重组睫状神经营养因子对大鼠反应性胶质化的影响
作者：林江凯 蔡文琴 范明
单位：林江凯(第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室，重庆400038)；蔡文琴(第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室，重庆400038)；范明(军事医学科 学院基础所，北京100850)
关键词：睫状神经营养因子；胶质化；脑损伤；胶质 纤维酸性蛋白
第三军医大学学报000217
提要 目的：探讨睫状神经营养因子(CNTF)对反应性胶 质化的影响。方法：应用大鼠脑顶叶刺伤模型，将动物分为3组。对照组：刺伤后即原位注射生理盐水 10μl；小剂量组：刺伤后即原位注射0.1g/L CNTF 1μg；大剂量组：刺伤后即原位注射1g/L CNTF 10μg，分别于伤后 1、2、7周灌注活杀大鼠，胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫 组织化学染色。结果：对照组1周时伤道及附近GFAP染 色增强，星形胶质细胞数目和突起数及突起长度增加，胞体增大，胞浆丰富；2周时，上述变化仍明显 ，开始形成胶质瘢痕；7周时有较明显的胶质瘢痕形成；给予CNTF各时间点上述变化均较对照组明显，大剂量组胶质变化较小剂量组更显著。结论：CNTF具有 促进胶质化形成的作用。
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中图法分类号 R394.2;R745.02 文献标识码A
文章编号：1000-5404(2000)02-0156-04
Effects of recombinant ciliary neurotrophic factor on reactive gliosis in rats
LIN Jiang-kai,CAI Wen-qin, FAN Ming
(Department of Histology and Embryology, Third Military Medical University,Chongqing 400038)
Abstract Objective: To investigate the effects of recombinant ciliary neurotrophic factor (CNTF) on gliosis. Methods: After the model of brain stab wound in parietal lobe was established in rats, the animals were randomized into the control group, 1 μg group and 10 μg group. The rats in the control group were injected with 10 μ l normal saline and those in 1ug and 10 μg groups were injected with CNTF at 1 μg/10 μ l and 10 μg/10 μ l respectively. Then the rats were sacrificed in 1,2 and 7 weeks following the injury for immunohistochemistry of GFAP. Results: The hypertrophy and hyperplasia of GFAP(+) glial cells in and around the wound were more significant and lasted longer in 1 μ g and 10 μg groups than in the control. The formation of glial scar began at the 2nd week. Furthermore, gliosis was more remarkable in 10 μg group than in 1 μg group. Conclusion: CNTF can enhance the formation of gliosis.
, 百拇医药
Key words CNTF; gliosis; brain injury; GFAP
胶质化表现为胶质细胞的增生和肥大。如果刺激持 续存在或刺激有足够强度，一定时期以后，胶质化 组织演变成致密的胶质瘢痕，从而阻碍神经元的神 经元的再生[1]。睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor,CNTF)是从E8鸡眼分离出的一种特异蛋白，因能维 持培养的睫状节神经细胞的存活而命名，有广泛的 生理作用[2]。一些研究表明CNTF可促进脊髓和周围神经 损伤后轴索生长。CNTF为25×103u的多肽，存在于中枢神 经系统的星形胶质细胞和周围神经系统的雪旺氏细 胞，在神经系统的分布不均，在嗅球、视神经和脑 干较丰富，与白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF) 属同一家族，共享两个信号转导β成份gp130和LIFR-β受体，其特异性受体即配体结合α-成份为跨膜亚单位CNTFR-α[3]。有关CNTF与胶质化关系的研究 的相关报道较少。
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1 材料和方法
1.1 动物模型与分组
