一氧化氮与脑出血关系的研究
作者：杨中良 周君富 黄鉴政
单位：杨中良(317523 浙江省温岭市第三人民医院神经内科)；周君富(浙江医科大学附属第二医院脑血管病研究所) 黄鉴政(神经内科)
关键词：一氧化氮；自由基；脑出血；抗氧化剂
脑与神经疾病杂志000104 摘 要 目的： 探讨一氧化氮与脑出血的关 系。 方法： 检测了133例脑出血患者和100例健康对照者血浆一氧化氮(P-NO)、 维生素C( P-VC)、 维生素E(P-VE)含量。 结果： 与对照组比较， 患者组P-NO平均值显著升高， P-VC、 P-VE平均值均显著降低； 患者临床病情(NDS)和颅内血肿量均与P-NO呈正相关， 而与P-VC、 P-VE呈负相关。 结论： 脑出血患者体内自由基反应病理性加剧， 氧化抗 氧化平衡严重失调， 宜及早抗氧化治疗。
Studies on the correlation between nitric oxide and cerebr al hemorrhage
, http://www.100md.com
Yang Zhongliang, Zhou Junfu, Huang Jianzheng.
Department of Neurology, The Third Peoples Hospital of WenLing City Zhejiang, 317523
Abstract Objective To study the correlation between nitri c oxide and cerebral hemorrhage and its significance. Methods The concentration s of plasma nitric oxide (P-NO), plasma vitamin C(P-VC) and plasma vitamin E(P -VE) were measured in 133 patients with cerebral hemorrhage and in 100 healthy control persons. Results Compared with the control group, the average concentra t ions of P-NO of the pilot group significantly increased (P<0.001), while th ose of P-VC, P-VE significantly decreased (P<0.001). Both NDS and intracra nial hematoma volume were positively related to the concentrations of P-NO, and were negatively related to those of P-VE, P-VE. Conclusion The free radical r eactions in the patients with cerebral hemorrhage were pathologically exacerbate d, and the balance between oxidation and antioxidation was markedly disturbed, a nd antioxidants are recommended to be used early in these patients.
, 百拇医药
Key words Nitric oxide Free radicals Cerebral hemor rhage Antioxidants
随着自由基医学研究的深入， 人体内自由基反应病理 性 加剧及氧化抗氧化平衡紊乱在疾病发生中的作用已越来越受到人们的重视。 为探讨一氧化 氮与脑出血的关系， 本文检测了133例脑出血患者急性期血浆一氧化氮(P-NO)、 维生素C( P-VC)、 维生素E(P-VE)的含量， 并与100例健康成人的上述检测值作了比较分析； 同时 用直线回归相关分析法分析了脑出血患者病情(临床神经功能缺损程度记分， NDS)和颅内血 肿量与上述指标的关系， 报道如下。
材料与方法
1. 病例选择
患者组： 随机抽检脑出血急性期(发病72小时内)患者133例， 男91例、 女42例， 年龄3 7～90 (62.3±10.9)岁， 均经CT或MRI证实； NDS[1]为0～44(22.3±11.8)分， 颅内血肿 量[2]为4.2～73.5(40.5±15.9ml)， 全部患者以往均无明显心、脑、肺、 肾等主 要脏器疾病， 均被排除糖尿病、 自身免疫性疾病、 周围血管病和肿瘤等疾病。
, http://www.100md.com
对照组： 健康成人100例， 男60例， 女40例， 年龄35～90(63.1±12.7)岁， 均排除上 述疾病， 且近期无明显炎症感染史。
两组受检对象平均年龄间和性别比例间均无显著性差异(P<0.05)， 所有受检对象在 受检前1个月内均未用过维生素C、 E、 甘露醇等抗氧化药物。
2. 标本采集： 全部受检对象在早晨空腹时静脉采血， 肝素钠抗凝， 严防溶血和凝固， 及时分离血浆， 置4℃待检。
