骨肉瘤患者红细胞免疫功能与T淋巴细胞亚群的变化
作者：蓝旭 葛宝丰 刘雪梅 许建中
单位：蓝旭(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；葛宝丰(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；刘雪梅(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；许建中(第三军医大学西南医院骨科，重庆 400038)
关键词：骨肉瘤；红细胞；免疫性；T淋巴细胞亚群
临床骨科杂志000202 【摘要】 目的 探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能状态与T淋巴细胞亚群改变的关系。方法 测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能状态。结果 骨肉瘤患者C3bRR、RFER、CD3、CD4较正常对照组降低(P<0.05),而RICR、RFIR、CD8则较正常对照组升高(P<0.05)。骨肉瘤患者C3bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论 骨肉瘤患者红细胞免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者关系密切。 探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能状态与T淋巴细胞亚群改变的关系。方法 测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能状态。结果 骨肉瘤患者C3bRR、RFER、CD3、CD4较正常对照组降低(P<0.05),而RICR、RFIR、CD8则较正常对照组升高(P<0.05)。骨肉瘤患者C3bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论 骨肉瘤患者红细胞免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者关系密切。
, 百拇医药
【中图分类号】 R738.1 【文献标识码】 A
【文章编号】 1008-0287(2000)02-0083-02
Immune function of erythrocytes and change of T-lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma
Lan Xu Ge Baofeng Liu Xuemei Xu Jianzhong
(Institute of Orthopae-dics,The General Hospital of Lanzhou Military Command,Lanzhou,Gansu 730050)
【Abstract】 Objective To study immune function of erythrocytes and its correlation with the change of T-lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma. Methods The red blood cell(RBC)， C3b receptor rate (C3bRR)，immune complex rate(RICR)，immune adherence enhance factor (RFER)，immune adherence inhibitor factor(RFIR) and the subsets of T-lymphocyte were determined in 35 cases of osteosarcoma. Results The C3bRR，RFER，CD3，CD4 and CD4/CD8 ratio was lower in the osteosarcoma group than in the control one (P<0.05). Meanwhile, RICR、RFIR、 and CD8 were significantly elevated (P<0.05). A positive correlation between C3bRR and the ratio of CD4/CD8 was found in the osteosarcoma group. Conclusion Patients with osteosarcoma show lower erythrocyte function and disorder of T-lymphocyte subsets. There is a close relationship between RBC immune function and T-lymphocyte subsets.
, 百拇医药
【Key words】 osteosarcoma; erythrocyte; immunity; T-lymphocyte subsets
红细胞免疫系统在机体抗肿瘤免疫监护中有重要作用。红细胞具有识别、粘附、浓缩和杀伤抗原、清除免疫复合物的能力。研究表明〔1〕：红细胞与白细胞免疫功能密切相关。红细胞具有增强 T细胞俘获抗原及促进 T辅助细胞的功能。本实验探讨了骨肉瘤患者红细胞免疫功能及其与T淋巴细胞亚群变化的相互关系。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器 冻干补体致敏和未致敏酵母多糖(第二军医大学长海医院免疫室提供)，荧光标记单克隆抗体(美国Sigma公司产品)。原子吸收光谱仪， Dupont 722型分光光度计，RS-28S冷冻离心机，激光流式细胞仪。
