直肠癌患者手术前后外周血白细胞介素2活性及淋巴细胞转化水平 的变化
作者：王志伟 吴印爱 刘献棠 蒋邦好 谢尚奎 王晓光
单位：王志伟 吴印爱 刘献棠 蒋邦好 谢尚奎(中国人民解放军广州军区第157中心医院 普通外科)；王晓光(肿瘤科 510510)
关键词：直肠癌；白细胞介素2；淋巴细胞转化试验
广东医学000114
【摘要】 目的 通过测定直肠癌患者外科切除术前后外周血白细 胞介素2(IL-2)活性及淋巴细胞刺激指数(LSI)的变化，了解患者机体免疫功能。方法 选取直肠癌患者20例，分别在术前及术后7，14，21，28 d抽取外周血测定IL-2活性及LSI 变化 。结果 直肠癌患者外周血IL-2及LSI均显著降低，术后7 d进一步降低， 至术后 14 d逐渐恢复。结论 ①直肠癌患者机体免疫功能下降；②外科根治切除术 可使机体在术后短期内免疫功能进一步降低，但随着时间延长可显示出促进恢复作用。
, 百拇医药
Peripheral blood interleukin-2 activity and lymphocyte transform ation in patients with rectum cancer before and after operation
Wang Zhiwei Wu Yinai Liu Xiantang et al
( Department of General Surgery, the 157th Hospital o f PLA, Guangzhou 510510)
【Abstract】 Objective To evaluate the immune function of pa tients with rectum cancer who underwent surgical resection.Methods Twenty patients with rectum cancer were selected. Peripheral blood was dra wn before resection and 7,14，21 and 28 days after r esection. Interleukin-2 (IL-2) activity and lymphocyte stimulation index (LSI) w ere measured. Results Both IL-2 and LSI were significantly de cr eased (P<0.01) in patients with rectum cancer. After operation, IL-2 acti vity and LSI were further decreased on day 7, but began to increase after 14 day s, and exceeded the preoperative levels after 28 days. Conclusion ①Immune function is impaired in patients with rect um cancer.②Surgical resection can improve immune function of these patients, al though temporal exace rhation can occur.
, 百拇医药
【Key words】 Rectum cancer Interleukin-2 Lymphocyte tran sformation test
肿瘤的发生及发展与机体的免疫功能密切相关。白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)和淋巴细胞转化率(lymphocyte transformation rate, LTR)是反映机体 免疫状态的重要指标。本实验通过观察直肠癌患者外周血IL-2及淋巴细胞刺激指数(lympho cyte stimulation index, LSI)的变化，以探讨直肠癌根治 切除术对患者免疫功能的影响。
1 资料与方法
1.1 标本与取材 20例本院获病理确诊的直肠癌患者，男12例，女8例； TNM Ⅱ期9例，Ⅲ期11例；术前及术后4周内未行化疗、放疗、免疫等治疗；均行根治切除术。 分别于术前及术后7，14，21，28 d无菌抽取静脉血12 ml。正常对照为健康献血员(20 例)。
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1.2 方法
