高胆红素血症状态测定血清HDL-c方法比较及误差控制
作者：蒋显勇
单位：湖南省郴州医专附属医院(423000)
关键词：高胆红素血症；血清HDL-c；测定
中国现代医学杂志000244 分类号 R575
本研究比较了硫磷铁法和酶法在高胆红素状态测定HDL-c的敏感性，并对亚铁氰化钾在纠正高胆红素血症对HDL-c测定的影响进行了分析。
1 材料和方法
1.1 试剂
总胆固醇酶试剂盒，为台湾元生公司产。
沉淀剂，磷钨酸钠0.4g，氯化镁1g溶于100ml蒸馏水中。
1.2 方法
取血清0.2ml加沉淀剂0.2ml，立即摇匀，静置15min后,3000r/min离心15min。吸取上清液0.2ml加酶试剂1.5ml。同时以1.29mmol/L(50mg/dl)胆固醇标准液0.1ml加沉淀剂0.1ml，酶试剂1.5ml为标准管，生理盐水0.2ml加酶试剂1.5ml为空白管，混匀置37℃水浴15min，最后在可见光分光光度计500nm波长处比色。
1.3 统计学处理采用t检验。
2 结果
160例肝胆疾病,其中黄疸和无黄疸者各80例,男104例,女56例,平均年龄44.5岁。正常对照取自健康献血员80例，其中男48例，女32例，平均年龄42.6岁。黄疸血清的HDL-c均偏低。
胆红素对酶法测定HDL-c的影响：取胆红素结晶配成8.55，17.1，51.3，85.5，102.6，153.9，171μmol/L浓度梯度标准液，分别加入HDL-c浓度为1.293mmol/L定值血清内，按酶法每份平行测定3次，观察SB对HDL-c量的干扰变化。结果显示SB在85.5μmol/L以上时使胆固醇的酶反应完全被抑制而测不出。说明血清中SB含量越高，对HDL-c酶法测定影响愈大，有明显的负干扰。而亚铁氰化钾可纠正高胆红素对测定HDL-c的负干扰。
硫磷铁法和酶法在高胆红素血症状态HDL-c测定结果比较：为了确定硫磷铁法和酶法对于测定高胆红素状态HDL-c的敏感性，我们对33份高胆红素样品，32例正常人血清分别用酶法及硫磷铁法测定了HDL-c浓度。
在正常胆红素浓度，二种方法测定HDL-c无差别，在高胆红素浓度，用硫磷铁法测定HDL-c浓度明显高于酶法。
3 讨论
HDL-c是由肝脏细胞内质网和肠上皮细胞合成：肝脏疾病尤其是高胆红素血症患者HDL-c在肝脏合成减少，主要是由于组成HDL-c的主要载脂蛋白(ApoA-1,ApoA-2)和HDL-c形成过程中所必须的酶(LCAT)在肝脏合成减少及胆法毒性作用损害了内质网功能所致，各种肝胆疾病SB<17.1μmol/L者，HDL-c含量均在正常范围；SB在17.1μmol/L以上者,HDL-c明显低于健康组，有显著差异(P<0.01)。证明了当SB>17.1μmol/L有负向干扰，使黄疸血清的HDL-c偏低。为了测出黄疸血清HDL-c实际含量，试剂中添加亚铁氰化钾，能纠正胆红素所致的负误差。对轻度黄疸血清效用更佳。本组用酶法及硫磷铁法同时进行了测定，体会是在黄疸血清状态测HDL-c，硫磷铁法结果较酶法可靠。
结合本研究结果，作者认为：在高胆红素血症状态，为排除胆红素对HDL-c测定的影响，选择硫磷铁法较为适合；如果采用酶法测定，应该根据实际的胆红素浓度，以相应的干扰率进行校正，这样才更可信。
收稿日期：1999-02-12, http://www.100md.com
单位：湖南省郴州医专附属医院(423000)
关键词：高胆红素血症；血清HDL-c；测定
中国现代医学杂志000244 分类号 R575
本研究比较了硫磷铁法和酶法在高胆红素状态测定HDL-c的敏感性，并对亚铁氰化钾在纠正高胆红素血症对HDL-c测定的影响进行了分析。
1 材料和方法
1.1 试剂
总胆固醇酶试剂盒，为台湾元生公司产。
沉淀剂，磷钨酸钠0.4g，氯化镁1g溶于100ml蒸馏水中。
1.2 方法
取血清0.2ml加沉淀剂0.2ml，立即摇匀，静置15min后,3000r/min离心15min。吸取上清液0.2ml加酶试剂1.5ml。同时以1.29mmol/L(50mg/dl)胆固醇标准液0.1ml加沉淀剂0.1ml，酶试剂1.5ml为标准管，生理盐水0.2ml加酶试剂1.5ml为空白管，混匀置37℃水浴15min，最后在可见光分光光度计500nm波长处比色。
1.3 统计学处理采用t检验。
2 结果
160例肝胆疾病,其中黄疸和无黄疸者各80例,男104例,女56例,平均年龄44.5岁。正常对照取自健康献血员80例，其中男48例，女32例，平均年龄42.6岁。黄疸血清的HDL-c均偏低。
胆红素对酶法测定HDL-c的影响：取胆红素结晶配成8.55，17.1，51.3，85.5，102.6，153.9，171μmol/L浓度梯度标准液，分别加入HDL-c浓度为1.293mmol/L定值血清内，按酶法每份平行测定3次，观察SB对HDL-c量的干扰变化。结果显示SB在85.5μmol/L以上时使胆固醇的酶反应完全被抑制而测不出。说明血清中SB含量越高，对HDL-c酶法测定影响愈大，有明显的负干扰。而亚铁氰化钾可纠正高胆红素对测定HDL-c的负干扰。
硫磷铁法和酶法在高胆红素血症状态HDL-c测定结果比较：为了确定硫磷铁法和酶法对于测定高胆红素状态HDL-c的敏感性，我们对33份高胆红素样品，32例正常人血清分别用酶法及硫磷铁法测定了HDL-c浓度。
在正常胆红素浓度，二种方法测定HDL-c无差别，在高胆红素浓度，用硫磷铁法测定HDL-c浓度明显高于酶法。
3 讨论
HDL-c是由肝脏细胞内质网和肠上皮细胞合成：肝脏疾病尤其是高胆红素血症患者HDL-c在肝脏合成减少，主要是由于组成HDL-c的主要载脂蛋白(ApoA-1,ApoA-2)和HDL-c形成过程中所必须的酶(LCAT)在肝脏合成减少及胆法毒性作用损害了内质网功能所致，各种肝胆疾病SB<17.1μmol/L者，HDL-c含量均在正常范围；SB在17.1μmol/L以上者,HDL-c明显低于健康组，有显著差异(P<0.01)。证明了当SB>17.1μmol/L有负向干扰，使黄疸血清的HDL-c偏低。为了测出黄疸血清HDL-c实际含量，试剂中添加亚铁氰化钾，能纠正胆红素所致的负误差。对轻度黄疸血清效用更佳。本组用酶法及硫磷铁法同时进行了测定，体会是在黄疸血清状态测HDL-c，硫磷铁法结果较酶法可靠。
结合本研究结果，作者认为：在高胆红素血症状态，为排除胆红素对HDL-c测定的影响，选择硫磷铁法较为适合；如果采用酶法测定，应该根据实际的胆红素浓度，以相应的干扰率进行校正，这样才更可信。
收稿日期：1999-02-12, http://www.100md.com