健康Wistar大鼠27只，体重140～160g，雌雄不拘,随机分 为对照组、小剂量组和大剂量组，每组9只。腹腔注 射3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，固定于江湾立体定位仪上。左顶头皮切口，直径2mm牙科钻钻孔，坐标为前囟后4mm，矢状线旁2.5mm，穿刺针垂直刺入4mm，留针30s后 拔除，立即伤道内注入生理盐水或CNTF(军事医学科 学院范明提供)。其中对照组注入生理盐水10μl，小剂量组注入0.1g/LCNTF1μg，大剂量组注入1g/LCNTF10μg。 注射时间为5min，缓慢拔针。拔针后严密缝合头皮。上述操作均严格无菌。
1.2免疫组织化学检测
按蔡文琴方法[4]进行。SP-9002试剂盒购自中山公司 。分别于伤后1、2、7周灌注(先0.9%生理盐水250ml，后 Zamboni's液200ml)活杀大鼠，取脑，后固定6h修块。2d内 冰冻切片，厚30μm，0.01mol/LPBS漂洗5min×3次，3%H2O215min, 0.01mol/LPBS漂洗5min×3次，置1%牛血清白蛋白与Triton37℃ 孵育30min,1∶100anti-GFAP(重庆医科大学)37℃孵育3h,0.01 mol/LPBS漂洗10min×3次，1∶100二抗37℃孵育2h，0.01mol/LPBS漂 洗5min×3次，1∶100三抗37℃孵育1h，0.01mol/LPBS漂洗5min×3次 。0.05%DAB/0.05mol/LTris-HCl/0.05%H2O2显色，60°C烘烤5h，100% 乙醇10min×2次，二甲苯透明，DPX封片。
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1.3 图像分析
920GTIGER图像分析仪分析单位面积胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞积分光密度(Integral opticdensity,IOD)。
1.4 统计学方法
数据以
±s表示，利用Excel行两样本均数的t检验， P<0.05和P<0.01代表相差显著和相差非常显著。
2 结果
对照组1周时伤道及附近染色增强，星形胶质细胞 数目和突起数及突起长度增加，胞体增大，胞浆丰富；2周时，上述变化仍明显，胶质突起开始交织成 网状，逐渐形成胶质瘢痕；7周时有较明显的胶质瘢痕。给予CNTF后,各时间点上述变化均较对照组明显，大剂量组胶质变化较小剂量组更显著，且伤侧胶质化持续存在，时间延长，并影响到对侧大脑半球，见表1、图1～4。
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表1 各组GFAP积分光密度比较
Tab1 Comparison of IOD among groups
1st week
2nd week
Control
68.3±22.2
109.9±8.1
Small dosage
146.7±17.2*
181.0±33.3**
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Large dosage
338.7±55.9*★
368.0±90.6**★
*:P<0.05,**:P<0.01 vs control;★:P<0.05 vs snall dosage
图1 大剂量组第1周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×400)
Fig1 GFAP staining around injured cortex of large dosage group at 1st week(S-P×400)
, 百拇医药
图2 小剂量组第1周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×200)
Fig2 GFAP staining around injured cortex of small dosage group at 1st week(S-P×200)
图3 大剂量组第2周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×400)
Fig3 GFAP staining in injured cortex of large dosage group at 2nd week(S-P×400)
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图4 对照组第2周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×200)
Fig4 GFAP staining in injured corex of control group at 2nd week(S-P×200)
3 讨论
本实验模型为破坏性损伤，刺激强烈，实验结果显 示较广泛的胶质化和胶质瘢痕形成。在此模型基础 上局部给予重组CNTF，发现胶质化明显增强，即GFAP免疫组化染色时，伤道附近星形胶质细胞数目增加，细胞胞体增大，突起变粗大且延长，免疫染色加深 。这与以前报道的结论一致[5]。CNTF为神经营养因子，具有神经营养作用。但在胶质化过程中，我们的实 验表明它也具有促进胶质化的作用，表现为典型的 星形胶质细胞肥大和增生，后期形成胶质瘢痕。
CNTF促进胶质细胞肥大。胶质化本身是神经系统对于 外来刺激的防御性反应，在没有任何伤害时，即单 纯的神经元活动增强足以引起星形胶质细胞肿胀。脑损伤时胶质细胞肿大是其早期的突出表现，增大 的细胞常持续数天到数周。一些细胞因子可能参与了这一过程。由于胶质细胞表现为内向的钾通道，细胞外钾浓度增加引起钾内流入星形胶质细胞导致 细胞内渗透性升高和细胞肿胀。损伤后神经元不能 维持其膜电位，导致钾积聚在细胞外。另外损伤的 神经元大量释放兴奋性氨基酸谷氨酸，星形胶质细胞摄取谷氨酸，谷氨酸激活胶质代谢营养性的谷氨 酸受体从而增加钾、钠、氯流入星形胶质细胞，星形胶质细胞肿胀。离子共转运子(Cotransporter)和交换 子(Exchanger)的激活，也可导致胶质肿胀。随肿胀时间的延长，星形细胞为适应损害而增加其功能，表现为细胞肥大[6]。
