烟酰胺对大鼠急性心肌缺血的保护作用
作者：张素荣 关慧灵 刘金铎
单位：张素荣(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)；关慧灵(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)；刘金铎(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)
关键词：
中国急救医学000112 近年来KATP通道开放剂在国外已得到迅速发展，在动物实验中发现KATP通道开放剂可以改善心肌缺血后的功能，并可有效地缩小心肌梗死面积，研究的药物主要是Cromakalim和Pinacidil。烟酰胺类为最初确诊的KATP通道开放剂，目前国内文献研究甚少，为研究烟酰胺对急性缺血心肌的保护作用，录找治疗缺血性心脏病的有效药物。本实验通过用烟酰胺治疗大鼠急性心肌缺血的疗效观察，证实在急性心肌缺血的状态下，烟酰胺具有降低心肌酶学保护心肌细胞的作用。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 动物分组 Wistar大鼠30只，雌雄不限，体重200～300 g，随机分为3组：A组10只(对照组)，B组10只(生理盐水组)，C组10只(烟酰胺治疗组)。
1.2 模型复制 所有实验动物以3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，A组腹腔注射生理盐水1.5 ml，B组用异丙肾上腺素850 μg/kg生理盐水稀释至1.5 ml腹腔注射，C组异内肾上腺素(剂量同上)腹腔注射，并肌肉注射烟酰胺50 mg/kg。将复制的动物模型分别置于笼中，24小时后取材。
1.3 标本采集 将动物麻醉后固定于实验台上，暴露右侧颈总动脉，向动脉内插管取血2 ml，测定CPK、LDH。然后开胸取出心脏，用盐水清洗后放于固定液中。取心尖部心肌经固定脱水和包埋切成1 μm厚的组织切片，HE染色后进行光学显微镜检查。
1.4 检测方法 盐酸异丙肾上腺素为上海禾丰制药有限公司生产，烟酰胺注射液为上海第一制药厂生产。CPK和LDH试剂盒为北京生物工程高技术公司生产，瑞士产COBASMIRA罗氏随机式多功能自动生化分析仪测CPK、LDH。心肌组织学改变由专一病理学主任医师观察与分类。
, 百拇医药
1.5 组织学改变程度与分类标准 Ⅰ度：无组织学改变；Ⅱ度：心肌间质血管扩张、充血无明显心肌坏死；Ⅲ度：心肌细胞出现点状坏死；Ⅳ度：心肌细胞出现片状坏死，心肌间质血管扩张充血伴有少量淋巴细胞浸润。
1.6 统计学处理 CPK、LDH水平以
±s表示，以t检验作统计处理。组织学改变则分别统计各组实验动物的组织学改变程度及例数的对比。
2 结果
2.1 3组实验动物血清CPK、LDH水平的改变和统计检验见表1。
表1 烟酰胺对大鼠心肌缺血后心肌酶学影响(U，±s)
, 百拇医药 CPK
LDH
A组
n=10
1070.28±382.74
628.71±325.18
B组
n=10
2528.14±761.58
1590.58±358.05
C组
n=10
, 百拇医药
1683.71±503.01
1087.78±452.58
A与B比较，P<0.05；B与C比较，P<0.05；A与C比较，P>0.05
表1显示A与B比较(P<0.05)，说明异丙肾上腺素850 μg/kg可复制大鼠心肌缺血模型。B与C比较(P<0.05)，显示烟酰胺治疗组对缺血心肌酶学有降低作用。A与C比较(P>0.05)，也表明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。
2.2 3组大鼠的心肌组织学改变见表2。
表2 烟酰胺对大鼠心肌缺血的组织学影响 组 别
心肌组织学改变
Ⅰ度
, 百拇医药
Ⅱ度
Ⅲ度
Ⅳ度
A组(n=10)
10
0
0
0
B组(n=10)
0
0
4
6
C组(n=10)
, 百拇医药
3
5
2
-
表2结果显示对照组10只大鼠的心肌均无组织学改变。生理盐水组10只大鼠的组织学改变，Ⅲ度4只，Ⅳ度6只。烟酰胺治疗组10只大鼠组织学改变Ⅰ度3只，Ⅱ度5只，Ⅲ度2只。
3 讨论
目前已了解到的KATP通道开放剂包括以下四类：①苯丙吡喃类；②青呱类；③烟酰胺类；④硫化甲酰胺类[2]。烟酰胺类为最初确认的KATP通道开放剂，他不仅具有KATP通道开放作用，同时还具有硝酸盐类作用。KATP通道开放的结果是K离子外流增加，加速心肌细胞的复极化，因此可缩短心肌动作电位时程，使能量消耗减少，对缺血心肌达保护作用。
, 百拇医药
