬化型和混合细胞型各 2例。
1.2 DNA抽提
1.2.1 细胞系：由本室常规传代培养后，收集细胞，用PBS洗涤两次，然后用常规酚/氯 仿/异戊醇法抽提基因组DNA。
, 百拇医药
1.2.2 ALL和CLL标本：骨髓穿刺抽取骨髓2 ml，肝素抗凝，用Ficoll-Hypaque淋巴细胞 分离液分离骨髓单个核细胞，PBS洗涤2次，然后用常规酚/氯仿/异戊醇法抽提基因组DNA。
1.2.3 石蜡包埋组织DNA抽取：采用水浴法抽提基因DNA，具体步骤如下:①切取5 μm厚 石蜡包埋组织4～6块置于1.5 ml EP管中，加入1 ml STE缓冲液(100 mmol/L NaCl,10 mmol /L Tris.HCl,1 mmol/L EDTA),72℃水浴10 min，插入吸水滤纸条，将浮蜡及STE吸净，如 此重复多次，直到石蜡除净;②将组织研磨成悬液，加入1 ml消化液，37℃水浴过夜。消化 液：15 mmol/L柠檬酸钠.H2O，150 mmol/L NaCl，1%SDS,100 mg/L蛋白酶K；③用等体 积酚和氯仿：异戊醇(24∶1)各抽提一次，加入1/10体积3 mol/L醋酸钠及2倍体积无水冷乙 醇沉淀基因组DNA，以适量TE溶解DNA,-20℃保存备用。
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1.3 bcl-2/IgH基因重排检测
引物序列，PCR扩增方法及产物鉴定参见我们以前报道的方法[3]。
2 结 果
2.1 细胞系：9种恶性淋巴瘤细胞系中，Su-DHL-4和Su-DHL-6扩增出约230bp的产物(图1)，提示有重排发生，bcl-2基因断裂点在MBR,余下7种细胞系未检出此种重排；所有细胞系未检出bcl-2(MCR)/JH重排。
图1 细胞系和慢淋患者PCR扩增结果
M:marker;A:Su-DHL-4;B:Su-DHL-6;C.CLL
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2.2 急性淋巴细胞白血病(ALL):27例ALL均未检出bcl-2 (MBR)/JH重排及bcl-2(MCR)/ JH重排。
2.3 慢性淋巴细胞白血病(CLL)：11例CLL中仅1例有bcl-2(MBR)/JH重排;所有病例均 未检出bcl-2(MCR)/JH重排(图1)。
2.4 霍奇金病(HD)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)：9例HD中未检出bcl-2/JH重排。29例NHL中 共检出6例有bcl-2/JH基因重排,全部发生于B细胞性NHL中;其中11例滤泡型NHL中检出4例 重排,重排发生率为36.4%,断裂点在MBR者3例(75%),在MCR者1例(25%);11例弥漫型NHL中共 检出2例有bcl-2/JH基因重排,重排率18.2%,均发生于MBR(图2);各组亚型中的重排情况 见表1。
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图2 NHL患者PCR扩增结果
M:marker,1～5泳道为MBR/JH重排,第6泳道为MCR/JH重排
表1 29例NHL bcl-2基因重排 分 型
n
bcl-2/IgH基因重排
MBR
MCR
滤泡型淋巴瘤
小裂细胞型
6
2
, 百拇医药
1
混合细胞型
2
1
0
大裂细胞型
3
0
0
弥漫型B细胞NHL
11
2
0
弥漫型T细胞NHL
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7
0
0
合 计
29
5
1
3 讨 论
bcl-2基因重排是恶性淋巴病最常见的染色体异常，重排时,90%以上的bcl-2基因断 裂发生于两个热点区:主要断裂区(MBR,占60%～70%)和次要断裂簇区(MCR,占20%～30%)，这两个断裂位点均相对恒定，部分甚至局限于3bp的范围内；IgH基因断裂则恒定地发生于 连接区(JH)[4]；因此bcl-2/IgH基因重排非常适合于用PCR方法进行检测。
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我们应用PCR方法，在9种恶性淋巴瘤的胞系，11例CLL和29例NHL中共检出9例有bcl-2/ IgH基因重排，其中8例bcl-2基因在MBR内断裂，仅1例断裂位点在MCR区内，说明bcl-2基 因重排时，bcl-2基因断裂大部分发生在MBR区内。