1.2 研究对象 骨肉瘤组：1996年9月～1999年6月住院骨肉瘤患者35例，男25例，女10例，年龄5～56岁。发生在股骨 20例，胫骨11例，肱骨 3例，骨盆1例。术后病理证实为骨肉瘤，不包括皮质旁骨肉瘤和继发性骨肉瘤。对照组：选择甘肃省中心血站健康献血员30例，男20例，女10例，年龄25～55岁。
, 百拇医药
1.3 检测方法 采集清晨空腹静脉血1.5 ml，肝素抗凝。用郭峰等〔2〕方法测定骨肉瘤患者及对照组红细胞免疫功能，免疫荧光全血法〔3〕测定 T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8阳性细胞百分率。所有测定结果用
±s表示，作组间t检验。
2 结果
2.1 红细胞免疫功能测定 骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)和红细胞免疫促进因子(RFER)明显低于对照组(P<0.05)，而红细胞免疫复合物花环率(RICR)和红细胞免疫抑制因子(RFIR)明显高于对照组(P<0.05)，见表1。
表1 红细胞免疫功能检测结果(%,±s) 组别
, 百拇医药
n
C3bRR
RICR
RFER
RFIR
对照组
30
19.36±2.18
8.22±0.76
157.67±8.46
32.67±5.33
骨肉瘤组
, 百拇医药
35
10.34±1.28*
12.95±1.73*
93.05±6.37*
78.19±4.65*
与对照组比较:*P<0.052.2 T淋巴细胞亚群测定 骨肉瘤患者CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对照组(P<0.05) ,而CD8则明显高于对照组(P<0.05)，见表2。
表2 T淋巴细胞亚群检测结果(%,±s) 组别
, 百拇医药
n
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
对照组
30
69.13±5.12
40.67±7.14
21.33±3.76
1.91±0.33
, 百拇医药
骨肉瘤组
35
55.96±5.58*
35.96±5.35*
37.49±4.72*
0.96±0.24*
与对照组比较:*P<0.05
2.3 相关分析 将骨肉瘤患者C3bRR与其CD4/CD8比值作相关分析，二者呈正相关( r=0.415, P<0.05)。
, 百拇医药 3 讨论
红细胞免疫功能主要通过其表面C3b受体的粘附功能实现，其免疫功能受血清中RFER和 RFIR的调节〔1〕。红细胞参与细胞、体液免疫和细胞因子网络的调控〔4〕。本组35例骨肉瘤患者C3bRR降低，表明其红细胞免疫粘附能力低下。RICR明显升高，则可能为继发性红细胞免疫功能下降，免疫复合物增加，红细胞粘附过多免疫复合物所引起〔5〕。骨肉瘤患者RFIR升高，封闭了红细胞表面受体结合点，影响了C3b受体活性表达。另外，RFER水平降低失去了对红细胞免疫促进作用。
骨肉瘤患者T淋巴细胞亚群中CD3、CD4和CD4/CD8比值低于对照组，提示骨肉瘤患者细胞免疫功能低下。而患者CD8水平较对照组明显升高，表明细胞免疫功能协调性进一步紊乱。CD8亚群包括抑制性和杀伤性 T细胞两个群体，肿瘤患者CD8亚群增高，可能以抑制性 T细胞增高为主〔6〕。相关分析显示骨肉瘤患者红细胞免疫粘附功能与 T淋巴细胞关系密切。提示患者红细胞免疫功能低下，其免疫调控能力降低，对 T淋巴细胞免疫增强作用减弱，这可能是T细胞免疫功能降低的一个因素。
, http://www.100md.com
我们认为，骨肉瘤的发生发展可能与患者的免疫功能状态有密切关系。监测患者的免疫功能对临床诊断、治疗及预后评定可能具有重要的意义。
作者简介：蓝 旭(1970-)，男，硕士，主治医师。研究方向：骨肿瘤，关节外科 葛宝丰(1924-)，男，中国工程院院士，教授。研究方向：创伤，显微外科
参考文献
1，郭 峰,郭 建.肿瘤红细胞免疫学研究[M].第1版,济南:济南出版社,1997：77～80,177～180
2，郭 峰,骆永珍.红细胞免疫学新探[M]. 第1版,南京:南京大学出版社,1993：118～132
3，Martinez OM, Villanueva J, Abtahi S et al. CD30 expression identifies a functional alloreactive human T-lymphocyte subset[J]. Transplantation, 1998; 65(9): 1 240～1 247
, 百拇医药
4，Goroshinskaia IA, Golotina LIu, Gorlo EI et al. Changes in lymphocyte and erythrocyte membrane microviscosity in cancer patients[J]. Vopr Med Khim, 1999; 45(1): 53～57
5，赵绵松,石 岩,秦桂秀.过敏性紫癜患者红细胞免疫功能与NK细胞活性的变化[J].中华风湿病学杂志,1999;3(1):44～45
6，沈柏华,史时芳,魏克湘 等.BCG加IL-2膀胱内灌注对外周血自然杀伤细胞、T淋巴细胞亚群的影响[J].中华实验外科杂志,1998;15(1):48～50