本实验用异丙肾上腺素850 μg/kg复制心肌缺血模型和对照组比较，血清CPK、LDH明显升高(P<0.05)并有明显的组织学改变，说明异丙肾上腺素850 μg/kg可复制可靠的心肌缺血模型。实验结果显示心肌缺血模型组与对照组相比血清酶CPK、LDH明显升高，烟酰胺治疗组与盐水组相比血清酶明显降低(P<0.05)，说明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。烟酰胺治疗组的心肌组织学改变受损程度较轻，更表明了烟酰胺的治疗作用。
有实验表明在心室肌细胞上存在KATP通道，KATP通道开放剂Pinacidil和Nocorandil能够缩小心肌梗死面积；而KATP通道阻滞剂格列苯脲(Glibenclamide)可消除这些KATP通道开放的心肌保护作用[4]。说明烟酰胺对缺血心肌的保护作用主要是通过KATP通道开放而实现的，烟酰胺还可以减少心肌酶CPK、LDH的释放，酶学峰值可以判断心肌受损程度和预后。
, 百拇医药
烟酰胺既往主要用于治疗糙皮病及烟酸缺乏症，80年代有文献报道治疗缓慢性心律失常，目前在国内尚未见用于心肌缺血治疗的文献报导。本实验结果显示，KATP通道开放剂—烟酰胺可作为临床治疗心肌缺血的良好药物，可望能达到预防和减轻心肌缺血的症状，减少其并发症，加速心肌缺血的恢复，增进缺血性心脏病的远期疗效，进一步降低其发病率及死亡率。有待同道者对KATP通道开放剂在缺血性心脏病治疗学方面深入研究。■
基金来源：河南省教委资助课题(No.38006)
参考文献：
[1]肖欣荣，陈文彬.钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压.中华内科杂志，1996，35(6)：416.
[2]于严，苏肇伉，丁文祥.氧自由基清除剂对缺血犬心肌再灌注损伤的保护作用.中华胸心血管外科杂志，1995；11(1)：43.
, 百拇医药
[3]陈大年节译.K+通道开放：心血管医学中一种新药原理.心血管病学进展，1997，18(4)：245.
[4]Yao I Gross GT. Acomparison of adencsincinduced cardioprotection and ischemic preconditoning in dogs. Efficacy, time course, and role of KATP chamels. Clrculation, 1994, 89(3):1229.
收稿日期：1998-07-24
修回日期：1999-05-20, http://www.100md.com
单位：张素荣(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)；关慧灵(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)；刘金铎(新乡医学院一附院心内科，河南 卫辉 453100)
关键词：
中国急救医学000112 近年来KATP通道开放剂在国外已得到迅速发展，在动物实验中发现KATP通道开放剂可以改善心肌缺血后的功能，并可有效地缩小心肌梗死面积，研究的药物主要是Cromakalim和Pinacidil。烟酰胺类为最初确诊的KATP通道开放剂，目前国内文献研究甚少，为研究烟酰胺对急性缺血心肌的保护作用，录找治疗缺血性心脏病的有效药物。本实验通过用烟酰胺治疗大鼠急性心肌缺血的疗效观察，证实在急性心肌缺血的状态下，烟酰胺具有降低心肌酶学保护心肌细胞的作用。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 动物分组 Wistar大鼠30只，雌雄不限，体重200～300 g，随机分为3组：A组10只(对照组)，B组10只(生理盐水组)，C组10只(烟酰胺治疗组)。
1.2 模型复制 所有实验动物以3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，A组腹腔注射生理盐水1.5 ml，B组用异丙肾上腺素850 μg/kg生理盐水稀释至1.5 ml腹腔注射，C组异内肾上腺素(剂量同上)腹腔注射，并肌肉注射烟酰胺50 mg/kg。将复制的动物模型分别置于笼中，24小时后取材。
1.3 标本采集 将动物麻醉后固定于实验台上，暴露右侧颈总动脉，向动脉内插管取血2 ml，测定CPK、LDH。然后开胸取出心脏，用盐水清洗后放于固定液中。取心尖部心肌经固定脱水和包埋切成1 μm厚的组织切片，HE染色后进行光学显微镜检查。
1.4 检测方法 盐酸异丙肾上腺素为上海禾丰制药有限公司生产，烟酰胺注射液为上海第一制药厂生产。CPK和LDH试剂盒为北京生物工程高技术公司生产，瑞士产COBASMIRA罗氏随机式多功能自动生化分析仪测CPK、LDH。心肌组织学改变由专一病理学主任医师观察与分类。
, 百拇医药