我们在NHL中发现的6例重排全部在22例B细胞性NHL中检出，其中滤泡型淋巴瘤占36.4 %(4/11)，弥漫型NHL占18.2%(2/11)，7例T细胞性NHL未检出重排，提示bcl-2基因重排 主要与低度恶性的滤泡型淋巴瘤有关,与高度恶性的NHL和T细胞性NHL无关[4]。在 滤泡型NHL的各亚型中,bcl-2基因重排主要发生于小裂细胞性(3例)和混合细胞性(1例)NHL 中，大裂细胞性中未检出bcl-2基因重排。Mitani等[5]研究了41例滤泡型NHL，其 中36.8%的小裂细胞性NHL和54.5%的混合细胞性NHL中检测出bcl-2基因重排，二者差异 有显著性，而滤泡型大细胞性NHL中未检出重排，作者认为bcl-2基因重排在滤泡型大细胞 性NHL的发生中所起作用较小，我们的结果与其略有差异，可能与病例选择有关。
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NHL中bcl-2基因重排的发生率各国报道不尽一致,40%～89%的滤泡型NHL，10%～45 %的弥漫型NHL有bcl-2基因重排，其中以欧美国家发生率高,亚洲国家发生率低[6] 。国内研究文献较少，冯文莉等[7]报道71.4%的滤泡型NHL有bcl-2基因重排 ，我们的研究仅36.4%的滤泡型NHL有重排,弥漫型NHL中18.2%有重排，与国外文献报道 相一致。中国人NHLbcl-2基因重排的实际发生率为多少尚需更多的研究报告。
95%以上的CLL为B细胞源性，表现为处于G0期的成熟CD5+CD19+B细胞缓 慢升高。根据淋 巴瘤国际协作组的新分类方法，CLL属于低度恶性淋巴瘤，但国内外临床学家仍把CLL与NHL 区分开。CLL许多临床和生物学特性与CLL相似，NHL在侵犯骨髓和外周血时也诊断为CLL [8]，因此CLL与NHL鉴别有时非常困难。CLL bcl-2基因重排发生率较低(约10%)，重 排方式与NHL不同,bcl-2基因在5'侧区断裂后与免疫球蛋白轻链基因以头头(head-to-hea d)方式相连[9]，NHL中bcl-2基因在3'端MBR或MCR区断裂后与IgH基因以头尾(head -to-tail)方式相连，因此bcl-2基因重排为CLL和NHL鉴别提供了分子基础，Raghoebier 等[10]也认为具有bcl-2/IgH基因重排的CD5-CLL应为NHL白血病期，而不是 真正 的CLL,我们报告的这例bcl-2(MBR)/IgH阳性CLL是在体检时偶然发现的，初诊时仅浅表淋巴 结肿大(双侧颈部)，但免疫分型CD5-CD19+,实际上为NHL白血病期。
, 百拇医药
我们在ALL和HD患者中未检测到bcl-2基因重排，国内外文献亦未见ALL有bcl-2/IgH重 排的报告。在HD患者,Southern blot不能检测到bcl-2基因重排，用敏感的PCR方法则发现 少数HD也有bcl-2/IgH基因重排，但对bcl-2基因重排在HD发生发展中的作用持否定态度， 部分是由于NHL转化为HD的结果[11]。
最初文献报道具有t(14;18)(q32;q21)的NHL患者对化疗反应差，容易复发，无病生存期 短，但随后对大样本的病例进行研究，t(14;18)重排并没有明显的预后意义，原因可能是在 无重排的病例也常有bcl-2基因高表达，影响了结果判断，若以bcl-2是否高表达进行分组 ，结果则完全不同，低表达组无病生存期和总生存期明显较高表达组长[12]，而且 对进行ABMT的NHL进行监测发现，PCR阴性者复发率低，无病生存期和总生存期长[13] ，因此作为一种抗凋亡基因，bcl-2基因在重排后引起的表达失调有显著的预后意义。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，Strasser A,Huang DC,Vaux DL.The role of the bcl-2/ced-9 gene family in cancer and general implications of detects in cell death control for tumouri genesis and resistance to chemotherapy.Biochem Biophys Acta,1997,1 333:151.