3. 检测方法： P-NO含量检测： 采用α-萘胺显色分光光度比色分析法， 以nmol/L表示 ； P-VE、 P-VE含量检测， 均采用亚铁嗪显色分光光度比色法， 结果均以μmol/L表示 。
4. 统计方法： 数据以均数±标准差(
±s)记录， 采用t检验、 X2检验、 直 线回归和相关分析法等。
, 百拇医药
结 果
1. 患者组与对照组的各检测值(±s)及其比较结果见表1。
表1 患者组与对照组的各检测值(±s)及其比较 组别
例数
P-NO
P-VC
P-VE
患者组
133
496.2±149.1
, http://www.100md.com
44.8±21.3
19.9±9.6
对照组
100
359.4±138.7
55.3±19.6
25.1±8.7
t
7.114
3.853
4.259
P
, http://www.100md.com <0.001
<0.001
<0.001
表1所示， 与对照组比较， 患者组P-NO平均值显著升高(P<0.001)， P-VC 、 P-VE平均值均显著降低(P<0.001)。
2. 脑出血患者临床病情(NDS)与各检测值的关系见表2。
直线回归和相关分析结果提示， NDS与P-NO值呈正相关(P<0.001)， 与P-VC、 P-VE值呈负相关(P<0.001)。
3. 脑出血患者颅内血肿量与各检测值的关系见表3。 表2 患者NDS与各检测值的直线回归和
相关分析结果 相关项目
, 百拇医药
n
直线回归 方程
相关系数
t
P
NDS与P-NO
133
Y=375.383+5.4259X
0.4277
5.4160
0.000000
NDS与P-VC
, 百拇医药 133
Y=59.3937-0.6422X
-0.3540
4.3316
0.000029
NDS与P-VE
133
Y=26.4588-0.2887X
-0.3548
4.3441
0.000028
表3 患者颅内血肿量与各检测值的直线回归和
, 百拇医药
相关分析结果 相关项目
n
直线回归 方程
相关系数
t
P
血肿量与P-NO
133
Y=316.702-4.4305X
0.4733
6.1496
0.000000
, 百拇医药
血肿量与P-VC
133
Y=69.7881-0.6046X
-0.4516
5.7926
0.000000
血肿量与P-VE
133
Y=31.1155-0.2736X
-0.4557
5.8596
0.000000
, 百拇医药
直线回归和相关分析结果提示， 脑出血患者的颅内血肿量与P-NO 值呈正相关(P<0.001)， 与P-VC、 P-VE值均呈负相关(P<0.001)。讨 论
人体内氧化抗氧化平衡系统与健康密切相关， 该平衡一旦紊乱， 就会导致一系列自由基 反应加剧， 体内自由基浓度升高， 加速细胞衰老而诱发疾病。 本文脑出血急性期患者P- VC、 P-VE平均值均显著降低， 而P-NO平均值显著升高， 提示患者体内NO自由基病理性 加剧。 其机理可能是：
脑出血时脑细胞释放大量谷氨酸， 使N-甲基-D-天门冬氨基酸(NMDA)受体依赖的Ca 2+通道过度激活， 大量Ca2+内流并与钙调蛋白(CaM)结合， Ca2+-CaM大 量激活NO合酶(NOS)进而合成过量的NO， Ca2+-CaM也激活神经钙蛋白， 使NOS去磷酸 化， 产生更多的NO[3，4]。 脑出血后， 损伤区发生明显炎症反应， 多种炎症细 胞特别是多形核白细胞的侵入， 可诱生和激活诱导型NO合酶(iNOS)， 导致其活性大大增加 ， 合成大量的NO。 NO的毒性机理包括： ①NO通过Fe蛋白产生毒性作用， NO不仅与血红素 内铁离子结合， 激活鸟苷酸环化酶产生作用， 还可与细胞中的含巯基(-SH)酶结合而使之 失活； ②NO与超氧阴离子(O2)自由基结合生成另一超氧亚硝酸自由基(OONO)， 其细胞毒 性作用更强， 可造成细胞坏死和组织损伤。 ③NO既有使碱基脱氨基而损伤DNA， 同时也有 直接断裂DNA的作用。 ④NO促使细胞凋亡[3～4]。
, 百拇医药
脑出血后， 一方面因血肿压迫而引起脑组织缺血、 缺氧， 启动黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶 等反应系统产生大量超氧阴离子(O)等氧自由基(OFR)， 而浸润于病灶部位的多形核白细胞 的激活所产生的吞噬作用和呼吸爆发也产生大量的超氧阴离子(O)等OFR； 另一方面， 脑出 血时所释放出的铁、 铜等金属离子及其复合物和二氧化氮自由基等又可特异地催化OFR反应 和 脂质过氧化反应， 结果造成中枢神经系统细胞内外及血浆等体液中的NO、O、 羟自由基、 氢过氧自由基等OFR浓度剧增， 导致大脑微血管内皮细胞坏死、 通透性增强和脑水肿形成 而加重病情[3～7]。 NDS和颅内血肿量与P-VC、 P-VE值呈直线负相关， 与P-NO 值呈直线正相关就说明了上述问题。
脑出血时， 中枢神经系统细胞内外及血浆等体液中的超氧阴子自由基等OFR及与NO作用生 成的二氧化氮自由基、 OONO等自由基浓度剧增， 机体为捕捉、 清除或降解这些过量的OFR ， 必须消耗大量的V-C、 V-E[3～7]。 因此， 在脑出血早期使用自由基清除剂 ， 适当补充体内V-C、 V-E， 对减轻或防止继发性脑损伤、促进神经功能的尽早恢复可 能有积极意义[6～7]。