1999-12-27收稿
2000-04-24修回, 百拇医药
单位：蓝旭(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；葛宝丰(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；刘雪梅(兰州军区总医院骨科研究所，甘肃 兰州 730050)；许建中(第三军医大学西南医院骨科，重庆 400038)
关键词：骨肉瘤；红细胞；免疫性；T淋巴细胞亚群
临床骨科杂志000202 【摘要】 目的 探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能状态与T淋巴细胞亚群改变的关系。方法 测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能状态。结果 骨肉瘤患者C3bRR、RFER、CD3、CD4较正常对照组降低(P<0.05),而RICR、RFIR、CD8则较正常对照组升高(P<0.05)。骨肉瘤患者C3bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论 骨肉瘤患者红细胞免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者关系密切。 探讨骨肉瘤患者红细胞免疫功能状态与T淋巴细胞亚群改变的关系。方法 测定35例骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RICR)、红细胞免疫促进因子(RFER)、红细胞免疫抑制因子(RFIR)和T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的功能状态。结果 骨肉瘤患者C3bRR、RFER、CD3、CD4较正常对照组降低(P<0.05),而RICR、RFIR、CD8则较正常对照组升高(P<0.05)。骨肉瘤患者C3bRR与CD4/CD8比值呈正相关。结论 骨肉瘤患者红细胞免疫功能低下，T淋巴细胞亚群比例失调，两者关系密切。
, 百拇医药
【中图分类号】 R738.1 【文献标识码】 A
【文章编号】 1008-0287(2000)02-0083-02
Immune function of erythrocytes and change of T-lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma
Lan Xu Ge Baofeng Liu Xuemei Xu Jianzhong
(Institute of Orthopae-dics,The General Hospital of Lanzhou Military Command,Lanzhou,Gansu 730050)
【Abstract】 Objective To study immune function of erythrocytes and its correlation with the change of T-lymphocyte subsets in patients with osteosarcoma. Methods The red blood cell(RBC)， C3b receptor rate (C3bRR)，immune complex rate(RICR)，immune adherence enhance factor (RFER)，immune adherence inhibitor factor(RFIR) and the subsets of T-lymphocyte were determined in 35 cases of osteosarcoma. Results The C3bRR，RFER，CD3，CD4 and CD4/CD8 ratio was lower in the osteosarcoma group than in the control one (P<0.05). Meanwhile, RICR、RFIR、 and CD8 were significantly elevated (P<0.05). A positive correlation between C3bRR and the ratio of CD4/CD8 was found in the osteosarcoma group. Conclusion Patients with osteosarcoma show lower erythrocyte function and disorder of T-lymphocyte subsets. There is a close relationship between RBC immune function and T-lymphocyte subsets.
, 百拇医药
【Key words】 osteosarcoma; erythrocyte; immunity; T-lymphocyte subsets
红细胞免疫系统在机体抗肿瘤免疫监护中有重要作用。红细胞具有识别、粘附、浓缩和杀伤抗原、清除免疫复合物的能力。研究表明〔1〕：红细胞与白细胞免疫功能密切相关。红细胞具有增强 T细胞俘获抗原及促进 T辅助细胞的功能。本实验探讨了骨肉瘤患者红细胞免疫功能及其与T淋巴细胞亚群变化的相互关系。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器 冻干补体致敏和未致敏酵母多糖(第二军医大学长海医院免疫室提供)，荧光标记单克隆抗体(美国Sigma公司产品)。原子吸收光谱仪， Dupont 722型分光光度计，RS-28S冷冻离心机，激光流式细胞仪。