2，Cotter FE.The role of the bcl-2 gene in lymphoma.Bri J Haematol,199 0,70:449.
3，Xiang ZF,Chen Y,Li HY，et al.The expression and rearrangement of bcl -2 gene in chronic lymphocytic leukemia.中国实验血液学杂志，1998,6:45-48.
, 百拇医药
4，Klefstrom J,Franssila K,Peltomaki P,et al.Major and minor breakpoint sites of chromosomal translocations t(14;18) in subtypes of non-Hodgkin's lymph omas.Leukemia Res,1994,18:245.
5，Mitani S,Aoki N,Mizutani S,et al.bcl-2 gene rearrangement analysis o f Japanese follicular lymphomas by polymerase chain reaction in formalinfixed, paraffin-embeded tissue specimens.Jpn J Cancer Res,1993,84:37.
6，陈 燕,王辨明.bcl-2基因与淋巴瘤和白血病.国外医学输血及血液学分册,19 94,17(5):260.
, 百拇医药
7，冯文莉,黄宗干.B细胞非霍奇金淋巴瘤bcl-2/JH融合基因的检测及临床意义. 中华血液学杂志,1997,18(6):361.
8，邓家栋主编.临床血液学.上海:上海科学技术出版社,1995.702.
9，Adachi M,Tefferi A,Greipp PR,et al.Preferential linkage of bcl-2 to immunoglobulin light chain gene in chronic lymphocytic leukemia.J Exp Med,1990, 171:559.
10，Raghoebier S,Van Krieken JH,Kluin-Nelemans JCN,et al.Oncogene rearr angement in chronic B-cell leukemia.Blood ,1991,77:1 560.
, 百拇医药
11，LeBrun DP,Ngan BY,Weiss LM,et al.The bcl-2 oncogene in Hodgkin's di sease arising in the setting of follicular non-Hodgkin's lymphoma.Blood,1994,8 3:223.
12，Hill ME,Maclennan KA,Cunningham DC,et al.Prognostic significance of b cl-2 expression and bcl-2 major breakpoint region rearrangement in diffuse lar ge cell non-Hodgkin's lymphoma:A British national cell non-Hodgkin's lymphoma: A British national lymphoma investigation study.Blood,1996,88:1 046.
13，Gribben JG,Neuberg D,Freedman AS,et al.Detection by polymerase chain reaction of residual cells with the bcl-2 translocation is associated with inc reased risk of relapse after autologous bone marrow transplantation for B-cel l lymphoma.Blood,1993,81:3 449.
