黄芩苷提取工艺研究
作者：黎万寿 陈幸
单位：四川省中药研究所，成都610041
关键词：
中草药000216 黄芩是常用中药[1]，在生产中，黄芩苷的提取多采用水提酸沉法[2]或碱提酸沉法[3，4]，但转移率低。为此我们进行了提取工艺研究，探索出了有效的醇提酸沉法，提高了黄芩苷的转移率，适用于大批量生产。
1 实验材料与仪器
1.1 仪器与药品：高效液相色谱仪Waters 510泵，岛津Catalog 7125型进样器，SPD-6AV紫外检测仪，CR-6A数据处理机；对照品：黄芩苷(含量测定用，中国药品生物制品检定所)；除药用乙醇外，所用化学试剂均为分析纯。
, 百拇医药
1.2 实验材料：黄芩饮片购自成都中药材站，经鉴定为正品黄芩Scutellaria baicalensis Georgi。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件：色谱柱Y WG 10 μm C18 4.6 mm×250 mm(大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.0125)；检测波长：280 nm[1]；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃。
2.2 黄芩苷标准曲线：精密称取在60 ℃真空干燥4 h的黄芩苷对照品2.79 mg，定容100 mL，作为对照品溶液。按色谱条件，分别选择1，2，4，8，16 μL，测得峰面积，线性回归方程为：y=3 098 769x-5 621，r=0.9999，结果表明：在0.0279～0.464 μg范围内呈良好线性关系。
, 百拇医药
2.3 提取方法的比较：黄芩饮片60 ℃烘干，粉碎过10目筛。称取100 g，用表1中不同溶剂以10倍、8倍量分两次提取，每次1 h，滤过。合并滤液，浓缩至干，称重。水煮醇沉法例外，先将提取液浓缩至药材6倍量，加入等量95%乙醇，搅匀，放置一昼夜，滤过，合并上清液及沉淀洗涤液，浓缩至干，称重。
精密称取相当于生药20 mg的上述浸膏，用80%甲醇适量超声溶解30 min，定容至10 mL，进样3～7 μL，测定结果见表1。
2.4 黄芩苷的纯化：取前述60%乙醇提取滤液，减压回收尽乙醇后，补足蒸馏水至药材的15倍量[2]，作为待纯化样品溶液。
表1 不同方法提取黄芩苷收得率比较 提取方法
水煎煮
水煮
, 百拇医药
醇沉
60%
乙醇
80%
乙醇
药用
乙醇
浸膏得量(g/100g生药)
25.34
18.88
39.39
37.47
26.41
, 百拇医药
黄芩苷得量(g/100g生药)
1.44
1.18
4.49
4.43
1.72
测定结果以60%乙醇作溶剂，黄芩苷提取率高。
纯化方法1 酸沉法[2]：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH3～4，静置1 h后滤去杂质，滤液再于40 ℃调pH1.5～2，保温30 min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH6.5～7.0，干燥即得黄芩苷粗品。
纯化方法2 碱酸法[4]：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH 1.0，放置15 h。1 500 r/min离心1 h，取沉淀物进行干燥，称重。加6倍量水，70 ℃水浴加热，10 % NaOH溶液调pH6.0，搅拌，使全溶。加入等量45%乙醇，放置1 h，抽滤，沉淀用45%乙醇洗涤，所得滤液加浓盐酸调pH1.0，70 ℃下保温1 h，放置10 h，抽滤，所得沉淀干燥即得黄岑苷粗品。
, http://www.100md.com
取酸沉法或碱酸法所得的黄芩苷粗品，用60%乙醇溶解，定容至5 mg(生药)/mL，进样2～3 μL，测定结果见表2。