, 百拇医药
CNTF促进胶质细胞增生。体外实验已发现CNTF能增强无营养因子支持的非成熟及成熟少突胶质细胞的生存 ，还增强O-2A祖细胞GFAP表达。CNTF作为前炎性因子激活 静息星形胶质细胞变为反应性星形胶质细胞，从而 引起星形胶质细胞的增生性反应[3]。CNTF不是由健康细 胞所分泌，CNTFmRNA在正常大鼠中枢神经系统水平很低 ，对正常的发育、生存并非必需。一旦损伤发生， 可能存在于健康细胞内的CNTF序列作为损伤信号释放 ，刺激邻近的胶质细胞，保护神经元[7]。
CNTF促进胶质化的可能途径。本实验给予外源性的 CNTF，其作用途径可能为外源性的CNTF与CNTF特异性受体 CNTFR-α结合，激活核内多种信号转导通路，引起基 因的表达[6]。CNTF引起胶质化可能通过两条途径，一是间接途径，即通过刺激小胶质细胞和星形胶质细胞 释放可溶性因子作用于临近的细胞群，这些因子如IL-1、TNF-α、IL-6、TGF-β等引起胶质化；二是直接途径，即结合未成熟胶质细胞表面受体直接调节GFAP的 合成[8]。
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局部给予CNTF影响对侧大脑半球。本实验还发现伤灶 局部给予CNTF后星形胶质细胞肥大的时间延长，而且 在对侧大脑半球区域如新皮质、海马、基底节的星 形胶质细胞肥大，GFAP染色加深。其原因可能是：① 注射入伤道的重组CNTF自蛛网膜下腔或脑室系统影响 到对侧半球；②脑水肿和胶质细胞的分布的差别；③Kahn[8]认为，星形胶质细胞通过缝隙连接的细胞间 通讯。GFAP阳性细胞形成的紧密网络可能涉及到通过 缝隙连接(Gapjunction)的离子和代谢联接，通过这种 方式一侧半球的反应性星形胶质细胞与远离损伤脑 区的未成熟星形胶质细胞通讯；④还有一可能的解 释是神经元而不是胶质通讯网络发送了越过大脑半 球的信号。
Levison[7]利用免疫组化发现GFAP、vimentin、GST(谷胱肝肽-S-转移酶)Yp、S-100等蛋白和OX-42在48h升高。且增生的细胞增加了2倍，作者根据以上胶质细胞基因表达 和细胞增生结果认为CNTF从多方面诱导胶质化。OX-42是小胶质细胞的标志分子，其数量增加可能是CNTF对小胶质细胞的趋化作用。中间丝GFAP和波形蛋白作为主 要的细胞骨架蛋白显著上调，导致胶质瘢痕的形成 [7]。在CNTF的表达环节或作用途径上的适当介入，是否有望减轻脑损伤后的胶质化反应和胶质瘢痕形成尚 需进一步的研究。
, 百拇医药
作者简介：林江凯(1964.4)，男，湖北省浠水县人，博 士，主治医师，讲师，主要从事神经胶质与神经再生方面的研究， 发表论文15篇。电话：(023)68752229
参考文献
[1]Ridet J L, S K Malhotra, A Privat, et al. Reactive astrocytes: cellular and molecular cues to biological function[J]. TINS，1997,20(12);570- 577.
[2]Hibi M， Nakajima K，Hirano-T. IL-6 cytokine family and signal transduction: A model of the cytokine system[J]. J Mol Med，1996，74(1): 1-12.
, 百拇医药
[3]Frostick S P, Frcs D M, Yin Q I. Schwann cells, neurotrophic factors, and peripheral nerve regeneration[J]. Microsurgery, 1998，18(7):397- 405.
[4]蔡文琴，王伯沄.实用免疫组织化学与核酸分子杂交技术[M].成都.四川科学技术出版社，1994,119-130.
[5]Winter C G, Saotome Y, Levison S W, et al. A role for ciliary neurotrophic factor as an inducer of reactive gliosis, the glial response to central nervous system injury[J]. Proc Natl Acad Sci USA，1995，92(13):5 865-5 869.
, 百拇医药
[6]Hudgins S N, Levison S W. Ciliary neurotrophic factor stimulates astroglial hypertrophy in vivo and vitro[J]. Exp Neurol,1998，150:171-182.
[7]Levison S W, Ducceschi M H, Young G M, et al. Acute expo-sure to CNTF in vivo i nduces multiple components of reactive gliosis[J]. Exp Neurol，1996，141(2):256-268.
[8]Kahn M A, Ellison J A, Speight G J, et al. CNTF regulation of astrogliosis and the activation of microglia in the developing rat central nervous system[J]. Brain Res，1995，685(1-2):55-56.