1.5 组织学改变程度与分类标准 Ⅰ度：无组织学改变；Ⅱ度：心肌间质血管扩张、充血无明显心肌坏死；Ⅲ度：心肌细胞出现点状坏死；Ⅳ度：心肌细胞出现片状坏死，心肌间质血管扩张充血伴有少量淋巴细胞浸润。
1.6 统计学处理 CPK、LDH水平以
±s表示，以t检验作统计处理。组织学改变则分别统计各组实验动物的组织学改变程度及例数的对比。2 结果
2.1 3组实验动物血清CPK、LDH水平的改变和统计检验见表1。
表1 烟酰胺对大鼠心肌缺血后心肌酶学影响(U，
±s), 百拇医药 CPK
LDH
A组
n=10
1070.28±382.74
628.71±325.18
B组
n=10
2528.14±761.58
1590.58±358.05
C组
n=10
, 百拇医药
1683.71±503.01
1087.78±452.58
A与B比较，P<0.05；B与C比较，P<0.05；A与C比较，P>0.05
表1显示A与B比较(P<0.05)，说明异丙肾上腺素850 μg/kg可复制大鼠心肌缺血模型。B与C比较(P<0.05)，显示烟酰胺治疗组对缺血心肌酶学有降低作用。A与C比较(P>0.05)，也表明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。
2.2 3组大鼠的心肌组织学改变见表2。
表2 烟酰胺对大鼠心肌缺血的组织学影响 组 别
心肌组织学改变
Ⅰ度
, 百拇医药
Ⅱ度
Ⅲ度
Ⅳ度
A组(n=10)
10
0
0
0
B组(n=10)
0
0
4
6
C组(n=10)
, 百拇医药
3
5
2
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表2结果显示对照组10只大鼠的心肌均无组织学改变。生理盐水组10只大鼠的组织学改变，Ⅲ度4只，Ⅳ度6只。烟酰胺治疗组10只大鼠组织学改变Ⅰ度3只，Ⅱ度5只，Ⅲ度2只。
3 讨论
目前已了解到的KATP通道开放剂包括以下四类：①苯丙吡喃类；②青呱类；③烟酰胺类；④硫化甲酰胺类[2]。烟酰胺类为最初确认的KATP通道开放剂，他不仅具有KATP通道开放作用，同时还具有硝酸盐类作用。KATP通道开放的结果是K离子外流增加，加速心肌细胞的复极化，因此可缩短心肌动作电位时程，使能量消耗减少，对缺血心肌达保护作用。
, 百拇医药
本实验用异丙肾上腺素850 μg/kg复制心肌缺血模型和对照组比较，血清CPK、LDH明显升高(P<0.05)并有明显的组织学改变，说明异丙肾上腺素850 μg/kg可复制可靠的心肌缺血模型。实验结果显示心肌缺血模型组与对照组相比血清酶CPK、LDH明显升高，烟酰胺治疗组与盐水组相比血清酶明显降低(P<0.05)，说明烟酰胺对缺血心肌有保护作用。烟酰胺治疗组的心肌组织学改变受损程度较轻，更表明了烟酰胺的治疗作用。
有实验表明在心室肌细胞上存在KATP通道，KATP通道开放剂Pinacidil和Nocorandil能够缩小心肌梗死面积；而KATP通道阻滞剂格列苯脲(Glibenclamide)可消除这些KATP通道开放的心肌保护作用[4]。说明烟酰胺对缺血心肌的保护作用主要是通过KATP通道开放而实现的，烟酰胺还可以减少心肌酶CPK、LDH的释放，酶学峰值可以判断心肌受损程度和预后。
, 百拇医药
烟酰胺既往主要用于治疗糙皮病及烟酸缺乏症，80年代有文献报道治疗缓慢性心律失常，目前在国内尚未见用于心肌缺血治疗的文献报导。本实验结果显示，KATP通道开放剂—烟酰胺可作为临床治疗心肌缺血的良好药物，可望能达到预防和减轻心肌缺血的症状，减少其并发症，加速心肌缺血的恢复，增进缺血性心脏病的远期疗效，进一步降低其发病率及死亡率。有待同道者对KATP通道开放剂在缺血性心脏病治疗学方面深入研究。■
基金来源：河南省教委资助课题(No.38006)
参考文献：
[1]肖欣荣，陈文彬.钾离子通道活性与缺氧性肺动脉高压.中华内科杂志，1996，35(6)：416.
[2]于严，苏肇伉，丁文祥.氧自由基清除剂对缺血犬心肌再灌注损伤的保护作用.中华胸心血管外科杂志，1995；11(1)：43.
, 百拇医药
[3]陈大年节译.K+通道开放：心血管医学中一种新药原理.心血管病学进展，1997，18(4)：245.
[4]Yao I Gross GT. Acomparison of adencsincinduced cardioprotection and ischemic preconditoning in dogs. Efficacy, time course, and role of KATP chamels. Clrculation, 1994, 89(3):1229.
收稿日期：1998-07-24
修回日期：1999-05-20, http://www.100md.com