, http://www.100md.com
本文脑出血患者急性期P-NO含量显著升高、 P-VC、 P- VE含量显著降低， 而患者病情及颅内血肿量均与P-NO直线正相关， 与P-VC、 P-VE呈直 线 负相关， 提示， P-NO、 P-VC、 P-VE含量变化很可能在脑出血过程中起着重要作用。 因此， 早期动态检测P-NO、 P-VC、 P-VE含量， 对于掌握患者病情， 指导临床及时补 充VE和VE， 进行抗氧化治疗， 具有一定的积极作用。
参 考 文 献
1，全国第四届脑血管病学术会议通过. 脑卒中患者临 床神经功能缺损程度评分标准. 中华神经科杂志， 1996； 29(6)∶381.
2，多田明， 久田欣， 铃目尚， 他. CTによる脑内血肿量の测 定. 脑神经外科， 1981；9∶251.
3，钟慈声， 孙安阳主编. 一氧化氮的生物医学. 上海： 上海医 科大学出版社， 1997；101～217.
, 百拇医药
4，陈瑗， 周玫主编. 自由基医学.北京： 人民军医出版社， 19 91∶64～279.
5，陈维洲， 芮耀诚主编. 脑血管疾病-基础与临床研究. 济南 ： 山东科学技术出版社， 1993； 68～76.
6，周君富， 黄志龙. 脑中风与红细胞胆固醇、氧化脂质和超氧 化物歧化酶水平关系的研究. 实用老年医学， 1995；9(6)∶253.
7，Chan PH. Role of oxidants in ischemic damage. Stroke, 1996；27(6)∶1124.
(1999-08-10 收稿), 百拇医药
单位：杨中良(317523 浙江省温岭市第三人民医院神经内科)；周君富(浙江医科大学附属第二医院脑血管病研究所) 黄鉴政(神经内科)
关键词：一氧化氮；自由基；脑出血；抗氧化剂
脑与神经疾病杂志000104 摘 要 目的： 探讨一氧化氮与脑出血的关 系。 方法： 检测了133例脑出血患者和100例健康对照者血浆一氧化氮(P-NO)、 维生素C( P-VC)、 维生素E(P-VE)含量。 结果： 与对照组比较， 患者组P-NO平均值显著升高， P-VC、 P-VE平均值均显著降低； 患者临床病情(NDS)和颅内血肿量均与P-NO呈正相关， 而与P-VC、 P-VE呈负相关。 结论： 脑出血患者体内自由基反应病理性加剧， 氧化抗 氧化平衡严重失调， 宜及早抗氧化治疗。
Studies on the correlation between nitric oxide and cerebr al hemorrhage
, http://www.100md.com
Yang Zhongliang, Zhou Junfu, Huang Jianzheng.
Department of Neurology, The Third Peoples Hospital of WenLing City Zhejiang, 317523
Abstract Objective To study the correlation between nitri c oxide and cerebral hemorrhage and its significance. Methods The concentration s of plasma nitric oxide (P-NO), plasma vitamin C(P-VC) and plasma vitamin E(P -VE) were measured in 133 patients with cerebral hemorrhage and in 100 healthy control persons. Results Compared with the control group, the average concentra t ions of P-NO of the pilot group significantly increased (P<0.001), while th ose of P-VC, P-VE significantly decreased (P<0.001). Both NDS and intracra nial hematoma volume were positively related to the concentrations of P-NO, and were negatively related to those of P-VE, P-VE. Conclusion The free radical r eactions in the patients with cerebral hemorrhage were pathologically exacerbate d, and the balance between oxidation and antioxidation was markedly disturbed, a nd antioxidants are recommended to be used early in these patients.