收稿日期：1998-10-09, 百拇医药
单位：广西医科大学第一附属医院血液科 南宁 530021
关键词：bcl-2基因；基因重排；淋巴细胞性白血病；淋巴瘤
广西医科大学学报000112
摘要 目的：探讨bcl-2/IgH基因重排的临床意义。方法：应用多聚酶链反应技术检测9种恶性淋巴瘤细胞系和不同类型 淋巴系统恶性肿瘤临床标本中bcl-2/IgH基因重排情况。结果：2种细胞系，1例慢性淋巴细胞白血病及6例非霍奇金淋巴瘤( NHL)有bcl-2/IgH基因重排，其中，36.4%滤泡型NHL及18.2%弥漫性NHL有重排。bcl-2 基因断裂点绝大多数(8/9)位于主要断裂区(MBR)。结论：bcl-2/IgH基因重排是恶性淋巴瘤一种常见的染色体异常， 主要与低度恶性NHL有关，重排的检测有助于淋巴瘤发生、演变机制的研究及对预后的评估 。
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中国图书资料分类法分类号 R733.3
STUDY ON bcl-2 GENE REARRANGEMENT IN LYMPHOID MALIGNANCIES
Xiang Zhifu,Li Huiyu,Chen Yan
(Department of Hematology,First Affiliate d Hospital,Guangxi Medical University,Nanning,530021 China)
Abstract Objective:To elucidate the clinical significance of bcl-2/IgH gene rearrangement in varied lymphoid malignancies.Methods:Using polymerase chain reaction technique,two patterns of bcl-2/IgH gene rearrangement were detected in 9 strains of malignant lympho ma cell lines and clinical specimens of varied lymphoid malignancies.Results:2 kinds of lymphoma cell lines,1 of 11 cases of chroni c lymphocytic leukemia and 6 of 29 cases of non-Hodgkin's lymphomas(NHL) demons trated bcl-2 gene rearrangement.Most breakpoints of bcl-2 gene occurred in ma jor breakpoint region(MBR).In NHL,36.4% follicular NHL and 18.2% diffuse NHL revealed bcl-2 rearrangement.Conclusion:bcl-2/IgH gene rearrangement is most common geneti c abnormality in lymphoma,especially in low-grade follicular NHL.Detection of bcl-2 rearrangement may be helpful to understand the molecular mechanism of pa thogenesis and development of lymphoma and to evaluate the prognosis.
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Key words bcl-2 gene;gene rearrangement;lymphocytic leukemi a;lymphoma
bcl-2基因是著名的凋亡抑制基因，过度表达和(或)重排与恶性血液病的发生、发展有 十分密切的关系[1]，特别是在恶性淋巴瘤中，bcl-2基因重排是淋巴瘤发生的分 子生物学病因[2]，我们应用多聚酶链反应对9种淋巴瘤细胞系和不同类型的淋巴系 统恶性肿瘤的临床标本进行bcl-2基因重排的检测，以探讨bcl-2基因重排的临床意义。
1 材料与方法
1.1研究对象
1.1.1 细胞系：9种恶性淋巴瘤细胞系分别为 Su-DHL-1，Su-DHL-4， Su-DHL-6,S u-DHL-8,Su-DHL-9，Su-DHL-10,Daudi,8392,SB,由美国国立癌症研究所提供。均为B 细胞性非霍奇金淋巴瘤细胞。
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1.1.2 淋巴细胞性白血病:27例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,男15例,女12例,年龄18～ 59岁;11例慢性淋巴细胞白血病(CLL),男10例,女1例,年龄56～78岁。所有病例均经临床、骨 髓细胞学、细胞化学及免疫分型确诊。