1.2.1 IL-2活性测定[1] 正常C57BL系小鼠，无菌取脾 ，制成2 .0×106/ml单个细胞悬液，加入Con A使最终质量浓度为3 μg/ml。置入CO2孵箱培养 4 d。用10 NBS-1640营养液制成1.0×106/ml的细胞悬液。IL-2标准品稀释成100 u/ml。 将待测样品与标准品在96孔板内倍比稀释，每孔加入所制成的1.0×106/ml脾细胞悬液0 .1 ml。放在37?℃，CO2孵箱培养24 h。培养结束前6 h每孔加入3H-TdR 0.2 μCi。 培养结束后用多头细胞收获器收获培养物，用液闪测定器测定放射性。
1.2.2 LSI测定 取肝素抗凝血10 ml，在无菌条件下用淋巴细胞分离液进 行 淋巴细胞分离，最后用Hanks配制成1.0×106/ml悬液，经ConA 3 μg/ml(终质量浓度) 刺激 的淋巴细胞在37?℃ RPMI 1640培养液培养72 h，加入3H-TdR 4 μCi。培养结束，放液闪 测 定器测定放射性。用刺激指数(stimulation index, SI)表示淋巴细胞对刺激的反应程度。
, 百拇医药
1.3 统计学方法 所有数据均以
±s表示，利用t检验比 较各组间差别。
2 结果
2.1 术前直肠癌患者IL-2活性及LSI变化 见表1。IL-2及LSI水平均显著下 降。
表1 术前直肠癌患者IL-2活性及LSI变化 组别
例数
IL-2(u/ml)
LSI
对照组
20
, 百拇医药 81.73±18.24
8.02 ±2.63
患者组
20
61.21±10.55*
5.32±3.36*
*与对照组比较P<0.01
2.2 手术前后直肠癌患者IL-2及LSI变化 术后7 d IL-2与LSI均有显著性 降低，术后14 d始逐渐上升，至术后28 d恢复至高于术前水平，见表2。表2 手术前后直肠癌患者IL-2及LSI变化
?IL-2(u/ml)
, http://www.100md.com
?LSI
术前
61.21±10.55
5.32±3.36
术
后
7 d
40.24±7.81**
4.08±1.52**
14 d
46.33±12.74**
, http://www.100md.com 4.76±9.48*
21 d
58.79±13.85
5.13±1.87
28 d
76.27±16.76**
6.68±2.83*
与术前比较*P<0.05， **P<0.013 讨论
IL-2是外周血T淋巴细胞分泌的主要淋巴因子，在免疫应答中能活化细胞毒性T细胞和B细胞、激活自然杀伤细胞，能溶解多种人体肿瘤细胞，其中有些并不引起T细胞的免疫效应 ，因此在机体免疫抗肿瘤效应中有重要作用。淋巴细胞转化率直接反映了淋巴细胞对刺激的 反应程度，根据LSI可判断机体的细胞免疫功能。故对IL-2和LSI进行测定能有效地反映机体 的免疫状态。
, http://www.100md.com
肿瘤的发生与发展可抑制机体免疫反应[2]。而造成机体免疫功能低下的主要原因 是由于肿瘤细胞产生或分泌大量的免疫抑制因子。肿瘤患者血清中含有大量的免疫抑制因子 ，且其抑制活性无癌瘤特异性，免疫抑制因子能广泛地抑制杀伤细胞活性，诱导Ts细胞产生 ，阻止淋巴细胞的形成和成熟。本实验中，术前直肠癌患者IL-2活性及LSI水平均低于对照 组，表明患者免疫功能出现明显障碍。
研究表明，手术及麻醉均能引起机体的免疫功能紊乱，出现免疫功能抑制[3]。有 报道严重创伤后IL-2生成减少是导致机体细胞免疫机能低下的重要原因。在本实验中，术后 7 d患者IL-2活性降至最低，可能也与麻醉及手术创伤有关。至术后4周，患者外周血IL-2活 性及LSI恢复并超过术前水平，提示机体外科切除癌肿后免疫力可得到提高。术后化疗是提 高恶性肿瘤患者远期存活率的重要途径。由于化疗药物能影响机体的免疫功能，因此术后患 者第1次化疗应等到术后4周进行，以免细胞监视脱逸导致肿瘤早期复发或转移。
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总之，动态观察患者手术前后IL-2及LSI水平，有助于了解患者全身的免疫功能状态，有助 于术后首次化疗时机的选择。
参考文献
1，丁桂凤，席宏丽，邓玉兰，等.用活化的小鼠脾细胞测定IL-2.上海免疫学杂志 ，1988，8：64
2，刘剑仑，秦伟新，韦长元，等.大肠癌病人手术前后细胞免疫功能的动态研究. 中华实验外科杂志，1995，12：71
3，梁华平，王正国，田丰群，等.白介素2对创伤小鼠细胞免疫功能及感染后死亡 率的影响.中华实验外科杂志，1995，12：292
(收稿日期：1999-02-01), 百拇医药