收稿日期：1999-09-29；修回日期：1999-12-22, 百拇医药
单位：林江凯(第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室，重庆400038)；蔡文琴(第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室，重庆400038)；范明(军事医学科 学院基础所，北京100850)
关键词：睫状神经营养因子；胶质化；脑损伤；胶质 纤维酸性蛋白
第三军医大学学报000217
提要 目的：探讨睫状神经营养因子(CNTF)对反应性胶 质化的影响。方法：应用大鼠脑顶叶刺伤模型，将动物分为3组。对照组：刺伤后即原位注射生理盐水 10μl；小剂量组：刺伤后即原位注射0.1g/L CNTF 1μg；大剂量组：刺伤后即原位注射1g/L CNTF 10μg，分别于伤后 1、2、7周灌注活杀大鼠，胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫 组织化学染色。结果：对照组1周时伤道及附近GFAP染 色增强，星形胶质细胞数目和突起数及突起长度增加，胞体增大，胞浆丰富；2周时，上述变化仍明显 ，开始形成胶质瘢痕；7周时有较明显的胶质瘢痕形成；给予CNTF各时间点上述变化均较对照组明显，大剂量组胶质变化较小剂量组更显著。结论：CNTF具有 促进胶质化形成的作用。
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中图法分类号 R394.2;R745.02 文献标识码A
文章编号：1000-5404(2000)02-0156-04
Effects of recombinant ciliary neurotrophic factor on reactive gliosis in rats
LIN Jiang-kai,CAI Wen-qin, FAN Ming
(Department of Histology and Embryology, Third Military Medical University,Chongqing 400038)
Abstract Objective: To investigate the effects of recombinant ciliary neurotrophic factor (CNTF) on gliosis. Methods: After the model of brain stab wound in parietal lobe was established in rats, the animals were randomized into the control group, 1 μg group and 10 μg group. The rats in the control group were injected with 10 μ l normal saline and those in 1ug and 10 μg groups were injected with CNTF at 1 μg/10 μ l and 10 μg/10 μ l respectively. Then the rats were sacrificed in 1,2 and 7 weeks following the injury for immunohistochemistry of GFAP. Results: The hypertrophy and hyperplasia of GFAP(+) glial cells in and around the wound were more significant and lasted longer in 1 μ g and 10 μg groups than in the control. The formation of glial scar began at the 2nd week. Furthermore, gliosis was more remarkable in 10 μg group than in 1 μg group. Conclusion: CNTF can enhance the formation of gliosis.
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Key words CNTF; gliosis; brain injury; GFAP
胶质化表现为胶质细胞的增生和肥大。如果刺激持 续存在或刺激有足够强度，一定时期以后，胶质化 组织演变成致密的胶质瘢痕，从而阻碍神经元的神 经元的再生[1]。睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor,CNTF)是从E8鸡眼分离出的一种特异蛋白，因能维 持培养的睫状节神经细胞的存活而命名，有广泛的 生理作用[2]。一些研究表明CNTF可促进脊髓和周围神经 损伤后轴索生长。CNTF为25×103u的多肽，存在于中枢神 经系统的星形胶质细胞和周围神经系统的雪旺氏细 胞，在神经系统的分布不均，在嗅球、视神经和脑 干较丰富，与白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF) 属同一家族，共享两个信号转导β成份gp130和LIFR-β受体，其特异性受体即配体结合α-成份为跨膜亚单位CNTFR-α[3]。有关CNTF与胶质化关系的研究 的相关报道较少。
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1 材料和方法
1.1 动物模型与分组
