呋喃妥因片控制菌检验方法探讨
作者：张志芬
单位：张志芬(江苏南通制药总厂 南通 226006)
关键词：
西北药学杂志000214 呋喃妥因是呋喃类抗菌药物。由于抗菌作用强，按中国药典1995年版微生物限度检查方法〔1〕不能检出污染的控制菌(大肠杆菌)，即阳性对照试验阴性。为了寻找有效的检测方法，笔者尝试在检验过程中采取适当的方法，排除供试品的抑菌作用，确保实验结果准确可靠。
1 材料
培养基(符合中国药典1995年版微生物限度检查法规定)；大肠杆菌[CMCC(B)44102]；呋喃妥因片(南通制药总厂)。
2 方法与结果
取试品10g，研细，加入灭菌生理盐水100ml，充分研磨或用匀浆仪混匀，制成1∶10供试 液。供试液分别作如下处理：
①各取10ml供试液，分置于2支10ml离心管中，以500r/min离心5min，取上清液分别加到2瓶100ml胆盐乳糖(BL)增菌液中。
②同上法离心，取上清液分别加到2支10ml离心管中，以3000r/min离心沉淀30min，取下层液2ml分别加到2瓶100ml BL增菌液中。
③各取10ml供试液，薄膜过滤，用灭菌生理盐水冲洗4～5次，每次50ml，取滤膜，分别放入2瓶100ml BL增菌液中。
④同②法离心沉淀，使每支留有下层残液约2ml，加灭菌生理盐水约20ml，混匀，同③法薄膜过滤，滤膜分别放入2瓶100ml BL增菌液中。
⑤每种方法的BL液中的一瓶加入规定量的大肠杆菌，作阳性对照，然后将上述4种方法的8瓶BL液于(36±1)℃培养24h，摇匀，用接种环蘸取2～3环培养液划线接种于伊红美蓝(EMB)琼 脂平板。EMB平板上如有菌生长，进行革兰镜检及生化试验判断是否为大肠杆菌〔2〕 。
结果：常规法500r/min低速离心5min，3000r/min离心沉淀30min及薄膜过滤未能检出阳性 对照的大肠杆菌。500r/min离心沉淀，再3000r/min离心沉淀合并薄膜过滤，显示大 肠杆菌对照阳性。
3 讨论
呋喃妥因在水中几乎不溶，采用两次离心处理，低速离心可除去绝大部分不溶性抑菌物质 ，高速离心使绝大部分待检菌沉降于管底约2ml内(集菌)，薄膜过滤冲洗则除去可溶性抑菌 成分。因此，两次离心沉淀联用薄膜过滤可作为呋喃妥因片控制菌检验行之有效的方法。
参考文献
〔1〕中国药典1995年版.二部.1995：附录82
〔2〕郑钧镛，王光宝.药品微生物学及检验技术.北京 ：人民卫生出版社，1989：73
(收稿：1999-09-18), http://www.100md.com
单位：张志芬(江苏南通制药总厂 南通 226006)
关键词：
西北药学杂志000214 呋喃妥因是呋喃类抗菌药物。由于抗菌作用强，按中国药典1995年版微生物限度检查方法〔1〕不能检出污染的控制菌(大肠杆菌)，即阳性对照试验阴性。为了寻找有效的检测方法，笔者尝试在检验过程中采取适当的方法，排除供试品的抑菌作用，确保实验结果准确可靠。
1 材料
培养基(符合中国药典1995年版微生物限度检查法规定)；大肠杆菌[CMCC(B)44102]；呋喃妥因片(南通制药总厂)。
2 方法与结果
取试品10g，研细，加入灭菌生理盐水100ml，充分研磨或用匀浆仪混匀，制成1∶10供试 液。供试液分别作如下处理：
①各取10ml供试液，分置于2支10ml离心管中，以500r/min离心5min，取上清液分别加到2瓶100ml胆盐乳糖(BL)增菌液中。
②同上法离心，取上清液分别加到2支10ml离心管中，以3000r/min离心沉淀30min，取下层液2ml分别加到2瓶100ml BL增菌液中。
③各取10ml供试液，薄膜过滤，用灭菌生理盐水冲洗4～5次，每次50ml，取滤膜，分别放入2瓶100ml BL增菌液中。
④同②法离心沉淀，使每支留有下层残液约2ml，加灭菌生理盐水约20ml，混匀，同③法薄膜过滤，滤膜分别放入2瓶100ml BL增菌液中。
⑤每种方法的BL液中的一瓶加入规定量的大肠杆菌，作阳性对照，然后将上述4种方法的8瓶BL液于(36±1)℃培养24h，摇匀，用接种环蘸取2～3环培养液划线接种于伊红美蓝(EMB)琼 脂平板。EMB平板上如有菌生长，进行革兰镜检及生化试验判断是否为大肠杆菌〔2〕 。
结果：常规法500r/min低速离心5min，3000r/min离心沉淀30min及薄膜过滤未能检出阳性 对照的大肠杆菌。500r/min离心沉淀，再3000r/min离心沉淀合并薄膜过滤，显示大 肠杆菌对照阳性。
3 讨论
呋喃妥因在水中几乎不溶，采用两次离心处理，低速离心可除去绝大部分不溶性抑菌物质 ，高速离心使绝大部分待检菌沉降于管底约2ml内(集菌)，薄膜过滤冲洗则除去可溶性抑菌 成分。因此，两次离心沉淀联用薄膜过滤可作为呋喃妥因片控制菌检验行之有效的方法。
参考文献
〔1〕中国药典1995年版.二部.1995：附录82
〔2〕郑钧镛，王光宝.药品微生物学及检验技术.北京 ：人民卫生出版社，1989：73
(收稿：1999-09-18), http://www.100md.com