根据以上结果，我们得到一种新的黄芩苷提取分离方法，即醇提酸沉法。该方法与传统的水提酸沉法和水提碱酸纯化法比较，黄芩苷的转移率有极大提高。该方法的具体操作应为：黄芩粗粉以60%乙醇10倍、8倍量回流提取2次，每次1 h，滤过，滤液减压回收尽乙醇，补足蒸馏水至药材的15倍量，加浓盐酸调pH3～4，静置1 h后滤去杂质，滤液再于40 ℃调pH1.5～2，保温30 min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH6.5～7.0，干燥即得黄芩粗品。表2 不同纯化方法黄芩苷转移情况比较 项 目
酸沉法
碱酸法
粗品得率(g/100g生药)
11.52
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10.89
含量 (g/100g粗品)
33.37
21.18
转移率(g/100g黄岑苷)
88.73
62.02
3 讨论
3.1 黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮衍生物，具有一定的脂溶性，因此在提取时采用60%乙醇作溶剂，与水作溶剂比较大大增加了黄芩苷的溶出率。
3.2 目前，黄芩苷的含量测定多采用紫外分光光度法[2～4]，本实验采用HPLC测定法，大大提高了准确度。■
, 百拇医药
黎万寿 男，27岁，研究实习员。1996年毕业于成都中医药大学中药专业，获学士学位。现在四川省中药研究所药化室工作。主要从事新药质量标准、制备工艺研究等。参加了两项"九.五"攻关课题即"川牛膝质量标准规范化研究"和"风湿平胶囊的研究"，曾参与了四川省中医局课题"丹参的系统研究"等多种新药的研制工作，其中"川产道地药材川丹参的系统研究"科研成果获重庆市中医管理局科技成果二等奖。已发表论文3篇。
参考文献
1，中华人民共和国药典.1995版一部.广州：广东科技出版社，1995：271
2，韩会玲，等.陕西中医学院学报，1997，20(4)：35
3，北京医学院，等.中草药成分化学.北京：人民卫生出版社，1980：293
4，王乃利，等.沈阳药学院学报，1993，10(2)：85
(1999-03-05 收稿), http://www.100md.com
单位：四川省中药研究所，成都610041
关键词：
中草药000216 黄芩是常用中药[1]，在生产中，黄芩苷的提取多采用水提酸沉法[2]或碱提酸沉法[3，4]，但转移率低。为此我们进行了提取工艺研究，探索出了有效的醇提酸沉法，提高了黄芩苷的转移率，适用于大批量生产。
1 实验材料与仪器
1.1 仪器与药品：高效液相色谱仪Waters 510泵，岛津Catalog 7125型进样器，SPD-6AV紫外检测仪，CR-6A数据处理机；对照品：黄芩苷(含量测定用，中国药品生物制品检定所)；除药用乙醇外，所用化学试剂均为分析纯。
, 百拇医药
1.2 实验材料：黄芩饮片购自成都中药材站，经鉴定为正品黄芩Scutellaria baicalensis Georgi。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件：色谱柱Y WG 10 μm C18 4.6 mm×250 mm(大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.0125)；检测波长：280 nm[1]；流速1.0 mL/min；柱温30 ℃。
2.2 黄芩苷标准曲线：精密称取在60 ℃真空干燥4 h的黄芩苷对照品2.79 mg，定容100 mL，作为对照品溶液。按色谱条件，分别选择1，2，4，8，16 μL，测得峰面积，线性回归方程为：y=3 098 769x-5 621，r=0.9999，结果表明：在0.0279～0.464 μg范围内呈良好线性关系。
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2.3 提取方法的比较：黄芩饮片60 ℃烘干，粉碎过10目筛。称取100 g，用表1中不同溶剂以10倍、8倍量分两次提取，每次1 h，滤过。合并滤液，浓缩至干，称重。水煮醇沉法例外，先将提取液浓缩至药材6倍量，加入等量95%乙醇，搅匀，放置一昼夜，滤过，合并上清液及沉淀洗涤液，浓缩至干，称重。