, 百拇医药
Key words Nitric oxide Free radicals Cerebral hemor rhage Antioxidants
随着自由基医学研究的深入， 人体内自由基反应病理 性 加剧及氧化抗氧化平衡紊乱在疾病发生中的作用已越来越受到人们的重视。 为探讨一氧化 氮与脑出血的关系， 本文检测了133例脑出血患者急性期血浆一氧化氮(P-NO)、 维生素C( P-VC)、 维生素E(P-VE)的含量， 并与100例健康成人的上述检测值作了比较分析； 同时 用直线回归相关分析法分析了脑出血患者病情(临床神经功能缺损程度记分， NDS)和颅内血 肿量与上述指标的关系， 报道如下。
材料与方法
1. 病例选择
患者组： 随机抽检脑出血急性期(发病72小时内)患者133例， 男91例、 女42例， 年龄3 7～90 (62.3±10.9)岁， 均经CT或MRI证实； NDS[1]为0～44(22.3±11.8)分， 颅内血肿 量[2]为4.2～73.5(40.5±15.9ml)， 全部患者以往均无明显心、脑、肺、 肾等主 要脏器疾病， 均被排除糖尿病、 自身免疫性疾病、 周围血管病和肿瘤等疾病。
, http://www.100md.com
对照组： 健康成人100例， 男60例， 女40例， 年龄35～90(63.1±12.7)岁， 均排除上 述疾病， 且近期无明显炎症感染史。
两组受检对象平均年龄间和性别比例间均无显著性差异(P<0.05)， 所有受检对象在 受检前1个月内均未用过维生素C、 E、 甘露醇等抗氧化药物。
2. 标本采集： 全部受检对象在早晨空腹时静脉采血， 肝素钠抗凝， 严防溶血和凝固， 及时分离血浆， 置4℃待检。
3. 检测方法： P-NO含量检测： 采用α-萘胺显色分光光度比色分析法， 以nmol/L表示 ； P-VE、 P-VE含量检测， 均采用亚铁嗪显色分光光度比色法， 结果均以μmol/L表示 。
4. 统计方法： 数据以均数±标准差(
±s)记录， 采用t检验、 X2检验、 直 线回归和相关分析法等。, 百拇医药
结 果
1. 患者组与对照组的各检测值(
±s)及其比较结果见表1。表1 患者组与对照组的各检测值(
±s)及其比较 组别例数
P-NO
P-VC
P-VE
患者组
133
496.2±149.1
, http://www.100md.com
44.8±21.3
19.9±9.6
对照组
100
359.4±138.7
55.3±19.6
25.1±8.7
t
7.114
3.853
4.259
P
, http://www.100md.com <0.001
<0.001
<0.001
表1所示， 与对照组比较， 患者组P-NO平均值显著升高(P<0.001)， P-VC 、 P-VE平均值均显著降低(P<0.001)。
2. 脑出血患者临床病情(NDS)与各检测值的关系见表2。
直线回归和相关分析结果提示， NDS与P-NO值呈正相关(P<0.001)， 与P-VC、 P-VE值呈负相关(P<0.001)。
3. 脑出血患者颅内血肿量与各检测值的关系见表3。 表2 患者NDS与各检测值的直线回归和
相关分析结果 相关项目
, 百拇医药
n
直线回归 方程
相关系数
t
P
NDS与P-NO
133
Y=375.383+5.4259X
0.4277
5.4160
0.000000
NDS与P-VC
, 百拇医药 133
Y=59.3937-0.6422X
-0.3540
4.3316
0.000029
NDS与P-VE
133
Y=26.4588-0.2887X
-0.3548
4.3441
0.000028
表3 患者颅内血肿量与各检测值的直线回归和
, 百拇医药
相关分析结果 相关项目
n
直线回归 方程
相关系数
t
P
血肿量与P-NO
133
Y=316.702-4.4305X
0.4733
6.1496
0.000000
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血肿量与P-VC
133
Y=69.7881-0.6046X
-0.4516
5.7926
0.000000
血肿量与P-VE
133
Y=31.1155-0.2736X
-0.4557
5.8596
0.000000