单位：王志伟 吴印爱 刘献棠 蒋邦好 谢尚奎(中国人民解放军广州军区第157中心医院 普通外科)；王晓光(肿瘤科 510510)
关键词：直肠癌；白细胞介素2；淋巴细胞转化试验
广东医学000114
【摘要】 目的 通过测定直肠癌患者外科切除术前后外周血白细 胞介素2(IL-2)活性及淋巴细胞刺激指数(LSI)的变化，了解患者机体免疫功能。方法 选取直肠癌患者20例，分别在术前及术后7，14，21，28 d抽取外周血测定IL-2活性及LSI 变化 。结果 直肠癌患者外周血IL-2及LSI均显著降低，术后7 d进一步降低， 至术后 14 d逐渐恢复。结论 ①直肠癌患者机体免疫功能下降；②外科根治切除术 可使机体在术后短期内免疫功能进一步降低，但随着时间延长可显示出促进恢复作用。
, 百拇医药
Peripheral blood interleukin-2 activity and lymphocyte transform ation in patients with rectum cancer before and after operation
Wang Zhiwei Wu Yinai Liu Xiantang et al
( Department of General Surgery, the 157th Hospital o f PLA, Guangzhou 510510)
【Abstract】 Objective To evaluate the immune function of pa tients with rectum cancer who underwent surgical resection.Methods Twenty patients with rectum cancer were selected. Peripheral blood was dra wn before resection and 7,14，21 and 28 days after r esection. Interleukin-2 (IL-2) activity and lymphocyte stimulation index (LSI) w ere measured. Results Both IL-2 and LSI were significantly de cr eased (P<0.01) in patients with rectum cancer. After operation, IL-2 acti vity and LSI were further decreased on day 7, but began to increase after 14 day s, and exceeded the preoperative levels after 28 days. Conclusion ①Immune function is impaired in patients with rect um cancer.②Surgical resection can improve immune function of these patients, al though temporal exace rhation can occur.
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【Key words】 Rectum cancer Interleukin-2 Lymphocyte tran sformation test
肿瘤的发生及发展与机体的免疫功能密切相关。白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)和淋巴细胞转化率(lymphocyte transformation rate, LTR)是反映机体 免疫状态的重要指标。本实验通过观察直肠癌患者外周血IL-2及淋巴细胞刺激指数(lympho cyte stimulation index, LSI)的变化，以探讨直肠癌根治 切除术对患者免疫功能的影响。
1 资料与方法
1.1 标本与取材 20例本院获病理确诊的直肠癌患者，男12例，女8例； TNM Ⅱ期9例，Ⅲ期11例；术前及术后4周内未行化疗、放疗、免疫等治疗；均行根治切除术。 分别于术前及术后7，14，21，28 d无菌抽取静脉血12 ml。正常对照为健康献血员(20 例)。
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1.2 方法