健康Wistar大鼠27只，体重140～160g，雌雄不拘,随机分 为对照组、小剂量组和大剂量组，每组9只。腹腔注 射3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，固定于江湾立体定位仪上。左顶头皮切口，直径2mm牙科钻钻孔，坐标为前囟后4mm，矢状线旁2.5mm，穿刺针垂直刺入4mm，留针30s后 拔除，立即伤道内注入生理盐水或CNTF(军事医学科 学院范明提供)。其中对照组注入生理盐水10μl，小剂量组注入0.1g/LCNTF1μg，大剂量组注入1g/LCNTF10μg。 注射时间为5min，缓慢拔针。拔针后严密缝合头皮。上述操作均严格无菌。
1.2免疫组织化学检测
按蔡文琴方法[4]进行。SP-9002试剂盒购自中山公司 。分别于伤后1、2、7周灌注(先0.9%生理盐水250ml，后 Zamboni's液200ml)活杀大鼠，取脑，后固定6h修块。2d内 冰冻切片，厚30μm，0.01mol/LPBS漂洗5min×3次，3%H2O215min, 0.01mol/LPBS漂洗5min×3次，置1%牛血清白蛋白与Triton37℃ 孵育30min,1∶100anti-GFAP(重庆医科大学)37℃孵育3h,0.01 mol/LPBS漂洗10min×3次，1∶100二抗37℃孵育2h，0.01mol/LPBS漂 洗5min×3次，1∶100三抗37℃孵育1h，0.01mol/LPBS漂洗5min×3次 。0.05%DAB/0.05mol/LTris-HCl/0.05%H2O2显色，60°C烘烤5h，100% 乙醇10min×2次，二甲苯透明，DPX封片。
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1.3 图像分析
920GTIGER图像分析仪分析单位面积胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞积分光密度(Integral opticdensity,IOD)。
1.4 统计学方法
数据以
±s表示，利用Excel行两样本均数的t检验， P<0.05和P<0.01代表相差显著和相差非常显著。2 结果
对照组1周时伤道及附近染色增强，星形胶质细胞 数目和突起数及突起长度增加，胞体增大，胞浆丰富；2周时，上述变化仍明显，胶质突起开始交织成 网状，逐渐形成胶质瘢痕；7周时有较明显的胶质瘢痕。给予CNTF后,各时间点上述变化均较对照组明显，大剂量组胶质变化较小剂量组更显著，且伤侧胶质化持续存在，时间延长，并影响到对侧大脑半球，见表1、图1～4。
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表1 各组GFAP积分光密度比较
Tab1 Comparison of IOD among groups
1st week
2nd week
Control
68.3±22.2
109.9±8.1
Small dosage
146.7±17.2*
181.0±33.3**
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Large dosage
338.7±55.9*★
368.0±90.6**★
*:P<0.05,**:P<0.01 vs control;★:P<0.05 vs snall dosage
图1 大剂量组第1周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×400)
Fig1 GFAP staining around injured cortex of large dosage group at 1st week(S-P×400)
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图2 小剂量组第1周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×200)
Fig2 GFAP staining around injured cortex of small dosage group at 1st week(S-P×200)
图3 大剂量组第2周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×400)
Fig3 GFAP staining in injured cortex of large dosage group at 2nd week(S-P×400)
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图4 对照组第2周时伤侧皮质GFAP表现(S-P×200)
Fig4 GFAP staining in injured corex of control group at 2nd week(S-P×200)
3 讨论
本实验模型为破坏性损伤，刺激强烈，实验结果显 示较广泛的胶质化和胶质瘢痕形成。在此模型基础 上局部给予重组CNTF，发现胶质化明显增强，即GFAP免疫组化染色时，伤道附近星形胶质细胞数目增加，细胞胞体增大，突起变粗大且延长，免疫染色加深 。这与以前报道的结论一致[5]。CNTF为神经营养因子，具有神经营养作用。但在胶质化过程中，我们的实 验表明它也具有促进胶质化的作用，表现为典型的 星形胶质细胞肥大和增生，后期形成胶质瘢痕。
CNTF促进胶质细胞肥大。胶质化本身是神经系统对于 外来刺激的防御性反应，在没有任何伤害时，即单 纯的神经元活动增强足以引起星形胶质细胞肿胀。脑损伤时胶质细胞肿大是其早期的突出表现，增大 的细胞常持续数天到数周。一些细胞因子可能参与了这一过程。由于胶质细胞表现为内向的钾通道，细胞外钾浓度增加引起钾内流入星形胶质细胞导致 细胞内渗透性升高和细胞肿胀。损伤后神经元不能 维持其膜电位，导致钾积聚在细胞外。另外损伤的 神经元大量释放兴奋性氨基酸谷氨酸，星形胶质细胞摄取谷氨酸，谷氨酸激活胶质代谢营养性的谷氨 酸受体从而增加钾、钠、氯流入星形胶质细胞，星形胶质细胞肿胀。离子共转运子(Cotransporter)和交换 子(Exchanger)的激活，也可导致胶质肿胀。随肿胀时间的延长，星形细胞为适应损害而增加其功能，表现为细胞肥大[6]。