1.1.3 非霍奇金淋巴瘤(NHL):29例NHL石蜡包埋标本为门诊及住院患者淋巴结活检存档 标本，男21例，女8例，经临床、组织病理学和免疫分型确诊并按NHL国际工作组分类标准分 型，其中滤泡型NHL 11例，弥漫型NHL18例；免疫学分型B细胞性22例，T细胞性7例。此外尚 有9例霍奇金病淋巴结活检石蜡标本，其中淋巴细胞为主型5例，结节硬化型和混合细胞型各 2例。
1.2 DNA抽提
1.2.1 细胞系：由本室常规传代培养后，收集细胞，用PBS洗涤两次，然后用常规酚/氯 仿/异戊醇法抽提基因组DNA。
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1.2.2 ALL和CLL标本：骨髓穿刺抽取骨髓2 ml，肝素抗凝，用Ficoll-Hypaque淋巴细胞 分离液分离骨髓单个核细胞，PBS洗涤2次，然后用常规酚/氯仿/异戊醇法抽提基因组DNA。
1.2.3 石蜡包埋组织DNA抽取：采用水浴法抽提基因DNA，具体步骤如下:①切取5 μm厚 石蜡包埋组织4～6块置于1.5 ml EP管中，加入1 ml STE缓冲液(100 mmol/L NaCl,10 mmol /L Tris.HCl,1 mmol/L EDTA),72℃水浴10 min，插入吸水滤纸条，将浮蜡及STE吸净，如 此重复多次，直到石蜡除净;②将组织研磨成悬液，加入1 ml消化液，37℃水浴过夜。消化 液：15 mmol/L柠檬酸钠.H2O，150 mmol/L NaCl，1%SDS,100 mg/L蛋白酶K；③用等体 积酚和氯仿：异戊醇(24∶1)各抽提一次，加入1/10体积3 mol/L醋酸钠及2倍体积无水冷乙 醇沉淀基因组DNA，以适量TE溶解DNA,-20℃保存备用。
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1.3 bcl-2/IgH基因重排检测
引物序列，PCR扩增方法及产物鉴定参见我们以前报道的方法[3]。
2 结 果
2.1 细胞系：9种恶性淋巴瘤细胞系中，Su-DHL-4和Su-DHL-6扩增出约230bp的产物(图1)，提示有重排发生，bcl-2基因断裂点在MBR,余下7种细胞系未检出此种重排；所有细胞系未检出bcl-2(MCR)/JH重排。
图1 细胞系和慢淋患者PCR扩增结果
M:marker;A:Su-DHL-4;B:Su-DHL-6;C.CLL
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2.2 急性淋巴细胞白血病(ALL):27例ALL均未检出bcl-2 (MBR)/JH重排及bcl-2(MCR)/ JH重排。
2.3 慢性淋巴细胞白血病(CLL)：11例CLL中仅1例有bcl-2(MBR)/JH重排;所有病例均 未检出bcl-2(MCR)/JH重排(图1)。
2.4 霍奇金病(HD)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)：9例HD中未检出bcl-2/JH重排。29例NHL中 共检出6例有bcl-2/JH基因重排,全部发生于B细胞性NHL中;其中11例滤泡型NHL中检出4例 重排,重排发生率为36.4%,断裂点在MBR者3例(75%),在MCR者1例(25%);11例弥漫型NHL中共 检出2例有bcl-2/JH基因重排,重排率18.2%,均发生于MBR(图2);各组亚型中的重排情况 见表1。
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图2 NHL患者PCR扩增结果
M:marker,1～5泳道为MBR/JH重排,第6泳道为MCR/JH重排
表1 29例NHL bcl-2基因重排 分 型
n
bcl-2/IgH基因重排
MBR
MCR
滤泡型淋巴瘤
小裂细胞型
6
2
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1
混合细胞型
2
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0
大裂细胞型
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弥漫型B细胞NHL
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弥漫型T细胞NHL
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bcl-2基因重排是恶性淋巴病最常见的染色体异常，重排时,90%以上的bcl-2基因断 裂发生于两个热点区:主要断裂区(MBR,占60%～70%)和次要断裂簇区(MCR,占20%～30%)，这两个断裂位点均相对恒定，部分甚至局限于3bp的范围内；IgH基因断裂则恒定地发生于 连接区(JH)[4]；因此bcl-2/IgH基因重排非常适合于用PCR方法进行检测。