1.2.1 IL-2活性测定[1] 正常C57BL系小鼠，无菌取脾 ，制成2 .0×106/ml单个细胞悬液，加入Con A使最终质量浓度为3 μg/ml。置入CO2孵箱培养 4 d。用10 NBS-1640营养液制成1.0×106/ml的细胞悬液。IL-2标准品稀释成100 u/ml。 将待测样品与标准品在96孔板内倍比稀释，每孔加入所制成的1.0×106/ml脾细胞悬液0 .1 ml。放在37?℃，CO2孵箱培养24 h。培养结束前6 h每孔加入3H-TdR 0.2 μCi。 培养结束后用多头细胞收获器收获培养物，用液闪测定器测定放射性。
1.2.2 LSI测定 取肝素抗凝血10 ml，在无菌条件下用淋巴细胞分离液进 行 淋巴细胞分离，最后用Hanks配制成1.0×106/ml悬液，经ConA 3 μg/ml(终质量浓度) 刺激 的淋巴细胞在37?℃ RPMI 1640培养液培养72 h，加入3H-TdR 4 μCi。培养结束，放液闪 测 定器测定放射性。用刺激指数(stimulation index, SI)表示淋巴细胞对刺激的反应程度。
, 百拇医药
1.3 统计学方法 所有数据均以
±s表示，利用t检验比 较各组间差别。2 结果
2.1 术前直肠癌患者IL-2活性及LSI变化 见表1。IL-2及LSI水平均显著下 降。
表1 术前直肠癌患者IL-2活性及LSI变化 组别
例数
IL-2(u/ml)
LSI
对照组
20
, 百拇医药 81.73±18.24
8.02 ±2.63
患者组
20
61.21±10.55*
5.32±3.36*
*与对照组比较P<0.01
2.2 手术前后直肠癌患者IL-2及LSI变化 术后7 d IL-2与LSI均有显著性 降低，术后14 d始逐渐上升，至术后28 d恢复至高于术前水平，见表2。表2 手术前后直肠癌患者IL-2及LSI变化
?IL-2(u/ml)
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?LSI
术前
61.21±10.55
5.32±3.36
术
后
7 d
40.24±7.81**
4.08±1.52**
14 d
46.33±12.74**
, http://www.100md.com 4.76±9.48*
21 d
58.79±13.85
5.13±1.87
28 d
76.27±16.76**
6.68±2.83*
与术前比较*P<0.05， **P<0.013 讨论
IL-2是外周血T淋巴细胞分泌的主要淋巴因子，在免疫应答中能活化细胞毒性T细胞和B细胞、激活自然杀伤细胞，能溶解多种人体肿瘤细胞，其中有些并不引起T细胞的免疫效应 ，因此在机体免疫抗肿瘤效应中有重要作用。淋巴细胞转化率直接反映了淋巴细胞对刺激的 反应程度，根据LSI可判断机体的细胞免疫功能。故对IL-2和LSI进行测定能有效地反映机体 的免疫状态。
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肿瘤的发生与发展可抑制机体免疫反应[2]。而造成机体免疫功能低下的主要原因 是由于肿瘤细胞产生或分泌大量的免疫抑制因子。肿瘤患者血清中含有大量的免疫抑制因子 ，且其抑制活性无癌瘤特异性，免疫抑制因子能广泛地抑制杀伤细胞活性，诱导Ts细胞产生 ，阻止淋巴细胞的形成和成熟。本实验中，术前直肠癌患者IL-2活性及LSI水平均低于对照 组，表明患者免疫功能出现明显障碍。
研究表明，手术及麻醉均能引起机体的免疫功能紊乱，出现免疫功能抑制[3]。有 报道严重创伤后IL-2生成减少是导致机体细胞免疫机能低下的重要原因。在本实验中，术后 7 d患者IL-2活性降至最低，可能也与麻醉及手术创伤有关。至术后4周，患者外周血IL-2活 性及LSI恢复并超过术前水平，提示机体外科切除癌肿后免疫力可得到提高。术后化疗是提 高恶性肿瘤患者远期存活率的重要途径。由于化疗药物能影响机体的免疫功能，因此术后患 者第1次化疗应等到术后4周进行，以免细胞监视脱逸导致肿瘤早期复发或转移。
, http://www.100md.com
总之，动态观察患者手术前后IL-2及LSI水平，有助于了解患者全身的免疫功能状态，有助 于术后首次化疗时机的选择。
参考文献
1，丁桂凤，席宏丽，邓玉兰，等.用活化的小鼠脾细胞测定IL-2.上海免疫学杂志 ，1988，8：64
2，刘剑仑，秦伟新，韦长元，等.大肠癌病人手术前后细胞免疫功能的动态研究. 中华实验外科杂志，1995，12：71
3，梁华平，王正国，田丰群，等.白介素2对创伤小鼠细胞免疫功能及感染后死亡 率的影响.中华实验外科杂志，1995，12：292
(收稿日期：1999-02-01), 百拇医药