1.2 研究对象 骨肉瘤组：1996年9月～1999年6月住院骨肉瘤患者35例，男25例，女10例，年龄5～56岁。发生在股骨 20例，胫骨11例，肱骨 3例，骨盆1例。术后病理证实为骨肉瘤，不包括皮质旁骨肉瘤和继发性骨肉瘤。对照组：选择甘肃省中心血站健康献血员30例，男20例，女10例，年龄25～55岁。
, 百拇医药
1.3 检测方法 采集清晨空腹静脉血1.5 ml，肝素抗凝。用郭峰等〔2〕方法测定骨肉瘤患者及对照组红细胞免疫功能，免疫荧光全血法〔3〕测定 T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8阳性细胞百分率。所有测定结果用
±s表示，作组间t检验。2 结果
2.1 红细胞免疫功能测定 骨肉瘤患者红细胞补体受体花环率 (C3bRR)和红细胞免疫促进因子(RFER)明显低于对照组(P<0.05)，而红细胞免疫复合物花环率(RICR)和红细胞免疫抑制因子(RFIR)明显高于对照组(P<0.05)，见表1。
表1 红细胞免疫功能检测结果(%,
±s) 组别, 百拇医药
n
C3bRR
RICR
RFER
RFIR
对照组
30
19.36±2.18
8.22±0.76
157.67±8.46
32.67±5.33
骨肉瘤组
, 百拇医药
35
10.34±1.28*
12.95±1.73*
93.05±6.37*
78.19±4.65*
与对照组比较:*P<0.052.2 T淋巴细胞亚群测定 骨肉瘤患者CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对照组(P<0.05) ,而CD8则明显高于对照组(P<0.05)，见表2。
表2 T淋巴细胞亚群检测结果(%,
±s) 组别, 百拇医药
n
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
对照组
30
69.13±5.12
40.67±7.14
21.33±3.76
1.91±0.33
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骨肉瘤组
35
55.96±5.58*
35.96±5.35*
37.49±4.72*
0.96±0.24*
与对照组比较:*P<0.05
2.3 相关分析 将骨肉瘤患者C3bRR与其CD4/CD8比值作相关分析，二者呈正相关( r=0.415, P<0.05)。
, 百拇医药 3 讨论
红细胞免疫功能主要通过其表面C3b受体的粘附功能实现，其免疫功能受血清中RFER和 RFIR的调节〔1〕。红细胞参与细胞、体液免疫和细胞因子网络的调控〔4〕。本组35例骨肉瘤患者C3bRR降低，表明其红细胞免疫粘附能力低下。RICR明显升高，则可能为继发性红细胞免疫功能下降，免疫复合物增加，红细胞粘附过多免疫复合物所引起〔5〕。骨肉瘤患者RFIR升高，封闭了红细胞表面受体结合点，影响了C3b受体活性表达。另外，RFER水平降低失去了对红细胞免疫促进作用。
骨肉瘤患者T淋巴细胞亚群中CD3、CD4和CD4/CD8比值低于对照组，提示骨肉瘤患者细胞免疫功能低下。而患者CD8水平较对照组明显升高，表明细胞免疫功能协调性进一步紊乱。CD8亚群包括抑制性和杀伤性 T细胞两个群体，肿瘤患者CD8亚群增高，可能以抑制性 T细胞增高为主〔6〕。相关分析显示骨肉瘤患者红细胞免疫粘附功能与 T淋巴细胞关系密切。提示患者红细胞免疫功能低下，其免疫调控能力降低，对 T淋巴细胞免疫增强作用减弱，这可能是T细胞免疫功能降低的一个因素。
, http://www.100md.com
我们认为，骨肉瘤的发生发展可能与患者的免疫功能状态有密切关系。监测患者的免疫功能对临床诊断、治疗及预后评定可能具有重要的意义。
作者简介：蓝 旭(1970-)，男，硕士，主治医师。研究方向：骨肿瘤，关节外科 葛宝丰(1924-)，男，中国工程院院士，教授。研究方向：创伤，显微外科
参考文献
1，郭 峰,郭 建.肿瘤红细胞免疫学研究[M].第1版,济南:济南出版社,1997：77～80,177～180
2，郭 峰,骆永珍.红细胞免疫学新探[M]. 第1版,南京:南京大学出版社,1993：118～132
3，Martinez OM, Villanueva J, Abtahi S et al. CD30 expression identifies a functional alloreactive human T-lymphocyte subset[J]. Transplantation, 1998; 65(9): 1 240～1 247
, 百拇医药
4，Goroshinskaia IA, Golotina LIu, Gorlo EI et al. Changes in lymphocyte and erythrocyte membrane microviscosity in cancer patients[J]. Vopr Med Khim, 1999; 45(1): 53～57
5，赵绵松,石 岩,秦桂秀.过敏性紫癜患者红细胞免疫功能与NK细胞活性的变化[J].中华风湿病学杂志,1999;3(1):44～45
6，沈柏华,史时芳,魏克湘 等.BCG加IL-2膀胱内灌注对外周血自然杀伤细胞、T淋巴细胞亚群的影响[J].中华实验外科杂志,1998;15(1):48～50
1999-12-27收稿
2000-04-24修回, 百拇医药