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CNTF促进胶质细胞增生。体外实验已发现CNTF能增强无营养因子支持的非成熟及成熟少突胶质细胞的生存 ，还增强O-2A祖细胞GFAP表达。CNTF作为前炎性因子激活 静息星形胶质细胞变为反应性星形胶质细胞，从而 引起星形胶质细胞的增生性反应[3]。CNTF不是由健康细 胞所分泌，CNTFmRNA在正常大鼠中枢神经系统水平很低 ，对正常的发育、生存并非必需。一旦损伤发生， 可能存在于健康细胞内的CNTF序列作为损伤信号释放 ，刺激邻近的胶质细胞，保护神经元[7]。
CNTF促进胶质化的可能途径。本实验给予外源性的 CNTF，其作用途径可能为外源性的CNTF与CNTF特异性受体 CNTFR-α结合，激活核内多种信号转导通路，引起基 因的表达[6]。CNTF引起胶质化可能通过两条途径，一是间接途径，即通过刺激小胶质细胞和星形胶质细胞 释放可溶性因子作用于临近的细胞群，这些因子如IL-1、TNF-α、IL-6、TGF-β等引起胶质化；二是直接途径，即结合未成熟胶质细胞表面受体直接调节GFAP的 合成[8]。
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局部给予CNTF影响对侧大脑半球。本实验还发现伤灶 局部给予CNTF后星形胶质细胞肥大的时间延长，而且 在对侧大脑半球区域如新皮质、海马、基底节的星 形胶质细胞肥大，GFAP染色加深。其原因可能是：① 注射入伤道的重组CNTF自蛛网膜下腔或脑室系统影响 到对侧半球；②脑水肿和胶质细胞的分布的差别；③Kahn[8]认为，星形胶质细胞通过缝隙连接的细胞间 通讯。GFAP阳性细胞形成的紧密网络可能涉及到通过 缝隙连接(Gapjunction)的离子和代谢联接，通过这种 方式一侧半球的反应性星形胶质细胞与远离损伤脑 区的未成熟星形胶质细胞通讯；④还有一可能的解 释是神经元而不是胶质通讯网络发送了越过大脑半 球的信号。
Levison[7]利用免疫组化发现GFAP、vimentin、GST(谷胱肝肽-S-转移酶)Yp、S-100等蛋白和OX-42在48h升高。且增生的细胞增加了2倍，作者根据以上胶质细胞基因表达 和细胞增生结果认为CNTF从多方面诱导胶质化。OX-42是小胶质细胞的标志分子，其数量增加可能是CNTF对小胶质细胞的趋化作用。中间丝GFAP和波形蛋白作为主 要的细胞骨架蛋白显著上调，导致胶质瘢痕的形成 [7]。在CNTF的表达环节或作用途径上的适当介入，是否有望减轻脑损伤后的胶质化反应和胶质瘢痕形成尚 需进一步的研究。
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作者简介：林江凯(1964.4)，男，湖北省浠水县人，博 士，主治医师，讲师，主要从事神经胶质与神经再生方面的研究， 发表论文15篇。电话：(023)68752229
参考文献
[1]Ridet J L, S K Malhotra, A Privat, et al. Reactive astrocytes: cellular and molecular cues to biological function[J]. TINS，1997,20(12);570- 577.
[2]Hibi M， Nakajima K，Hirano-T. IL-6 cytokine family and signal transduction: A model of the cytokine system[J]. J Mol Med，1996，74(1): 1-12.
, 百拇医药
[3]Frostick S P, Frcs D M, Yin Q I. Schwann cells, neurotrophic factors, and peripheral nerve regeneration[J]. Microsurgery, 1998，18(7):397- 405.
[4]蔡文琴，王伯沄.实用免疫组织化学与核酸分子杂交技术[M].成都.四川科学技术出版社，1994,119-130.
[5]Winter C G, Saotome Y, Levison S W, et al. A role for ciliary neurotrophic factor as an inducer of reactive gliosis, the glial response to central nervous system injury[J]. Proc Natl Acad Sci USA，1995，92(13):5 865-5 869.
, 百拇医药
[6]Hudgins S N, Levison S W. Ciliary neurotrophic factor stimulates astroglial hypertrophy in vivo and vitro[J]. Exp Neurol,1998，150:171-182.
[7]Levison S W, Ducceschi M H, Young G M, et al. Acute expo-sure to CNTF in vivo i nduces multiple components of reactive gliosis[J]. Exp Neurol，1996，141(2):256-268.
[8]Kahn M A, Ellison J A, Speight G J, et al. CNTF regulation of astrogliosis and the activation of microglia in the developing rat central nervous system[J]. Brain Res，1995，685(1-2):55-56.
收稿日期：1999-09-29；修回日期：1999-12-22, 百拇医药