精密称取相当于生药20 mg的上述浸膏，用80%甲醇适量超声溶解30 min，定容至10 mL，进样3～7 μL，测定结果见表1。
2.4 黄芩苷的纯化：取前述60%乙醇提取滤液，减压回收尽乙醇后，补足蒸馏水至药材的15倍量[2]，作为待纯化样品溶液。
表1 不同方法提取黄芩苷收得率比较 提取方法
水煎煮
水煮
, 百拇医药
醇沉
60%
乙醇
80%
乙醇
药用
乙醇
浸膏得量(g/100g生药)
25.34
18.88
39.39
37.47
26.41
, 百拇医药
黄芩苷得量(g/100g生药)
1.44
1.18
4.49
4.43
1.72
测定结果以60%乙醇作溶剂，黄芩苷提取率高。
纯化方法1 酸沉法[2]：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH3～4，静置1 h后滤去杂质，滤液再于40 ℃调pH1.5～2，保温30 min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH6.5～7.0，干燥即得黄芩苷粗品。
纯化方法2 碱酸法[4]：取上述待纯化样品溶液，加浓盐酸调pH 1.0，放置15 h。1 500 r/min离心1 h，取沉淀物进行干燥，称重。加6倍量水，70 ℃水浴加热，10 % NaOH溶液调pH6.0，搅拌，使全溶。加入等量45%乙醇，放置1 h，抽滤，沉淀用45%乙醇洗涤，所得滤液加浓盐酸调pH1.0，70 ℃下保温1 h，放置10 h，抽滤，所得沉淀干燥即得黄岑苷粗品。
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取酸沉法或碱酸法所得的黄芩苷粗品，用60%乙醇溶解，定容至5 mg(生药)/mL，进样2～3 μL，测定结果见表2。
根据以上结果，我们得到一种新的黄芩苷提取分离方法，即醇提酸沉法。该方法与传统的水提酸沉法和水提碱酸纯化法比较，黄芩苷的转移率有极大提高。该方法的具体操作应为：黄芩粗粉以60%乙醇10倍、8倍量回流提取2次，每次1 h，滤过，滤液减压回收尽乙醇，补足蒸馏水至药材的15倍量，加浓盐酸调pH3～4，静置1 h后滤去杂质，滤液再于40 ℃调pH1.5～2，保温30 min，静置，抽滤，沉淀用水洗至pH6.5～7.0，干燥即得黄芩粗品。表2 不同纯化方法黄芩苷转移情况比较 项 目
酸沉法
碱酸法
粗品得率(g/100g生药)
11.52
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10.89
含量 (g/100g粗品)
33.37
21.18
转移率(g/100g黄岑苷)
88.73
62.02
3 讨论
3.1 黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮衍生物，具有一定的脂溶性，因此在提取时采用60%乙醇作溶剂，与水作溶剂比较大大增加了黄芩苷的溶出率。
3.2 目前，黄芩苷的含量测定多采用紫外分光光度法[2～4]，本实验采用HPLC测定法，大大提高了准确度。■
, 百拇医药
黎万寿 男，27岁，研究实习员。1996年毕业于成都中医药大学中药专业，获学士学位。现在四川省中药研究所药化室工作。主要从事新药质量标准、制备工艺研究等。参加了两项"九.五"攻关课题即"川牛膝质量标准规范化研究"和"风湿平胶囊的研究"，曾参与了四川省中医局课题"丹参的系统研究"等多种新药的研制工作，其中"川产道地药材川丹参的系统研究"科研成果获重庆市中医管理局科技成果二等奖。已发表论文3篇。
参考文献
1，中华人民共和国药典.1995版一部.广州：广东科技出版社，1995：271
2，韩会玲，等.陕西中医学院学报，1997，20(4)：35
3，北京医学院，等.中草药成分化学.北京：人民卫生出版社，1980：293
4，王乃利，等.沈阳药学院学报，1993，10(2)：85
(1999-03-05 收稿), http://www.100md.com
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