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直线回归和相关分析结果提示， 脑出血患者的颅内血肿量与P-NO 值呈正相关(P<0.001)， 与P-VC、 P-VE值均呈负相关(P<0.001)。讨 论
人体内氧化抗氧化平衡系统与健康密切相关， 该平衡一旦紊乱， 就会导致一系列自由基 反应加剧， 体内自由基浓度升高， 加速细胞衰老而诱发疾病。 本文脑出血急性期患者P- VC、 P-VE平均值均显著降低， 而P-NO平均值显著升高， 提示患者体内NO自由基病理性 加剧。 其机理可能是：
脑出血时脑细胞释放大量谷氨酸， 使N-甲基-D-天门冬氨基酸(NMDA)受体依赖的Ca 2+通道过度激活， 大量Ca2+内流并与钙调蛋白(CaM)结合， Ca2+-CaM大 量激活NO合酶(NOS)进而合成过量的NO， Ca2+-CaM也激活神经钙蛋白， 使NOS去磷酸 化， 产生更多的NO[3，4]。 脑出血后， 损伤区发生明显炎症反应， 多种炎症细 胞特别是多形核白细胞的侵入， 可诱生和激活诱导型NO合酶(iNOS)， 导致其活性大大增加 ， 合成大量的NO。 NO的毒性机理包括： ①NO通过Fe蛋白产生毒性作用， NO不仅与血红素 内铁离子结合， 激活鸟苷酸环化酶产生作用， 还可与细胞中的含巯基(-SH)酶结合而使之 失活； ②NO与超氧阴离子(O2)自由基结合生成另一超氧亚硝酸自由基(OONO)， 其细胞毒 性作用更强， 可造成细胞坏死和组织损伤。 ③NO既有使碱基脱氨基而损伤DNA， 同时也有 直接断裂DNA的作用。 ④NO促使细胞凋亡[3～4]。
, 百拇医药
脑出血后， 一方面因血肿压迫而引起脑组织缺血、 缺氧， 启动黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶 等反应系统产生大量超氧阴离子(O)等氧自由基(OFR)， 而浸润于病灶部位的多形核白细胞 的激活所产生的吞噬作用和呼吸爆发也产生大量的超氧阴离子(O)等OFR； 另一方面， 脑出 血时所释放出的铁、 铜等金属离子及其复合物和二氧化氮自由基等又可特异地催化OFR反应 和 脂质过氧化反应， 结果造成中枢神经系统细胞内外及血浆等体液中的NO、O、 羟自由基、 氢过氧自由基等OFR浓度剧增， 导致大脑微血管内皮细胞坏死、 通透性增强和脑水肿形成 而加重病情[3～7]。 NDS和颅内血肿量与P-VC、 P-VE值呈直线负相关， 与P-NO 值呈直线正相关就说明了上述问题。
脑出血时， 中枢神经系统细胞内外及血浆等体液中的超氧阴子自由基等OFR及与NO作用生 成的二氧化氮自由基、 OONO等自由基浓度剧增， 机体为捕捉、 清除或降解这些过量的OFR ， 必须消耗大量的V-C、 V-E[3～7]。 因此， 在脑出血早期使用自由基清除剂 ， 适当补充体内V-C、 V-E， 对减轻或防止继发性脑损伤、促进神经功能的尽早恢复可 能有积极意义[6～7]。
, http://www.100md.com
本文脑出血患者急性期P-NO含量显著升高、 P-VC、 P- VE含量显著降低， 而患者病情及颅内血肿量均与P-NO直线正相关， 与P-VC、 P-VE呈直 线 负相关， 提示， P-NO、 P-VC、 P-VE含量变化很可能在脑出血过程中起着重要作用。 因此， 早期动态检测P-NO、 P-VC、 P-VE含量， 对于掌握患者病情， 指导临床及时补 充VE和VE， 进行抗氧化治疗， 具有一定的积极作用。
参 考 文 献
1，全国第四届脑血管病学术会议通过. 脑卒中患者临 床神经功能缺损程度评分标准. 中华神经科杂志， 1996； 29(6)∶381.
2，多田明， 久田欣， 铃目尚， 他. CTによる脑内血肿量の测 定. 脑神经外科， 1981；9∶251.
3，钟慈声， 孙安阳主编. 一氧化氮的生物医学. 上海： 上海医 科大学出版社， 1997；101～217.
, 百拇医药
4，陈瑗， 周玫主编. 自由基医学.北京： 人民军医出版社， 19 91∶64～279.
5，陈维洲， 芮耀诚主编. 脑血管疾病-基础与临床研究. 济南 ： 山东科学技术出版社， 1993； 68～76.
6，周君富， 黄志龙. 脑中风与红细胞胆固醇、氧化脂质和超氧 化物歧化酶水平关系的研究. 实用老年医学， 1995；9(6)∶253.
7，Chan PH. Role of oxidants in ischemic damage. Stroke, 1996；27(6)∶1124.
(1999-08-10 收稿), 百拇医药