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我们应用PCR方法，在9种恶性淋巴瘤的胞系，11例CLL和29例NHL中共检出9例有bcl-2/ IgH基因重排，其中8例bcl-2基因在MBR内断裂，仅1例断裂位点在MCR区内，说明bcl-2基 因重排时，bcl-2基因断裂大部分发生在MBR区内。
我们在NHL中发现的6例重排全部在22例B细胞性NHL中检出，其中滤泡型淋巴瘤占36.4 %(4/11)，弥漫型NHL占18.2%(2/11)，7例T细胞性NHL未检出重排，提示bcl-2基因重排 主要与低度恶性的滤泡型淋巴瘤有关,与高度恶性的NHL和T细胞性NHL无关[4]。在 滤泡型NHL的各亚型中,bcl-2基因重排主要发生于小裂细胞性(3例)和混合细胞性(1例)NHL 中，大裂细胞性中未检出bcl-2基因重排。Mitani等[5]研究了41例滤泡型NHL，其 中36.8%的小裂细胞性NHL和54.5%的混合细胞性NHL中检测出bcl-2基因重排，二者差异 有显著性，而滤泡型大细胞性NHL中未检出重排，作者认为bcl-2基因重排在滤泡型大细胞 性NHL的发生中所起作用较小，我们的结果与其略有差异，可能与病例选择有关。
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NHL中bcl-2基因重排的发生率各国报道不尽一致,40%～89%的滤泡型NHL，10%～45 %的弥漫型NHL有bcl-2基因重排，其中以欧美国家发生率高,亚洲国家发生率低[6] 。国内研究文献较少，冯文莉等[7]报道71.4%的滤泡型NHL有bcl-2基因重排 ，我们的研究仅36.4%的滤泡型NHL有重排,弥漫型NHL中18.2%有重排，与国外文献报道 相一致。中国人NHLbcl-2基因重排的实际发生率为多少尚需更多的研究报告。
95%以上的CLL为B细胞源性，表现为处于G0期的成熟CD5+CD19+B细胞缓 慢升高。根据淋 巴瘤国际协作组的新分类方法，CLL属于低度恶性淋巴瘤，但国内外临床学家仍把CLL与NHL 区分开。CLL许多临床和生物学特性与CLL相似，NHL在侵犯骨髓和外周血时也诊断为CLL [8]，因此CLL与NHL鉴别有时非常困难。CLL bcl-2基因重排发生率较低(约10%)，重 排方式与NHL不同,bcl-2基因在5'侧区断裂后与免疫球蛋白轻链基因以头头(head-to-hea d)方式相连[9]，NHL中bcl-2基因在3'端MBR或MCR区断裂后与IgH基因以头尾(head -to-tail)方式相连，因此bcl-2基因重排为CLL和NHL鉴别提供了分子基础，Raghoebier 等[10]也认为具有bcl-2/IgH基因重排的CD5-CLL应为NHL白血病期，而不是 真正 的CLL,我们报告的这例bcl-2(MBR)/IgH阳性CLL是在体检时偶然发现的，初诊时仅浅表淋巴 结肿大(双侧颈部)，但免疫分型CD5-CD19+,实际上为NHL白血病期。
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我们在ALL和HD患者中未检测到bcl-2基因重排，国内外文献亦未见ALL有bcl-2/IgH重 排的报告。在HD患者,Southern blot不能检测到bcl-2基因重排，用敏感的PCR方法则发现 少数HD也有bcl-2/IgH基因重排，但对bcl-2基因重排在HD发生发展中的作用持否定态度， 部分是由于NHL转化为HD的结果[11]。
最初文献报道具有t(14;18)(q32;q21)的NHL患者对化疗反应差，容易复发，无病生存期 短，但随后对大样本的病例进行研究，t(14;18)重排并没有明显的预后意义，原因可能是在 无重排的病例也常有bcl-2基因高表达，影响了结果判断，若以bcl-2是否高表达进行分组 ，结果则完全不同，低表达组无病生存期和总生存期明显较高表达组长[12]，而且 对进行ABMT的NHL进行监测发现，PCR阴性者复发率低，无病生存期和总生存期长[13] ，因此作为一种抗凋亡基因，bcl-2基因在重排后引起的表达失调有显著的预后意义。
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参 考 文 献
1，Strasser A,Huang DC,Vaux DL.The role of the bcl-2/ced-9 gene family in cancer and general implications of detects in cell death control for tumouri genesis and resistance to chemotherapy.Biochem Biophys Acta,1997,1 333:151.
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收稿日期：1998-10-09, 百拇医药